目的建立超高效液相色谱-串联质谱法(ultra high performance liquid chromatography tandem mass spectrometry,UPLCMS/MS)检测毛蕊花糖苷干预不育症模型大鼠血浆睾酮的含量,测定不育症模型大鼠血浆24 h睾酮含量,并借助药动学理论定量...目的建立超高效液相色谱-串联质谱法(ultra high performance liquid chromatography tandem mass spectrometry,UPLCMS/MS)检测毛蕊花糖苷干预不育症模型大鼠血浆睾酮的含量,测定不育症模型大鼠血浆24 h睾酮含量,并借助药动学理论定量评价干预效果。方法大鼠含药血浆以睾酮-C3为内标,用液液萃取法,以12000 r·min^(-1)离心10 min,取上清液,5μL进样分析。以Acquity UPLCⅢBEH C_(18)(50 mm×2.1 mm,1.7μm)为色谱柱;以甲醇为流动相A、5 mL·L^(-1)甲酸溶液为流动相B进行梯度洗脱,洗脱程序:流速为0.2 mL∙min^(-1);柱温为35℃;样品室温度为4℃;运行时间为10 min;质量检测器使用ESI离子源,正模式检测,睾酮及内标睾酮-C3用于定量的母→子离子对分别为m/z 289.2→97.0、m/z 291.4→101.1。借助药动学软件分析,获取空白组和毛蕊花糖苷干预组大鼠体内24 h睾酮曲线下面积(area under the curve,AUC)数据。结果睾酮质量浓度在1~1000 ng·mL^(-1)范围内呈良好的线性关系。该方法日内、日间精密度RSD值均<10.84%,日内、日间准确度RE均<10.03%,样品提取回收率为95.82%~99.17%,置于进样器于4℃冰箱及长期冷冻稳定性RSD值均<10.63%。测定结果显示,毛蕊花糖苷干预组药峰浓度(peak concentration,C_(max))为7.92 ng·mL^(-1),空白组C_(max)为10.26 ng·mL^(-1)。与空白组比较,毛蕊花糖苷干预组大鼠体内睾酮24 h总AUC相对平稳。结论建立了UPLC-MS/MS测定不育症模型大鼠血浆睾酮含量的方法。从PK/PD角度比较分析推测出,给予毛蕊花糖苷干预后,不育症模型大鼠的24 h总体睾酮可基本恢复正常水平,从而发挥改善大鼠雄性生殖功能的作用。展开更多
目的:研究毛蕊花糖苷对β淀粉样蛋白(Aβ_(1-42))损伤神经元的保护作用及可能机制。方法:从新生乳鼠大脑皮层中分离纯化得到神经元,与Aβ_(1-42)、不同浓度的毛蕊花糖苷分别孵育24 h,利用CCK-8法检测神经元存活率;利用免疫荧光染色法检...目的:研究毛蕊花糖苷对β淀粉样蛋白(Aβ_(1-42))损伤神经元的保护作用及可能机制。方法:从新生乳鼠大脑皮层中分离纯化得到神经元,与Aβ_(1-42)、不同浓度的毛蕊花糖苷分别孵育24 h,利用CCK-8法检测神经元存活率;利用免疫荧光染色法检测突触素-1(Synapsin-1,SYN)的表达量;利用原位末端标记法(Terminaldeoxynucleoitidyl Transferase Mediated Nick End Labeling,TUNEL)检测神经元凋亡;利用Real-time及Western blot法检测Bcl-2、Bax和Caspase-3 m RNA及蛋白的表达量。结果:毛蕊花糖苷能显著提高Aβ_(1-42)损伤后神经元的存活率,能增加SYN的表达,抑制其凋亡,并且能提高神经元Bcl-2 m RNA及蛋白,降低Bax和Caspase-3 m RNA及蛋白的表达量。结论:促进抗凋亡因子、抑制促凋亡因子表达可能是毛蕊花糖苷拮抗Aβ_(1-42)神经毒性的机制之一。展开更多
