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杂交三倍体泥鳅减数分裂相关基因Dmc1启动子甲基化分析
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作者 马可馨 李逸帆 +5 位作者 杨悦瑶 李川 郭文轩 庄子昕 王伟 周贺 《水产科学》 北大核心 2025年第2期244-253,共10页
为探究减数分裂特异重组酶1(Dmc1)在杂交三倍体泥鳅不育机制的重要作用,本试验克隆了杂交三倍体泥鳅(4n♀×2n♂)Dmc1基因,分析了Dmc1基因的理化性质和系统发育地位。用亚硫酸氢盐测序技术和逆转录PCR技术分析了泥鳅杂交三倍体子代... 为探究减数分裂特异重组酶1(Dmc1)在杂交三倍体泥鳅不育机制的重要作用,本试验克隆了杂交三倍体泥鳅(4n♀×2n♂)Dmc1基因,分析了Dmc1基因的理化性质和系统发育地位。用亚硫酸氢盐测序技术和逆转录PCR技术分析了泥鳅杂交三倍体子代及其亲本性腺组织中Dmc1基因启动子区甲基化发生率和表达量。结果显示,Dmc1基因全长3895bp,开放阅读框为1029bp,编码342个氨基酸,Dmc1蛋白的预测分子质量为37.85ku,理论等电点为6.95。氨基酸多序列比对表明,泥鳅Dmc1氨基酸序列与其他鲤形目鱼类Dmc1氨基酸序列相似性较高,与节肢动物的相似性较低。系统发育进化树结果显示,泥鳅与其他硬骨鱼类Dmc1聚于同一进化支。亚硫酸氢盐测序结果显示,四倍体母本、二倍体父本及三倍体子代Dmc1基因的启动子区域甲基化发生率分别为100%、80.0%及82.2%。三倍体雄性子代Dmc1启动子区甲基化发生率高于二倍体父本,Dmc1基因表达量显著低于二倍体父本;三倍体雌性子代Dmc1启动子区甲基化发生率低于四倍体母本,Dmc1基因表达量显著高于四倍体母本。根据Pearson相关系数分析可知,Dmc1基因启动子区的甲基化发生率与其表达水平呈负相关(r=-0.986,P=0.014)。综上所述,在不同倍性泥鳅中Dmc1基因的表达量受启动子区域甲基化的负调控作用,因此推测Dmc1基因的DNA甲基化发生率与三倍体泥鳅的减数分裂异常及低育性具有一定的相关性。试验结果可为解析杂交三倍体泥鳅不育的分子机制提供理论依据。 展开更多
关键词 泥鳅 杂交三倍体 Dmc1 启动子甲基
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MLH1基因启动子甲基化在子宫内膜癌中的应用研究进展
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作者 李晓盈 张鑫 +1 位作者 张伟健 阮晓红 《陕西医学杂志》 2025年第5期711-715,720,共6页
子宫内膜癌(EC)是女性生殖系统常见的恶性肿瘤。近年来,表观遗传学机制在EC的发生和发展中引起了广泛关注。其中,MutL同源物1(MLH1)基因启动子区甲基化是EC常见的表观遗传改变,可导致基因沉默,进而引起微卫星不稳定性(MSI)。研究发现,M... 子宫内膜癌(EC)是女性生殖系统常见的恶性肿瘤。近年来,表观遗传学机制在EC的发生和发展中引起了广泛关注。其中,MutL同源物1(MLH1)基因启动子区甲基化是EC常见的表观遗传改变,可导致基因沉默,进而引起微卫星不稳定性(MSI)。研究发现,MLH1基因启动子甲基化不仅参与EC的发生和发展,还可影响其诊断、治疗及预后。现对MLH1基因启动子甲基化的分子机制、检测方法及其在EC临床诊断、治疗策略及预后评估中的应用进行综述。 展开更多
关键词 子宫内膜癌 MutL同源物1 启动子甲基 错配修复缺陷 表观遗传
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中药成分CDP逆转高甲基化状态的GSTP1基因启动子低转录活性的研究 被引量:5
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作者 张军哲 王锦红 +1 位作者 覃扬 傅强 《四川大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期761-765,共5页
目的研究中药成分CDP逆转高甲基化状态的GSTP1基因启动子低转录活性的作用。方法构建含完全甲基化GSTP1启动子区的重组质粒pGL3-GSTP1prom并转染MCF-7细胞,分别用不同剂量的CDP和5-aza-C作用细胞,检测表达的萤光素酶活性。观察GSTP1启... 目的研究中药成分CDP逆转高甲基化状态的GSTP1基因启动子低转录活性的作用。方法构建含完全甲基化GSTP1启动子区的重组质粒pGL3-GSTP1prom并转染MCF-7细胞,分别用不同剂量的CDP和5-aza-C作用细胞,检测表达的萤光素酶活性。观察GSTP1启动子转录活性的变化。结果GSTP1启动子区被完全甲基化后转录活性显著降低;CDP能够逆转高甲基化状态下GSTP1基因启动子区的低转录活性且呈剂量依赖关系。结论中药成分CDP能够逆转高甲基化状态的GSTP1基因启动子区的低转录活性。 展开更多
