期刊文献+
共找到856篇文章
< 1 2 43 >
每页显示 20 50 100
狂犬病颗粒样疫苗的制备及免疫评价
1
作者 代昕宇 李昀真 +4 位作者 孙亚杰 胡博 张成琪 许丽文 白雪 《畜牧与兽医》 CAS 北大核心 2024年第7期44-51,共8页
为研发高免疫原性的新型狂犬病颗粒样疫苗,利用PCR方法扩增狂犬病病毒HEP-Flury株的G蛋白和M蛋白基因序列,将其依次克隆至Bac-to-Bac杆状病毒表达系统穿梭载体pFastBac dual上,构建重组质粒pFD-GM。制备基于pFD-GM的重组杆粒,转染至Sf9... 为研发高免疫原性的新型狂犬病颗粒样疫苗,利用PCR方法扩增狂犬病病毒HEP-Flury株的G蛋白和M蛋白基因序列,将其依次克隆至Bac-to-Bac杆状病毒表达系统穿梭载体pFastBac dual上,构建重组质粒pFD-GM。制备基于pFD-GM的重组杆粒,转染至Sf9细胞,得到重组杆状病毒rb-GM,在Sf-9细胞中表达获得病毒样颗粒VLP-GM。经SDS-PAGE、Western blot和间接免疫荧光鉴定,重组杆状病毒成功表达了G蛋白(约56 kDa)和M蛋白(约23 kDa);经电镜观察,VLP-GM大小约为100 nm×50 nm,呈表面带有纤突的子弹形状,与典型的狂犬病病毒粒子类似。将VLP-GM免疫犬,经测定犬在二次免疫后产生较灭活疫苗更高的中和抗体水平,达到7.81 U/mL,并且与单独免疫G蛋白相比可刺激更多细胞因子如白细胞介素4(IL-4)和γ-干扰素(IFN-γ)生成。本研究成功表达了狂犬病病毒的病毒样颗粒VLP-GM,证明了其免疫原性,为后续的疫苗研制和抗体制备奠定了基础。 展开更多
关键词 狂犬病病毒 病毒颗粒 Bac-to-Bac杆状病毒表达系统
在线阅读 下载PDF
内镜下均一胃黏膜颗粒样改变的临床特征及治疗效果分析 被引量:1
2
作者 张林 侯艳红 +1 位作者 李楠 朱建华 《胃肠病学和肝病学杂志》 CAS 2017年第5期548-550,共3页
目的探讨内镜下均一胃黏膜颗粒样改变的临床及病理特点,分析各种药物的治疗效果。方法通过对比胃黏膜颗粒样改变与普通慢性非萎缩性胃炎的临床表现、病理表现、H.pylori感染率、胆汁反流内镜检出率等分析胃黏膜颗粒样改变的临床特点。12... 目的探讨内镜下均一胃黏膜颗粒样改变的临床及病理特点,分析各种药物的治疗效果。方法通过对比胃黏膜颗粒样改变与普通慢性非萎缩性胃炎的临床表现、病理表现、H.pylori感染率、胆汁反流内镜检出率等分析胃黏膜颗粒样改变的临床特点。127例接受过内镜检查的胃黏膜颗粒样改变患者按治疗方式的不同分为三组,分别采用单纯质子泵抑制剂、质子泵抑制剂为主的四联根除H.pylori、质子泵抑制剂加抗胆汁反流药物治疗,并比较各组治疗效果。结果胃黏膜颗粒样改变组患者上腹痛、反酸烧心、纳差等症状发生率显著高于对照组(P<0.05),病理表现中肠上皮化生发生率、淋巴细胞浸润发生率显著高于对照组(P<0.05),H.pylori感染率显著高于对照组(P<0.05),胆汁反流发生率显著高于对照组(P<0.05)。41例胃黏膜颗粒样改变患者经质子泵抑制剂为主的四联根除H.pylori治疗10 d后继续质子泵抑制剂治疗3周,27例患者临床症状消失,8周后复查胃镜发现17例原黏膜隆起病变显著减轻或消失。42例患者经单纯质子泵抑制剂治疗4周后14例症状消失,8周后复查胃镜仅6例黏膜隆起病变显著减轻或消失。44例患者经质子泵抑制剂联合抗胆汁反流药物治疗4周后23例症状消失,8周后复查胃镜11例黏膜隆起病变显著减轻或消失。结论胃黏膜颗粒样改变作为一种特殊类型的胃炎,临床表现具有一定的特征性,根据H.pylori感染情况行根治H.pylori治疗联合抗胆汁反流治疗是该病有效的治疗方法,值得临床推广。 展开更多
关键词 胃黏膜颗粒样改变 内镜 质子泵抑制剂 幽门螺杆菌
在线阅读 下载PDF
胃黏膜颗粒样改变与幽门螺旋杆菌感染特征的临床观察 被引量:1
