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乙肝病毒X基因真核表达载体的构建及人肝细胞株HL-7702转染 被引量：9
1
作者 陈红英 唐南洪 +2 位作者 张生君 陈治新 王小众 《世界华人消化杂志》 CAS 2004年第3期614-617,共4页
目的:构建表达乙肝病毒(HBV)X基因的人肝细胞株. 方法:用PCR法扩增HBVX基因序列,将其添A后连至PUCmT载体上,用EcolⅠ和Hind Ⅲ双酶切PUCmT-X和PcDNA3载体,连接酶切片段PcDNA3及X片段以构建重组质粒PcDNA3-X.用脂质体转染法将PcDNA3-X及... 目的:构建表达乙肝病毒(HBV)X基因的人肝细胞株. 方法:用PCR法扩增HBVX基因序列,将其添A后连至PUCmT载体上,用EcolⅠ和Hind Ⅲ双酶切PUCmT-X和PcDNA3载体,连接酶切片段PcDNA3及X片段以构建重组质粒PcDNA3-X.用脂质体转染法将PcDNA3-X及空质粒PcDNA3导入肝细胞HL-7702中,G418选择培养,RT- PCR鉴定其稳定表达. 结果:已构建的PcDNA3-X经序列测定含有完整的HBV X 基因片段,转入HL-7702细胞后经RT-PCR证实该细胞有稳定表达X蛋白. 结论:成功构建了表达HBV X基因的肝细胞株,为进一步探讨HBV X基因在肝炎与肝癌发生中的作用提供了理想的实验模型. 展开更多
关键词 乙肝病毒 X基因 真核表达载体 hl-7702细胞株 脂质体转染法 肝癌
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番茄红素对CCl_4诱导的正常肝细胞株HL-7702损伤的影响
2
作者 赵凯 《安徽医药》 CAS 2013年第5期844-845,共2页
目的体外观察番茄红素对人正常肝细胞株HL-7702细胞活力及凋亡的影响,探讨其对肝细胞的保护作用。方法体外培养人正常肝细胞株HL-7702,建立CCl4肝损伤模型,终浓度为2、5、10μmol·L-1的番茄红素干预处理,MTT法测定细胞活性、Horche... 目的体外观察番茄红素对人正常肝细胞株HL-7702细胞活力及凋亡的影响,探讨其对肝细胞的保护作用。方法体外培养人正常肝细胞株HL-7702,建立CCl4肝损伤模型,终浓度为2、5、10μmol·L-1的番茄红素干预处理,MTT法测定细胞活性、Horchest33342染色及TUNEL检测观察细胞凋亡。结果番茄红素在2～10μmol·L-1浓度范围内的对肝细胞无毒性,可抑制CCl4所致肝细胞活性下降,减少CCl4所致的肝细胞凋亡,一定剂量范围内与番茄红素浓度相关。结论番茄红素对正常肝细胞HL-7702具有保护作用。 展开更多
关键词 番茄红素 四氯化碳 hl-7702细胞
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天麻素通过激活AMPK通路减少油酸诱导的HL-7702细胞脂肪蓄积 被引量：16
3
作者 耿雅娜 于滨 孔维佳 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期39-44,共6页
目的研究天麻素(GSTD)对油酸(OA)诱导的HL-7702细胞脂肪蓄积的抑制作用,并探讨其可能的细胞信号通路。方法以噻唑蓝(MTT)法测定GSTD对HL-7702细胞存活率的影响;以1 mmol·L-1的OA处理24 h诱导细胞脂肪变性,同时加入不同浓度的GSTD,... 目的研究天麻素(GSTD)对油酸(OA)诱导的HL-7702细胞脂肪蓄积的抑制作用,并探讨其可能的细胞信号通路。方法以噻唑蓝(MTT)法测定GSTD对HL-7702细胞存活率的影响;以1 mmol·L-1的OA处理24 h诱导细胞脂肪变性,同时加入不同浓度的GSTD,油红O(ORO)染色观察细胞脂肪蓄积情况并测定细胞内三酰甘油(TG)含量;以Western blot检测GSTD处理后细胞中AMPKα和ACC的磷酸化水平;以compound C处理细胞,研究其对GSTD药效的影响。结果 GSTD浓度≤3 386.5μmol·L-1时对HL-7702细胞没有明显毒性。OA处理24 h后细胞中出现大量脂滴蓄积,TG含量明显增加,但同时加入浓度为169.3或338.7μmol·L-1的GSTD可明显抑制HL-7702细胞的脂肪蓄积,并使TG含量分别平均下降35%和43.6%(与单加OA的细胞比较P<0.01)。GSTD处理后能时间和浓度依赖性地增加细胞中的p-AMPKα和p-ACC水平,compound C能完全阻断GSTD对AMPK通路的激活作用以及减少肝细胞TG蓄积的作用。结论 GSTD可明显抑制OA诱导的HL-7702细胞脂肪蓄积,降低TG含量,其作用依赖于细胞中AMPK通路的激活。 展开更多
关键词 天麻素 油酸 hl-7702 脂肪变性 三酰甘油 AMPK
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萘醌类化合物对HL-7702细胞LDH释放率以及线粒体膜电位的影响 被引量：10