关键词 CDP 高甲基化gstp1启动子 MCF-7 转染 萤光素酶报告基因
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3种胃癌细胞株中GSTP1基因表达及其启动子区甲基化状态的研究 被引量:2
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作者 张晔 曲秀娟 +4 位作者 刘云鹏 荆薇 杨向红 侯科佐 滕月娥 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期724-726,共3页
目的研究候选基因GSTP1在胃癌细胞株中的表达及其启动子区的甲基化状态,初步探讨胃癌细胞株GSTP1基因表达水平与其启动子区甲基化的相关性。方法采用RT-PCR和Western blot技术分别检测GSTP1在人胃癌细胞株MGC803、BGC823和SGC7901中的m... 目的研究候选基因GSTP1在胃癌细胞株中的表达及其启动子区的甲基化状态,初步探讨胃癌细胞株GSTP1基因表达水平与其启动子区甲基化的相关性。方法采用RT-PCR和Western blot技术分别检测GSTP1在人胃癌细胞株MGC803、BGC823和SGC7901中的mRNA和蛋白表达水平。甲基化特异性PCR(MSP)法检测启动子区域甲基化状态。分别用不同浓度的去甲基化药物5-氮杂胞苷处理GSTP1基因启动子区高甲基化状态细胞后,再检测GSTP1基因蛋白表达水平。结果人胃癌细胞株BGC823和SGC7901中GSTP1 mRNA和蛋白呈阳性表达,MGC803中mRNA和蛋白呈阴性表达;BGC823和SGC7901细胞GSTP1基因启动子区域未发生甲基化,而MGC803细胞启动子区呈高甲基化状态;经5-氮杂胞苷药物干预后,MGC803细胞的GSTP1蛋白表达明显增强。结论胃癌MGC803细胞株中GSTP1基因表达沉默与启动子区高甲基化状态有关。 展开更多
关键词 gstp1基因 DNA甲基 胃癌 5-氮杂胞苷
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HCC患者GSTP1基因启动子区CpG岛甲基化状态研究 被引量:1
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作者 王锦红 覃扬 +3 位作者 李波 孙芝琳 孙泽芳 关泉林 《四川大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期686-688,共3页
目的检测人原发性肝癌(HCC)中抑癌基因GSTP1的启动子区CpG岛甲基化的状况,并探讨其在肝癌发生中的作用。方法以已知的GSTP1基因启动子区CpG岛甲基化阳性的乳腺癌细胞株MCF-7为阳性对照,以11例正常人外周血单核细胞(PBMC)DNA为阴性对照,... 目的检测人原发性肝癌(HCC)中抑癌基因GSTP1的启动子区CpG岛甲基化的状况,并探讨其在肝癌发生中的作用。方法以已知的GSTP1基因启动子区CpG岛甲基化阳性的乳腺癌细胞株MCF-7为阳性对照,以11例正常人外周血单核细胞(PBMC)DNA为阴性对照,用甲基化特异性PCR(MSP)的方法对26例肝细胞癌患者的癌、远癌组织中GSTP1基因启动子区CpG岛甲基化的状态进行检测。结果在26例原发性肝癌中GSTP1基因启动子区CpG岛甲基化在癌组织为88%(23/26),在远癌组织中为69%(18/26);而在11例正常人外周血单核细胞均为甲基化阴性。结论抑癌基因GSTP1基因启动子区CpG岛高甲基化可能是肝癌发生早期的分子事件,在人原发性肝癌的发生发展中具有重要的作用。 展开更多
关键词 肝癌 gstp1基因 CPG岛 甲基
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普鲁卡因酰胺诱导肝癌细胞启动子区甲基化的GSTP1基因重新表达 被引量:2
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作者 杨卫富 李德春 《医师进修杂志(外科版)》 北大核心 2004年第9期17-19,共3页
