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禽流感病毒H9N2与新城疫病毒在鸡成纤维细胞中共感染对病毒复制的影响 被引量：4
1
作者 谢军 孙英杰 +3 位作者 周昌娈 朱善元 丁铲 柏家林 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第11期2521-2528,共8页
临床上禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)与新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)共同感染情况经常发生。为研究AIV与NDV在鸡成纤维细胞DF-1中的共感染对病毒复制的相互影响,首先对NDV和H9N2亚型AIV单独感染DF-1细胞时病毒的... 临床上禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)与新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)共同感染情况经常发生。为研究AIV与NDV在鸡成纤维细胞DF-1中的共感染对病毒复制的相互影响,首先对NDV和H9N2亚型AIV单独感染DF-1细胞时病毒的复制情况进行了分析,设定以NDV和AIV共感染细胞后12和24h作为样品采集点,通过Western blot、间接免疫荧光和实时荧光定量PCR检测了两种病毒共感染与单独感染对病毒NP蛋白表达的相互影响。结果显示:Western blot分析表明共感染12和24h,NDV NP蛋白的表达分别下调了70.6%(P<0.001)和45.7%(P<0.001),AIV NP蛋白的表达分别下调了61.5%(P<0.001)和82.8%(P<0.001);免疫荧光分析显示共感染组细胞中NDV和AIV的NP蛋白丰度在感染12h时间点分别下调81.1%(P<0.001)和65.5%(P<0.001),24h时则分别下调41.2%(P<0.05)和47.4%(P<0.001);qPCR结果也证实共感染12和24h组NDV NP的mRNA表达水平分别下调了64.3%(P<0.001)和64.4%(P<0.05),AIV NP的mRNA表达水平分别下调了61.5%(P<0.001)和63.0%(P<0.001)。本研究证明AIV与NDV共感染在细胞水平上可引起病毒复制的相互抑制,为研究NDV和AIV共感染机制在细胞水平上奠定了基础。 展开更多
关键词 禽流感病毒 新城疫病毒 鸡成纤维细胞DF-1 共感染 病毒复制
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列当多糖对鸡新城疫病毒在鸡成纤维细胞中增殖的抑制作用 被引量：3
2
作者 阿得力江.吾斯曼 米克热木.沙衣布扎提 +1 位作者 阿依姑丽.买买提明 赛福丁.阿不拉 《动物医学进展》 北大核心 2016年第12期60-65,共6页
为研究列当多糖抗新城疫病毒(NDV)活性,用水提醇沉法提取列当总多糖及4种分级多糖,并通过苯酚硫酸法及红外光谱对列当多糖进行检测。通过MTT法测定各级多糖对鸡胚成纤维细胞(CEF)的安全浓度。以3种加药方式(先加多糖后接种病毒、先接种... 为研究列当多糖抗新城疫病毒(NDV)活性,用水提醇沉法提取列当总多糖及4种分级多糖,并通过苯酚硫酸法及红外光谱对列当多糖进行检测。通过MTT法测定各级多糖对鸡胚成纤维细胞(CEF)的安全浓度。以3种加药方式(先加多糖后接种病毒、先接种病毒后加多糖、多糖和病毒感作后加)加药,检测列当多糖对新城疫病毒的阻断作用、抑制作用及直接杀灭作用。结果表明,列当总多糖及4种分级多糖均具有抗NDV活性,其中对NDV的抑制作用及阻断作用强于对NDV的直接杀灭作用。50%、80%梯度醇沉的列当多糖(OSP50、OSP80)及总多糖(OSPt),阻断作用下的病毒抑制率分别为19.50%、33.10%和22.30%,抑制作用下的病毒抑制率分别为19.00%、21.90%和22.60%,杀灭作用下对NDV的抑制率分别为,14.70%、17.50%和13.30%,其余各组多糖阻断作用、抑制作用及杀灭作用下的病毒抑制率均低于上述3组多糖。说明OSP50、OSP80及OSPt的抗NDV活性较好,可以作为进一步研究的材料。 展开更多