4
作者 郭晶 宋文华 +3 位作者 丁峰 孙增田 李双 孙瑞娟 《南开大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期6-12,共7页
测定了6种萘醌类化合物对正常人肝细胞HL-7702乳酸脱氢酶(Lactate Dehydrogenase,LDH)释放率以及线粒体膜电位的影响.研究发现,LDH释放率随着染毒浓度的增大而增大,而线粒体膜电位却减小,呈现剂量-效应关系.其中,2-羟基-1,4-萘醌引起的... 测定了6种萘醌类化合物对正常人肝细胞HL-7702乳酸脱氢酶(Lactate Dehydrogenase,LDH)释放率以及线粒体膜电位的影响.研究发现,LDH释放率随着染毒浓度的增大而增大,而线粒体膜电位却减小,呈现剂量-效应关系.其中,2-羟基-1,4-萘醌引起的LDH释放率变化高于其它4种化合物,而阿托伐醌引起的线粒体膜电位下降最严重,这可能是由于阿托伐醌是高脂溶性的化合物,更容易到达细胞靶点从而引起了严重的细胞凋亡所致.脂水分配系数lgP、分子直径D以及分子拓扑学指数TIndex可能是影响该类化合物对HL-7702致毒作用的主要因素.该类化合物还可能通过疏水作用或者π-π相互作用影响生物大分子,从而产生毒性作用. 展开更多
关键词 萘醌类化合物 hl-7702细胞 乳酸脱氢酶 线粒体膜电位 致毒机理
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补骨脂素加长波紫外线对人白血病细胞株NB4、HL-60、K562作用的研究 被引量：30
5
作者 陈楠楠 黄世林 +3 位作者 张德杰 向阳 郭爱霞 张励 《中国中医急症》 2007年第4期444-446,共3页
目的探讨补骨脂素(PSO)加长波紫外线(UVA)光化学疗法对人白血病细胞株NB4、HL-60、K562的作用。方法以NB4、HL-60、K562细胞株为研究对象,以细胞抑制率、凋亡率及在电镜下细胞超微结构改变为检测指标,观察PSO加波长360nm的UVA对人白血... 目的探讨补骨脂素(PSO)加长波紫外线(UVA)光化学疗法对人白血病细胞株NB4、HL-60、K562的作用。方法以NB4、HL-60、K562细胞株为研究对象,以细胞抑制率、凋亡率及在电镜下细胞超微结构改变为检测指标,观察PSO加波长360nm的UVA对人白血病细胞株的影响,并分析各因素间的交互作用。结果当PSO浓度均为80μg/ml,UVA照射时间分别为10min、15min和15min时,NB4、HL-60、和K562细胞的抑制率分别达峰值;当PSO浓度分别为40μg/ml、80μg/ml和80μg/ml,UVA照射时间为10min、15min和15min时,NB4、HL-60和K562细胞的凋亡率达峰值。不同PSO浓度、不同UVA照射时间对不同白血病细胞株的抑制率、凋亡率的差异有统计学意义,且各因素之间有交互作用。电镜下观察经PSO和UVA处理后的NB4、HL-60及K562细胞超微结构,均可见明显的凋亡形态学改变。结论PSO加UVA(PUVA)可抑制白血病细胞株NB4、HL-60、K562的生长,并可诱导其凋亡。浓度为40～80μg/mlPSO与波长为360nm的UVA照射10～15min是PUVA抗NB4、HL-60、K562白血病细胞的最佳作用点。 展开更多
关键词 补骨脂素紫外线A疗法 紫外线 白血病 NB4细胞株 hl-60细胞株 K562细胞株
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44种生物碱类化合物对人鼻咽癌细胞株KB和人白血病细胞株HL-60细胞增殖抑制活性的筛选 被引量：22
6
作者 杨秀伟 冉福香 +4 位作者 王瑞卿 吴军 彭俊 裴惠平 孙士勇 《中国现代中药》 CAS 2007年第1期8-13,共6页
目的:从中药中筛选有抗肿瘤活性的化合物。方法:应用人鼻咽癌细胞株KB和人白血病细胞株HL-60筛选44种生物碱类化合物对其增殖的抑制作用。结果:西萝芙木碱、伊波加因、骆驼蓬碱、哈尔明碱、黄连碱、延胡索碱、白屈菜碱、小檗胺、吐根碱... 目的:从中药中筛选有抗肿瘤活性的化合物。方法:应用人鼻咽癌细胞株KB和人白血病细胞株HL-60筛选44种生物碱类化合物对其增殖的抑制作用。结果:西萝芙木碱、伊波加因、骆驼蓬碱、哈尔明碱、黄连碱、延胡索碱、白屈菜碱、小檗胺、吐根碱、4-甲氧基-1-甲基-2-喹诺酮、贝母碱N-氧化物、去氢贝母碱N-氧化物、倒千里光碱、9-去甲基小檗碱、番茄碱苷、澳洲茄次碱、金鸡宁、罂粟碱、喜树碱和酒石酸麦角胺对人鼻咽癌细胞株KB细胞的增殖有一定程度的抑制作用,且呈浓度-效应关系;最强者为吐根碱、番茄碱苷和喜树碱,其次为黄连碱、白屈菜碱、哈尔明碱、澳洲茄次碱和延胡索碱。西萝芙木碱、白屈菜碱、哈尔明碱、小檗胺、吐根碱、贝母碱N-氧化物、番茄碱苷、罂粟碱、利血胺和喜树碱对人白血病细胞株HL-60细胞的增殖亦有一定程度的抑制作用,且呈浓度-效应关系;最强者为吐根碱,其次为西萝芙木碱、小檗胺、番茄碱苷和喜树碱。结论:上述生物碱类化合物可能是含有该生物碱的、有抗肿瘤活性中药的有效成分,亦可能成为开发抗肿瘤新药的候选药物。 展开更多