目的 研究HepG2肝癌细胞GSTP1基因启动子区甲基化与GSTP1基因表达的关系 ,并探讨普鲁卡因酰胺用于诱导因甲基化失活的GSTP1基因重新表达的可能性。方法 分别用 5 -杂氮 - 2′ -脱氧胞苷 (5 -Aza -CdR)和普鲁卡因酰胺处理HepG2细胞后培... 目的 研究HepG2肝癌细胞GSTP1基因启动子区甲基化与GSTP1基因表达的关系 ,并探讨普鲁卡因酰胺用于诱导因甲基化失活的GSTP1基因重新表达的可能性。方法 分别用 5 -杂氮 - 2′ -脱氧胞苷 (5 -Aza -CdR)和普鲁卡因酰胺处理HepG2细胞后培养 ,甲基化特异性PCR(MSP)检测细胞中GSTP1基因的甲基化状况 ,RT -PCR和Westernblot分别检测细胞中GSTP1mRNA和GST -π的表达。结果 HepG2细胞在去甲基化药物处理前 ,GSTP1基因完全甲基化 ,GSTP1基因不表达 ;药物处理后 ,普鲁卡因酰胺组和 5 -Aza -CdR组GSTP1基因有表达。结论 肝癌细胞GSTP1基因启动子区甲基化可抑制GSTP1基因表达 ,普鲁卡因酰胺与 5 -Aza 展开更多
关键词 普鲁卡因酰胺 肝癌 癌细胞 gstp1 基因表达 基因启动子 基因甲基 甲基作用
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异烟肼致肝细胞损伤中GSTP1启动子区甲基化 被引量:3
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作者 牛琛 李金凤 +7 位作者 李莹淑 张一杨 李玉红 王悦 田慎谦 任琦 郑国颖 冯福民 《国际药学研究杂志》 CSCD 北大核心 2017年第10期965-969,共5页
目的通过异烟肼损伤HL-7702肝细胞,探索谷胱甘肽S转移酶P1(GSTP1)启动子区Cp G岛甲基化与损伤的关系。方法将细胞分为对照组与不同浓度异烟肼(200、400和800 mg/L)处理组,采用比色法检测HL-7702细胞外乳酸脱氢酶(LDH)活性水平;采用实时... 目的通过异烟肼损伤HL-7702肝细胞,探索谷胱甘肽S转移酶P1(GSTP1)启动子区Cp G岛甲基化与损伤的关系。方法将细胞分为对照组与不同浓度异烟肼(200、400和800 mg/L)处理组,采用比色法检测HL-7702细胞外乳酸脱氢酶(LDH)活性水平;采用实时荧光定量PCR分别检测各组3种DNA甲基转移酶(DNMT)DNMT1、DNMT3a、DNMT3b和GSTP1的m RNA表达;采用酶联免疫法(ELISA)检测3种DNA甲基转移酶蛋白表达;采用亚硫酸盐修饰后测序法(BSP)检测GSTP1启动子区Cp G岛的甲基化水平。结果异烟肼处理细胞上清液中LDH活性水平升高,细胞损伤程度随异烟肼浓度升高而加剧。与对照组比较,400和800 mg/L异烟肼组GSTP1 m RNA表达随异烟肼浓度增加而显著升高(P<0.05,P<0.01),异烟肼高剂量组GSTP1启动子区Cp G岛甲基化较对照组降低。3种DNMT蛋白表达水平随异烟肼浓度增加表达升高,高剂量异烟肼组的3种DNA甲基转移酶m RNA和蛋白表达较对照组均显著性增强(P<0.01)。结论异烟肼损伤的肝细胞HL-7702的GSTP1启动子区Cp G岛呈低甲基化。 展开更多
关键词 肝损伤 gstp1 DNA甲基 DNA甲基转移酶
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非小细胞肺癌化疗短期疗效与GSTP1基因启动子甲基化的相关性分析 被引量:1
8
作者 胡伟成 陈柏深 刘强 《广州医科大学学报》 2018年第6期6-10,24,共6页
目的:观察非小细胞肺癌化疗短期疗效与谷胱甘肽S转移酶P1基因(GSTP1)启动子甲基化水平的相关性。方法:纳入2016年3月到2018年3月于我院与中山大学孙逸仙纪念医院收治的100例非小细胞肺癌患者为研究对象,开展回顾性分析。所有患者均接受... 目的:观察非小细胞肺癌化疗短期疗效与谷胱甘肽S转移酶P1基因(GSTP1)启动子甲基化水平的相关性。方法:纳入2016年3月到2018年3月于我院与中山大学孙逸仙纪念医院收治的100例非小细胞肺癌患者为研究对象,开展回顾性分析。所有患者均接受吉西他滨联合顺铂治疗,收集患者肺泡灌洗液,以聚合酶链反应(PCR)联合高分辨率熔解曲线(HRM)方法检测GSTP1基因启动子甲基化水平。统计患者一般资料,并分析化疗后短期疗效及其独立影响因素,观察GSTP1基因启动子甲基化水平与患者化疗后短期疗效的关系。结果:100例非小细胞肺癌患者治疗2个化疗周期后CR 4例(4.00%),PR 45例(45.00%),SD 40例(40.00%),均归入疾病控制组; PD 11例(11.00%),归入疾病未控制组。疾病控制组KPS评分<80分、TNM分期处于Ⅲa期、肿瘤直径≤5 cm、肿瘤细胞分化程度为低分化、血小板计数≤300×10~9/L所占比例均显著高于疾病未控制组(P<0.05)。疾病控制组GSTP1基因启动子甲基化率为15.73%,疾病未控制组为54.54%,差异有统计学意义(P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示,除KPS评分、TNM分期、肿瘤直径、分化程度、血小板计数外,GSTP1基因启动子甲基化率亦为非小细胞肺癌化疗短期疗效的独立影响因素(P<0.05)。结论:非小细胞肺癌化疗短期疗效与GSTP1启动子甲基化水平密切相关,临床上应引起足够重视。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 gstp1基因 甲基
