大肠杆菌K88菌毛蛋白faeG亚基基因克隆及表达 被引量：6

1

作者 徐建生 成大荣 +1 位作者 任士飞 孙怀昌 《扬州大学学报（农业与生命科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期1-4,共4页

利用PCR技术,从致仔猪黄痢的大肠杆菌中扩增不含信号肽序列的K 88菌毛蛋白faeG亚基基因片段,将其克隆到表达载体pGEX-6P-1中,构建该基因的原核表达载体pGEX-F aeG,通过测序证明序列正确后,导入大肠杆菌BL 21,得到工程菌株PGEX-F aeG。I... 利用PCR技术,从致仔猪黄痢的大肠杆菌中扩增不含信号肽序列的K 88菌毛蛋白faeG亚基基因片段,将其克隆到表达载体pGEX-6P-1中,构建该基因的原核表达载体pGEX-F aeG,通过测序证明序列正确后,导入大肠杆菌BL 21,得到工程菌株PGEX-F aeG。IPTG诱导表达,SDS-PAGE分析结果表明,融合蛋白(约53 ku)在大肠杆菌BL 21中得到高效表达,表达产物约占菌体蛋白的35%,免疫印记结果表明此融合蛋白与K 88单抗反应。 展开更多

关键词 大肠杆菌 k88菌毛 克隆 表达

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K88菌毛蛋白亚基基因克隆、表达及重组蛋白抗血清制备 被引量：8

2

作者 赵主江 黄诚 +5 位作者 黄亚红 陈建秀 周智爱 梁婉琪 潘爱虎 张大兵 《上海农业学报》 CSCD 2000年第2期38-41,共4页

利用 PCR技术 ,从仔猪黄痢的致病菌中扩增出不含信号肽序列的 K88菌毛蛋白亚基基因片段 ,将其克隆到 E.coli表达载体 p ET2 8a(+)中 ,构建了该基因的原核表达载体 p882 8,导入 E.coli BL 2 1(DE3) ,得到工程菌株。 SDS- PAGE分析结果显... 利用 PCR技术 ,从仔猪黄痢的致病菌中扩增出不含信号肽序列的 K88菌毛蛋白亚基基因片段 ,将其克隆到 E.coli表达载体 p ET2 8a(+)中 ,构建了该基因的原核表达载体 p882 8,导入 E.coli BL 2 1(DE3) ,得到工程菌株。 SDS- PAGE分析结果显示 ,经 IPTG诱导 ,该亚基基因高效表达出重组 K88菌毛蛋白 ,约占菌体总蛋白的 30 %。用含重组蛋白的凝胶作为抗原 ,免疫新西兰大白兔 ,首次制备 K88菌毛蛋白亚基的抗血清。免疫学分析表明 。 展开更多

关键词 ETEC k88菌毛蛋白 抗血清 大肠杆菌

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纯化ETEC K88菌毛特异性卵黄抗体的加工贮藏及体外抗粘附性研究 被引量：5

3

作者 程学慧 王劼 +2 位作者 蒋思文 彭健 詹志春 《饲料研究》 CAS 2005年第4期3-5,共3页

分离、纯化产肠毒素大肠杆菌(ETEC) K88ac菌毛蛋白,将其免疫产蛋鸡,经喷雾干燥制备抗ETEC菌毛抗原特异性卵黄抗体粉。间接ELISA法检测卵黄抗体效价,试验结果表明,喷雾干燥(140℃进气,65℃出气)对卵黄抗体活性无影响,加工前后抗体滴度均... 分离、纯化产肠毒素大肠杆菌(ETEC) K88ac菌毛蛋白,将其免疫产蛋鸡,经喷雾干燥制备抗ETEC菌毛抗原特异性卵黄抗体粉。间接ELISA法检测卵黄抗体效价,试验结果表明,喷雾干燥(140℃进气,65℃出气)对卵黄抗体活性无影响,加工前后抗体滴度均为1∶1280;卵黄抗体粉在90℃干热条件下处理5min后抗体效价下降50%,而90℃湿热条件下处理5min抗体效价无明显变化,但处理15min后下降75%;经过1h的干热或湿热处理,抗体均基本失活;4℃和常温下放置半年对卵黄抗体粉活性无影响;体外抑制粘附试验表明,抗K88卵黄抗体能抑制K88对肠上皮细胞的粘附。 展开更多

