目的探讨利用唾液样本提取DNA进行HLA高分辨分型的可行性。方法采集6例造血干细胞移植患者和10例供者唾液样本各2 m L,EDTA抗凝静脉全血3 m L。采用Qiagen全血基因组提取试剂盒和Oragene唾液DNA提取试剂盒分别于全血和唾液样本中提取DNA...目的探讨利用唾液样本提取DNA进行HLA高分辨分型的可行性。方法采集6例造血干细胞移植患者和10例供者唾液样本各2 m L,EDTA抗凝静脉全血3 m L。采用Qiagen全血基因组提取试剂盒和Oragene唾液DNA提取试剂盒分别于全血和唾液样本中提取DNA,琼脂糖凝胶电泳检测DNA质量。采用PCR-SSOP和PCRSBT方法对血液提取DNA和唾液提取DNA进行HLA高分辨分型,并对分型结果进行比较。结果唾液提取DNA浓度69.75±44.96,A260/A280比值为1.77±0.07;血液提取DNA浓度63.06±33.99,A260/A280比值为1.75±0.04。唾液来源DNA PCR-SSOP结果明确,DNA PCR-SBT高分辨分型中无杂峰和碱基错配。16例样本唾液来源DNA的HLA高分辨分型结果和血液来源DNA的结果完全一致,符合率为100%。结论唾液提取的DNA可用于HLA高分辨分型。展开更多
文摘目的探讨利用唾液样本提取DNA进行HLA高分辨分型的可行性。方法采集6例造血干细胞移植患者和10例供者唾液样本各2 m L,EDTA抗凝静脉全血3 m L。采用Qiagen全血基因组提取试剂盒和Oragene唾液DNA提取试剂盒分别于全血和唾液样本中提取DNA,琼脂糖凝胶电泳检测DNA质量。采用PCR-SSOP和PCRSBT方法对血液提取DNA和唾液提取DNA进行HLA高分辨分型,并对分型结果进行比较。结果唾液提取DNA浓度69.75±44.96,A260/A280比值为1.77±0.07;血液提取DNA浓度63.06±33.99,A260/A280比值为1.75±0.04。唾液来源DNA PCR-SSOP结果明确,DNA PCR-SBT高分辨分型中无杂峰和碱基错配。16例样本唾液来源DNA的HLA高分辨分型结果和血液来源DNA的结果完全一致,符合率为100%。结论唾液提取的DNA可用于HLA高分辨分型。