3
作者 李素玉 王武新 何英 《现代医药卫生》 2007年第14期2107-2108,共2页
目的:观察胃黏膜颗粒样改变与萎缩性胃炎及胃幽门螺旋杆菌感染的特征。方法:通过临床特征、内镜及病理结果,来对比分析胃镜检查中发现的慢性胃炎的颗粒样改变。结果:胃颗粒样改变的胃镜下表现为结节大小均一、分布密集的特点,多发生于... 目的:观察胃黏膜颗粒样改变与萎缩性胃炎及胃幽门螺旋杆菌感染的特征。方法:通过临床特征、内镜及病理结果,来对比分析胃镜检查中发现的慢性胃炎的颗粒样改变。结果:胃颗粒样改变的胃镜下表现为结节大小均一、分布密集的特点,多发生于年轻女性,几乎都以上腹部疼痛为主诉,并且感染了幽门螺旋杆菌,病理检查有淋巴滤泡而没有萎缩和肠上皮化生。而萎缩性胃炎胃镜下表现为颗粒大小不一,分布松散,多发生于50岁以上男性,主诉有多样性的特点,并且幽门螺旋杆菌检测部分阴性。病理结果有中、重度萎缩和肠上皮化生,而少有淋巴滤泡。结论:拥有颗粒样改变的胃炎是一种新的特殊胃炎,不同于萎缩性胃炎的结节状改变。 展开更多
关键词 颗粒样改变 胃炎 感染特征
在线阅读 下载PDF
改良开放性颗粒样植骨治疗56例感染性骨折不愈合患者的护理
4
作者 蒲有方 刘贵芳 陈娟 《内蒙古中医药》 2013年第29期138-139,共2页
报告了改良开放性颗粒样植骨治疗56例感染性骨折不愈合患者的护理。术前皮肤准备时注意减少皮肤表面损伤,做好床边隔离措施.强调医务人员手卫生,预防院内交叉感染,术后保证创面湿润。仔细观察创面颜色、肉芽组织生长情况;注意取骨区、... 报告了改良开放性颗粒样植骨治疗56例感染性骨折不愈合患者的护理。术前皮肤准备时注意减少皮肤表面损伤,做好床边隔离措施.强调医务人员手卫生,预防院内交叉感染,术后保证创面湿润。仔细观察创面颜色、肉芽组织生长情况;注意取骨区、植皮区的观察与护理,促进切口愈合。本组治疗周期1~6个月,术后随访1月~2年,骨折愈合时间5~16个月,无骨不连发生。 展开更多
关键词 颗粒样植骨 感染性骨折 护理
在线阅读 下载PDF
冠状病毒颗粒样疫苗研究进展 被引量:9
5
作者 宋丽丽 毕玉彧 +2 位作者 甘书钻 孙新宽 磨美兰 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2014年第4期102-106,共5页
冠状病毒主要包括严重急性呼吸道综合征病毒、鸡传染性支气管炎病毒、猪传染性胃肠炎病毒和鼠肝炎病毒等,给人类健康和养殖业带来巨大风险,避免风险的有效手段是研制出高效安全的疫苗。病毒样颗粒是由病毒的一个或多个结构蛋白自动组装... 冠状病毒主要包括严重急性呼吸道综合征病毒、鸡传染性支气管炎病毒、猪传染性胃肠炎病毒和鼠肝炎病毒等,给人类健康和养殖业带来巨大风险,避免风险的有效手段是研制出高效安全的疫苗。病毒样颗粒是由病毒的一个或多个结构蛋白自动组装而成,但不含病毒核酸的空壳结构,具有安全性高、免疫原性好的优点,可作为冠状病毒病的候选疫苗。论文就病毒颗粒样疫苗的免疫机制、冠状病毒的结构蛋白在病毒组装和成熟中的作用、应用杆状病毒表达系统构建病毒样颗粒疫苗的优点、常见冠状病毒的颗粒样疫苗研究概况进行综述,为相关病毒颗粒样疫苗研究提供参考。 展开更多
关键词 冠状病毒 杆状病毒表达系统 病毒颗粒 疫苗
在线阅读 下载PDF
HBc颗粒样呈现载体研究进展
6
作者 田泽维 刘朝霞 董文其 《热带医学杂志》 CAS 2004年第2期215-217,共3页
HBc核壳是由240或180个HBc单体组成的对称性颗粒,免疫原性强,是机体CTL识别的主要靶抗原之一,且具有高表达率、高效装配的特点,作为颗粒样呈现载体能于颗粒表面呈现融合抗原肽,维持天然构象,并增强其免疫原性,在HIV、HBV、HCV、疟原虫... HBc核壳是由240或180个HBc单体组成的对称性颗粒,免疫原性强,是机体CTL识别的主要靶抗原之一,且具有高表达率、高效装配的特点,作为颗粒样呈现载体能于颗粒表面呈现融合抗原肽,维持天然构象,并增强其免疫原性,在HIV、HBV、HCV、疟原虫等疫苗研究中得到广泛研究与应用,是具有巨大研究潜力和应用价值的疫苗载体,本文就HBc核壳结构特点及其作为颗粒样免疫载体的应用作一综述。 展开更多