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乳腺癌患者BRCA1基因启动子区甲基化模式的初步研究 被引量:11
9
作者 李云青 张思仲 +1 位作者 肖翠英 赵扬冰 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2001年第10期1057-1060,共4页
目的:探讨在散发性乳腺癌患者中乳腺癌易感基因1(breastcancer1,BRCA1)启动子区13个CpG二核苷酸甲基化模式与肿瘤发生的关系。方法:用新发展的甲基化敏感单链构象分析法methylationsensitivesinglestrandconformationanalysis,MSSSCA及... 目的:探讨在散发性乳腺癌患者中乳腺癌易感基因1(breastcancer1,BRCA1)启动子区13个CpG二核苷酸甲基化模式与肿瘤发生的关系。方法:用新发展的甲基化敏感单链构象分析法methylationsensitivesinglestrandconformationanalysis,MSSSCA及DNA测序技术,对66例乳腺癌患者的癌组织、癌旁组织、外周血细胞中的BR-CA1基因启动子区甲基化模式进行研究。结果:发现有3种不同的甲基化模式。其中16例(24.2%)为高度甲基化,3例(4.5%)为部分甲基化,其余为未甲基化。结论:在部分散发性乳腺癌中BRCA1基因是高度甲基化的,它可能是BRCA1基因表达下降的机制之一。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 BRCA1基因 MS-SSCA法 甲基模式 启动子
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CHD5基因启动子甲基化调控p19Arf/p53/p21Cip1信号通路促进急性髓系白血病发病的研究 被引量:8
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作者 吴明彩 蒋明 +5 位作者 董婷 吕俊 方基勇 徐蕾 韦中玲 章尧 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期1001-1007,共7页
目的:探讨急性髓系白血病患者(AML)骨髓中CHD5基因甲基启动子甲基化状态及其调控p19Arf/p53/p21Cip1信号通路促进AML发病的机制。方法:采用MSP检测AML组及对照组CHD5基因甲基化状态,应用实时定量RT-PCR和Westernblot检测CHD5、p19Arf、... 目的:探讨急性髓系白血病患者(AML)骨髓中CHD5基因甲基启动子甲基化状态及其调控p19Arf/p53/p21Cip1信号通路促进AML发病的机制。方法:采用MSP检测AML组及对照组CHD5基因甲基化状态,应用实时定量RT-PCR和Westernblot检测CHD5、p19Arf、p53及p21Cip1的表达水平。结果:AML患者骨髓中CHD5基因甲基化率(39.06%)较对照组(6.67%)明显增高(P<0.05);CHD5基因甲基化与AML不同染色体核型相关(P=0.009),但与性别、年龄及临床分型无显著相关(P>0.05);AML患者CHD5相对表达水平明显低于对照组(P<0.05);存在CHD5甲基化AML患者p19Arf、p53及p21Cip1基因和蛋白表达水平较对照组降低。结论:AML患者CHD5基因启动子的高甲基化可导致CHD5、p19Arf、p53和p21Cip1表达水平下降,从而可能通过调控p19Arf/p53/p21Cip1途径减弱对白血病细胞增殖抑制作用,促进AML的发生。 展开更多
关键词 急性髓系白血病 CHD5基因 启动子 DNA甲基 p19Arf P53 p21Cip1
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喉癌组织中TSLC1基因启动子过甲基化及mRNA表达 被引量:7
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作者 王军利 张惠中 +3 位作者 白万胜 刘丽 卞卡 成诗银 《第四军医大学学报》 北大核心 2007年第7期651-653,共3页