关键词 卵黄抗体 ETEC 特异性 k88菌毛 纯化 粘附性 间接ELISA法 抗体效价 贮藏 喷雾干燥 肠上皮细胞 湿热条件 抗体滴度 抗体活性 粘附试验 试验结果 加工前后 湿热处理 产肠毒素 大肠杆菌 体外抑制 菌毛抗原 产蛋鸡 毛蛋白 下降

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猪产肠毒素性大肠杆菌野生株K88菌毛蛋白结构基因的克隆与序列测定 被引量：2

4

作者 李鹏 戴鼎震 +1 位作者 陈焕春 金升藻 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期198-202,共5页

根据报道的猪产肠毒素性大肠杆菌K88菌毛结构基因DNA序列 ,在其保守区用Goldkey软件设计了 1对引物 ,经PCR扩增从 2 0株野生分离株质粒中得到 17个大小在 815bp左右的阳性产物 ,经纯化、连接、转化、筛选及核酸序列测定与分析 ,确认所... 根据报道的猪产肠毒素性大肠杆菌K88菌毛结构基因DNA序列 ,在其保守区用Goldkey软件设计了 1对引物 ,经PCR扩增从 2 0株野生分离株质粒中得到 17个大小在 815bp左右的阳性产物 ,经纯化、连接、转化、筛选及核酸序列测定与分析 ,确认所克隆的外源基因与报道的K88菌毛 (亚单位K88ab、K88ac、K88ad)蛋白结构基因序列一致 。 展开更多

关键词 k88菌毛蛋白结构基因 克隆 序列测定

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ETEC K99、K88菌毛蛋白抗原表位多肽的设计合成及免疫反应 被引量：1

5

作者 余丽芸 田斌 +6 位作者 温丽娟 王桂华 曹宁 魏小曼 郭东伟 齐浩 刘秋晨 《江西农业学报》 CAS 2013年第3期88-92,共5页

目的:通过生物信息学及蛋白分析软件等,寻找ETEC K88、K99菌毛蛋白的抗原表位。方法:通过生物信息学技术、DNAStar Protean蛋白分析软件及网络共享软件对ETEC K88、K99菌毛蛋白抗原性相关的参数进行预测分析,从而设计ETEC K88、K99菌毛... 目的:通过生物信息学及蛋白分析软件等,寻找ETEC K88、K99菌毛蛋白的抗原表位。方法:通过生物信息学技术、DNAStar Protean蛋白分析软件及网络共享软件对ETEC K88、K99菌毛蛋白抗原性相关的参数进行预测分析,从而设计ETEC K88、K99菌毛蛋白的抗原表位多肽;采用腹腔注射的方式将合成的抗原表位多肽免疫小鼠,用ELISA法检测血清中产生的抗体,并对免疫小鼠进行了攻毒试验。结果:多肽免疫小鼠后均能诱导抗体产生,攻毒试验表明合成肽对小鼠具有保护作用。结论:成功预测了抗原表位,合成的表位多肽具有较好的抗原性。 展开更多

关键词 ETEC k99菌毛蛋白 ETEC k88菌毛蛋白 抗原表位 合成肽

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K88菌毛及其蛋白亚基FaeG在防治仔猪腹泻中的应用性研究进展

6

作者 张灵启 高研 李卫芬 《上海畜牧兽医通讯》 2007年第6期8-9,共2页

关键词 k88菌毛 仔猪腹泻 蛋白亚基 肠毒素大肠杆菌 肠毒性大肠杆菌 应用 防治 ETEC

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共表达ETECK99、K88菌毛蛋白重组干酪乳杆菌的构建 被引量：4