关键词 列当 多糖 鸡胚成纤维细胞 新城疫病毒
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Pcgf2促进鸡胚成纤维细胞重编程形成诱导多能干细胞
3
作者 姚梓淇 廖立钦 +2 位作者 宋佳蓓 张新珩 谢青梅 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期311-320,共10页
【目的】以提高诱导鸡多能干细胞的干性为目的,利用Pcgf2基因与传统诱导多能干细胞的重编程因子共同诱导鸡多能干细胞。【方法】以鸡早期胚胎为模板,对Oct4、Sox2、Nanog、Lin28、C-myc、Klf4这6种传统的重编程因子及Pcgf2进行基因扩增... 【目的】以提高诱导鸡多能干细胞的干性为目的,利用Pcgf2基因与传统诱导多能干细胞的重编程因子共同诱导鸡多能干细胞。【方法】以鸡早期胚胎为模板,对Oct4、Sox2、Nanog、Lin28、C-myc、Klf4这6种传统的重编程因子及Pcgf2进行基因扩增,并与慢病毒载体重组为慢病毒质粒,在包装慢病毒并测定相对应的病毒滴度后,分组感染鸡胚成纤维细胞,在诱导的过程中对干细胞标记物进行检测。【结果】利用传统的重编程因子组合与加入Pcgf2共同诱导后的细胞都较早地表达出磷酸酶活性。加入Pcgf2诱导多能干细胞可以使细胞更早地出现类干细胞形态,且内源性基因Oct4、Sox2、Nanog和Lin28的表达得到更稳定的提高。【结论】Pcgf2在加入诱导体系后可以有效提高细胞的重编程接近干细胞状态。该研究可为选择重编程因子诱导鸡细胞完全重编程及其机制研究提供理论参考。 展开更多
关键词 鸡 慢病毒 多能转录因子 鸡胚成纤维细胞 体细胞重编程 诱导多能干细胞
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温度对鸡胚成纤维细胞UMNSAH/DF-1的影响
4
作者 张雨晴 夏晴 +1 位作者 喻峰 吴军 《科学技术创新》 2024年第9期38-41,共4页
本文通过在不同温度条件下进行鸡胚成纤维细胞UMNSAH/DF-1细胞培养实验,同时模拟活细胞株常温运输环境寻找改善UMNSAH/DF-1细胞生长状态及胞体“空泡化”现象的方法。实验结果表明:相较于37℃,39℃的培养温度更有利于UMNSAH/DF-1细胞生... 本文通过在不同温度条件下进行鸡胚成纤维细胞UMNSAH/DF-1细胞培养实验,同时模拟活细胞株常温运输环境寻找改善UMNSAH/DF-1细胞生长状态及胞体“空泡化”现象的方法。实验结果表明:相较于37℃,39℃的培养温度更有利于UMNSAH/DF-1细胞生长。室温运输时UMNSAH/DF-1细胞“空泡化”程度显著。但是正常传代后,其胞体“空泡化”现象又会显著减少。本文提示:若UMNSAH/DF-1细胞胞体“空泡”数量较多时,可通过优化该细胞最佳生长温度同时增加传代次数进行改善,一般多次传代后UMNSAH/DF-1细胞就会恢复至其正常状态。 展开更多
关键词 温度 鸡胚成纤维细胞 空泡化
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鸡传染性法氏囊病毒接种鸡胚成纤维细胞工艺优化
5
作者 孙德君 《家禽科学》 2024年第7期31-34,共4页
