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伊伐布雷定联合常规药物治疗小儿病毒性心肌炎的临床效果分析
1
作者 李寿林 林小飞 李赛 《中国社区医师》 2024年第1期63-65,共3页
目的:分析伊伐布雷定联合常规药物治疗小儿病毒性心肌炎(VMC)的临床效果。方法:选取2020年7月—2022年7月淮安市妇幼保健院收治的VMC患儿94例作为研究对象,依据随机数字表法分为观察组与对照组,各47例。对照组给予常规治疗,观察组在对... 目的:分析伊伐布雷定联合常规药物治疗小儿病毒性心肌炎(VMC)的临床效果。方法:选取2020年7月—2022年7月淮安市妇幼保健院收治的VMC患儿94例作为研究对象,依据随机数字表法分为观察组与对照组,各47例。对照组给予常规治疗,观察组在对照组基础上应用盐酸伊伐布雷定治疗。比较两组治疗效果。结果:观察组治疗总有效率、白细胞介素-4水平高于对照组,血清γ干扰素、单核细胞趋化蛋白-1、血清淀粉样蛋白、心肌肌钙蛋白T、B型钠尿肽前体水平以及外周血Toll样受体3(TLR3)、β干扰素TIR结构域衔接蛋白(TRIF)、核因子-κBp65表达量低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:伊伐布雷定联合常规药物治疗VMC的效果较好,可通过抑制TLR3/TRIF信号通路减轻炎性反应,改善患者心功能,且安全性高。 展开更多
关键词 病毒性心肌炎 伊伐布雷定 TOLL样受体3 β干扰素TIR结构域衔接蛋白
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泛癌分析揭示SREK1在低级别胶质瘤中促进CD274表达
2
作者 刘东 刘媛 +1 位作者 张淑灵 王玉祥 《宁夏医科大学学报》 2024年第9期893-902,910,共11页
目的剪接调节谷氨酸和富赖氨酸的蛋白质1(SREK1)在多种肿瘤中的泛癌分析,揭示SREK1在泛癌中的作用。方法利用在线数据库GEPIA 2、TIMER 2.0、TISIDB和cBioPortal分析SREK1表达对肿瘤患者预后的影响、在低级别胶质瘤(LGG)肿瘤组织中的表... 目的剪接调节谷氨酸和富赖氨酸的蛋白质1(SREK1)在多种肿瘤中的泛癌分析,揭示SREK1在泛癌中的作用。方法利用在线数据库GEPIA 2、TIMER 2.0、TISIDB和cBioPortal分析SREK1表达对肿瘤患者预后的影响、在低级别胶质瘤(LGG)肿瘤组织中的表达、遗传变异的特征及其表达对肿瘤组织中免疫细胞的浸润和免疫—肿瘤靶基因的相关性分析。结果LGG肿瘤组织中,SREK1表达与记忆B细胞、活化的CD4+T细胞、Th2细胞、中性粒细胞、NKT细胞以及单核细胞和CD56dimNK细胞的浸润存在相关性(P均<0.05)。SREK1与免疫—肿瘤靶基因如信号传导及转录激活蛋白3(STAT3)、Ⅰ型干扰素受体1(IFNAR1)、核受体亚家族3C组成员1(NR3C1)和表皮生长因子受体(EGFR)、表面抗原分化簇274(CD274)等表达在LGG中均呈正相关(P均<0.05)。结论SREK1是LGG患者的危险因子之一,可能通过促进CD274的表达来加剧LGG的进展。 展开更多
关键词 剪接调节谷氨酸和富赖氨酸的蛋白质1 低级别胶质瘤 细胞程序性死亡-配体1 Ⅰ型干扰素受体1 信号转导和转录激活因子3 免疫—肿瘤靶基因
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中国旱獭Ⅰ型干扰素受体β亚基克隆、表达及功能初步鉴定
3
作者 陶颖 杨东亮 +4 位作者 王宝菊 刘艺 桂文甲 李智 樊和斌 《临床肝胆病杂志》 CAS 北大核心 2024年第2期278-283,共6页
目的克隆中国旱獭Ⅰ型干扰素受体β亚基(mhIFNAR2)的基因,并进行抗体制备及功能鉴定。方法应用RT-PCR技术,从中国旱獭脾组织中扩增得到序列,克隆至原核表达载体p RSET-B,表达重组蛋白,电泳和Western Blot法鉴定;重组蛋白常规免疫BALB/c... 目的克隆中国旱獭Ⅰ型干扰素受体β亚基(mhIFNAR2)的基因,并进行抗体制备及功能鉴定。方法应用RT-PCR技术,从中国旱獭脾组织中扩增得到序列,克隆至原核表达载体p RSET-B,表达重组蛋白,电泳和Western Blot法鉴定;重组蛋白常规免疫BALB/c小鼠制备其胞外段多克隆抗体,免疫组化、免疫荧光和Western Blot法鉴定;再通过si RNA阻断的方法检测其功能。计量资料多组间比较采用方差分析,进一步两两比较采用LSD-t检验。结果从mhIFNAR2扩增出149~1300 bp片段,其同源性在分析的种属中以土拨鼠最高,可达98.05%。成功地构建了表达胞外段mhIFNAR2_((50-181aa))蛋白的原核表达质粒,命名为pRSET-B.mhIFNAR2;其表达重组蛋白分子量27 kD,纯化后纯度约为95%,浓度约为160μg/mL。用纯化的重组蛋白常规免疫BALB/c小鼠后,获得1∶1000的特异性多克隆抗体,用免疫组化及免疫荧光可见细胞膜、细胞质有表达。合成的三条siRNA,其中有一条起始于277位点的siRNA(siRNA277)与空白对照及阴性对照相比,可以沉默目的基因的表达,并能减弱干扰素的信号通路(P值均<0.05)。结论获得mhIFNAR2的部分序列,成功地制备出抗mhIFNAR2胞外段多克隆抗体,该抗体有较高的效价和特异性,并能用于免疫组化、免疫荧光及Western Blot的检测。用siRNA277可以抑制目的基因的表达,并能阻断干扰素的信号通路。 展开更多