关键词 中药 生物碱类 人鼻咽癌细胞株KB 人白血病细胞株hl-60
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40种香豆素类化合物对人鼻咽癌细胞株KB和人白血病细胞株HL-60细胞生长抑制活性的筛选 被引量：18
7
作者 杨秀伟 徐波 +3 位作者 吴军 冉福香 王瑞卿 崔景荣 《中国现代中药》 CAS 2006年第10期8-13,共6页
目的:从中药中筛选有抗肿瘤活性的化合物。方法:应用人鼻咽癌细胞株KB和人白血病细胞株HL-60筛选40种香豆素类化合物对其生长的抑制作用。结果:马栗树皮苷、去甲基呋喃皮纳灵、前胡素和二氢山芹醇当归酸酯对人鼻咽癌细胞株KB细胞的生长... 目的:从中药中筛选有抗肿瘤活性的化合物。方法:应用人鼻咽癌细胞株KB和人白血病细胞株HL-60筛选40种香豆素类化合物对其生长的抑制作用。结果:马栗树皮苷、去甲基呋喃皮纳灵、前胡素和二氢山芹醇当归酸酯对人鼻咽癌细胞株KB细胞的生长有一定程度的抑制作用,且呈浓度-效应关系;伞形花内酯刘寄奴酸酯、牛防风素和考迈斯托醇对人白血病细胞株HL-60细胞的生长有一定程度的抑制作用。结论:马栗树皮苷、去甲基呋喃皮纳灵、前胡素和二氢山芹醇当归酸酯对人鼻咽癌细胞株KB细胞的生长有抑制作用;伞形花内酯刘寄奴酸酯、牛防风素和考迈斯托醇对人白血病细胞株HL-60细胞的生长有抑制作用。 展开更多
关键词 中药 香豆素类 人鼻咽癌细胞株KB 人白血病细胞株hl-60
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OA对人肝细胞HL-7702和肝癌细胞Bel-7402增殖的影响和对细胞凋亡的诱导作用研究 被引量：7
8
作者 陈洋 颜天 +1 位作者 于仁成 周名江 《中山大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期86-92,共7页
以人肝细胞HL-7702和肝癌细胞Bel-7402为研究对象,通过MTT法、细胞外部形态观察、Annexin V-FITC&PI双染法及TUNEL法等方法,研究了腹泻性贝毒的主要组分大田软海绵酸(Okadaic acid,OA)对其增殖的影响及对细胞凋亡的诱导作用。结果表... 以人肝细胞HL-7702和肝癌细胞Bel-7402为研究对象,通过MTT法、细胞外部形态观察、Annexin V-FITC&PI双染法及TUNEL法等方法,研究了腹泻性贝毒的主要组分大田软海绵酸(Okadaic acid,OA)对其增殖的影响及对细胞凋亡的诱导作用。结果表明:OA对人两株细胞的增殖均有显著的抑制作用,24 h IC50分别为65ng/mL和60 ng/mL,且这种抑制作用呈剂量依赖性。OA导致两株细胞的形态均发生明显变化:细胞变圆,脱壁,细胞膜形成泡状突起,最终形成膜包裹的凋亡小体。Annexin V-FITC和PI双染法及TUNEL法检测均发现:OA能够诱导两株细胞发生不同程度的凋亡,且凋亡细胞的比例与OA的浓度相关。以上结果表明:OA能够通过抑制细胞增殖和诱导细胞凋亡而对人肝细胞和肝癌细胞造成影响,且这种影响的程度与OA的浓度和作用时间密切相关。 展开更多
关键词 大田软海绵酸 人肝细胞hl-7702 人肝癌细胞BEL-7402 增殖 细胞凋亡
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姜黄素通过激活AMPK抑制人肝癌细胞HL-7702的增殖 被引量：3
9
作者 田杰 李慧萍 +2 位作者 任配友 刘春禹 李锐 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期1897-1898,共2页
目的观察姜黄素对体外培养人肝癌细胞HL-7702增殖的影响。方法体外培养HL-7702,分别以50、100μmol/L姜黄素处理48 h,噻唑蓝(MTT)法检测细胞的增殖情况,Western印迹方法检测细胞内AMP蛋白激酶(AMPK)与p-AMPK蛋白含量;以AMPK激活剂(AICAR... 目的观察姜黄素对体外培养人肝癌细胞HL-7702增殖的影响。方法体外培养HL-7702,分别以50、100μmol/L姜黄素处理48 h,噻唑蓝(MTT)法检测细胞的增殖情况,Western印迹方法检测细胞内AMP蛋白激酶(AMPK)与p-AMPK蛋白含量;以AMPK激活剂(AICAR)、AMPK抑制剂(compound C)联合姜黄素处理体外培养的HL-7702 48 h,MTT法检测细胞增殖情况。结果姜黄素处理48 h后,HL-7702细胞增殖受到抑制,且抑制程度呈剂量依赖性,细胞中AMPK与p-AMPK蛋白水平上调;与AICAR联合应用,姜黄素对HL-7702的增殖抑制作用无明显改变;与compound C联合应用,姜黄素对HL-7702增殖抑制作用减弱;同时与AICAR和compound C联合应用,姜黄素对HL-7702的增殖抑制作用无明显变化。结论姜黄素可抑制人肝癌细胞HL-7702增殖,其作用机制可能与激活AMPK有关。 展开更多