关键词 HBC 颗粒样呈现载体
在线阅读 下载PDF
可承载CETP多肽表位的颗粒样蛋白表达载体的克隆、表达与分离纯化 被引量:1
7
作者 龙军 吴洁 +1 位作者 曹荣月 刘景晶 《药物生物技术》 CAS CSCD 2006年第4期237-243,共7页
为了提高多肽表位的免疫原性,利用乙肝病毒核心抗原能够在体外自行组装成病毒样颗粒的特性,将人源胆固醇酯转运蛋白羧基端26个氨基酸连同大肠杆菌DnaK基因C端结构域克隆入乙肝病毒核心抗原的免疫优势决定区,并在大肠杆菌BL-21(DE3)表达... 为了提高多肽表位的免疫原性,利用乙肝病毒核心抗原能够在体外自行组装成病毒样颗粒的特性,将人源胆固醇酯转运蛋白羧基端26个氨基酸连同大肠杆菌DnaK基因C端结构域克隆入乙肝病毒核心抗原的免疫优势决定区,并在大肠杆菌BL-21(DE3)表达,以包含体形式存在,经过洗涤、复性和分子筛纯化,获得纯度达90%以上的目的蛋白。纯化的蛋白免疫新西兰大白兔后能够诱导产生高水平的抗胆固醇酯转运蛋白的抗体,表明乙肝病毒核心抗原能够在体外自发装配成多聚体颗粒,并能够将插入其免疫优势决定区的胆固醇酯转运蛋白(CETP)多肽表位展示于颗粒表面以提高免疫原性,显示出其作为疫苗免疫载体的良好前景。 展开更多
关键词 乙肝病毒核心抗原 病毒颗粒 DnaK基因 胆固醇酯转运蛋白 包含体 纯化
在线阅读 下载PDF
重编程人成纤维细胞为诱导型类小脑颗粒样细胞的体外实验研究
8
作者 沈刚 苏作鹏 +2 位作者 全勇 徐福林 徐锋 《临床神经外科杂志》 CAS 2017年第1期30-34,共5页
目的在体外直接诱导重编程获取患者成纤维细胞来源的诱导型类小脑颗粒样细胞(hi CGCs),并研究这些细胞的生物学特征。方法筛选与小脑神经细胞发育、分化相关的诱导因子;构建携带有转录因子的表达载体;以标准皮肤细胞培养流程培养出人头... 目的在体外直接诱导重编程获取患者成纤维细胞来源的诱导型类小脑颗粒样细胞(hi CGCs),并研究这些细胞的生物学特征。方法筛选与小脑神经细胞发育、分化相关的诱导因子;构建携带有转录因子的表达载体;以标准皮肤细胞培养流程培养出人头皮成纤维细胞,使用慢病毒载体介导Ascl1、Sox2和OCT4三个转录因子在胞内表达,并在培养过程中加入神经营养因子:BMP4,FGF8b和Wnt3a;诱导获得具有小脑颗粒神经元特征的hi CGCs。结果经细胞免疫组织化学和电生理检测,证实该hi CGCs具有类似正常小脑颗粒神经元的生物学和生理学特征。使用Ascl1、Sox2和OCT4三个转录因子及BMP4、FGF8b和Wnt3a三种营养因子可将成人成纤维细胞直接转变成为具有小脑颗粒神经元特征的hi CGCs。结论 Hi CGCs在形态上与小脑颗粒神经元非常相似,能够表达小脑颗粒神经元的特异性蛋白,并具有类似正常小脑颗粒神经元的电生理特性。 展开更多
关键词 人诱导型类小脑颗粒样神经细胞 再生医学 谱系重编程
在线阅读 下载PDF
开放颗粒样植骨治疗胫骨近端骨髓炎二例
9
作者 贾翔 高勇军 +1 位作者 张红梅 姜菊霞 《内蒙古医学院学报》 2005年第5期64-,共1页
关键词 胫骨近端 颗粒样 碎骨块 骨髓炎 多骨疽
在线阅读 下载PDF
猪圆环病毒2型病毒样颗粒三倍轴区域嵌合猪细小病毒抗原表位的展示策略及免疫原性
10
作者 蔡云凤 李宏 +8 位作者 黄小铭 何庆 丁振宇 余婉婷 罗施乐 陈方志 王乃东 杨毅 湛洋 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第1期307-318,共12页