关键词 受体 干扰素αβ 克隆 乙型肝炎
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MyD88和TRIF在新生儿脑损伤中的表达及其与炎症反应的关系
4
作者 庄玮清 季晓云 《临床和实验医学杂志》 2024年第19期2085-2089,共5页
目的探讨髓样分化因子88(MyD88)和β干扰素TIR结构域衔接蛋白(TRIF)在新生儿脑损伤中的表达及其与炎症反应的关系。方法前瞻性选取2021年10月至2023年9月入同济大学附属妇产科医院诊断并接受治疗的新生儿脑损伤患儿103例为研究对象,作... 目的探讨髓样分化因子88(MyD88)和β干扰素TIR结构域衔接蛋白(TRIF)在新生儿脑损伤中的表达及其与炎症反应的关系。方法前瞻性选取2021年10月至2023年9月入同济大学附属妇产科医院诊断并接受治疗的新生儿脑损伤患儿103例为研究对象,作为新生儿损伤组。同时选择同期无神经系统疾病的正常新生儿80例,作为对照组。收集所有新生儿的临床资料,并采集外周静脉血3 mL,检测两组新生儿血清中降钙素原、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-2、IL-1β、IL-8和IL-6水平,采用实时荧光定量PCR检测血清中MyD88和TRIF mRNA表达,采用Pearson相关性分析对MyD88和TRIF mRNA表达与炎症反应的关系进行分析,并采用受试者操作特征(ROC)曲线评估MyD88和TRIF mRNA表达在新生儿脑损伤中的诊断价值。结果两组新生儿的胎龄、年龄、出生体重、男性占比、生产方式比较,差异均无统计学意义(P>0.05);脑损伤组Apgar评分为(7.42±1.87)分,明显低于对照组[(8.78±4.72)分],差异有统计学意义(P<0.05)。脑损伤组新生儿血清降钙素原、TNF-α、IL-1β、IL-2、IL-8和IL-6水平分别为(6.21±0.73)ng/L、(5.94±1.83)pg/mL、(8.93±2.95)pg/mL、(3.17±1.02)pg/mL、(32.98±9.83)pg/mL、(14.51±4.37)pg/mL,均明显高于对照组[(0.59±0.18)ng/L、(2.68±0.79)pg/mL、(4.19±1.36)pg/mL、(1.29±0.73)pg/mL、(7.37±2.91)pg/mL、(2.97±0.85)pg/mL],差异均有统计学意义(P<0.05)。脑损伤组新生儿血清中MyD88和TRIF mRNA表达水平分别为2.46±0.73、2.11±0.65,均明显高于对照组(1.03±0.29、0.79±0.22),差异均有统计学意义(P<0.05)。MyD88和TRIF mRNA表达均与炎症反应指标降钙素原、TNF-α、IL-1β、IL-2、IL-8和IL-6均呈正相关(P<0.05)。血清MyD88 mRNA检测诊断新生儿脑损伤的最佳临界值为1.561,敏感度和特异度分别为77.50%和86.25%,ROC曲线下面积(AUC)为0.868(95%CI:0.804~0.932);血清TRIF mRNA检测诊断新生儿脑损伤的最佳临界值为1.249,敏感度和特异度分别为78.75%和87.64%,AUC为0.883(95%CI:0.823~0.938);MyD88联合TRIF mRNA诊断的敏感度和特异度分别为88.75%和93.64%,AUC为0.903(95%CI:0.852~0.955),MyD88联合TRIF mRNA诊断的AUC明显优于血清MyD88和TRIF单独检测的AUC(P<0.05)。结论脑损伤新生儿血清中MyD88和TRIF表达升高,且与炎症反应因子呈正相关,血清MyD88和TRIF检测对新生儿脑损伤具有一定的诊断价值,二者联合检测诊断价值更高。 展开更多
关键词 脑损伤 髓样分化因子88 新生儿 β干扰素TIR结构域衔接蛋白 炎症反应 相关性 诊断价值
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用构建的新型BmNPV载体在家蚕高效表达人β-干扰素 被引量：6
5
作者 邓继先 王少飞 +2 位作者 杨琴 程萱 李琳 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 1995年第2期126-132,共7页
构建了家蚕核多角体病毒新型载体ｐＢｍ９２，该载体将多角体蛋白基因的起始密码ＡＴＧ改变为ＡＴＴ，然后在多角体蛋白基因的＋１２位后连接有５个外源基因的克隆位点。将ＨｕＩＦＮ－β基因克隆在多角体蛋白基因的＋１２位后，构建了... 构建了家蚕核多角体病毒新型载体ｐＢｍ９２，该载体将多角体蛋白基因的起始密码ＡＴＧ改变为ＡＴＴ，然后在多角体蛋白基因的＋１２位后连接有５个外源基因的克隆位点。将ＨｕＩＦＮ－β基因克隆在多角体蛋白基因的＋１２位后，构建了ｐＢｍＩＦＮ＋１２；同时构建了Ｈｕ ＩＦＮ－β克隆在－３位后的转移载体ｐＢ－ｍＩＦＮ－３。 展开更多
