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Cr介质中生长的棕色固氮菌突变株UW3的固氮酶CrFe蛋白的特性
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作者 张志刚 赵颖 +5 位作者 张纯喜 边少敏 周会娜 王煌平 殷红 黄巨富 《科学通报》 EI CAS CSCD 北大核心 2006年第12期1432-1437,共6页
经DEAE-52,Q-Sepharose和Sephacry S-200柱厌氧层析,从在含Cr的培养基中生长良好的棕色固氮菌突变株UW3纯化得到CrFe蛋白制备物.与从野生型固氮菌OP的MoFe蛋白(OP Av1)相比,该制备物中-50%的蛋白具有与之相似的亚基组成,并可与OP Av1... 经DEAE-52,Q-Sepharose和Sephacry S-200柱厌氧层析,从在含Cr的培养基中生长良好的棕色固氮菌突变株UW3纯化得到CrFe蛋白制备物.与从野生型固氮菌OP的MoFe蛋白(OP Av1)相比,该制备物中-50%的蛋白具有与之相似的亚基组成,并可与OP Av1的抗体发生免疫交叉反应.该制备物还具有-40%的OP Av1 C2H2,H+和N2(以在氩气和氮气下放氢的差值表示)还原活性,并具与OP Av1相似的电子对比率.金属分析表明,此蛋白制备物含有Fe,Cr和Mo.与OP Av1相比,该制备物在450 nm的圆二色谱(CD)与之相似,但在3个相同g值处(g≈4.3,3.7和2.0)出现的EPR信号相对强度则不相同.根据EPR计算的结果表明,(i)CrFe蛋白制备物的Mo/Cr和Fe/(Cr+Mo)的比率分别为0.4和15.0,暗示在该制备物中的含Cr蛋白与MoFe蛋白之比约为2.5;(ii)该制备物活性与Fe及Cr的比率都分别接近于OP Av1活性与Fe和与Mo的比率;(iii)该制备物的上述3个g处的EPR信号强度与Cr含量的比率分别为Op Av1信号强度与Mo含量之比的-83%,0%和-40%.以上结果表明,CrFe蛋白也许是一种新的固氮酶组分Ⅰ蛋白,除以Cr代替Mo外,它的功能和包括金属原子簇在内的结构都可能与MoFe相似。 展开更多
关键词 AZOTOBACTER vinelamdii突变株UW3 crfe蛋白 金属原子簇 圆二色谱(CD) 电子顺磁共振(EPR)
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Crystal Growth of Nitrogenase CrFe Protein and MnFe Protein in Space 被引量:1
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作者 赵颖 赵剑峰 +4 位作者 吕玉兵 黄巨富 王耀萍 仓怀兴 毕汝昌 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 2003年第9期1043-1048,共6页
Nitrogenase CrFe protein and MnFe protein were purified from a mutant strain UW3 of Azotobacter vinelandii Lipmann grown on a medium containing Cr and Mn, respectively. In order to meet the requirement for crystal gro... Nitrogenase CrFe protein and MnFe protein were purified from a mutant strain UW3 of Azotobacter vinelandii Lipmann grown on a medium containing Cr and Mn, respectively. In order to meet the requirement for crystal growth Of O-2-susceptible proteins including nitrogenase in space, crystallization conditions were optimized for the proteins using a simple and suitable device, as a replacement for the cumbersome anaerobic box (dry box), for anaerobic addition of the protein samples. In all used precipitant and protein solutions added in the simplified plexi glass box, CrFe protein and MnFe protein could be crystallized on the spacecraft in one week by the liquid/liquid diffusion method and vapor diffusion by the sitting drop method, respectively. All formed crystals were single on the spacecraft, but under the same condition twin crystals appeared on the ground. The size of the largest crystal grown in space from CrFe protein was 2-fold larger than that on the ground. But the size of the largest crystal grown in space from MnFe protein was not larger than that on the ground. The difference in crystal growth in space between CrFe protein and MnFe protein could be resulted from the crystallization method, rather than the kind of protein. 展开更多
关键词 mutant UW3 of Azotobacter vinelandii O-2-susceptible proteins nitrogenase crfe protein and MnFe protein crystal growth in space
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Characterization of a nitro-genase CrFe protein from a mutant UW3 of Azotobacter vinelandii grown on a Cr-containing medium 被引量:1
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作者 ZHANG Zhigang ZHAO Ying +5 位作者 ZHANG Chunxi BIAN Shaomin ZHOU Huina WANG Huangping YIN Hong HUANG Jufu 《Chinese Science Bulletin》 SCIE EI CAS 2006年第14期1729-1735,共7页
通过 DEAE-52 的列上的缺氧的层析, Q-Sepharose andSeph 压克力 S-200, CrFe 蛋白质准备从 UW3 被获得, Azotobactervinelandii 的异种,它在包含 Cr 媒介上成长了很好。与 MoFe 蛋白质(OP Av1 ) 相比 fromwild 类型紧张 OP,在准... 通过 DEAE-52 的列上的缺氧的层析, Q-Sepharose andSeph 压克力 S-200, CrFe 蛋白质准备从 UW3 被获得, Azotobactervinelandii 的异种,它在包含 Cr 媒介上成长了很好。与 MoFe 蛋白质(OP Av1 ) 相比 fromwild 类型紧张 OP,在准备的约 50% 蛋白质有类似的子单元作文并且与 OP Av1 的抗体有有免疫力的反应。准备有 C_2H_2- H~+-andN_2 的 -40 百分比(在 H~+ 减小活动在之间由差别表示了在 Ar 下面并且在 N_2 下面) 到那些的 OP Av1 和 OP Av1 的类似的电子对的减小活动。并且金属分析证明准备包含了 Fe, Cr 和瞬间。,在在约 450 nm 的准备的圆形的二色性(CD ) 光谱类似于 OP Av1 的出现在一样的 g 价值的 threeEPR 信号的相对紧张(g 约 4.3, 3.7 和 2.0 ) 是不同的。EPR-basedcalculated 结果显示出那(1 ) 到 Cr 的瞬间并且 Fe 到的比率(Cr+Mo ) 分别地, CrFe 蛋白质准备, 0.41 和 15 正在显示在准备,到 MoFe 蛋白质的比率包含 ofCr 蛋白质是大约 2.5;(2 ) 到 Fe 并且到准备的 Cr 的活动的比率分别地接近了活动的比率到 Fe 并且到 OP Av1 的瞬间;(3 ) EPR 的比率在到 CrFe 蛋白质的 Cr 的值大约到瞬间的约 83% 那些, 0% 和约 40% 的上述三 g 表明紧张。OP Av1,分别地。结果进一步显示 CrFe 蛋白质力量是一个新 ni-trogenase 部件我有在余因子由 Mn MoFe 蛋白质包括 metallocluster 到那些而不是瞬间的简单代替的类似的功能和结构的蛋白质。 展开更多
关键词 固氮菌 突变异种 crfe蛋白 循环二色性 电子顺磁共振
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