关键词 姜黄素 人肝癌细胞 hl-7702 AMPK
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四嗪二甲酰胺对白血病细胞株HL-60体外作用的研究 被引量：6
10
作者 周永列 吕亚萍 +4 位作者 胡惟孝 邱莲女 王文松 杨忠愚 刘建栋 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2006年第9期1006-1012,共7页
目的：观察四嗪二甲酰胺（ZGDHu-1）体外抑制白血病细胞株HL-60增殖，诱导细胞分化和凋亡作用，并对其作用机制进行初步探讨。方法：将不同浓度的ZGDHu-1与HL-60细胞在体外培养，台盼蓝染色、MTT比色法观察对HL-60细胞增殖的抑制作用；... 目的：观察四嗪二甲酰胺（ZGDHu-1）体外抑制白血病细胞株HL-60增殖，诱导细胞分化和凋亡作用，并对其作用机制进行初步探讨。方法：将不同浓度的ZGDHu-1与HL-60细胞在体外培养，台盼蓝染色、MTT比色法观察对HL-60细胞增殖的抑制作用；用细胞形态学、DNA凝胶电泳、DNA含量及细胞周期分析、Annexin-V／PI双标记和DNA片段原位末端标记法等分析细胞凋亡。通过NBT试验、细胞表面抗原CD11b、CD13、CD14、CD64和细胞形态学检测ZGDHu-1对HL-60细胞的分化作用。用Rh123／PI测定线粒体跨膜电位（△ψm），用流式细胞术检测Bcl-2、Box、P53、Fas和线粒体膜蛋白的表达变化。结果：ZGDHu-1呈现作用时间和剂量的量效性抑制HL-60细胞增殖和活力，10ng·ml^-1 ZGDHu-1作用HL-60细胞24～72h后，MTr法检测细胞增殖抑制率分别为（7．3±0．3）％、（15．8±1．0）％和（21．3±1．2）％，均显著高于对照组（P〈0．01）；48h、72h的IC50分别为180、180ng·ml^-1。HL-60细胞经ZGDHu-1作用后，大部分细胞阻滞于G2-M期，G0/1期细胞减少；出现典型的细胞形态改变，DNA片端化，经50～1000ng·ml^-1的ZGDHu-1作用后，SubG1由（3.2±1．6）％上升至（67．7±5.9）％，与对照组（0．7±0.5）％比较，具有显著性差异（P〈0．05），Annexin-V／PI标记升高，TUNEL染色后的凋亡细胞的特征性改变等均证实ZGDHu-1能诱导HL-60细胞凋亡。HL-60细胞经10～100ng·ml^-1 ZGDHu-1作用3d后，细胞发生部分分化，NBT阳性率增加，细胞表面CD11b、CD13、CD14、CD64表达增加。ZGDHu-1诱导HL-60细胞凋亡和分化过程中，Bcl-2表达无变化，但Box表达显著增加，Bax／Bcl-2的比值升高，Fas表达增强，而P53表达无变化。随ZGDHu-1作用的浓度增加，△ψm下降、而线粒体膜蛋白表达显著升高。结论：ZGDHu-1能抑制HL-60细胞增殖和细胞活力，低浓度时诱导HL-60细胞向粒单系分化，高浓度时促进细胞凋亡，其机制可能与Bax表达上调，线粒体膜电位下降等有关。 展开更多
关键词 四嗪二甲酰胺 细胞株hl-60 细胞凋亡 细胞分化
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草苁蓉多糖对过氧化氢致HL-7702细胞损伤的保护作用 被引量：5
11
作者 金爱花 常慧 +3 位作者 张钊 葛乃嘉 全吉淑 尹学哲 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2021年第21期132-139,共8页
采用草苁蓉多糖(Boschniakia rossica polysaccharides,BRP)对HL-7702细胞进行预保护,再用H 2O 2处理HL-7702细胞构建肝细胞氧化损伤模型。CCK-8法测定HL-7702细胞存活率,微板法测定HL-7702细胞培养液中乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenas... 采用草苁蓉多糖(Boschniakia rossica polysaccharides,BRP)对HL-7702细胞进行预保护,再用H 2O 2处理HL-7702细胞构建肝细胞氧化损伤模型。CCK-8法测定HL-7702细胞存活率,微板法测定HL-7702细胞培养液中乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)活性,硫代巴比妥酸法检测HL-7702细胞丙二醛(malondialdehyde,MDA)的生成,Hoechst33342染色法及原位末端标记法观察HL-7702细胞的凋亡情况,蛋白印迹技术检测HL-7702细胞Caspase 3活性片段(C-casp3)、聚腺苷二磷酸核糖聚合酶活性片段[cleaved poly(ADP-ribose)polymerase,C-PARP]、细胞色素c(cytochrome c,Cyto c)、p53、B细胞淋巴瘤/白血病-2(B cell lymphoma/lewkmia-2,Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2-associated X protein,Bax)、Bcl-2同源拮抗剂/杀伤剂(Bcl-2 homologous antagonist/killer,Bak)蛋白表达以及丝裂原活化蛋白激酶、核转录因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)激活情况。