关键词 BMNPV 转移载体 Β-干扰素 基因表达
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基因工程人β干扰素的原核表达及纯化研究 被引量：3
6
作者 陈国友 蒋应明 +7 位作者 张意 黄欣 厉永建 施群英 王全兴 张明徽 何龙 曹雪涛 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2001年第2期130-133,共4页
目的 :摸索一种适合于中试生产的点突变重组人 β干扰素 ( 17Ser IFN β)发酵与纯化工艺。 方法 :研究不同培养基和热诱导时间对17Ser IFN β表达的影响 ;观察pH、蛋白浓度和层析条件对17Ser IFN β纯化的影响。 结果 :17Ser IFN β工... 目的 :摸索一种适合于中试生产的点突变重组人 β干扰素 ( 17Ser IFN β)发酵与纯化工艺。 方法 :研究不同培养基和热诱导时间对17Ser IFN β表达的影响 ;观察pH、蛋白浓度和层析条件对17Ser IFN β纯化的影响。 结果 :17Ser IFN β工程菌在含甘油、酪蛋白水解物及微量元素的M9培养基中 ,17Ser IFN β表达量明显增加。灰度扫描显示热诱导 4h后的表达量最高 ,目的蛋白可达菌体总蛋白的 2 0 %以上。17Ser IFN β可以相对特异性地被仲丁醇抽提至有机相中 ,纯度达 80 % ,经S2 0 0凝胶过滤柱层析后纯度达 90 % ,用G2 5柱转换缓冲液 ,使缓冲液pH值 >8,同时去除缓冲液中的还原剂DTT ,将复性后的样品用C4反相柱层析进行精制 ,最终获得纯度 >98%和比活性 >3× 10 7U/mg的17Ser IFN β制品。 结论 :成功地建立了注射用新型重组人 β 干扰素的中试生产工艺 ,为随后进行的临床前研究及临床试验打下基础。 展开更多
关键词 Β-干扰素 蛋白纯化 蛋白表达 原核表达 基因工程
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重组杆状病毒表达牛β干扰素及其生物学活性研究 被引量：4
7
作者 陈伟业 肇慧君 +5 位作者 王喜军 黄克和 步志高 曹文雁 葛金英 温志远 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期992-996,共5页
本研究构建了表达牛β干扰素的重组杆状病毒,感染sf9细胞后,分别采用免疫荧光和免疫印迹证实了重组BoIFN-β的表达存在于细胞内和培养上清中。采用表达绿色荧光蛋白的水疱性口炎病毒(VSV*GFP)检测分泌到细胞上清中重组BoIFN-β的抗病毒... 本研究构建了表达牛β干扰素的重组杆状病毒,感染sf9细胞后,分别采用免疫荧光和免疫印迹证实了重组BoIFN-β的表达存在于细胞内和培养上清中。采用表达绿色荧光蛋白的水疱性口炎病毒(VSV*GFP)检测分泌到细胞上清中重组BoIFN-β的抗病毒活性,可达到106.0AU/mL。同时重组BoIFN-β还可以激活鸡Mx启动子控制的萤光素酶报告基因的转录表达。综上,本研究采用杆状病毒表达系统,重组牛β干扰素以分泌形式高水平表达,且具有天然Ⅰ型干扰素的生物学活性。 展开更多
关键词 牛β干扰素 抗病毒活性 Mx启动子 重组杆状病毒
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鼻咽癌外周血免疫指标研究 被引量：6
8
作者 程钢 邵建永 +2 位作者 陈志 曾瑞萍 何蕴韶 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2002年第12期1104-1105,1108,共3页
目的寻找合适的鼻咽癌外周血诊断指标。方法设立鼻咽癌组(83例)和非鼻咽癌、非肿瘤的其他疾病对照组(105例)。用ELISA法分别测试9种细胞因子在血浆中的含量,并进行统计分析。结果白细胞介素(IL)-4在鼻咽癌组显著上升,IL-6、IL-12、转化... 目的寻找合适的鼻咽癌外周血诊断指标。方法设立鼻咽癌组(83例)和非鼻咽癌、非肿瘤的其他疾病对照组(105例)。用ELISA法分别测试9种细胞因子在血浆中的含量,并进行统计分析。结果白细胞介素(IL)-4在鼻咽癌组显著上升,IL-6、IL-12、转化生长因子-β、干扰素-γ在鼻咽癌组显著下降(P<0.05)。结论上述细胞因子的组合变化有望用于鼻咽癌诊断。 展开更多
关键词 鼻咽癌 鼻咽肿瘤 免疫学 诊断 白细胞介素类 转化生长因子Β 干扰素Ⅱ型
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川崎病恢复期颈动脉内膜-中膜厚度变化及相关因素分析 被引量：4
9
作者 牛峰海 王瑜 +2 位作者 蔡文仙 范国贞 任雪云 《临床儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期144-146,共3页