为了探索猪圆环病毒2型(porcine circovirus type 2, PCV2)病毒样颗粒三倍轴区域展示外源抗原表位的潜力,本研究借助结构模拟和蛋白质的三维结构展示,分析了PCV2核衣壳表面氨基酸残基突变后的结构差异。通过分析不同cap基因突变质粒在... 为了探索猪圆环病毒2型(porcine circovirus type 2, PCV2)病毒样颗粒三倍轴区域展示外源抗原表位的潜力,本研究借助结构模拟和蛋白质的三维结构展示,分析了PCV2核衣壳表面氨基酸残基突变后的结构差异。通过分析不同cap基因突变质粒在大肠杆菌表达系统中所表达的突变体蛋白的可溶性和纯化难易程度,确定合适的外源表位嵌合区。将嵌合PPV抗原表位的Cap蛋白经体外组装获得重组的病毒样颗粒,将此病毒样颗粒免疫小鼠,通过抗体检测来评价其免疫原性。结果显示,PCV2核衣壳表面三倍轴区域存在两个适合用于展示外源表位的氨基酸区域(分别命名为Motif A和Motif B),相同表达条件下,Motif A区域的突变蛋白均以可溶性表达为主,且能一步纯化获得目的蛋白,而Motif B区域的突变蛋白多以包涵体形式存在;Motif A区域嵌合PPV表位后,纯化的重组蛋白能在体外组装成cVLPs,并通过间接免疫荧光试验证明其保留有野生型VLPs内化PK15细胞的能力;形成的cVLPs能刺激小鼠机体产生分别针对PCV2 VLPs、B5-E1表位和PPV VP2蛋白的抗体。综上表明,PCV2 Cap蛋白Loop GH区域Motif A能够将外源表位展示在病毒样颗粒外表面,并且能够被机体免疫细胞识别产生特异性抗体。 展开更多
关键词 猪圆环病毒2型 病毒颗粒 三倍轴区域 外源表位
在线阅读 下载PDF
电阻法测定人乳头瘤病毒病毒样颗粒的粒径
11
作者 路琼 纳涛 +1 位作者 黄维金 聂建辉 《药学研究》 2025年第2期123-126,共4页
目的建立电阻法测定病毒样颗粒粒径的方法。方法采用库尔特纳米粒度仪对人乳头瘤病毒(human papilloma virus,HPV)疫苗原液的粒径进行测定。从准确性、精密度和重复性进行方法学验证同时与负染电镜结果比较。结果100 nm标准微球平均粒径... 目的建立电阻法测定病毒样颗粒粒径的方法。方法采用库尔特纳米粒度仪对人乳头瘤病毒(human papilloma virus,HPV)疫苗原液的粒径进行测定。从准确性、精密度和重复性进行方法学验证同时与负染电镜结果比较。结果100 nm标准微球平均粒径为(102.00±0.00)nm,测定6次结果为(102.33±0.52)nm。样品测定6次,结果为(78.67±1.37)nm。表明该方法具有较好的准确性、精密度和重复性。样品测量结果与负染电镜结果相当。样品56℃放置30 min,大颗粒最多。结论电阻法可用于病毒样颗粒产品的粒径检测、粒度分布和稳定性监测。 展开更多
关键词 库尔特电阻法 人乳头瘤病毒 粒径与粒径分布 病毒颗粒
在线阅读 下载PDF
杆状病毒-昆虫表达系统(IBEVS)表达的动物病毒样颗粒及疫苗研究进展
12
作者 王炎 高婉宁 +3 位作者 范益阳 玉妹 张德荣 柏家林 《江苏农业学报》 北大核心 2025年第1期203-208,共6页
杆状病毒-昆虫表达系统(IBEVS)是一种高效的外源蛋白表达平台,具有可以容纳较大的外源基因片段、蛋白质表达量较高、支持蛋白质翻译后修饰、操作简便且安全性较高等优势,已被广泛用于兽用疫苗生产。病毒样颗粒(VLP)是一种由病毒蛋白自... 杆状病毒-昆虫表达系统(IBEVS)是一种高效的外源蛋白表达平台,具有可以容纳较大的外源基因片段、蛋白质表达量较高、支持蛋白质翻译后修饰、操作简便且安全性较高等优势,已被广泛用于兽用疫苗生产。病毒样颗粒(VLP)是一种由病毒蛋白自组装形成的纳米颗粒,由于缺乏病毒遗传物质,其安全性较高。VLP表面抗原排列高度有序,可有效诱导免疫反应,是一种新型的亚单位疫苗。本文综述了IBEVS在动物VLP疫苗中的应用现状,分析了当前IBEVS存在的问题及其解决策略,为动物VLP疫苗的进一步开发提供参考。 展开更多