结果表明,300μmol/LH 2O 2处理HL-7702细胞6 h可使细胞存活率降低58%(P<0.05),表明H 2O 2能够诱导HL-7702细胞损伤。而50和100 mg/L BRP能够减缓H 2O 2导致的HL-7702细胞损伤。与模型组比较,BRP高剂量组HL-7702细胞存活率增高30.8%(P<0.05),LDH释放率降低32.8%(P<0.05),细胞MDA生成降低81.0%(P<0.05)。此外,与模型组比较,BRP组HL-7702细胞凋亡明显减少,胞浆Cyto c水平下降(P<0.05),细胞p53、Bak、Bax蛋白表达下调(P<0.05),Bcl-2蛋白表达上调(P<0.05),C-casp3、C-PARP水平降低(P<0.05),磷酸化细胞外信号调节蛋白激酶(phosphorylated extracellular signal-regulated kinase,p-ERK)、磷酸化c-Jun氨基末端激酶(phosphorylated c-Jun N-terminal kinase,p-JNK)以及核NF-κB水平下降(P<0.05)。提示,BRP能够有效保护H 2O 2诱导的HL-7702细胞损伤,并抑制HL-7702细胞凋亡,此作用可能与BRP对ERK、JNK、NF-κB通路的调控有关。 展开更多
关键词 草苁蓉 多糖 hl-7702细胞 过氧化氢 细胞凋亡
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大田软海绵酸对HL-7702肝细胞毒性效应的研究 被引量：4
12
作者 黄爱君 黄海燕 +2 位作者 庄志雄 杨汝德 刘建军 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2010年第10期5251-5253,共3页
[目的]探讨大田软海绵酸(okadaic acid,OA)对HL-7702肝细胞的毒性效应。[方法]通过细胞计数试剂盒(Cell Counting Kit-8,CCK-8)、细胞形态学观察及流式细胞术等方法,从细胞增殖、细胞凋亡等方面探讨OA对HL-7702肝细胞的毒性效应。[结果... [目的]探讨大田软海绵酸(okadaic acid,OA)对HL-7702肝细胞的毒性效应。[方法]通过细胞计数试剂盒(Cell Counting Kit-8,CCK-8)、细胞形态学观察及流式细胞术等方法,从细胞增殖、细胞凋亡等方面探讨OA对HL-7702肝细胞的毒性效应。[结果]与溶剂对照组相比,OA对HL-7702肝细胞增殖有明显的抑制作用,细胞增殖抑制率随着OA浓度的增加而增加,同时随着染毒时间的延长,细胞增殖抑制率也明显增加;与对照组相比,作用HL-7702肝细胞24h后,5nmol/LOA可明显诱导细胞发生凋亡。[结论]OA可以通过抑制细胞增殖及诱导细胞凋亡的方式对HL-7702肝细胞产生毒性效应,且呈现剂量-效应关系。 展开更多
关键词 大田软海绵酸 细胞增殖 凋亡 hl-7702肝细胞
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甘氨鹅脱氧胆酸盐对人正常肝细胞HL-7702的影响 被引量：3
13
作者 陈念平 周军 +2 位作者 秦勇 廖博懿 邱志东 《广东医学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第14期1773-1775,共3页
目的观察甘氨鹅脱氧胆酸盐(glycochenodeoxcholate,GCDC)对人正常肝细胞HL-7702凋亡诱导作用,探讨GCDC诱导HL-7702细胞凋亡的机制。方法终浓度分别为50、100、150、200、250μmol/L的GCDC处理HL-7702细胞4、8、12、24h,光学显微镜镜下... 目的观察甘氨鹅脱氧胆酸盐(glycochenodeoxcholate,GCDC)对人正常肝细胞HL-7702凋亡诱导作用,探讨GCDC诱导HL-7702细胞凋亡的机制。方法终浓度分别为50、100、150、200、250μmol/L的GCDC处理HL-7702细胞4、8、12、24h,光学显微镜镜下观察细胞形态学改变、用Am-Blue细胞活性检测和乳酸脱氢酶活性的测定及AnnexinV-FITC/PI双染色法检测GCDC对HL-7702细胞凋亡的影响,用荧光指示剂Fluo-3/AM测定HL-7702细胞内钙离子浓度。结果 (1)终浓度为150μmol/L的GCDC处理HL-7702细胞24h后,细胞出现典型的凋亡细胞形态学改变,包括核固缩、核碎裂和凋亡小体形成等。(2)Am-Blue吸光光度法、GENMED乳酸脱氢酶(LDH)总活性比色法及AnnexinV-FITC/PI双染色法定量检测结果均显示,GCDC均可诱导HL-7702细胞凋亡且呈剂量及时间依赖性。(3)GCDC能使HL-7702细胞内钙离子浓度增加且具有浓度和时间依赖性。结论 GCDC可能通过增加HL-7702细胞内钙离子浓度诱导人正常肝细胞HL-7702凋亡,其作用具有浓度和时间依赖性。 展开更多