目的观察川崎病(KD)患儿恢复期颈动脉内膜-中膜厚度变化及相关因素,为防治KD血管病变提供科学依据。方法收集30例2～4岁KD恢复期患儿及30例同年龄健康儿童,测定其颈动脉内膜-中膜厚度(IMT)、丙二醛(MDA)、白介素-1β(IL-1β)、γ-干扰素... 目的观察川崎病(KD)患儿恢复期颈动脉内膜-中膜厚度变化及相关因素,为防治KD血管病变提供科学依据。方法收集30例2～4岁KD恢复期患儿及30例同年龄健康儿童,测定其颈动脉内膜-中膜厚度(IMT)、丙二醛(MDA)、白介素-1β(IL-1β)、γ-干扰素(IFN-γ)和体质指数(BMI)。结果 KD患儿颈动脉IMT为(0.40±0.03)mm,对照组为(0.37±0.04)mm,两者比较差异有统计学意义。KD患儿MDA为(2.56±0.18)nmol/ml,对照组为(2.09±0.24)nmol/ml,两者比较差异有统计学意义。两组间IL-1β、IFN-γ、BMI比较,差异均无统计学意义。直线相关分析显示,颈动脉IMT与MDA呈正相关(r=0.463,P<0.05),而与IL-1β、IFN-γ和BMI水平均无相关性(P均>0.05)。结论 KD恢复期患儿颈动脉内膜-中膜增厚,与氧化应激有关。 展开更多
关键词 川崎病 丙二醛 白细胞介素-1Β Γ-干扰素 体质指数
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猪β干扰素在毕赤酵母中的分泌表达及其对伪狂犬病毒的抑制作用 被引量：19
10
作者 曹瑞兵 周国栋 +2 位作者 周海霞 包晶晶 陈溥言 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期412-417,共6页
为了研制高活性的重组猪β干扰素,对PoIFN-β成熟蛋白第3、7和164位的3个氨基酸密码子进行毕赤酵母偏嗜性改造并构建了酵母表达载体pPICZαA-PIB。pPICZαA-PIB经SacⅠ酶切线性化后电转化导入毕赤酵母菌株X-33。多株PCR鉴定为阳性的酵... 为了研制高活性的重组猪β干扰素,对PoIFN-β成熟蛋白第3、7和164位的3个氨基酸密码子进行毕赤酵母偏嗜性改造并构建了酵母表达载体pPICZαA-PIB。pPICZαA-PIB经SacⅠ酶切线性化后电转化导入毕赤酵母菌株X-33。多株PCR鉴定为阳性的酵母转化子经甲醇诱导发酵分泌表达了PoIFN-β,其中B1株酵母的PoIFN-β产量最高,约为2.5×105U/mL,其表达量约为60μg/mL,比活为4.17×106U/mg。将发酵上清液用PEG20000浓缩后进行SDS-PAGE和Western blot检测,结果表明表达产物是分子量约为28kDa和25kDa蛋白的混合物,两者均可与PoIFN-β阳性抗血清发生特异反应。表达产物比PoIFN-β理论推导分子量(约20.8kDa)大,推测可能是表达产物发生了不同程度的糖基化。重组PoIFN-β对伪狂犬病毒在细胞中增殖可呈现抑制作用,并且rPoIFN-β对伪狂犬病毒在MDBK细胞上早期增殖的抑制效果最为明显。 展开更多
关键词 猪β干扰素 毕赤酵母 分泌表达 伪狂犬病毒 抗病毒
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干扰素-β治疗复发-缓解型多发性硬化系统评价 被引量：9
11
作者 贺电 李娅 +5 位作者 徐竹 周红雨 楚兰 蔡刚 戴庆箐 张艺凡 《中国现代神经疾病杂志》 CAS 2014年第9期775-788,共14页
目的评价干扰素-β（IFN-β）治疗复发．缓解型多发性硬化的有效性和安全性。方法 检索Cochrane临床对照试验中心注册库、美国国立医学图书馆、荷兰医学文摘、CINAHL、LILACS、PEDRO、中国生物医学文献数据库、临床试验注册中心和世界... 目的评价干扰素-β（IFN-β）治疗复发．缓解型多发性硬化的有效性和安全性。方法 检索Cochrane临床对照试验中心注册库、美国国立医学图书馆、荷兰医学文摘、CINAHL、LILACS、PEDRO、中国生物医学文献数据库、临床试验注册中心和世界卫生组织国际临床试验注册平台（检索截止时间2014年6月）；并通过阅读相关论文参考文献，联系参与IFN-β治疗多发性硬化临床试验的研究者和企业，进一步获取研究信息或未发表的数据。由两名评价人员独立筛选研究、提取研究信息和数据、评价偏倚风险。应用Review Manager软件（Version 5．3．3）进行Meta分析，GRADEpro软件评价研究设计和实施过程中的局限性（偏倚风险）、结果的不一致性和不精确性、证据的间接性和发表偏倚对主体证据质量的影响。结果共检索相关文献576篇，阅读标题和摘要后初步筛选出26项研究；进一步阅读全文后纳入5项研究（共2129例复发一缓解型多发性硬化患者：高剂量IFN-β组1076例、安慰剂组1053例）。所有纳入的研究均为IFN-β单药治疗且随访时间≥1年的随机双盲安慰剂对照平行临床试验。大多数研究存在方法学局限性，主要缺陷为随访偏倚风险较高，且数据分析未使用意向治疗原则，仅919例受试者（43．17％）的数据可用于分析随访2年时的主要结局。Meta分析显示，IFN-β轻微减少随访2年时复发病例数（RR：0．810，95％CI：0．740～0．890；P=0．000）和残疾进展病例数（RR=0．700，95％CI：0．550～0，880；P=O．