鸡传染性法氏囊病是一种急性、高度接触性传染病,主要侵害幼龄鸡。传染性法氏囊病灭活疫苗通常采用强毒接种鸡胚成纤维细胞(CEF)进行病毒的培养。本试验采用细胞培养转瓶培养CEF方法接种病毒对转瓶内细胞接种密度、种毒接种量及收获病... 鸡传染性法氏囊病是一种急性、高度接触性传染病,主要侵害幼龄鸡。传染性法氏囊病灭活疫苗通常采用强毒接种鸡胚成纤维细胞(CEF)进行病毒的培养。本试验采用细胞培养转瓶培养CEF方法接种病毒对转瓶内细胞接种密度、种毒接种量及收获病毒时间进行了优化,筛选出传染性法氏囊病毒培养的最佳工艺参数(转瓶),为扩大生产稳定的鸡传染性法氏囊病灭活疫苗奠定了基础。 展开更多
关键词 鸡传染性法氏囊病毒 鸡胚成纤维细胞 工艺优化
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TLRs信号通路和促炎症细胞因子基因在鸡胚成纤维细胞感染新城疫病毒过程中的表达分析 被引量：8
6
作者 曾胜强 冯泽清 +1 位作者 刘益平 杨志勤 《四川农业大学学报》 CSCD 北大核心 2014年第4期436-441,共6页
【目的】研究新城疫病毒对鸡胚成纤维细胞中TLRs抗病毒信号通路和促炎症相关细胞因子的诱导作用。【方法】采用分离培养的原代鸡胚成纤维细胞感染中等毒力的新城疫病毒,并在感染后的4、8、12、16、24h收集细胞,利用定量PCR检测TLRs信号... 【目的】研究新城疫病毒对鸡胚成纤维细胞中TLRs抗病毒信号通路和促炎症相关细胞因子的诱导作用。【方法】采用分离培养的原代鸡胚成纤维细胞感染中等毒力的新城疫病毒,并在感染后的4、8、12、16、24h收集细胞,利用定量PCR检测TLRs信号通路及促炎症相关细胞因子在细胞新城疫病毒感染过程中的表达变化。【结果】结果显示,TLR3、TLR7、TLR15,及其衔接蛋白基因MYD88、TRIF,以及下游基因IFN-α、IFN-β、Mx的表达量在病毒感染后呈现出显著上调(P<0.05)。同时促炎症细胞因子IL-1β、IL-6、TNF-α的表达量在病毒感染后也表现出显著上调(P<0.05)。【结论】研究表明,在鸡胚成纤维细胞对新城疫病毒的识别过程中,由TLR3、TLR7、TLR15介导抗病毒信号通路,同时诱导产生促炎症细胞因子IL-1β、IL-6、TNF-α,并在新城疫病毒诱导的炎症反应过程中发挥重要的作用。 展开更多
关键词 鸡成纤维细胞 新城疫病毒 抗病毒免疫
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10种中药成分对单层鸡胚成纤维细胞增殖的影响 被引量：18
7
作者 孔祥峰 胡元亮 +3 位作者 刘家国 张宝康 陈玉库 王德云 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期84-87,共4页
将安全浓度范围内的黄芪多糖、当归多糖、蜂胶多糖、淫羊藿多糖、板蓝根多糖、黄芪黄酮、蜂胶黄酮、淫羊藿黄酮、黄芪皂苷和人参皂苷等 10种中药成分分别加入已培养 2 4h、刚形成单层的鸡胚成纤维细胞 (CEF)中 ,在加药后12 ,2 4 ,36 ,4 ... 将安全浓度范围内的黄芪多糖、当归多糖、蜂胶多糖、淫羊藿多糖、板蓝根多糖、黄芪黄酮、蜂胶黄酮、淫羊藿黄酮、黄芪皂苷和人参皂苷等 10种中药成分分别加入已培养 2 4h、刚形成单层的鸡胚成纤维细胞 (CEF)中 ,在加药后12 ,2 4 ,36 ,4 8和 6 0h用MTT法测定它们对CEF增殖的影响。结果表明 ,黄芪皂苷、黄芪多糖、板蓝根多糖和蜂胶黄酮主要表现为促进增殖 ;淫羊藿多糖主要具抑制效应 ;其他 5种中药成分在某些浓度和时间点能促进增殖 ,而在某些浓度和时间点则抑制增殖 ,并有一定的量效和时效关系。 展开更多
关键词 鸡胚成纤维细胞 细胞增殖 中药成分 时效关系 量效关系 免疫增强剂
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8种硫酸化多糖对新城疫病毒感染鸡胚成纤维细胞能力的影响 被引量：13