关键词 病毒颗粒 杆状病毒-昆虫表达系统(IBEVS) 动物病毒颗粒疫苗
在线阅读 下载PDF
蓝莓来源的外泌体样纳米颗粒在MNNG诱导人正常胃黏膜上皮细胞恶性转化中的干预效应
13
作者 宋佳佳 张轩 +3 位作者 高子涵 许文荣 钱晖 梁照锋 《江苏大学学报(医学版)》 2025年第1期52-55,61,共5页
目的:提取蓝莓来源的外泌体样纳米颗粒(blueberry derived exosome-like nanoparticles,BELNs)并进行鉴定,探讨BELNs在1-甲基-3-硝基-1-亚硝基胍(N-methyl-N′-nitro-N-nitrosoguallidine,MNNG)诱导人正常胃黏膜上皮细胞恶性转化中的干... 目的:提取蓝莓来源的外泌体样纳米颗粒(blueberry derived exosome-like nanoparticles,BELNs)并进行鉴定,探讨BELNs在1-甲基-3-硝基-1-亚硝基胍(N-methyl-N′-nitro-N-nitrosoguallidine,MNNG)诱导人正常胃黏膜上皮细胞恶性转化中的干预效应。方法:采用超速离心法提取BELNs,纳米颗粒跟踪分析仪和透射电镜分别从粒径、Zeta电位、形态对获取的BELNs进行鉴定;激光共聚焦显微镜观察BELNs能否被MNNG诱导的人正常胃黏膜上皮细胞,即胃黏膜上皮细胞转化细胞(transformed gastric mucosal epithelial cells,TGES-1)内吞;用200、400μg/mL的BELNs处理TGES-1细胞72 h后,蛋白质印迹法分析干性基因、上皮细胞间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)及增殖相关蛋白表达的变化。结果:纳米颗粒跟踪分析仪和透射电镜等结果显示BELNs符合外泌体样纳米颗粒的特征,表明成功提取BELNs;激光共聚焦显微镜结果提示BELNs可被TGES-1细胞内吞;蛋白印迹结果表明,400μg/mL的BELNs抑制TGES-1细胞中N-钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、同源框蛋白(Nanog)和增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)的表达,增强E-钙黏蛋白(E-cadherin)的表达。结论:BELNs在MNNG诱导人正常胃黏膜上皮细胞恶性转化中具有明显的干预效应。 展开更多
关键词 蓝莓来源的外泌体纳米颗粒 1-甲基-3-硝基-1-亚硝基胍 胃黏膜上皮细胞 恶性转化 干预效应
在线阅读 下载PDF
家蚕中猪细小病毒病毒样颗粒的制备 被引量:1
14
作者 吕慧芳 王雅诗 +7 位作者 张刘涛 赵丽 彭志锋 陈忠杰 宋幸辉 王瑞宁 卢婷婷 董望 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2024年第7期20-25,共6页
为了防控猪细小病毒(PPV)感染,本试验利用家蚕杆状病毒表达系统制备PPV病毒样颗粒(VLPs)。首先扩增PPV结构蛋白VP2基因,克隆至pFastBacⅠ载体中,构建转移载体pFastBacⅠ-VP2,将转移载体pFastBacⅠ-VP2转化大肠杆菌制备重组杆粒(Bacmid)... 为了防控猪细小病毒(PPV)感染,本试验利用家蚕杆状病毒表达系统制备PPV病毒样颗粒(VLPs)。首先扩增PPV结构蛋白VP2基因,克隆至pFastBacⅠ载体中,构建转移载体pFastBacⅠ-VP2,将转移载体pFastBacⅠ-VP2转化大肠杆菌制备重组杆粒(Bacmid)。将Bacmid转染家蚕卵巢(BmN)细胞,制备重组杆状病毒。利用Western blot鉴定VP2蛋白的表达,采用透射电子显微镜观察PPV VLPs形态,血凝试验检测PPV VLPs的效价。