002）；敏感性分析（最差情况的演示分析）显示，IFN-β治疗无效（RR=1．110，95％CI：O．730～1．680，P=0．620；RR=1．310，95％CI：0．600～2．890，P=0．500）。共1581例患者（74．26％）的数据可用于分析随访1年时至少复发1次的病例数（RR=O．740，95％CI：0．590～0．930；P=0．010），绝对危险降低率为13．24％，需治疗的病例数为8例，表明需要治疗8例患者才可防止1例在第1年内复发。但在年复发率方面，IFN-β治疗无效。IFN-β常导致注射部位局部反应、寒颤、发热、肌肉疼痛、流感样症状、头痛、血清丙氨酸转氨酶和天冬氨酸转氨酶水平升高等不良事件，但并不增加外周血淋巴细胞和中性粒细胞减少、抑郁、自杀行为或自杀观念的发生。结论 高质量证据显示，IFN-β治疗复发-缓解型多发性硬化可轻微降低第1年内的复发病例数，但超过1年的疗效尚不能确定。目前尚无足够证据证明IFN-β在减少残疾进展病例数方面的疗效，尚待高质量的随机对照临床试验评价其长期有效性。 展开更多
关键词 干扰素Β 多发性硬化 META分析
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重组人β干扰素在DHFR^--CHO细胞中的高效表达 被引量：7
12
作者 史艳秋 陈畅 +3 位作者 顾黎 邹思湘 宋静 王鹏 《中国生化药物杂志》 CAS CSCD 2006年第3期129-133,共5页
目的由二氢叶酸还原酶缺陷型的中国仓鼠卵巢(DHFR--CHO)细胞高效表达重组人β干扰素(rhIFN-β),比较来源于E.coli、Yeast和CHO细胞的IFN-β抗增殖活性。方法采用PCR技术,从pLG104R载体中扩增目的基因,经XhoⅠ和SmaⅠ双酶切后克隆到真核... 目的由二氢叶酸还原酶缺陷型的中国仓鼠卵巢(DHFR--CHO)细胞高效表达重组人β干扰素(rhIFN-β),比较来源于E.coli、Yeast和CHO细胞的IFN-β抗增殖活性。方法采用PCR技术,从pLG104R载体中扩增目的基因,经XhoⅠ和SmaⅠ双酶切后克隆到真核表达载体pCI-dhfr中,采用阳离子脂质体介导方法,将构建的表达载体转染到CHO细胞中。通过MTX的加压筛选,以病毒诱导的细胞病变抑制(CPEI)法进行活性定量检测,获得稳定、高效表达rhIFN-β的CHO细胞株,并扩大培养。分离纯化后,定量并鉴定表达产物。采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法比较E.coli、Yeast和CHO细胞表达体系所生产的rhIFN-β的抗增殖活性。结果得到由CHO细胞株表达的rhIFN-β纯品,且抗增殖活性显著高于其他2个表达体系。结论CHO细胞可大规模生产rhIFN-β,且活性高于其他表达体系,显示了以CHO细胞为生产平台的优越性。 展开更多
关键词 中国仓鼠卵巢细胞 Β干扰素 真核表达 抗增殖活性
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支气管哮喘病儿外周血单核细胞中LncRNA MEG3的表达及其与肺功能、免疫功能的相关性研究 被引量：5
13
作者 李丽英 李海燕 陈海燕 《安徽医药》 CAS 2021年第4期755-759,共5页
目的探讨支气管哮喘病儿外周血单核细胞中长链非编码RNA母系表达基因3(LncRNA MEG3)的表达及其与肺功能和免疫功能的相关性。方法选取2017年10月至2018年9月安阳市妇幼保健院收治的支气管哮喘病儿60例为观察组,根据疾病严重程度分为轻度... 目的探讨支气管哮喘病儿外周血单核细胞中长链非编码RNA母系表达基因3(LncRNA MEG3)的表达及其与肺功能和免疫功能的相关性。方法选取2017年10月至2018年9月安阳市妇幼保健院收治的支气管哮喘病儿60例为观察组,根据疾病严重程度分为轻度组(20例),中度组(20例),重度组(20例),同时选取同期体检的40例健康儿童作为对照组。均行肺功能检测,采用qRT-PCR检测各组外周血单核细胞中LncRNA MEG3表达量;血细胞分析仪检测嗜酸性粒细胞计数水平,ELISA法检测免疫球蛋白E(IgE)水平血清白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-17A(IL-17A)、γ干扰素(IFN-γ)、转化生长因子-β(TGF-β)水平,比较各组肺功能、免疫功能指标、血清炎性介质及LncRNA MEG3水平差异,Pearson相关检验分析支气管哮喘病儿外周血单核细胞中LncRNA MEG3表达量与肺功能指标、免疫功能指标及炎性介质的相关性。多元线性回归分析LncRNA MEG3表达量与病情严重程度、肺功能、免疫功能的关联影响关系。