8
作者 王君敏 胡元亮 +6 位作者 张帆 王德云 赵晓娜 张靖 刘静 赵彪 郝丽华 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期118-122,共5页
用氯磺酸-吡啶法修饰当归多糖(CAPS)和枸杞多糖(LBPS),得到4种硫酸化当归多糖sCAPS0.6、sCAPS1.1、sCAPS1.9、sCAPS2.2和4种硫酸化枸杞多糖sLBPS0.7、sLBPS1.1、sLBPS1.5和sLBPS1.9。分别以CAPS和LBPS为对照,采用MTT法比较了这8种硫酸... 用氯磺酸-吡啶法修饰当归多糖(CAPS)和枸杞多糖(LBPS),得到4种硫酸化当归多糖sCAPS0.6、sCAPS1.1、sCAPS1.9、sCAPS2.2和4种硫酸化枸杞多糖sLBPS0.7、sLBPS1.1、sLBPS1.5和sLBPS1.9。分别以CAPS和LBPS为对照,采用MTT法比较了这8种硫酸化多糖对新城疫病毒感染鸡胚成纤维细胞能力的影响。结果表明:硫酸化修饰能显著提高当归多糖和枸杞多糖的抗病毒活性,且与硫酸基取代度有一定的相关性。sCAPS2.2、sLBPS1.5、sCAPS1.9和sLBPS1.9的活性较好,可以作为进一步研究的材料。 展开更多
关键词 硫酸化修饰 当归多糖 枸杞多糖 新城疫病毒 感染细胞能力 鸡胚成纤维细胞
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鸡胚成纤维细胞原代培养及应用 被引量：16
9
作者 朱国坡 周晓丽 +5 位作者 郭延锋 李瑞芳 高均伟 陈仕均 王丽荣 刘兴友 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2010年第3期112-114,共3页
原代培养是指在体外模拟体内生理环境,使从体内取出的组织细胞生存、生长和传代,并维持原有组织细胞的结构和功能特性。鸡胚成纤维细胞具有相对容易获得、增殖能力强、适应性强、良好的耐受性、性状比较稳定等特点,使得其被广泛地应用... 原代培养是指在体外模拟体内生理环境,使从体内取出的组织细胞生存、生长和传代,并维持原有组织细胞的结构和功能特性。鸡胚成纤维细胞具有相对容易获得、增殖能力强、适应性强、良好的耐受性、性状比较稳定等特点,使得其被广泛地应用于分子和细胞生物学研究的许多方面。论文综述了近年来有关鸡胚成纤维细胞的培养技术,如鸡胚的取材、细胞的分离、纯化和培养,同时介绍了应用进展和未来研究方向。 展开更多
关键词 鸡胚成纤维细胞 原代培养 分离 纯化
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10种中药成分对鸡胚成纤维细胞生长的影响 被引量：9
10
作者 胡元亮 孔祥峰 +2 位作者 张宝康 刘家国 王德云 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期601-603,共3页
将鸡胚成纤维细胞 ( CEF)分别与当归多糖 ( CAPS)、黄芪多糖 ( APS)、板蓝根多糖 ( IRPS)、淫羊藿多糖 ( EPS)、蜂胶多糖 ( PPS)、淫羊藿黄酮 ( EF)、蜂胶黄酮 ( PF)、黄芪黄酮 ( AF)、黄芪皂甙 ( AS)和人参皂甙 ( GS)等 10种中药成分... 将鸡胚成纤维细胞 ( CEF)分别与当归多糖 ( CAPS)、黄芪多糖 ( APS)、板蓝根多糖 ( IRPS)、淫羊藿多糖 ( EPS)、蜂胶多糖 ( PPS)、淫羊藿黄酮 ( EF)、蜂胶黄酮 ( PF)、黄芪黄酮 ( AF)、黄芪皂甙 ( AS)和人参皂甙 ( GS)等 10种中药成分一起加入到 96孔细胞培养板中培养 ,分别在培养 2 4、36、4 8、6 0、72 h时用 MTT法测定中药成分对 CEF增殖的影响。结果表明 ,所有中药成分均能显著促进 CEF增殖 。 展开更多