将含有PPV VP2基因的重组杆状病毒注射家蚕幼虫制备PPV VLPs,并对家蚕中PPV VLPs进行鉴定。结果显示:BmN细胞样品和家蚕幼虫样品的Western blot检测,均可见64 kDa处存在VP2目的条带;在透射电子显微镜下可观察到约23 nm的PPV VLPs。BmN细胞中制备的PPV VLPs的血凝效价为1∶2~6,家蚕中制备的PPV VLPs的血凝效价为1∶2~9,其效价高于BmN细胞中制备的PPV VLPs效价。结果表明,本试验在家蚕中成功制备PPV VLPs,且具有良好的生物学活性,为PPV VLPs疫苗的研发提供了数据支持。 展开更多
关键词 猪细小病毒 病毒颗粒 VP2 家蚕
在线阅读 下载PDF
基于病毒样颗粒的癌症疫苗研究进展
15
作者 舒星富 陈遥 +4 位作者 马小梅 苏津贤 柏家林 张海霞 马忠仁 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期1590-1594,共5页
癌症的主动免疫治疗旨在通过诱导有效的细胞免疫和体液免疫治疗疾病。近年针对病毒样颗粒(VLPs)疫苗的研究取得了巨大发展,极大降低了一些传染病的发病率和死亡率。VLPs是由一种或多种结构蛋白自组装而成的纳米颗粒,具有高度有序的重复... 癌症的主动免疫治疗旨在通过诱导有效的细胞免疫和体液免疫治疗疾病。近年针对病毒样颗粒(VLPs)疫苗的研究取得了巨大发展,极大降低了一些传染病的发病率和死亡率。VLPs是由一种或多种结构蛋白自组装而成的纳米颗粒,具有高度有序的重复序列及良好的免疫原性,可诱导较强的细胞免疫和体液免疫应答。VLPs可以克服肿瘤微环境的免疫抑制状态,打破自我耐受,引发强烈的细胞毒性T淋巴细胞活性,对病毒清除和肿瘤细胞破坏至关重要。本文主要综述目前基于VLPs的癌症疫苗研究进展,以及VLPs作为疫苗载体在癌症疫苗开发中的潜在缺陷。 展开更多
关键词 肿瘤 疫苗 病毒颗粒
在线阅读 下载PDF
病毒样颗粒常用表达系统及应用研究进展
16
作者 舒星富 陈遥 +4 位作者 苏津贤 马小梅 柏家林 马忠仁 张海霞 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第10期2194-2201,共8页
病毒样颗粒(VLPs)是由一种或多种病毒结构蛋白自组装而成的纳米颗粒,这些结构蛋白可以排列成几层,也可以包含脂质外膜。由于缺乏遗传物质,因此VLPs无法感染宿主细胞,但其具有高度的免疫原性,能够诱导不同于常规灭活疫苗的免疫应答。VLP... 病毒样颗粒(VLPs)是由一种或多种病毒结构蛋白自组装而成的纳米颗粒,这些结构蛋白可以排列成几层,也可以包含脂质外膜。由于缺乏遗传物质,因此VLPs无法感染宿主细胞,但其具有高度的免疫原性,能够诱导不同于常规灭活疫苗的免疫应答。VLPs可利用包括细菌、酵母、植物、昆虫和哺乳动物细胞等多种系统进行生产。与传统疫苗相比,VLPs具有不可比拟的优势,因此在生物医学领域越来越受欢迎。迄今为止,已开发出一系列基于VLPs的候选疫苗,用于免疫和预防各类传染病。同时,最近VLPs因在靶向药物传递和基因治疗的成功应用而受到关注。本文主要综述了VLPs的常用表达系统及应用研究进展。 展开更多
关键词 病毒颗粒 表达系统 疫苗 药物传递
在线阅读 下载PDF
植物类外泌体样纳米颗粒特性、成分与功能研究进展 被引量:1
17
作者 陈春苹 徐红艳 +2 位作者 刘帅辰 田雨欣 王羽琛 《食品与机械》 CSCD 北大核心 2024年第1期226-233,共8页