关键词 甘氨鹅脱氧胆酸盐 细胞凋亡 hl-7702细胞 钙离子
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纳米二氧化硅颗粒对HL-7702细胞黏附和迁移能力的影响 被引量：3
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作者 潘涛 郭彩霞 +4 位作者 金明华 刘晓梅 刘颖 杜海英 孙志伟 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期732-736,共5页
目的:探讨纳米二氧化硅颗粒对HL-7702细胞黏附迁移能力的影响,为其安全性评价提供实验依据。方法:体外培养的人正常肝细胞株HL-7702随机分为对照组和纳米二氧化硅颗粒暴露组,暴露浓度分别为12.5、25.0、50.0和100.0mg·L-1。采用透... 目的:探讨纳米二氧化硅颗粒对HL-7702细胞黏附迁移能力的影响,为其安全性评价提供实验依据。方法:体外培养的人正常肝细胞株HL-7702随机分为对照组和纳米二氧化硅颗粒暴露组,暴露浓度分别为12.5、25.0、50.0和100.0mg·L-1。采用透射电子显微镜(TEM)及动态光散射粒度分析仪(DLS)对纳米二氧化硅颗粒进行观察。细胞处理24h后,细胞黏附实验检测细胞黏附能力;划痕修复实验检测细胞迁移能力,TEM观察细胞对纳米二氧化硅颗粒的摄取及颗粒在细胞内的分布。结果:TEM观察,纳米二氧化硅呈圆形,颗粒大小均匀一致,分散性良好,颗粒平均粒径为(67.42±5.69)nm。DLS法检测,纳米二氧化硅颗粒在无血清RPMI-1640培养液中水合粒径为(134.13±2.78)nm,而在含1%、5%和10%血清的RPMI-1640培养液中的水合粒径明显增大。细胞黏附实验及划痕修复实验,与对照组比较,在无毒剂量下,纳米二氧化硅颗粒暴露组细胞的相对黏附率和损伤修复率明显下调(P<0.05),且随着作用浓度的升高下调作用愈加明显。与对照组比较,在无毒剂量作用下,纳米二氧化硅暴露组大量的纳米二氧化硅颗粒已被细胞摄取,颗粒主要以成簇的形式分布于内吞小泡中或散在分布于胞质中,可见细胞膜凹陷、包裹吞噬纳米颗粒的过程。结论:纳米二氧化硅颗粒能够抑制HL-7702细胞的黏附和迁移能力,并呈一定的浓度依赖效应。 展开更多
关键词 纳米二氧化硅颗粒 hl-7702细胞 细胞黏附 细胞迁移 细胞摄取
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纳米SiO_2颗粒对HL-7702细胞的毒性作用和缝隙连接通讯的影响 被引量：2
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作者 潘涛 金明华 +4 位作者 刘晓梅 杜忠君 周显青 黄沛力 孙志伟 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期222-226,431,共5页
目的:探讨纳米二氧化硅(SiO2)颗粒对HL-7702细胞的毒性作用和细胞缝隙连接通讯(GJIC)的影响,为纳米SiO2体内外毒性的预测和安全性应用提供实验依据。方法:透射电镜(TEM)观察2种SiO2颗粒的粒径、分散性和形状;动态光散射法(DLS)检测SiO2... 目的:探讨纳米二氧化硅(SiO2)颗粒对HL-7702细胞的毒性作用和细胞缝隙连接通讯(GJIC)的影响,为纳米SiO2体内外毒性的预测和安全性应用提供实验依据。方法:透射电镜(TEM)观察2种SiO2颗粒的粒径、分散性和形状;动态光散射法(DLS)检测SiO2颗粒在高纯水和培养液中的粒度分布;MTT法检测细胞存活率;乳酸脱氢酶(LDH)活力实验检测细胞膜完整性;划痕染料示踪技术检测GJIC。结果:透射电镜,2种SiO2颗粒呈圆形,大小均一,分散性良好,2种颗粒的粒径分别为(447.60±20.78)和(67.42±5.69)nm,分别为亚微米级和纳米级颗粒。动态光散射法,2种颗粒在高纯水和RPMI-1640培养液中的水合粒径分别为(684.37±18.76)、(697.02±19.57)nm和(128.31±7.64)、(133.74±8.97)nm,颗粒均未发生聚集,分散性良好。MTT法,2种SiO2颗粒作用细胞24h后,同一粒径的颗粒,随着浓度的增加,细胞存活率下降;同一浓度下,纳米颗粒比亚微米颗粒的毒性大。LDH活力实验,当作用细胞24h后,2种SiO2颗粒均能够损伤细胞膜,同一浓度下,纳米SiO2颗粒比亚微米颗粒对细胞膜的损伤能力大;同一粒径的颗粒,随着作用浓度的增加,细胞膜的损伤程度加重。划痕染料示踪实验,纳米SiO2颗粒可抑制GJIC,并且随着作用浓度的增加,抑制作用增强;而在相同浓度下,纳米SiO2颗粒比亚微米颗粒对GJIC的抑制作用更明显。结论:纳米SiO2颗粒能够对HL-7702细胞产生毒性作用,且抑制GJIC。 展开更多