关键词 中药成分 鸡胚成纤维细胞 生长 增殖 量效关系 时效关系 免疫增强剂
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鸡胚成纤维细胞酵母双杂交cDNA文库的构建及鉴定 被引量：5
11
作者 段志强 王郁杨 +4 位作者 朱艳梅 开妍 胡顺林 王晓泉 刘秀梵 《扬州大学学报（农业与生命科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期1-5,共5页
选取对新城疫病毒（NDV）易感的鸡胚成纤维细胞（CEF）,Trizol提取细胞总RNA,用SMART技术合成双链cDNA,然后利用同源重组的方法在酵母细胞内构建CEF的cDNA文库,以寻找与NDV基质（M）蛋白相互作用的宿主细胞蛋白,探讨其相互作用对NDV装... 选取对新城疫病毒（NDV）易感的鸡胚成纤维细胞（CEF）,Trizol提取细胞总RNA,用SMART技术合成双链cDNA,然后利用同源重组的方法在酵母细胞内构建CEF的cDNA文库,以寻找与NDV基质（M）蛋白相互作用的宿主细胞蛋白,探讨其相互作用对NDV装配和出芽的影响。结果表明：提取的细胞总RNA的D260 nm/D280 nm为1.96,甲醛变性琼脂糖凝胶显示RNA未发生降解,质量良好。获得的文库容量为3×106cfu,插入的双链cDNA片段大小为0.3~3 kb,平均长度为1.3 kb左右,文库重组率为100%。该文库的构建为发现和研究与NDV M蛋白相互作用的宿主细胞蛋白提供有效工具。 展开更多
关键词 新城疫病毒 鸡胚成纤维细胞 酵母双杂交 CDNA文库 SMART技术
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马立克氏病病毒pp38基因真核表达质粒的构建及其在鸡胚成纤维细胞中的表达 被引量：4
12
作者 姜世金 丁家波 +4 位作者 张志 孙淑红 王玉 杨汉春 崔治中 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期117-119,共3页
通过 PCR方法扩增马立克氏病病毒 (Marek′s disease virus,MDV) Md11株的 pp38基因 ,并将其克隆到真核表达载体 pc DNA3.1/ zeo(+)中。阳性克隆鉴定后 ,在脂质体作用下转染鸡胚成纤维细胞 (CEF) ,通过间接免疫荧光试验 (IFA)检测到了 p... 通过 PCR方法扩增马立克氏病病毒 (Marek′s disease virus,MDV) Md11株的 pp38基因 ,并将其克隆到真核表达载体 pc DNA3.1/ zeo(+)中。阳性克隆鉴定后 ,在脂质体作用下转染鸡胚成纤维细胞 (CEF) ,通过间接免疫荧光试验 (IFA)检测到了 pp38在 CEF中的表达。 展开更多
关键词 马立克氏病 病毒 PP38基因 真核表达质粒 构建 鸡胚成纤维细胞 表达
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致病性鹅源新城疫病毒对鸡胚成纤维细胞的致病变特性 被引量：6
13
作者 万洪全 卢军 +3 位作者 刘秀梵 陈平 陈素娟 冀德君 《动物医学进展》 CSCD 2004年第5期89-91,共3页