目的观察荞麦花叶黄酮(flavones of buckwheat flower and leaf,FBFL)对糖尿病大鼠血糖波动的影响。方法以4-硝基苯-α-D-吡喃葡萄糖苷(PNPG)为底物,测定不同浓度FBFL对α-葡萄糖苷酶活性的影响;用高脂饲料和小剂量链脲佐菌素(STZ)建立...目的观察荞麦花叶黄酮(flavones of buckwheat flower and leaf,FBFL)对糖尿病大鼠血糖波动的影响。方法以4-硝基苯-α-D-吡喃葡萄糖苷(PNPG)为底物,测定不同浓度FBFL对α-葡萄糖苷酶活性的影响;用高脂饲料和小剂量链脲佐菌素(STZ)建立2型糖尿病(T2DM)胰岛素抵抗(IR)大鼠模型,用不同剂量FBFL干预6周,测定大鼠随机血糖、餐后血糖的动态变化,禁食24 h内血糖波动及糖耐量情况。结果 FBFL对α-葡萄糖苷酶活性有明显的抑制作用,IC50为4.205 mg/L,与阿卡波糖(ACAR)的效价比约为15.24∶1;FBFL能降低糖尿病大鼠随机和餐后血糖值(P<0.05),并改善糖耐量,有明显的剂量和时间依赖性。结论 FBFL可降低糖尿病大鼠随机和餐后血糖值,对血糖波动有稳定作用,其机制可能是通过抑制α-葡萄糖苷酶活性实现的。展开更多
文摘目的:研究毛蕊花糖苷对β淀粉样蛋白(Aβ_(1-42))损伤神经元的保护作用及可能机制。方法:从新生乳鼠大脑皮层中分离纯化得到神经元,与Aβ_(1-42)、不同浓度的毛蕊花糖苷分别孵育24 h,利用CCK-8法检测神经元存活率;利用免疫荧光染色法检测突触素-1(Synapsin-1,SYN)的表达量;利用原位末端标记法(Terminaldeoxynucleoitidyl Transferase Mediated Nick End Labeling,TUNEL)检测神经元凋亡;利用Real-time及Western blot法检测Bcl-2、Bax和Caspase-3 m RNA及蛋白的表达量。结果:毛蕊花糖苷能显著提高Aβ_(1-42)损伤后神经元的存活率,能增加SYN的表达,抑制其凋亡,并且能提高神经元Bcl-2 m RNA及蛋白,降低Bax和Caspase-3 m RNA及蛋白的表达量。结论:促进抗凋亡因子、抑制促凋亡因子表达可能是毛蕊花糖苷拮抗Aβ_(1-42)神经毒性的机制之一。
文摘目的观察荞麦花叶黄酮(flavones of buckwheat flower and leaf,FBFL)对糖尿病大鼠血糖波动的影响。方法以4-硝基苯-α-D-吡喃葡萄糖苷(PNPG)为底物,测定不同浓度FBFL对α-葡萄糖苷酶活性的影响;用高脂饲料和小剂量链脲佐菌素(STZ)建立2型糖尿病(T2DM)胰岛素抵抗(IR)大鼠模型,用不同剂量FBFL干预6周,测定大鼠随机血糖、餐后血糖的动态变化,禁食24 h内血糖波动及糖耐量情况。结果 FBFL对α-葡萄糖苷酶活性有明显的抑制作用,IC50为4.205 mg/L,与阿卡波糖(ACAR)的效价比约为15.24∶1;FBFL能降低糖尿病大鼠随机和餐后血糖值(P<0.05),并改善糖耐量,有明显的剂量和时间依赖性。结论 FBFL可降低糖尿病大鼠随机和餐后血糖值,对血糖波动有稳定作用,其机制可能是通过抑制α-葡萄糖苷酶活性实现的。