目的:探讨TSLC1基因启动子区过甲基化与喉癌的关系.方法:采用甲基化特异性PCR和RT-PCR法分析喉部正常粘膜、声带息肉、喉癌细胞Hep-2和喉癌组织中TSLC1基因启动子区过甲基化及其mRNA表达状况.结果:40例喉癌组织中,有21(52.5%)例TSLC1基... 目的:探讨TSLC1基因启动子区过甲基化与喉癌的关系.方法:采用甲基化特异性PCR和RT-PCR法分析喉部正常粘膜、声带息肉、喉癌细胞Hep-2和喉癌组织中TSLC1基因启动子区过甲基化及其mRNA表达状况.结果:40例喉癌组织中,有21(52.5%)例TSLC1基因启动子区过甲基化,其在各病理分级、临床分期和分型之间差异无统计学意义(P>0.05),而在N分级(N0和N1)之间差异有统计学意义(P<0.05).喉癌细胞Hep-2也显示TSLC1基因启动子区过甲基化.RT-PCR结果显示,TSLC1 mRNA在所有甲基化的喉癌组织和喉癌细胞Hep-2中均无表达,而喉部正常组织,声带息肉组织和非甲基化的喉癌组织中均有表达.结论:喉癌组织中TSLC1基因启动子区过甲基化与其mRNA失表达有关,可能是喉癌发生、发展的原因之一,可作为喉癌诊断和预后分析的检测指标. 展开更多
关键词 TSLC1基因 喉肿瘤 启动子 甲基
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肝细胞癌中SFRP1和APC基因启动子甲基化与其mRNA的表达 被引量:7
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作者 吴龙 钱叶本 +2 位作者 朱立新 耿小平 熊奇如 《中国普通外科杂志》 CAS CSCD 2008年第1期29-33,共5页
目的探讨肝细胞癌(HCC)中SFRP1和APC基因启动子甲基化状态及其mRNA表达的关系。方法应用甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术,检测30例肝细胞癌(HCC组)及相应的癌旁组织(癌旁组)和10例正常肝组织(正常对照... 目的探讨肝细胞癌(HCC)中SFRP1和APC基因启动子甲基化状态及其mRNA表达的关系。方法应用甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术,检测30例肝细胞癌(HCC组)及相应的癌旁组织(癌旁组)和10例正常肝组织(正常对照组)中SFRP1及APC基因启动子甲基化状态和mRNA的表达水平,分析甲基化与某些临床参数与mRNA表达的关系。结果HCC组、癌旁组及正常对照组中的SFRP1和APC基因启动子甲基化率分别是11/30,4/30,0/10和14/30,5/30,0/10;HCC组明显高于其余两组(P<0.05)。SFRP1基因启动子甲基化与临床资料无关(P>0.05);APC基因启动子甲基化与年龄(<60)岁和癌肿无假包膜有关(P<0.05)。HCC组SFRP1基因mRNA表达明显低于其余两组(P<0.05),各组APC基因mRNA表达差异无显著性。两基因甲基化之间无相关性。结论SFRP1和APC基因启动子甲基化与HCC的形成和进展有关,但HCC组织中基因甲基化与mRNA表达的关系尚不明确。 展开更多
关键词 肝细胞/病理学 APC SFRP1 启动子甲基 MRNA
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食管鳞癌中hMLH1、E-cadherin、p16^INK4a基因启动子甲基化及其意义 被引量:7
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作者 缪珑昇 相加庆 +2 位作者 张亚伟 黄丹 沈镇宙 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期340-346,共7页
背景与目的:目前认为抑癌基因启动子甲基化导致转录抑制是恶性肿瘤发生的重要机制之一,hMLH1、E-cadherin及p16INK4a基因在多种恶性肿瘤中都已被证实存在较高频率的甲基化。本研究通过检测食管鳞癌组织及癌旁组织中hMLH1、E-cadherin、p... 背景与目的:目前认为抑癌基因启动子甲基化导致转录抑制是恶性肿瘤发生的重要机制之一,hMLH1、E-cadherin及p16INK4a基因在多种恶性肿瘤中都已被证实存在较高频率的甲基化。本研究通过检测食管鳞癌组织及癌旁组织中hMLH1、E-cadherin、p16INK4a基因启动子甲基化的发生情况,探讨hMLH1、E-cadherin、p16INK4a基因启动子甲基化在食管鳞癌发生发展中的作用。方法:采用酚-氯仿法提取105例食管鳞癌组织及癌旁组织的基因组DNA,应用甲基化特异性PCR对所提DNA进行hMLH1、E-cadherin、p16INK4a基因甲基化检测。采用EnVison免疫组织化学二步法对癌组织中上述3种基因蛋白表达进行检测。结果:癌组织中E-cadherin、hMLH1、p16INK4a基因启动子甲基化的阳性率分别为57.1%(60/105)、20.9%(22/105)和50.5%(53/105),而癌旁食管组织中相应的3个基因的甲基化率分别为10.5%(11/105)、1.9%(2/105)和7.6%(8/105),均显著低于癌组织。