7

作者 温丽娟 王桂华 +2 位作者 侯喜林 余丽芸 王萌 《黑龙江八一农垦大学学报》 2011年第3期34-39,共6页

将PCR扩增的K99和K88-LTB基因片段串联插入到干酪乳杆菌细胞表面表达载体pLA中,构建了重组表达载体pLA-K99-K88-LTB,将其电转化干酪乳杆菌CICC 6 105,获得了表达融合蛋白pLA-K99-K88-LTB的重组干酪乳杆菌表达系统。重组干酪乳杆菌在MRS... 将PCR扩增的K99和K88-LTB基因片段串联插入到干酪乳杆菌细胞表面表达载体pLA中,构建了重组表达载体pLA-K99-K88-LTB,将其电转化干酪乳杆菌CICC 6 105,获得了表达融合蛋白pLA-K99-K88-LTB的重组干酪乳杆菌表达系统。重组干酪乳杆菌在MRS培养基中表达后,经SDS-PAGE检测,约有90 KDa的融合蛋白得到表达,蛋白大小与理论值相符合。Western-blot分析表明表达的蛋白可被鼠源K99,K88抗血清所识别。间接免疫荧光技术和流式细胞术的结果表明,融合蛋白成功地利用多聚谷氨酸跨膜蛋白pgsA基因展示在干酪乳杆菌菌体表面。 展开更多

关键词 产肠毒素性大肠杆菌 k88菌毛蛋白 k99菌毛蛋白 干酪乳杆菌

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K88菌毛基因的克隆及ST表位序列在菌毛基因上的融合 被引量：1

8

作者 胡建军 陈创夫 祝建波 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2008年第21期8949-8951,共3页

[目的]为了建立用于细胞表面展示的载体系统。[方法]利用PCR技术,以大肠杆菌质粒为模板扩增K88菌毛操纵子的结构基因faeC^faeH,并克隆到pBR322质粒载体中。合成一段替换序列,在菌毛抗原基因的超变区引入酶切位点ApaI和NcoI,合成耐热肠度... [目的]为了建立用于细胞表面展示的载体系统。[方法]利用PCR技术,以大肠杆菌质粒为模板扩增K88菌毛操纵子的结构基因faeC^faeH,并克隆到pBR322质粒载体中。合成一段替换序列,在菌毛抗原基因的超变区引入酶切位点ApaI和NcoI,合成耐热肠度素STII表位编码序列,并引入菌毛抗原基因的超变区。[结果]经PCR鉴定和限制性内切酶酶切证明,重组质粒pBR-fae插入片断大小为6.6kb,与预期相符。核苷酸序列分析证明,所得faeC^faeH序列正确。PCR筛选和测序验证证明,构建了K88菌毛-耐热肠度素STII的融合基因。[结论]试验成功获得了重组质粒pBR-fae-ST。 展开更多

关键词 肠毒素大肠杆菌 k88菌毛 ST表位表位

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大肠杆菌K88菌毛蛋白发酵工艺的初步研究

9

作者 杨春梅 《生命科学研究》 CAS CSCD 2006年第S2期72-77,共6页

采用液体培养基包括牛肉膏蛋白胨培养基和强化营养肉汤培养基对大肠杆菌K88进行发酵培养,采用不同摇瓶培养时间和不同pH值的培养基观察发酵结果,研究菌体和菌毛生产量的相关性,并通过紫外分光光度计UV751于600nm处测量菌体OD值以对菌种... 采用液体培养基包括牛肉膏蛋白胨培养基和强化营养肉汤培养基对大肠杆菌K88进行发酵培养,采用不同摇瓶培养时间和不同pH值的培养基观察发酵结果,研究菌体和菌毛生产量的相关性,并通过紫外分光光度计UV751于600nm处测量菌体OD值以对菌种发酵情况进行检测.热激分离菌体和菌毛蛋白,(NH4)2SO4盐析分离纯化K88菌毛蛋白并用分光光度计于280nm处测定其OD值.透析后经SDSP-AGE检测菌毛蛋白纯度.根据实验结果优化发酵培养条件,确定菌种的最佳发酵工艺,以收获最多的K88菌毛蛋白.经过实验研究,最终确定了大肠杆菌K88在pH值为6.5、转速为250r/min的条件下发酵18个h,菌体和菌毛生产量均达到高峰,同时得出菌毛蛋白和菌体成正相关. 展开更多

关键词 大肠杆菌 k88菌毛蛋白 发酵 工艺优化

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仔猪腹泻源大肠杆菌贵州株K_(88)菌毛研究 被引量：20

10

作者 周碧君 苟万里 +1 位作者 王开功 吴彤 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 2000年第4期291-296,共6页