类外泌体样纳米颗粒(exosome-like nanoparticles,ELNs)是细胞所分泌的纳米级小泡,双层磷脂包围的囊泡状结构,携带独特的生物活性物质(如脂质、蛋白质、miRNAs和次级代谢物等)。植物ELNs因其特殊的结构和良好的生理活性,关于其展开的研... 类外泌体样纳米颗粒(exosome-like nanoparticles,ELNs)是细胞所分泌的纳米级小泡,双层磷脂包围的囊泡状结构,携带独特的生物活性物质(如脂质、蛋白质、miRNAs和次级代谢物等)。植物ELNs因其特殊的结构和良好的生理活性,关于其展开的研究受到了广泛关注。文章综述了植物ELNs的分离方法、特性、组成成分及功能作用,重点阐述了多组学技术在植物ELNs中的应用,并对植物ELNs的深入研究提出了建议。 展开更多
关键词 类外泌体纳米颗粒 特性 组成成分 组学分析 功能作用
在线阅读 下载PDF
表达CSFV E2线性表位的PCV2病毒样颗粒的制备及免疫原性研究
18
作者 李岩岩 张帅 +5 位作者 赵云环 任晓祥 李思琪 王文钊 左玉柱 范京惠 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期70-77,共8页
为制备携带猪瘟病毒(CSFV)E2蛋白的猪圆环病毒2型(PCV2)病毒样颗粒(VLP),并在小鼠体内评价其免疫原性,本研究采用PCR扩增PCV2 Cap基因,利用重叠延伸PCR将PCV2 Cap蛋白的诱饵表位(aa169~aa180)替换成编码两个连续的CSFV E2蛋白线性表位(a... 为制备携带猪瘟病毒(CSFV)E2蛋白的猪圆环病毒2型(PCV2)病毒样颗粒(VLP),并在小鼠体内评价其免疫原性,本研究采用PCR扩增PCV2 Cap基因,利用重叠延伸PCR将PCV2 Cap蛋白的诱饵表位(aa169~aa180)替换成编码两个连续的CSFV E2蛋白线性表位(aa829~aa837)的融合基因(PCV2-Cap^(169~180)-E2^(829~837))经测序鉴定正确后克隆至载体pET-32a(+)中,构建重组质粒p-Cap-E2并采用PCR方法鉴定正确后转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达重组蛋白(PCV2-Cap-E2),采用改良的镍亲和层析法纯化重组蛋白,并利用SDS-PAGE与western blot对重组蛋白的表达形式及反应原性鉴定;利用透射电镜观察纯化的重组蛋白能否形成VLP;利用本研究制备的VLP、PCV2及CSFV商品化疫苗分别免疫小鼠,采用ELISA方法检测免疫后不同时间小鼠体内的抗体水平及细胞因子含量。SDS-PAGE结果显示,在49 ku处出现目的条带,且重组蛋白主要以可溶性形式表达,纯化得到单一的目的蛋白;western blot结果显示,重组蛋白能够与猪源PCV2多克隆抗体(PAb)、猪源CSFV PAb及HRP标记的6×His-Tag小鼠单克隆抗体(MAb)发生特异性反应,在49 ku处出现特异性条带;电镜观察可见重组蛋白形成规则的VLP;抗体的ELISA结果显示,与PBS对照相比,VLP能够诱导小鼠产生较高的PCV2及CSFV抗体水平(P<0.01),与各商品化疫苗均无显著差异。细胞因子的ELISA结果显示,与PBS对照组相比,VLP能够诱导小鼠产生较高水平的细胞因子(P<0.01)。体外病毒中和试验结果显示,VLP免疫的小鼠血清中具有中和PCV2的活性。综上所述,本实验首次在大肠杆菌中可溶性表达并获得了纯化的重组蛋白(PCV2-Cap-E2),且其能够在体外自组装成VLP,并可刺激小鼠产生针对PCV2 Cap蛋白及CSFV E2蛋白的特异性抗体,为研制针对PCV2和CSFV的新型二联VLP疫苗提供了物质基础。 展开更多
关键词 猪圆环病毒2型 病毒颗粒 猪瘟病毒E2蛋白 CAP蛋白
在线阅读 下载PDF
QX型传染性支气管炎病毒病毒样颗粒的制备与初步评价
19
作者 张梦寒 程敏 +5 位作者 陈杨 薄宗义 张成成 郭梦娇 吴艳涛 张小荣 《中国家禽》 北大核心 2024年第5期46-55,共10页