E-cadherin(P=0.021)及p16INK4a(P=0.026)基因甲基化与蛋白表达缺失密切相关,而hMLH1基因甲基化与蛋白表达无显著相关性。E-cadherin基因启动子甲基化与淋巴结转移有关(P=0.016),p16INK4a基因启动子甲基化与低分化癌有关性(P=0.024)。hMLH1基因甲基化与各项临床病理特征均无关。结论:食管鳞癌中p16INK4a基因启动子甲基化与相应蛋白表达缺失密切相关,且在低分化癌中更多见;E-cadherin基因启动子甲基化与相应蛋白质表达缺失有相关性,并且有淋巴结转移多见的显著特征,这2个基因的甲基化位点与食管鳞癌密切相关。hMLH1基因甲基化可能并不直接参与食管鳞癌的发生、发展。 展开更多
关键词 食管肿瘤 鳞状细胞 启动子 甲基hMLH1基因 E-CADHERIN基因 p16INK4a基因
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乳腺癌中RIZ1基因启动子甲基化状态的探讨 被引量:4
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作者 方娟娟 余卫平 +1 位作者 安艳丽 樊祥山 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2007年第12期664-666,669,共4页
目的:研究乳腺癌组织中RIZ1启动子甲基化状态及与临床、病理指标之间的关系,并探讨该甲基化状态与RIZ1 mRNA表达的相关性。方法:应用甲基化特异性PCR法(methylation specific PCR,MSP)检测人乳腺癌组织和相应癌旁组织及乳腺良性肿瘤组织... 目的:研究乳腺癌组织中RIZ1启动子甲基化状态及与临床、病理指标之间的关系,并探讨该甲基化状态与RIZ1 mRNA表达的相关性。方法:应用甲基化特异性PCR法(methylation specific PCR,MSP)检测人乳腺癌组织和相应癌旁组织及乳腺良性肿瘤组织中RIZ1启动子甲基化状态,结合患者的临床与病理资料分析结果,并结合半定量RT-PCR法检测结果加以分析。结果:34例乳腺癌标本中RIZ1启动子甲基化阳性率为44.1%(15/34),该甲基化状态与患者年龄、肿瘤TNM分期、有无淋巴结转移、雌激素受体(ER)是否阳性无相关性(均为P>0.05)。RIZ1启动子甲基化标本中的RIZ1 mRNA表达水平低于未甲基化标本者,两者差异具有显著性(P<0.05),RIZ1表达降低与其启动子高甲基化状态之间有相关性(P<0.05)。结论:RIZ1基因启动子高甲基化是乳腺癌中常见的分子病理学改变之一;RIZ1 mRNA表达与RIZ1启动子高甲基化呈负相关。 展开更多
关键词 RIZ1 乳腺肿瘤 启动子甲基 基因表达
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骨性关节炎患者关节软骨hMLH1启动子区甲基化水平 被引量:3
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作者 徐敏 沈奕 +3 位作者 张强 陈明辉 余波 彭丹 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期928-933,共6页
目的:通过对骨性关节炎(osteoarthritis,OA)患者关节软骨人类错配修复基因1(human MutL homologue1,hMLH1)启动子区甲基化状态及hMLH1蛋白表达的检测,探讨hMLH1启动子区甲基化在OA发生发展中的作用。方法:采用亚硫酸氢钠法处理基因组DNA... 目的:通过对骨性关节炎(osteoarthritis,OA)患者关节软骨人类错配修复基因1(human MutL homologue1,hMLH1)启动子区甲基化状态及hMLH1蛋白表达的检测,探讨hMLH1启动子区甲基化在OA发生发展中的作用。方法:采用亚硫酸氢钠法处理基因组DNA,甲基化特异性PCR检测hMLH1基因启动子甲基化情况;免疫组织化学方法检测hMLH1蛋白的表达。结果:OA患者组关节软骨hMLH1启动子区甲基化阳性率明显高于健康人对照组(χ2=30.634,P<0.001);OA患者组关节软骨hMLH1蛋白表达率明显低于健康人对照组(χ2=37.724,P<0.001);OA患者关节软骨hMLH1启动子区启动子甲基化与蛋白表达呈显著负相关(rs=-0.554,P<0.001)。结论:OA患者关节软骨hMLH1启动子区发生了甲基化。其高甲基化状态影响了hMLH1蛋白的表达,可能参与OA疾病的发生发展。 展开更多
关键词 骨性关节炎 DNA甲基 hMLH1启动子 甲基特异性PCR
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胃癌MAGE-1基因启动子B′B区去甲基化状态的研究 被引量:3