通过玻片凝集试验、抗D_甘露糖微量血凝试验 (MRMH)、离体细胞粘附试验、菌体蛋白的聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS_PAGE)和免疫印迹、质粒DNA提取及电泳等 ,分析了仔猪腹泻源大肠杆菌贵州株 (4 0 9_11)所产K88菌毛的血凝谱、对肠上皮细胞粘附... 通过玻片凝集试验、抗D_甘露糖微量血凝试验 (MRMH)、离体细胞粘附试验、菌体蛋白的聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS_PAGE)和免疫印迹、质粒DNA提取及电泳等 ,分析了仔猪腹泻源大肠杆菌贵州株 (4 0 9_11)所产K88菌毛的血凝谱、对肠上皮细胞粘附特性、菌毛蛋白亚单位分子量 ,并对其K88基因进行了初步定位。结果表明 :其所产K88菌毛的血凝谱能凝集豚鼠和鸡红细胞 ;能介导细菌粘附于仔猪离体肠上皮细胞 ,这种粘附作用能被特异的K88抗血清阻断 ;菌毛蛋白亚单位的分子量为2 35 0 0Da;K88基因位于一个分子量为 85kb(5 4× 10 6Da)的大质粒上。当菌株于 18℃生长时 。 展开更多

关键词 仔猪腹泻 大肠杆菌 贵州株 k88菌毛 病原菌

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K88 ad ETEC菌毛蛋白亚基基因faeC的克隆、表达及多克隆抗体的制备 被引量：3

11

作者 申慧峰 王玉炯 +6 位作者 黄亚红 梁婉琪 周智爱 潘爱虎 钱炳俊 武爱波 张大兵 《上海农业学报》 CSCD 2005年第2期5-10,共6页

为研究毒素源性大肠杆菌(ETEC)菌毛蛋白分子装配机理,从K88adETEC中PCR扩增出K88菌毛蛋白小亚基基因片段faeC,然后将其克隆到大肠杆菌表达载体pET30a(+)中,获得重组质粒pET30C,并将该质粒转入大肠杆菌表达菌株BL21(DE3)中;重组菌株经IPT... 为研究毒素源性大肠杆菌(ETEC)菌毛蛋白分子装配机理,从K88adETEC中PCR扩增出K88菌毛蛋白小亚基基因片段faeC,然后将其克隆到大肠杆菌表达载体pET30a(+)中,获得重组质粒pET30C,并将该质粒转入大肠杆菌表达菌株BL21(DE3)中;重组菌株经IPTG诱导后,经过SDS PAGE分析表明该菌株可以表达FaeC蛋白(16.9kDa),且重组蛋白主要以包涵体形式存在,约占菌体蛋白的30%。用分离纯化的重组FaeC蛋白免疫小鼠,获得FaeC的鼠抗血清,经免疫学分析表明,利用此重组蛋白制备的抗血清与FaeC重组蛋白及K88adETEC的菌毛蛋白都能发生特异性抗原抗体反应。 展开更多

关键词 重组蛋白 纯化 多克隆抗体 基因克隆 基因表达 猪 肠毒性大肠杆菌 k88菌毛

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产肠毒素大肠杆菌K88ab/K88ad菌毛操纵子fae全基因的克隆、表达及生物学活性的初步研究 被引量：2

12

作者 郁磊 吴娟 +1 位作者 朱军 朱国强 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期23-27,共5页

为研究K88ab/K88ad菌毛对细胞的黏附作用,本研究分别以产肠毒素E.coli(ETEC)K88ab C83901株和K88ad C83903株基因组DNA为模板,采用PCR技术扩增这两种K88菌毛操纵子fae基因(均约7.9 kb)。将其分别克隆于表达质粒pBR322中构建pBR-K88ab和p... 为研究K88ab/K88ad菌毛对细胞的黏附作用,本研究分别以产肠毒素E.coli(ETEC)K88ab C83901株和K88ad C83903株基因组DNA为模板,采用PCR技术扩增这两种K88菌毛操纵子fae基因(均约7.9 kb)。将其分别克隆于表达质粒pBR322中构建pBR-K88ab和pBR-K88ad重组质粒,并将其分别转化至不含任何菌毛的E.coli SE5000株中。该重组菌能够分别与鼠抗K88菌毛阳性血清和抗K88菌毛单克隆抗体(MAb)产生凝集反应;在电镜下观察到重组菌表面大量表达K88菌毛。采用热抽提法提取其体外表达的K88ab和K88ad菌毛,SDS-PAGE电泳检测结果显示,菌毛蛋白的分子量约为26 ku。玻板凝集试验和western blot结果表明:重组表达的K88ab及K88ad菌毛与K88+参考株菌毛均能够被抗K88菌毛阳性血清和MAb识别。以猪小肠上皮细胞系IPEC-J2为模型进行黏附和黏附抑制试验,结果表明表达K88菌毛的重组菌及K88+参考株均能够黏附于IPEC-J2上皮细胞表面;而且阳性血清和MAb能够有效抑制重组菌或K88+参考株对猪小肠上皮细胞系的黏附结合。 展开更多