关键词 纳米SIO2颗粒 hl-7702细胞 细胞毒性 细胞缝隙连接通讯
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雷公藤多甙对人急性髓性白血病细胞株HL-60的生长抑制及凋亡诱导作用 被引量：4
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作者 刘静 胡维新 +2 位作者 叶茂 何莉芳 张彬 《中南大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期382-385,共4页
目的 :探讨雷公藤多甙对人急性髓性白血病细胞株HL 6 0细胞的增殖及凋亡的影响。方法 :应用四甲基偶氮唑蓝 (MTT)法、荧光染色法、流式细胞仪 (FCM )检测、DNA片段化分析等方法研究雷公藤多甙对HL 6 0细胞的影响。结果 :雷公藤多甙能显... 目的 :探讨雷公藤多甙对人急性髓性白血病细胞株HL 6 0细胞的增殖及凋亡的影响。方法 :应用四甲基偶氮唑蓝 (MTT)法、荧光染色法、流式细胞仪 (FCM )检测、DNA片段化分析等方法研究雷公藤多甙对HL 6 0细胞的影响。结果 :雷公藤多甙能显著抑制白血病细胞的增殖 ,降低肿瘤细胞的存活率 ,其半数细胞抑制剂量 (IC50 )为5 .0 μg/ml,阻滞细胞周期于G2 /M期 (P <0 .0 5 )。雷公藤多甙实验组在形态学上可见明显凋亡细胞 ,且凋亡细胞百分率显著上升 (P <0 .0 5 ) ,凝胶电泳分析有DNA梯状条带出现。结论 :雷公藤多甙能显著抑制人急性髓性白血病细胞株HL 6 展开更多
关键词 雷公藤多甙 急性髓性白血病 细胞株 hl-60细胞 增殖 凋亡细胞 生长抑制 DNA 细胞周期 MT
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阿霉素在人白血病敏感细胞株HL-60和多药耐药细胞株HL-60/ADR的分布和积聚变化 被引量：4
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作者 王磊 柯红 +2 位作者 王一羽 任东明 崔洁 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第12期1650-1653,共4页
目的了解化疗药物阿霉素(ADR)在人白血病敏感细胞株HL-60和多药耐药细胞株HL-60/ADR细胞内的分布和积聚变化及其与耐药的关系。方法应用共聚焦激光扫描显微镜和流式细胞术研究ADR在细胞内的分布和积聚,以及维拉帕米、BSO、布雷菲尔得菌... 目的了解化疗药物阿霉素(ADR)在人白血病敏感细胞株HL-60和多药耐药细胞株HL-60/ADR细胞内的分布和积聚变化及其与耐药的关系。方法应用共聚焦激光扫描显微镜和流式细胞术研究ADR在细胞内的分布和积聚,以及维拉帕米、BSO、布雷菲尔得菌素、氯喹对细胞内ADR异常分布的影响。以3种特异染色线粒体、高尔基体和溶酶体的荧光物质Rhodamine123、NBD-ceramide和中性红作为探针,鉴定分隔储留ADR的细胞器。结果与ADR在HL-60细胞核、胞质均匀分布不同,在HL-60/ADR,ADR呈点棘状分布于细胞质,核内ADR荧光很少。这种分布方式与NBD-ceramide荧光在该细胞的分布极其相似。BSO和布雷菲尔得菌素可逆转ADR在HL-60/ADR的异常分布和积聚,而维拉帕米和氯喹无此作用。结论ADR在耐药细胞的异常分布和积聚与肿瘤细胞耐药的形成有关。 展开更多
关键词 阿霉素 流式细胞术 共聚焦激光扫描显微镜 分布和积聚 多药耐药 细胞株 hl-60/ADR
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ALA-PDT诱导白血病细胞株HL-60凋亡 被引量：5
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作者 韩晓凤 曹兰芳 +6 位作者 钟济华 王海嵘 宣正华 朱菁 陈芳源 韩洁英 欧阳仁荣 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 2007年第10期779-783,共5页