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作者 许琳 罗兵 +3 位作者 王青 徐翮飞 黄维青 梁华 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2003年第1期39-41,共3页
目的 :探讨胃癌组织中MAGE 1基因启动子B′B区去甲基化状态及其与病理分级及临床分期的关系。方法 :取胃癌组织标本 4 0例 ,另外取同患者相应的癌旁组织 4 0例作为对照。采用分子生物学技术 甲基化敏感性内切酶酶切及PCR扩增技术 ,研究... 目的 :探讨胃癌组织中MAGE 1基因启动子B′B区去甲基化状态及其与病理分级及临床分期的关系。方法 :取胃癌组织标本 4 0例 ,另外取同患者相应的癌旁组织 4 0例作为对照。采用分子生物学技术 甲基化敏感性内切酶酶切及PCR扩增技术 ,研究了胃癌组织中MAGE 1启动子B′B区的去甲基化状态。结果 :在所检测的胃癌组织标本中MAGE 1基因启动子B′B区去甲基化的发生率为 2 5 % (10 /40 )。而在癌旁组织中发生率为 0 ,两者发生率的差别具有显著的统计学意义 (P <0 0 1)。在低分化腺癌中MAGE 1基因的B′B区去甲化发生率为 5 0 % (6 /12 ) ,中分化腺癌中发生率为 18.7% (3/16 ) ,高分化腺癌中发生率为 8.3(1/11)。其发生率的差异有统计学意义 (P <0 .0 5 )。在早期胃癌组织中B′B区的去甲基化的发生率为16 .7% ,在晚期胃癌组织中发生率为 2 8.6 % (P <0 .0 5 ) ,差别有统计学意义。结论 :胃癌组织中MAGE 1基因启动子的B′B区存在去甲基化。 展开更多
关键词 胃癌 MAGE-1基因启动子 甲基
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胃癌Pdx1启动子载体构建及其受DNA甲基化的调节 被引量:5
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作者 马娟 刘庆华 +3 位作者 王蓓蓓 廖山婴 沙卫红 王启仪 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2011年第31期3222-3228,共7页
目的:构建胰十二指肠同源盒基因1(pancreatic duodenum homeobox 1,Pdx1)启动子调控的荧光素酶基因表达载体,筛选Pdx1启动子,探讨Pdx1启动子活性受DNA甲基化的影响.方法:针对Pdx1基因启动子区域进行PCR扩增,经限制性酶切法将扩增产物克... 目的:构建胰十二指肠同源盒基因1(pancreatic duodenum homeobox 1,Pdx1)启动子调控的荧光素酶基因表达载体,筛选Pdx1启动子,探讨Pdx1启动子活性受DNA甲基化的影响.方法:针对Pdx1基因启动子区域进行PCR扩增,经限制性酶切法将扩增产物克隆至荧光素酶基因报告载体中,构建pGL3-Pdx1重组质粒.荧光素酶检测法检测胃癌细胞中Pdx1各段报告基因的启动子活性,并用DNA甲基化酶SssI处理胃癌细胞,比较各报告基因的启动子活性变化.结果:经过酶切和PCR法鉴定成功构建了9个携带Pdx1启动子的重组荧光素酶基因报告载体;荧光素酶检测法显示与pGL3-basic比较,含有F383的3个报告基因F383、F720和F1039有强启动子活性,组间比较无显著性差异;与对照组比较,SssI甲基化酶处理的F383、F720和F1039启动子活动明显降低(P<0.05).结论:成功获得由Pdx1启动子调控的荧光素酶基因表达载体,并筛选出具有强启动子活性的3个报告基因(F383、F720和F1039),且其启动子活性受DNA甲基化影响.其中F383可能是Pdx1启动子核心,这些结果为研究胃癌中Pdx1基因沉默的表观遗传学机制建立了基础. 展开更多
关键词 胃癌 胰十二指肠同源异型基因1 启动子 载体构建 甲基
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肺癌患者RASSF1A启动子甲基化状态及其基因表达水平 被引量:3
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作者 余宗涛 袁亚莉 +2 位作者 张吉才 高琼 吕军 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2007年第9期1011-1014,共4页