关键词 产肠毒素大肠杆菌 k88菌毛 克隆 生物活性

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大肠杆菌K88ac菌毛操纵子fae全基因的克隆、表达及生物学活性初步研究 被引量：3

13

作者 朱春红 朱国强 《生物技术通讯》 CAS 2008年第2期236-239,共4页

目的:在体外克隆和表达猪肠产毒性大肠杆菌(ETEC)K88ac菌毛操纵子fae结构基因,并检测重组菌毛的相关生物学活性。方法:利用长PCR技术以猪ETECK88ac株C83902基因组DNA为模板扩增编码K88菌毛操纵子fae基因,克隆入表达质粒载体pBR322,构建... 目的:在体外克隆和表达猪肠产毒性大肠杆菌(ETEC)K88ac菌毛操纵子fae结构基因,并检测重组菌毛的相关生物学活性。方法:利用长PCR技术以猪ETECK88ac株C83902基因组DNA为模板扩增编码K88菌毛操纵子fae基因,克隆入表达质粒载体pBR322,构建和筛选重组质粒pBR322-fae,转化至不含任何菌毛的大肠杆菌EP株;电镜观察重组菌表面菌毛表达情况;用热抽提法提纯表达的重组菌毛;用纯化菌毛免疫小鼠制备高效价抗血清;用SDS-PAGE和Westernblot检测重组菌毛的抗原性,用细胞黏附和黏附抑制试验检测其生物学活性。结果和结论:在电镜下观察到重组菌表面大量表达K88ac菌毛,该重组菌与兔抗K88ac菌毛单因子阳性血清、鼠抗K88ac菌毛单克隆抗体均产生凝集反应;纯化菌毛经SDS-PAGE,结构单位菌毛呈单一的相对分子质量约26×103的蛋白条带;纯化菌毛免疫小鼠后可制备出高效价的鼠抗血清,玻板凝集试验和Westernblot结果表明体外表达的K88ac菌毛具有与K88ac野生菌毛相同的抗原性;猪小肠上皮细胞系黏附和黏附抑制实验结果表明重组EP菌和野生菌株一样具有较强的黏附猪小肠上皮细胞系的能力,而且提纯重组菌毛制备出的鼠抗血清能有效抑制上述重组菌或野生菌株对猪小肠上皮细胞系的黏附结合。 展开更多

关键词 肠产毒性大肠杆菌k88菌毛扣结构基因 克隆 表达 生物活性

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贵州仔猪大肠杆菌分离物K_（88）菌毛的鉴定 被引量：4

14

作者 王开功 周碧君 +1 位作者 冯莹 潘仕文 《贵州农学院学报》 1997年第2期20-23,共4页

从贵州省７个种猪场发生腹泻的仔猪分离致病性细菌，对１６株病原细菌分离物进行了生化鉴定，１５株细菌符合埃希氏大肠杆菌的生化特征，其中１０株是普通大肠杆菌；５株是类大肠杆菌。两株细菌能在血琼脂平板上产生溶血素，两株细菌经... 从贵州省７个种猪场发生腹泻的仔猪分离致病性细菌，对１６株病原细菌分离物进行了生化鉴定，１５株细菌符合埃希氏大肠杆菌的生化特征，其中１０株是普通大肠杆菌；５株是类大肠杆菌。两株细菌能在血琼脂平板上产生溶血素，两株细菌经抗Ｄ－甘露糖血凝试验表明能产生Ｋ８８菌毛；阳性率达１２．５％。本文还对Ｋ８８菌毛、肠毒素、溶血素与仔猪大肠杆菌病的流行病学关系进行了讨论。 展开更多

