目的:构建炭疽毒素保护性抗原第四结构域PA4基因的重组Sem lik i森林病毒(Sem lik i forest virus,SFV)复制子载体,并观察PA4抗原在重组SFV复制子载体中的表达。方法:将PA4基因克隆到基于RNA和DNA的SFV复制子表达载体中,获得的重组SFV...目的:构建炭疽毒素保护性抗原第四结构域PA4基因的重组Sem lik i森林病毒(Sem lik i forest virus,SFV)复制子载体,并观察PA4抗原在重组SFV复制子载体中的表达。方法:将PA4基因克隆到基于RNA和DNA的SFV复制子表达载体中,获得的重组SFV复制子载体直接转染BHK21细胞,通过间接免疫荧光和W estern印迹试验检测PA4在细胞中的表达;与辅助病毒载体共转染制备重组病毒颗粒,通过间接免疫荧光和W estern印迹检测PA4在重组病毒颗粒感染细胞中的表达。结果与结论:成功地构建了基于RNA和DNA的PA4重组SFV复制子载体,并且在体外基于RNA和DNA的重组SFV复制子表达载体能够在细胞中有效地表达非分泌型和分泌型的PA4抗原,制备了具有感染能力并能表达PA4抗原的重组病毒颗粒,为进一步以SFV复制子作疫苗载体观察炭疽新型复制子疫苗的免疫原性奠定了基础。展开更多
文摘目的:构建炭疽毒素保护性抗原第四结构域PA4基因的重组Sem lik i森林病毒(Sem lik i forest virus,SFV)复制子载体,并观察PA4抗原在重组SFV复制子载体中的表达。方法:将PA4基因克隆到基于RNA和DNA的SFV复制子表达载体中,获得的重组SFV复制子载体直接转染BHK21细胞,通过间接免疫荧光和W estern印迹试验检测PA4在细胞中的表达;与辅助病毒载体共转染制备重组病毒颗粒,通过间接免疫荧光和W estern印迹检测PA4在重组病毒颗粒感染细胞中的表达。结果与结论:成功地构建了基于RNA和DNA的PA4重组SFV复制子载体,并且在体外基于RNA和DNA的重组SFV复制子表达载体能够在细胞中有效地表达非分泌型和分泌型的PA4抗原,制备了具有感染能力并能表达PA4抗原的重组病毒颗粒,为进一步以SFV复制子作疫苗载体观察炭疽新型复制子疫苗的免疫原性奠定了基础。
