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培养基血清质量和浓度的不同对肠干细胞群分离培养的影响
被引量:
1
1
作者
刘冠琳
程跃
+2 位作者
谢国海
严泽军
袁鹤胜
《现代实用医学》
2018年第10期1266-1268,1419,共4页
目的通过改变细胞培养基中血清的质量和浓度,探索构建小鼠肠干细胞群更合适的血清及浓度。方法取孕17 d昆明系小白鼠的胚胎鼠肠组织,予肠干细胞的培养,将获得的细胞溶于8组细胞培养液,种于24孔板中。细胞培养液共有8组,采用DMEM培养基...
目的通过改变细胞培养基中血清的质量和浓度,探索构建小鼠肠干细胞群更合适的血清及浓度。方法取孕17 d昆明系小白鼠的胚胎鼠肠组织,予肠干细胞的培养,将获得的细胞溶于8组细胞培养液,种于24孔板中。细胞培养液共有8组,采用DMEM培养基和新生牛血清或胎牛血清配制,血清的浓度分别为5%、10%、15%及20%,除此以外还含有胰岛素、谷铵酰胺、表皮生长因子以及双抗(青霉素、链霉素)等成分。最后进行角蛋白抗体及波形蛋白抗体免疫组化染色鉴定细胞来源。结果 24~48 h后,细胞开始贴壁生长。显微镜下可见,除采用10%新生牛血清的组外,其他组细胞均含有大量的间质细胞,上皮细胞所占比例不足10%。而如采用含10%的新生牛血清培养基培养,则贴壁生长的细胞绝大部分为上皮细胞。经传代后,所培养出的肠干细胞群角蛋白18亚型染色阳性。而其他组的细胞,则基本上为间质细胞。结论构建肠干细胞群应选用10%的新生牛血清。
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关键词
肠干细胞
表皮生长因子
新生牛血清
角蛋白
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题名
培养基血清质量和浓度的不同对肠干细胞群分离培养的影响
被引量:
1
1
作者
刘冠琳
程跃
谢国海
严泽军
袁鹤胜
机构
宁波大学附属宁波市第一医院
出处
《现代实用医学》
2018年第10期1266-1268,1419,共4页
基金
国家自然科学基金资助项目(30371423)
文摘
目的通过改变细胞培养基中血清的质量和浓度,探索构建小鼠肠干细胞群更合适的血清及浓度。方法取孕17 d昆明系小白鼠的胚胎鼠肠组织,予肠干细胞的培养,将获得的细胞溶于8组细胞培养液,种于24孔板中。细胞培养液共有8组,采用DMEM培养基和新生牛血清或胎牛血清配制,血清的浓度分别为5%、10%、15%及20%,除此以外还含有胰岛素、谷铵酰胺、表皮生长因子以及双抗(青霉素、链霉素)等成分。最后进行角蛋白抗体及波形蛋白抗体免疫组化染色鉴定细胞来源。结果 24~48 h后,细胞开始贴壁生长。显微镜下可见,除采用10%新生牛血清的组外,其他组细胞均含有大量的间质细胞,上皮细胞所占比例不足10%。而如采用含10%的新生牛血清培养基培养,则贴壁生长的细胞绝大部分为上皮细胞。经传代后,所培养出的肠干细胞群角蛋白18亚型染色阳性。而其他组的细胞,则基本上为间质细胞。结论构建肠干细胞群应选用10%的新生牛血清。
关键词
肠干细胞
表皮生长因子
新生牛血清
角蛋白
Keywords
Intestinal stem cell
Epidermal growth factor
Newborn bovine serum
cytoketarin
分类号
R329 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
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作者
出处
发文年
被引量
操作
1
培养基血清质量和浓度的不同对肠干细胞群分离培养的影响
刘冠琳
程跃
谢国海
严泽军
袁鹤胜
《现代实用医学》
2018
1
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