关键词 k88菌毛 猪病 大肠杆菌 鉴定

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产肠毒素大肠杆菌K88菌毛蛋白与大肠杆菌不耐热肠毒素b亚单位的原核表达及其鼻腔免疫效果 被引量：1

15

作者 姜柯安 贺志良 +1 位作者 宋方洲 马永平 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2012年第9期1091-1094,共4页

目的原核表达产肠毒素大肠杆菌(Enterotoxigenic Escherichia coli,ETEC)K88菌毛蛋白与大肠杆菌不耐热肠毒素(Heat-labile enterotoxin,LT)b亚单位(LTb),并评价其鼻腔免疫效果。方法采用PCR技术分别扩增不含信号肽的K88和LTb基因,克隆... 目的原核表达产肠毒素大肠杆菌(Enterotoxigenic Escherichia coli,ETEC)K88菌毛蛋白与大肠杆菌不耐热肠毒素(Heat-labile enterotoxin,LT)b亚单位(LTb),并评价其鼻腔免疫效果。方法采用PCR技术分别扩增不含信号肽的K88和LTb基因,克隆至表达载体pQE30中,构建重组表达质粒pQE30-K88和pQE30-LTb,转化大肠杆菌M15,IPTG诱导表达。表达的重组K88和LTb蛋白纯化、复性后,进行SDS-PAGE分析。分别用K88单独、K88联合LTb滴鼻免疫BALB/c小鼠,以生理盐水作为对照,每次间隔1周,共4次,末次免疫后10 d,分离血清,并收集鼻腔和小肠黏膜冲洗液,间接ELISA法检测各组血清特异性IgG和黏膜sIgA抗体水平。结果重组表达质粒pQE30-K88和pQE30-LTb经双酶切和测序证实构建正确;表达的重组K88和LTb蛋白相对分子质量分别为28 100和12 500,表达量分别约占菌体总蛋白的35%和40%,主要以包涵体形式存在;纯化复性后的重组蛋白纯度均可达95%以上。K88联合LTb滴鼻免疫组血清特异性IgG及鼻腔、小肠黏膜冲洗液中特异性SIgA水平均较K88单独免疫组和对照组明显增高,且差异有统计学意义(P<0.01)。结论在大肠杆菌中高效表达并纯化了重组K88和LTb蛋白,K88联合LTb滴鼻免疫BALB/c小鼠后,可增强特异性血清抗体反应,且诱导了黏膜免疫应答,为将来开发新型的ETEC基因工程疫苗奠定了基础。 展开更多

关键词 产肠毒素大肠杆菌 k88菌毛蛋白 大肠杆菌不耐热肠毒素b亚单位 原核细胞 基因表达 黏膜免疫

原文传递

大肠杆菌菌毛抗原K88与热稳定肠毒素ST融合基因植物表达载体的构建及其在烟草中的初步表达 被引量：6

16

作者 任雪艳 陈创夫 +2 位作者 孔庆军 高剑锋 祝建波 《石河子大学学报（自然科学版）》 CAS 2005年第1期64-67,共4页

利用DNA重组技术，将编码大肠杆菌黏附素K88与稳定肠毒素ST的融合基因的序列片段可龙到植物表达载体pCAMBLM302中，成功的构建了植物重组表达质粒pCAMBIA-K88-ST。并将其转化农杆菌EHA105，利用农杆菌介导法转化烟草，并初步获得转化体... 利用DNA重组技术，将编码大肠杆菌黏附素K88与稳定肠毒素ST的融合基因的序列片段可龙到植物表达载体pCAMBLM302中，成功的构建了植物重组表达质粒pCAMBIA-K88-ST。并将其转化农杆菌EHA105，利用农杆菌介导法转化烟草，并初步获得转化体。为K88-ST基因的进一步研究奠定了基础。 展开更多

关键词 菌毛抗原k88 大肠杆菌肠毒素 植物重组表达质粒 基因克隆

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大肠埃希菌K88ac菌毛蛋白亚基因的原核表达及其免疫原性研究 被引量：1