选择4株鹅源新城疫病毒(NDV)接种鸡胚成纤维细胞(CEF)培养物,研究鹅源NDV对CEF的致病变特性,并与鸡源及鸽源NDV进行比较。结果显示,鹅源NDV接种次代CEF后24h开始有病变产生,表现为少数细胞变圆、皱缩,折光性增强,随后病变缓慢进展,感染... 选择4株鹅源新城疫病毒(NDV)接种鸡胚成纤维细胞(CEF)培养物,研究鹅源NDV对CEF的致病变特性,并与鸡源及鸽源NDV进行比较。结果显示,鹅源NDV接种次代CEF后24h开始有病变产生,表现为少数细胞变圆、皱缩,折光性增强,随后病变缓慢进展,感染细胞形成大量合胞体,到84-144 h时,CEF单层彻底破坏;鸡源和鸽源NDV接种CEF后也在24 h左右开始有病变产生,最初病变与鹅源毒株导致的病变相似,但病变进展迅速,细胞显著裂解并导致单层的严重破坏,60-84 h时细胞单层即彻底破坏。对病毒接种后不同时间段培养物上清血凝(HA)效价的测定结果表明,鹅源NDV接种后84-120h培养物上清HA效价达到高峰,为5-8 log2,鸡源和鸽源NDV接种后60-84 h HA效价即可达到高峰,但其最高效价只有4 log2。 展开更多
关键词 鹅 新城疫病毒 鸡胚成纤维细胞 致病变特性
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不同制备方法对鸡胚成纤维细胞产量的影响 被引量：6
14
作者 牛家强 徐业芬 +4 位作者 支海兵 陈先国 吴华伟 曾群辉 夏业才 《中国兽医科技》 CSCD 北大核心 2002年第7期31-32,共2页
采用传统法、半胚法和全胚法制备鸡胚成纤维细胞 (CEF)单层 ,在同等条件下均以成纤维细胞为主 ,并伴有少量的上皮细胞 ,仅有全胚法含有极少量的肝细胞 ;培养时细胞贴壁和生长状况 3种方法无明显差异 (P >0 .0 5 ) ;CEF的产量 ,半胚... 采用传统法、半胚法和全胚法制备鸡胚成纤维细胞 (CEF)单层 ,在同等条件下均以成纤维细胞为主 ,并伴有少量的上皮细胞 ,仅有全胚法含有极少量的肝细胞 ;培养时细胞贴壁和生长状况 3种方法无明显差异 (P >0 .0 5 ) ;CEF的产量 ,半胚法明显高于其他 展开更多
关键词 制备方法 产量 鸡胚成纤维细胞 传统法 半胚法 全胚法
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鸡胚成纤维细胞和马立克氏淋巴瘤细胞端粒酶基因的表达水平 被引量：5
15
作者 孙莹 邹亚学 +5 位作者 潘风光 郑梅竹 柏洪武 孙刚 崔文王景 张玉静 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期700-702,706,共4页
应用改进的TRAP-银染法检测了鸡胚成纤维细胞(CEF)和马立克氏淋巴瘤细胞系(MDCC-MSB1)的端粒酶活性,并应用荧光相对定量RT-PCR法,检测了这2种细胞中的端粒酶基因:端粒酶反转录酶(Telomerase reverse tran-scriptase,chTERT)和端粒酶RNA(... 应用改进的TRAP-银染法检测了鸡胚成纤维细胞(CEF)和马立克氏淋巴瘤细胞系(MDCC-MSB1)的端粒酶活性,并应用荧光相对定量RT-PCR法,检测了这2种细胞中的端粒酶基因:端粒酶反转录酶(Telomerase reverse tran-scriptase,chTERT)和端粒酶RNA(Telomerase RNA,chTER)的相对表达量,以探讨端粒酶活性与基因表达的相关性。结果显示,MDCC-MSB1细胞的相对端粒酶活力是CEF细胞的100倍;实时荧光定量检测,MDCC-MSB1细胞中chTERT的mRNA表达水平高于chTER基因,其中chTERT基因的表达量为CEF的215倍,而chTER基因的表达量只有CEF的10倍。研究表明,chTER基因在CEF和MDCC-MSB1的表达差异不显著,而chTERT基因的mRNA表达水平在MDCC-MSB1细胞中却显著增加,说明chTERT是端粒酶活性的主要限速步骤之一,也可能是导致马立克氏病淋巴瘤的重要因素。 展开更多
关键词 马立克氏病 端粒酶基因 鸡胚成纤维细胞 马立克氏淋巴瘤细胞
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紫苏叶注射液在鸡胚成纤维细胞体系中安全浓度的测定 被引量：4