结果重度组,中度组及轻度组LncRNA MEG3表达水平高于对照组[(0.30±0.07)、(0.42±0.06)、(0.67±0.10)比(1.01±0.13)](P<0.05),重度组LncRNA MEG3表达水平高于中度组及轻度组(P<0.05),中度组LncRNA MEG3表达水平高于轻度组(P<0.05);重度组,中度组及轻度组FEV1[(52.19±9.86)、(59.73±8.02)、(73.18±12.90)比(93.06±10.43)],FEV1/FVC[(65.23±9.65)、(72.05±5.28)、(80.12±8.12)比(93.25±10.90)]及PEF[(42.27±5.98)%、(59.94±5.67)%、(70.22±6.59)%比(86.52±3.57)%]低于对照组(P<0.05),重度组FEV1,FEV1/FVC及PEF低于中度组及轻度组(P<0.05),中度组FEV1,FEV1/FVC及PEF低于轻度组(P<0.05),重度组,中度组及低度组IgE[(110.25±13.32)U/mL、(84.92±12.98)U/mL、(56.61±11.21)U/mL比(23.21±5.81)U/mL]、嗜酸性粒细胞计数水平[(0.45±0.04)×10~9/L、(0.36±0.03)×10~9/L、(0.20±0.02)×10~9/L比(0.13±0.03)×10~9/L]、IL-4[(20.24±4.07)ng/L、(16.71±3.17)ng/L、(12.23±1.59)ng/L比(8.03±2.25)ng/L]、IL-17A[(119.51±8.52)ng/L、(100.89±6.28)ng/L、(85.74±9.05)ng/L比(52.67±13.24)ng/L]水平高于对照组(P<0.05),重度组IgE、嗜酸性粒细胞计数水平、IL-4、IL-17A水平高于中度组及轻度组(P<0.05),中度组IgE、嗜酸性粒细胞计数水平、IL-4、IL-17A水平高于轻度组(P<0.05),重度组、中度组及轻度组IFN-γ[(40.13±5.39)ng/L、(50.01±6.45)ng/L、(60.30±5.42)ng/L比(69.87±6.51)ng/L]、TGF-β[(709.74±36.53)ng/L、(836.77±42.64)ng/L、(1,002.35±53.34)ng/L比(1,940.88±224.39)ng/L]低于对照组(P<0.05),重度组IFN-γ、TGF-β低于中度组及轻度组(P<0.05),中度组IFN-γ、TGF-β低于轻度组(P<0.05),相关分析显示,支气管哮喘病儿LncRNA MEG3表达水平与IgE、IL-4、IL-17A呈负相关(P<0.05),与IFN-γ、TGF-β呈正相关(P<0.05),与FEV1,FEV1/FVC及PEF呈正相关(P<0.05)。多元线性回归显示,病情严重程度、肺功能、免疫功能与LncRNA MEG3表达量有密切的关联影响关系(P<0.05)。结论支气管哮喘病儿外周血单核细胞中LncRNA MEG3的表达量降低,并且与病情相关,其可能通过对免疫功能及炎症介质的调节参与支气管哮喘的发病及进展过程。 展开更多
关键词 哮喘 单核细胞 淋巴细胞 LncRNA MEG3 免疫球蛋白类 白细胞介素类 转化生长因子β 干扰素Γ 肺功能
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β干扰素联合全反式维甲酸通过抑制JAK2/STAT3信号通路抑制HepG2人肝癌细胞增殖并促进其凋亡 被引量：16
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作者 赵冀安 聂文佳 +5 位作者 李卫 周小慧 孙会凤 朱俊青 陈进军 彭军路 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期901-905,共5页
目的研究β干扰素(IFN-β)和全反式维甲酸(ATRA)联合应用对Hep G2人肝癌细胞增殖和凋亡的影响,并探讨Janus激酶2/信号转导子与转录激活子3(JAK2/STAT3)通路在其中可能的机制。方法分别用1000 U/m L IFN-β、10μmol/L ATRA及1000 U/m L ... 目的研究β干扰素(IFN-β)和全反式维甲酸(ATRA)联合应用对Hep G2人肝癌细胞增殖和凋亡的影响,并探讨Janus激酶2/信号转导子与转录激活子3(JAK2/STAT3)通路在其中可能的机制。方法分别用1000 U/m L IFN-β、10μmol/L ATRA及1000 U/m L IFN-β联合10μmol/L ATRA处理Hep G2细胞24 h,采用MTT法检测Hep G2细胞的增殖抑制率,流式细胞术检测细胞凋亡。Western blot法检测磷酸化的Janus激酶2(p-JAK2)和磷酸化的信号转导子与转录激活子3(p-STAT3)、维甲酸-干扰素诱导死亡相关基因19(GRIM-19)、Bcl-2、Bcl-xl、Bax蛋白的表达。结果 IFN-β、ATRA作用于细胞后,Hep G2细胞增殖受到抑制,同时诱导细胞发生凋亡,IFN-β联合ATRA联合处理作用更强;Hep G2细胞中p-JAK2和p-STAT3蛋白的表达在IFN-β或ATRA作用下减弱,GRIM-19和Bax蛋白表达升高。IFN-β联合ATRA处理作用更强。结论 IFN-β联合ATRA通过抑制JAK2/STAT3信号通路抑制Hep G2人肝癌细胞的增殖并促进其凋亡。 展开更多
关键词 JAK2/STAT3信号通路 Β干扰素 全反式维甲酸 HepG2细胞
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干扰素-β-1b治疗多发性硬化的疗效及不良反应观察 被引量：8