17

作者 李国军 侯喜林 朴范泽 《动物医学进展》 CSCD 2007年第8期1-4,共4页

从E.coliC83902中扩增出不含信号肽序列的K88ac菌毛蛋白亚基基因片段,将其克隆到表达载体pQE-30中,构建了原核表达载体pQE30-K88ac,并转入E.coliXL1-Blue中,经IPTG诱导后,重组蛋白以包涵体形式获得高效表达。Western blot结果显示,表达... 从E.coliC83902中扩增出不含信号肽序列的K88ac菌毛蛋白亚基基因片段,将其克隆到表达载体pQE-30中,构建了原核表达载体pQE30-K88ac,并转入E.coliXL1-Blue中,经IPTG诱导后,重组蛋白以包涵体形式获得高效表达。Western blot结果显示,表达的蛋白能够被K88ac单抗识别,用纯化的蛋白免疫小鼠,能够抵抗1 MLD大肠埃希菌强毒株C83902的攻击,这表明构建的工程菌株XL1-Blue(pQE30-K88ac)可以作为预防幼畜大肠埃希菌性腹泻基因工程菌苗的候选株。 展开更多

关键词 产肠毒素大肠埃希菌 k88ac菌毛蛋白 表达 免疫原性

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仔猪黄痢K88-K99-987p-F41多价菌毛混合油乳剂灭活疫苗的制备及小鼠免疫保护试验 被引量：5

18

作者 戴鼎震 李鹏 +3 位作者 周长锋 汪银才 王晓丽 夏兴霞 《江苏农业科学》 CSCD 北大核心 2003年第1期55-57,共3页

根据我国仔猪大肠杆菌性腹泻流行的实际情况 ,用产菌毛粘附因子的野生分离菌株HN2 0 0 1(K88ab)、HN2 0 0 2 (K88ac)、HN2 0 0 3(K88ad)、HN2 0 0 4 (K99)、C83915 (987p)及C836 2 1(F4 1)提取菌毛制成 5批多价菌毛混合油乳剂灭活苗 ,5... 根据我国仔猪大肠杆菌性腹泻流行的实际情况 ,用产菌毛粘附因子的野生分离菌株HN2 0 0 1(K88ab)、HN2 0 0 2 (K88ac)、HN2 0 0 3(K88ad)、HN2 0 0 4 (K99)、C83915 (987p)及C836 2 1(F4 1)提取菌毛制成 5批多价菌毛混合油乳剂灭活苗 ,5批多价灭活疫苗对小鼠的平均保护率达 95 0 % (38 4 0 )。 展开更多

关键词 灭活疫苗 制备 小鼠 免疫保护试验 仔猪 黄痢 k88-k99-987p-F41多价菌毛混合油乳剂

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K_(88)-K_(99)-^(987)P-F_(41)菌毛疫苗预防仔猪黄痢的效果 被引量：3

19

作者 李鹏 王家乡 +1 位作者 殷裕斌 龚大春 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2004年第5期10-11,共2页

关键词 仔猪 黄痢 k88-k99-^987P-F41菌毛疫苗 大肠杆菌性腹泻 预防接种 免疫保护力

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仔猪黄痢K88-K99-987p-F41多价菌毛疫苗的制备及小鼠免疫试验 被引量：4

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作者 李鹏 王家乡 程碧军 《动物医学进展》 CSCD 2006年第9期55-58,96,共5页

为了更好地预防仔猪黄痢,选取野生分离菌株HN2001(K88ab)、HN2002(K88ac)、HN2003(K 88ad)、HN2004(K 99)、HN2005(987p)和HN2006(F41)培养后用低温磁力搅拌法提取菌毛,制成5批多价菌毛混合油乳剂灭活苗。试验结果表明,5批多价灭活疫苗... 为了更好地预防仔猪黄痢,选取野生分离菌株HN2001(K88ab)、HN2002(K88ac)、HN2003(K 88ad)、HN2004(K 99)、HN2005(987p)和HN2006(F41)培养后用低温磁力搅拌法提取菌毛,制成5批多价菌毛混合油乳剂灭活苗。试验结果表明,5批多价灭活疫苗对小鼠的平均保护率达95.0%,为进一步进行本体动物试验提供了有价值的参考资料。 展开更多

关键词 大肠埃希菌 k88-k99—987p—F41多价菌毛疫苗 研制

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