16
作者 王定坤 杜智勇 +2 位作者 徐在品 赵伟 王清宇 《贵州农业科学》 CAS 北大核心 2010年第5期146-148,共3页
采用体外细胞培养法,将紫苏叶注射液与鸡胚成纤维细胞(Chick embryo fibroblast,CEF)共同培养,测定紫苏叶注射液在鸡胚成纤维细胞培养体系中的最大安全浓度,检测紫苏叶注射液的细胞毒性。结果表明,紫苏叶注射液对鸡胚成纤维细胞的最大... 采用体外细胞培养法,将紫苏叶注射液与鸡胚成纤维细胞(Chick embryo fibroblast,CEF)共同培养,测定紫苏叶注射液在鸡胚成纤维细胞培养体系中的最大安全浓度,检测紫苏叶注射液的细胞毒性。结果表明,紫苏叶注射液对鸡胚成纤维细胞的最大安全浓度为488.281μg/mL。 展开更多
关键词 紫苏叶注射液 鸡胚成纤维细胞 细胞毒性 安全浓度
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鸡胚成纤维细胞cDNA表达文库的构建 被引量：4
17
作者 刘伟 高玉龙 +2 位作者 高宏雷 王笑梅 许修宏 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期413-417,共5页
鸡胚成纤维细胞(CEF)是研究鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)的主要细胞材料,而构建CEF的cDNA表达文库是筛选IBDV在CEF中的细胞受体,研究细胞嗜性的基础平台。采用Gateway技术构建CEF的表达文库,避免使用限制性内切酶切割cDNA,能够解决常规... 鸡胚成纤维细胞(CEF)是研究鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)的主要细胞材料,而构建CEF的cDNA表达文库是筛选IBDV在CEF中的细胞受体,研究细胞嗜性的基础平台。采用Gateway技术构建CEF的表达文库,避免使用限制性内切酶切割cDNA,能够解决常规方法构建cDNA文库的技术缺陷。该技术将CEF的mRNA分离纯化后,以5′端生物素标记的Oligo(dT)primer为引物反转录后连接Adapter,层析柱纯化,通过BP重组反应构建cDNA入门文库,其平均滴度为1.1×106cfu/mL,文库总容量为1.2×107cfu,平均插入片段为2243bp,重组率为100%。通过LR重组反应将入门文库转换为表达文库,经测定平均滴度为5×105cfu/mL,文库总容量为5.5×106cfu,平均插入片段为2411bp,重组率为100%。结果表明,所构建的文库具有较高的重组率和较大的库容量,可作为较高质量的文库来研究IBDV的相关基因,为研究病毒受体和病毒入侵途径,进一步了解IBDV的致病机理奠定了基础。 展开更多
关键词 鸡胚成纤维细胞(CEF) GATEWAY技术 CDNA表达文库 传染性法氏囊病病毒(IBDV)
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12种藏药对鸡胚成纤维细胞的安全浓度和生长的影响 被引量：3
18
作者 赵晓娜 牛家强 +5 位作者 胡元亮 王君敏 黄小燕 卢宇 张帆 郑铁锁 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期511-513,518,共4页