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作者 刘喷飓 张星虎 +4 位作者 周衡 刘云 刘君 李莉莉 沈彦 《中国神经免疫学和神经病学杂志》 CAS 2011年第1期37-40,共4页
目的探讨干扰素-β-1b(IFN-β-1b)用于治疗中国多发性硬化(MS)患者的疗效及不良反应。方法对12例确诊的复发缓解型MS(RRMS)患者给予IFN-β-1b治疗,并于治疗后第4、8、12、24周随访。通过观察患者扩展的功能缺损状况量表(EDSS)评分、头MR... 目的探讨干扰素-β-1b(IFN-β-1b)用于治疗中国多发性硬化(MS)患者的疗效及不良反应。方法对12例确诊的复发缓解型MS(RRMS)患者给予IFN-β-1b治疗,并于治疗后第4、8、12、24周随访。通过观察患者扩展的功能缺损状况量表(EDSS)评分、头MRI T2加权像病灶数量及Gd-DTPA强化病灶数量、体积的演变,综合评价IFN-β-1b治疗MS的疗效,并通过分析血常规、肝肾功能等检测指标及不良反应综合评价该药物的不良反应。结果 (1)12例患者治疗前与治疗后24周EDSS评分比较差异无统计学意义(P>0.05);(2)治疗前6个月疾病复发率为33.33%(4/12),治疗后24周内复发率41.67%(5/12),两者比较差异无统计学意义(P>0.05);(3)与治疗前相比,治疗后第12周及第24周时MRI检查发现T2病灶数量、Gd-DTPA强化病灶数量及体积均明显减少(P<0.05)。(4)治疗后第24周血清尿酸、肌酐水平〔分别为(66.64±16.15)(、295.48±165.36)μmol/L〕与治疗前〔分别为(69.07±14.70)(、319.86±113.61)μmol/L〕相比明显降低(P<0.01),血尿素氮、肝功能、血常规等血液指标与治疗前相比差异无统计学意义(P>0.05)。(5)所有患者分别出现不同程度的局部注射部位红肿、头疼、肌肉关节疼痛、发热等不良反应。结论 IFN-β-1b用于治疗MS患者在24周内可以改善影像学改变情况,但不能明显改善疾病复发和临床神经功能障碍程度;IFN-β-1b的常见不良反应为注射局部红肿、头疼、肌肉关节疼痛、发热等。 展开更多
关键词 多发性硬化 干扰素-β-1b 疗效 不良反应
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携带人β干扰素基因的人乙型肝炎特异性真核表达载体的构建 被引量：9
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作者 潘欣 柯重伟 +5 位作者 潘卫 武文斌 张斌 贺祥 曹广文 戚中田 《世界华人消化杂志》 CAS 2000年第5期520-523,共4页
目的构建乙型肝炎病毒(HBV)C 区启动子调控的人β干扰素(IFN-β)基因的真核表达载体.方法切除真核表达载体 pcDNA3.1(+)-DT_(390)-VEG_(exon7)内部的 CMV 启动子及 DT_(390)序列使之成为 p3.1V_7;从逆转录病毒载体 pMNSM-IFN-β质粒中... 目的构建乙型肝炎病毒(HBV)C 区启动子调控的人β干扰素(IFN-β)基因的真核表达载体.方法切除真核表达载体 pcDNA3.1(+)-DT_(390)-VEG_(exon7)内部的 CMV 启动子及 DT_(390)序列使之成为 p3.1V_7;从逆转录病毒载体 pMNSM-IFN-β质粒中游离人β干扰素基因;用 PCR 方法从 pGEM.7Z-HBV 质粒中扩增人乙型肝炎病毒(HBV)的 C区启动子序列;通过转换酶切位点,将 HBV C 区启动子和人β干扰素基因共同插入到 p3.1V_7中,构建成受 HBV C 区启动子控制的人β干扰素基因真核表达载体 p3.1 V_7-HBV.CP-IFN-β.结果构建完成携带人β干扰素基因的人乙型肝炎特异性真核表达载体.结论该载体为慢性病毒性肝炎的特异性干扰素基因治疗奠定了基础. 展开更多
关键词 IFN-β基因 乙型肝炎病毒 真核表达载体 治疗
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多发性硬化治疗的研究进展 被引量：14
17
作者 董艳玲 李吕力 《医学综述》 2010年第3期395-398,共4页
多发性硬化是一种中枢神经系统的自身免疫性脱髓鞘疾病,好发于青壮年。目前对其尚无肯定有效的治疗方法,主要的治疗方法有:①皮质类固醇激素;②干扰素β;③醋酸格拉太咪尔;④盐酸米托蒽醌;⑤硫唑嘌呤;⑥环磷酰胺;⑦免疫球蛋白;⑧血浆置... 多发性硬化是一种中枢神经系统的自身免疫性脱髓鞘疾病,好发于青壮年。目前对其尚无肯定有效的治疗方法,主要的治疗方法有:①皮质类固醇激素;②干扰素β;③醋酸格拉太咪尔;④盐酸米托蒽醌;⑤硫唑嘌呤;⑥环磷酰胺;⑦免疫球蛋白;⑧血浆置换;⑨干细胞移植。 展开更多
关键词 多发性硬化 治疗 干扰素Β
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奶牛β-干扰素在大肠杆菌中高效表达和生物活性分析 被引量：2