研究旨在制备一种针对QX型传染性支气管炎病毒(Infectious bronchitis virus,IBV)的病毒样颗粒(Virus-like particle,VLP)疫苗并对其免疫保护效果进行初步评价。试验首先构建了分别表达QX型IBV S蛋白(QXLS)、M蛋白(QXLM)和E蛋白(QXLE)... 研究旨在制备一种针对QX型传染性支气管炎病毒(Infectious bronchitis virus,IBV)的病毒样颗粒(Virus-like particle,VLP)疫苗并对其免疫保护效果进行初步评价。试验首先构建了分别表达QX型IBV S蛋白(QXLS)、M蛋白(QXLM)和E蛋白(QXLE)的三种重组杆状病毒rBacmid-QXLS、rBacmid-QXLM和rBacmid-QXLE,并通过间接免疫荧光试验(IFA)和West-ern blot鉴定目的蛋白的表达;进一步将3种重组杆状病毒通过适当比例共感染Sf9细胞获得VLP,经蔗糖密度梯度离心纯化后使用透射电子显微镜观察鉴定VLP的组装效果;最后将纯化的VLP与氢氧化铝佐剂混合制成疫苗免疫SPF鸡进行免疫保护效果评价。结果显示:S、M和E三种目的蛋白均能成功表达,透射电子显微镜观察可见组装形成的VLP呈现典型的椭圆形病毒样结构,直径为80~120 nm;单独VLP疫苗免疫具有一定的免疫保护效果,QXL87+VLP疫苗联合免疫保护效果较好,可有效减轻临床病变、降低气管和泄殖腔排毒量及组织器官载毒量。研究表明,试验已经成功制备出QX型IBV VLP,且具有良好的免疫原性,为后续进一步研制基于VLP技术的QX型IBV基因工程疫苗奠定了基础。 展开更多
关键词 IBV QX型 病毒颗粒 重组杆状病毒
在线阅读 下载PDF
布鲁氏菌BP26蛋白细菌样颗粒疫苗的制备和免疫学评价
20
作者 林海 涂飞 +4 位作者 李楠 孙洋 姜博文 纪雪 刘军 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2024年第6期37-46,共10页
为了构建布鲁氏菌外膜蛋白BP26细菌样颗粒候选疫苗BLPs-BP26,并评价其免疫原性,本试验首先分别扩增羊种布鲁氏菌16M株编码BP26蛋白的整个基因序列和乳酸乳球菌MG1363株编码肽聚糖锚钩蛋白(PA)的整个基因序列,通过重叠延伸PCR技术将bp26... 为了构建布鲁氏菌外膜蛋白BP26细菌样颗粒候选疫苗BLPs-BP26,并评价其免疫原性,本试验首先分别扩增羊种布鲁氏菌16M株编码BP26蛋白的整个基因序列和乳酸乳球菌MG1363株编码肽聚糖锚钩蛋白(PA)的整个基因序列,通过重叠延伸PCR技术将bp26基因与PA基因连接构建融合基因bp26-PA,将融合基因bp26-PA克隆至pET-28a原核表达载体并诱导表达融合蛋白BP26-PA。将表达正确的BP26-PA融合蛋白与细菌样颗粒(BLPs)结合构建BLPs-BP26,通过SDS-PAGE、Western blot、间接免疫荧光和冷冻超薄切片对BLPs-BP26进行鉴定。将BLPs-BP26免疫小鼠,通过酶联免疫吸附试验(ELISA)检测小鼠特异性IgG抗体水平,实时荧光定量反转录PCR(RT-qPCR)分析免疫小鼠脾脏组织中干扰素γ(IFN-γ)和白介素2(IL-2)的基因转录水平,ELISA方法检测免疫小鼠血清中IFN-γ和IL-2的蛋白表达水平。鉴定结果显示,BP26-PA蛋白成功展示在BLPs表面;免疫小鼠试验结果显示,小鼠血清特异性IgG抗体效价最高可达1∶1 024 000;与PBS组相比,BLPs-BP26组免疫小鼠脾脏组织中IFN-γ和IL-2基因的转录水平均极显著升高(P值分别为P<0.000 1和P<0.01),小鼠血清中IFN-γ的表达水平极显著升高(P<0.000 1)。结果表明,BLPs-BP26能刺激小鼠产生高水平的特异性IgG抗体,并可诱导小鼠产生细胞免疫应答。本试验为开发具有良好免疫原性且无安全隐患的布鲁氏菌新型疫苗提供了新的思路。 展开更多
关键词 表面展示技术 布鲁氏菌 BP26蛋白 细菌颗粒疫苗
在线阅读 下载PDF
上一页 1 2 43 下一页 到第
使用帮助 返回顶部