用MTT法测定了藏菖蒲、红景天、决明子、灵芝盖、灵芝柄、龙胆、天冬、降香、乳香、仁青芒觉、二十五味珍珠丸、二十五味松石丸等12种藏药对体外培养的鸡胚成纤维细胞（CEF）的安全浓度和生长的影响。结果显示，各藏药的最大安全质量浓... 用MTT法测定了藏菖蒲、红景天、决明子、灵芝盖、灵芝柄、龙胆、天冬、降香、乳香、仁青芒觉、二十五味珍珠丸、二十五味松石丸等12种藏药对体外培养的鸡胚成纤维细胞（CEF）的安全浓度和生长的影响。结果显示，各藏药的最大安全质量浓度红景天为31．25mg／L，天冬、降香、决明子和二十五味松石丸为62．5mg／L，乳香为125mg／L，二十五味珍珠丸为250mg／L，藏菖蒲和灵芝柄为1000mg／L，龙胆和仁青芒觉为2500mg／L，灵芝盖为5000mg／L，藏菖蒲为1．954-500mg／L，天冬为1．954-15．625mg／L，决明子为1．954-3．907mg／L，灵芝柄为1．954-7．813mg／L，仁青芒觉为19．54-1250mg／L，龙胆为312．5-625mg／L，可显著促进细胞生长。 展开更多
关键词 藏药 鸡胚成纤维细胞 安全浓度 生长
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新城疫病毒Ⅰ系毒株通过Caspase途径诱导鸡胚成纤维细胞凋亡 被引量：4
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作者 崔玉东 冉旭华 +1 位作者 宋佰芬 朴范泽 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期254-256,共3页
应用不同Caspases抑制剂研究了新城疫病毒(NDV)Ⅰ系毒株诱导鸡胚成纤维细胞(CEF)凋亡的途径。结果,用20μmol/L的Z-VAD.fmk、Z-IETD.fmk和Z-LEHD.fmk分别处理CEF后,均能抑制NDVⅠ系毒株诱导的CEF凋亡;而用20μmol/L的Z-DEVD.fmk和Z-AEVD... 应用不同Caspases抑制剂研究了新城疫病毒(NDV)Ⅰ系毒株诱导鸡胚成纤维细胞(CEF)凋亡的途径。结果,用20μmol/L的Z-VAD.fmk、Z-IETD.fmk和Z-LEHD.fmk分别处理CEF后,均能抑制NDVⅠ系毒株诱导的CEF凋亡;而用20μmol/L的Z-DEVD.fmk和Z-AEVD.fmk分别处理CEF,则不能抑制NDVⅠ系毒株诱导的CEF凋亡。由此表明,NDVⅠ系毒株能通过Caspase依赖性途径诱导CEF凋亡,其中Caspase-8和Caspase-9在凋亡中发挥重要作用,而Caspase-3和Caspase-10在凋亡中不发挥作用。 展开更多
关键词 新城疲病毒 凋亡 CASPASE 鸡胚成纤维细胞
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鸡胚成纤维细胞感染IBDV后SOD活性的变化 被引量：13
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作者 薛春宜 毕英佐 曹永长 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 1999年第1期3-5,共3页
鸡胚成纤维细胞（ＣＥＦｓ）用传染性囊病病毒（ＩＢＤＶ）感染后，采用邻苯三酚自氧化法测定细胞超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）的活性。ＣＥＦｓ感染ＩＢＤＶ后８ｈ，细胞ＳＯＤ活性有所上升。之后，随着时间的延长，细胞ＳＯＤ活性逐渐下... 鸡胚成纤维细胞（ＣＥＦｓ）用传染性囊病病毒（ＩＢＤＶ）感染后，采用邻苯三酚自氧化法测定细胞超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）的活性。ＣＥＦｓ感染ＩＢＤＶ后８ｈ，细胞ＳＯＤ活性有所上升。之后，随着时间的延长，细胞ＳＯＤ活性逐渐下降。试验结果表明，ＳＯＤ活性降低是ＣＥＦｓ感染ＩＢＤＶ之后发生的重要生化变化，在ＩＢＤＶ诱导细胞凋亡的过程中可能起关键作用。 展开更多
关键词 传染性囊病病毒 鸡胚成纤维细胞 SOD
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