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作者 刘颖 刘华兰 +2 位作者 杨利国 陈焕春 郭爱珍 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2010年第1期123-128,共6页
提取经植物血凝素诱导培养的中国健康奶牛外周血淋巴细胞总RNA,应用RT-PCR方法扩增出奶牛β-干扰素成熟蛋白基因并将其克隆到pMD18-T载体上。测序结果表明,扩增片段为奶牛β-干扰素成熟蛋白序列,与GenBank上发表的干扰素序列同源性为100... 提取经植物血凝素诱导培养的中国健康奶牛外周血淋巴细胞总RNA,应用RT-PCR方法扩增出奶牛β-干扰素成熟蛋白基因并将其克隆到pMD18-T载体上。测序结果表明,扩增片段为奶牛β-干扰素成熟蛋白序列,与GenBank上发表的干扰素序列同源性为100%。将其重组到原核表达载体pET32a(+)上,并在大肠杆菌BL21中实现了高效表达。表达产物以His-Tag融合蛋白的形式存在,表达量约占细菌总蛋白的40%。用镍亲和层析法对蛋白进行纯化,并利用VSV-MDBK/IBRV细胞系统分析其生物活性。重组奶牛β-干扰素抗病毒活性分别约3.16×105U/mL,7.5×104U/mL。结果表明,重组奶牛β-干扰素特异性好,而且抗病毒活性比较稳定。本研究为研制和开发重组奶牛β-干扰素类生物制品研发奠定了基础。 展开更多
关键词 奶牛 Β-干扰素 融合蛋白 抗病毒活性
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组氨酸标签人β干扰素在E.coli BL21(DE3)中的表达、纯化和活性测定 被引量：3
19
作者 王丽非 朱元军 +4 位作者 王松梅 杜郁 余腾斐 王丽 洪斌 《中国医药生物技术》 CSCD 2011年第1期12-17,共6页
目的在大肠杆菌中高效表达组氨酸标签与人β干扰素融合蛋白,并进行蛋白纯化和生物活性测定。方法提取人Bel-7402细胞总DNA为模板,经PCR获得人β干扰素编码基因片段。将此基因插入表达载体pET-16b,重组克隆,经酶切与测序确认后转化至大... 目的在大肠杆菌中高效表达组氨酸标签与人β干扰素融合蛋白,并进行蛋白纯化和生物活性测定。方法提取人Bel-7402细胞总DNA为模板,经PCR获得人β干扰素编码基因片段。将此基因插入表达载体pET-16b,重组克隆,经酶切与测序确认后转化至大肠杆菌BL21(DE3),进行IPTG诱导表达和条件优化。表达产物经Western blotting分析,用Ni sepharose亲和层析纯化,纯化产物进行干扰素生物学活性测定。结果经表达条件优化后,SDS-PAGE显示重组菌株表达与组氨酸标签人β干扰素分子量大小一致的条带,进一步的Western blotting分析中发现表达的蛋白能与人β干扰素抗体及组氨酸标签抗体产生结合反应,亲和层析纯化分离得到纯度92%的组氨酸标签人β干扰素,干扰素生物学活性测定表明,获得的组氨酸标签人β干扰素比活性为4.2×107U/mg。结论组氨酸标签人β干扰素编码基因在大肠杆菌中成功表达。建立了该蛋白的简便亲和纯化方法,表达产物具有人β干扰素生物学活性,为进一步以此系统表达及纯化其他具有生物学活性的科研用标签化细胞因子奠定了基础。 展开更多
关键词 干扰素Β 重组融合蛋白质类 基因表达
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凝血酶诱导培养星形胶质细胞炎症细胞因子的表达 被引量：2
20
作者 吴碧华 江承平 +2 位作者 许可 吴文斌 胡长林 《神经疾病与精神卫生》 2008年第2期132-135,共4页
目的证实凝血酶诱导体外培养的大鼠星形胶质细胞(astrocyte,As)白介素-1β(inter-leukin-1 beta,IL-1β)和干扰素-γ(Interferon-gamma,IFN-γ)的表达。方法采用体外培养As的方法,对新生Wistar大鼠大脑As进行培养并纯化,用不同浓度的凝... 目的证实凝血酶诱导体外培养的大鼠星形胶质细胞(astrocyte,As)白介素-1β(inter-leukin-1 beta,IL-1β)和干扰素-γ(Interferon-gamma,IFN-γ)的表达。方法采用体外培养As的方法,对新生Wistar大鼠大脑As进行培养并纯化,用不同浓度的凝血酶干预;酶联免疫吸附法(en-zyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测培养大鼠脑皮层As上清液中IL-1β、γ-干扰素的含量,免疫细胞化学染色和逆转录多聚酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)检测培养AsIL-1β、IFN-γ蛋白和基因的表达。结果凝血酶上调体外培养As上调IL-1β、IFN-γ蛋白及mRNA的表达。结论凝血酶诱导培养As上细胞因子的IL-1β、IFN-γ表达,这些炎症细胞因子有助于As的损伤。 展开更多
关键词 凝血酶 胶质细胞 IL-1Β IFN-Γ
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