背景与目的:基于5-氨基乙酰丙酸的光动力疗法(ALA-PDT)利用肿瘤细胞对ALA产生的内源性光敏剂原卟啉IX(PpIX)的优先摄取,使肿瘤细胞在受到一定的光照后被选择性地杀伤。到目前为止,ALA-PDT引起肿瘤细胞破坏的确切机制尚未完全阐明。本研... 背景与目的:基于5-氨基乙酰丙酸的光动力疗法(ALA-PDT)利用肿瘤细胞对ALA产生的内源性光敏剂原卟啉IX(PpIX)的优先摄取,使肿瘤细胞在受到一定的光照后被选择性地杀伤。到目前为止,ALA-PDT引起肿瘤细胞破坏的确切机制尚未完全阐明。本研究探讨ALA-PDT对白血病细胞株HL-60的凋亡诱导作用。方法:以白血病细胞株HL-60为实验模型。实验分为4组,对照组、单纯ALA组、单纯光照组及ALA+PDT组。用MTT法检测细胞的存活率,瑞氏染色观察细胞形态学改变,用Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率,并用共聚焦激光显微镜(LSCM)观察凋亡细胞的特征。结果:ALA+PDT组光照后细胞形态学可见凋亡改变;MTT法显示细胞存活率明显下降,24 h为(46±9)%,48 h为(26±8)%,两者比较差异有显著性(P<0.05);流式细胞仪检测显示光照后4、5和24 h细胞凋亡率分别为(26±9)%、(29±11)%和(51±6)%,与对照组相比差异有显著性(P<0.05);LSCM观察AnnexinV-FITC单阳性及AnnexinV-FITC/PI双阳性细胞均具有典型的凋亡特征,而单纯ALA组、单纯光照组及对照组则无上述改变。结论:ALA-PDT能杀伤白血病细胞株HL-60,主要通过诱导凋亡的方式实现的,并呈一定的时间依赖性。 展开更多
关键词 5-氨基乙酰丙酸 光动力学治疗 白血病细胞株hl-60 细胞凋亡
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HL-60细胞株经顺铂和电离辐射作用后细胞周期阻滞变化 被引量：5
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作者 汤屹 奚玲 +2 位作者 周剑锋 刘文励 吴剑宏 《临床血液学杂志》 CAS 2006年第5期289-290,293,共3页
目的:观察HL-60细胞株经顺铂作用和60Co照射后其细胞周期阻滞的动态变化。方法:用60Co分别以6,10Gy的吸收剂量照射HL-60肿瘤细胞株,并于照射后6、12、24及60h测量其细胞周期变化,同样使用化疗药物顺铂分别以10μmol/L,20μmol/L浓度梯... 目的:观察HL-60细胞株经顺铂作用和60Co照射后其细胞周期阻滞的动态变化。方法:用60Co分别以6,10Gy的吸收剂量照射HL-60肿瘤细胞株,并于照射后6、12、24及60h测量其细胞周期变化,同样使用化疗药物顺铂分别以10μmol/L,20μmol/L浓度梯度作用HL-60细胞株,并于作用后4、8、12及24h测量其细胞周期变化。结果:HL-60细胞株在受到小剂量外界作用后,如6Gy60Co照射和10μmol/L顺铂作用,表现有G2/M期崩溃现象,而在大剂量外界作用后,如10Gy60Co照射和20μmol/L顺铂作用,未表现G2/M期崩溃现象,而是表现持续的细胞周期阻滞现象。结论:在一定范围的外界剂量作用下,HL-60细胞株的细胞周期阻滞现象即自我保护机制呈剂量依赖性增强。小剂量外界刺激可导致其凋亡增加,而大剂量反而使其表现较强的细胞周期阻滞现象。 展开更多
关键词 细胞周期 hl-60肿瘤细胞株 辐射
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昆布多糖硫酸酯对急性髓性白血病HL-60细胞株NF-κB表达的实验研究及CD_(11b)在HL-60细胞株的表达 被引量：4
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作者 肖青 唐宗山 +1 位作者 黄宗干 董蒲江 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 2003年第24期47-49,共3页
目的　研究昆布多糖硫酸酯 (LAMS)对急性髓性白血病HL - 6 0细胞株NF -κB表达的影响及CD11b在HL - 6 0细胞株的表达。方法　用MTT法测定不同浓度LAMS对HL - 6 0细胞株的增殖抑制作用 ;流式细胞仪分析不同浓度作用下细胞凋亡率 ,免疫组... 目的　研究昆布多糖硫酸酯 (LAMS)对急性髓性白血病HL - 6 0细胞株NF -κB表达的影响及CD11b在HL - 6 0细胞株的表达。方法　用MTT法测定不同浓度LAMS对HL - 6 0细胞株的增殖抑制作用 ;流式细胞仪分析不同浓度作用下细胞凋亡率 ,免疫组化法测定MMS对HL - 6 0细胞株NP -κB家族P6 5亚单位的作用及CD11b表达。结果　HL - 6 0细胞增殖抑制程度与昆布多糖硫酸酯的浓度呈正相关 ;HL - 6 0细胞凋亡率随药物浓度的增加而升高 ;在LAMS浓度为 0 .75 μg/ml作用下 ,P6 5在 12h表达呈强阳性 ,2 4h几乎不表达 ,而IKbα在 6h表达呈强阳性 ,CD11b不表达。结论　LAMS可以诱导体外HL - 6 0细胞凋亡 ,其中对凋亡的调控作用可能为负调控 ;LAMS能够调控NF -κB的表达 ,其表达有时间差异性。说明LAMS已作用于分子水平 ,且对CD11b在HL - 6 0细胞株的表达无影响。 展开更多
关键词 昆布多糖硫酸酯 hl-60细胞株 调控 白血病/急性髓性白血病
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