目的探讨肺癌RAS相关区域家族1A(RASSF1A)启动子CpG岛甲基化状态和基因表达水平与肺癌发生的关系。方法用甲基化特异性PCR检测RASSF1A启动子CpG岛甲基化状态,实时定量PCR检测RASSF1A mRNA的表达水平。结果在肺癌组织中RASSF1A启动子甲... 目的探讨肺癌RAS相关区域家族1A(RASSF1A)启动子CpG岛甲基化状态和基因表达水平与肺癌发生的关系。方法用甲基化特异性PCR检测RASSF1A启动子CpG岛甲基化状态,实时定量PCR检测RASSF1A mRNA的表达水平。结果在肺癌组织中RASSF1A启动子甲基化频率为53.33%(24/45),在正常肺组织中发生甲基化的频率为13.04%(3/23)(P<0.05)。正常肺组织中RASSF1A mRNA全部表达,肺癌组织中表达缺失率为28.89%(13/45),且表达量低于正常肺组织(P<0.05);不同年龄、性别、肿瘤大小、恶性程度、肿瘤分类中其表达量无显著差异;RASSF1A甲基化与其mRNA表达水平下降密切相关。结论肺癌中RASSF1A基因启动子甲基化频率明显升高,其表达普遍下调或缺失,提示RASSF1A启动子甲基化在肺癌发生、发展中起一定作用。 展开更多
关键词 肺癌 RASSF1A 启动子 甲基 表达
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子宫内膜癌错配修复基因hMLH1的表达和启动子甲基化研究 被引量:3
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作者 舒珊荣 柯佩琪 +3 位作者 李小毛 李美香 王莉 费慧 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期241-245,共5页
【目的】探讨子宫内膜癌组织中错配修复基因hMLH1的表达和启动子甲基化状态与子宫内膜癌发生的关系。【方法】应用免疫组化链霉素抗生物素-过氧化物酶法(S-P法)和甲基化特异性聚合酶连反应(MSP)方法,检测37例子宫内膜癌组织和20例正常... 【目的】探讨子宫内膜癌组织中错配修复基因hMLH1的表达和启动子甲基化状态与子宫内膜癌发生的关系。【方法】应用免疫组化链霉素抗生物素-过氧化物酶法(S-P法)和甲基化特异性聚合酶连反应(MSP)方法,检测37例子宫内膜癌组织和20例正常增生期子宫内膜组织中hMLH1蛋白的表达和启动子甲基化状态。【结果】37例子宫内膜癌组织和20例正常增生期子宫内膜组织hMLH1基因蛋白表达分别为51.4%(19/37),85%(17/20);基因启动子甲基化分别为43.2%(16/37),15%(3/20)。发生甲基化的16例子宫内膜癌组织14例蛋白表达阴性,发生甲基化的3例正常增生期子宫内膜组织2例蛋白表达阴性。hMLH1蛋白表达与组织学分级(G1,G2,G3)有关,与肿瘤肌层浸润、淋巴结转移、国际妇产科协会(FIGO)分期和宫颈浸润无相关性,hMLH1的甲基化与上述临床病理因素均无相关性。【结论】hMLH1基因启动子甲基化与其蛋白表达缺失密切相关,hMLH1基因在子宫内膜癌的发生过程中发挥重要作用。 展开更多
关键词 子宫内膜癌 HMLH1基因 表达 启动子甲基
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胃癌组织hMLH1和hMSH2基因启动子区甲基化状态研究 被引量:5
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作者 房殿春 罗元辉 刘为纹 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第9期1010-1011,共2页
目的 探讨hMLH1和hMSH2基因启动子区的甲基化状态与微卫星DNA不稳的关系。方法 采用甲基化特异性PCR方法检测hMLH1和hMSH2基因启动子区的甲基化状态 ,采用PCR为基础的方法检测微卫星DNA不稳。结果 正常胃粘膜未见hMLH1和hMSH2基因启... 目的 探讨hMLH1和hMSH2基因启动子区的甲基化状态与微卫星DNA不稳的关系。方法 采用甲基化特异性PCR方法检测hMLH1和hMSH2基因启动子区的甲基化状态 ,采用PCR为基础的方法检测微卫星DNA不稳。结果 正常胃粘膜未见hMLH1和hMSH2基因启动子区的高甲基化。 6 8例胃癌中检出hMLH1高甲基化 11例 ,占 16 .2 % ,而且均为去甲基化和高甲基化并存 ,未见有hMSH2高甲基化者。将MSI分为高频率MSI(MSI H ,≥ 2个位点 ) 8例、低频率MSI(MSI L ,仅为 1个位点 ) 9例和MSI阴性(MSS) 5 1例 3组 ,结果MSI H组hMLH1高甲基化的检出率显著高于MSI L和MSS组 (P <0 .0 1)。结论 hMLH1高甲基化可能参与了MSI病理途径 ,而hMSH2甲基化状态可能与MSI途径无关。 展开更多
关键词 胃癌 HMLH1 HMSH2 基因启动子甲基 微卫星不稳
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