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多房棘球蚴病特异性诊断抗原Em18的基因克隆、表达和血清学评价 被引量:18
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作者 江莉 冯正 +2 位作者 薛海筹 许学年 裘丽姝 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期193-198,共6页
目的 克隆从我国四川省分离的多房棘球绦虫Em18抗原基因片段 ,表达重组抗原 ,用于多房棘球蚴病(AE)的诊断 ,并用患者血清对其诊断价值进行评价。 方法 PCR扩增目的基因片段与质粒载体 pET2 8a (+ )连接构建表达质粒 ,转化大肠埃希菌B... 目的 克隆从我国四川省分离的多房棘球绦虫Em18抗原基因片段 ,表达重组抗原 ,用于多房棘球蚴病(AE)的诊断 ,并用患者血清对其诊断价值进行评价。 方法 PCR扩增目的基因片段与质粒载体 pET2 8a (+ )连接构建表达质粒 ,转化大肠埃希菌BL2 1(DE3 )菌株表达重组蛋白 ,用镍 次氮基三乙酸琼脂糖树脂 (NI NTAagarose)亲和层析纯化重组抗原 ,酶联免疫吸附测定 (ELISA)评价重组抗原的血清学诊断效果。 结果 获得两个高效表达克隆ReEm18 1和ReEm 18 2。其中ReEm18 1与预期序列一致 ,ReEm18 2为同一序列 ,但有 2 7bp的核苷酸缺失。两个克隆表达的融合蛋白相对分子质量 (Mr)分别为 2 80 0 0和 2 60 0 0。对 10 1例AE、 47例细粒棘球蚴病、3 0例囊尾蚴病、 10例肝癌、 9例血吸虫病和 40名健康人共 2 3 7份血清进行ELISA检测 ,结果显示 ,ReEm18 1和ReEm 18 2重组抗原对AE血清诊断的敏感性为 86 1%和 90 1%、特异性为 93 4%和 94 1%、阳性预期值为 90 6%和 91 9%、阴性预期值为 90 1%和 92 8%、诊断效率分别为 90 3 %和 92 4% ;对 5 8例AE患者肝脏病灶大小与重组抗原检测血清平均吸光度 (A )的相关性比较分析结果表明 ,抗体反应水平在病程早期有较好的相关性。 展开更多
关键词 重组抗原 特异性诊断抗原 表达 血清 棘球蚴病 患者 病程 性比 基因克隆 ELISA检测
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旋毛虫肌幼虫排泄分泌物中特异性诊断抗原的研究 被引量:45
2
作者 崔晶 王中全 张灯 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期268-271,共4页
目的 寻找旋毛虫肌幼虫排泄分泌 (ES)物中的特异性诊断抗原。 方法 应用SDS PAGE和Western印迹对旋毛虫肌幼虫体外培养 18、3 0h后的ES抗原中的蛋白组分进行研究。 结果 旋毛虫肌幼虫培养 18、3 0h后得到的ES抗原组分大致相同 ,两... 目的 寻找旋毛虫肌幼虫排泄分泌 (ES)物中的特异性诊断抗原。 方法 应用SDS PAGE和Western印迹对旋毛虫肌幼虫体外培养 18、3 0h后的ES抗原中的蛋白组分进行研究。 结果 旋毛虫肌幼虫培养 18、3 0h后得到的ES抗原组分大致相同 ,两种ES抗原中主要蛋白带的分子量为 112、110、10 8、97、5 3、49、45、42、3 5、2 3和 16kDa。18hES抗原中的 10 2、97、95和 5 3kDa以及 3 0hES抗原中的 5 3、49、45和 43kDa均与并殖吸虫病、华支睾吸虫病、日本血吸虫病及囊尾蚴病患者血清发生明显的交叉反应。ES抗原中的 2 3kDa蛋白组分只与旋毛虫感染的大鼠、小鼠及患者血清反应 ,而不与上述其它寄生虫感染者、正常大鼠和小鼠及正常人血清发生交叉反应。 结论 旋毛虫肌幼虫ES抗原中的 2 3kDa蛋白组分为旋毛虫肌幼虫的特异性抗原 ,可用于旋毛虫病的血清学诊断及血清流行病学调查。 展开更多
关键词 旋毛虫 肌幼虫 排泄分泌物 特异性诊断抗原 SDS-PAGE
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非洲猪瘟病毒E183L、B602L、K205R和A104R基因表达及诊断抗原筛选 被引量:11
3
作者 张鑫宇 陈宇 +2 位作者 刘文俊 夏晓莉 孙怀昌 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2014年第3期3-5,9,共4页
为了获得非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)重组蛋白pK205R、pE183L、pA104R和pB602L,将Ba71V株的K205R、E183L、A104R和B602L基因分别亚克隆进行原核表达载体pET30a(+),构建重组质粒pET-E183L、pET-B602L、pET-K205R和pET-... 为了获得非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)重组蛋白pK205R、pE183L、pA104R和pB602L,将Ba71V株的K205R、E183L、A104R和B602L基因分别亚克隆进行原核表达载体pET30a(+),构建重组质粒pET-E183L、pET-B602L、pET-K205R和pET-A104R,转化大肠杆菌感受态细胞BL21(DE3)。IPTG诱导后,纯化表达的蛋白,并进行Western blotting鉴定,结果4种重组蛋白与预期大小一致,且与ASFV抗体发生特异性反应。为了从表达的4种重组蛋白中筛选最佳诊断抗原,将其分别包被酶标板,间接ELISA检测ASFV阳性血清,发现重组蛋白pK205R、p54和pB602L血清学反应良好;在检测ASFV感染后第13天分离血清时,重组蛋白p54和pK205R效果更佳,这表明p54和pK205R重组蛋白是较好的诊断抗原,可用于ASFV感染后早期或中后期血清学诊断。 展开更多
关键词 非洲猪瘟病毒 重组蛋白 诊断抗原
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用噬菌体十二肽库筛选日本血吸虫病诊断抗原 被引量:5
4
作者 朱晓华 姜昌富 +3 位作者 魏兰英 雷家慧 时红波 潘虹 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期275-278,共4页
目的 从噬菌体十二肽库中筛选出特异、灵敏的日本血吸虫病诊断抗原。 方法 以日本血吸虫急感患者血清免疫球蛋白 (Ig)作为靶分子 ,免疫筛选噬菌体随机十二肽库。经过 3轮吸附 洗脱 扩增的淘筛过程 ,随机挑取 10个蓝色噬菌斑扩增 ,... 目的 从噬菌体十二肽库中筛选出特异、灵敏的日本血吸虫病诊断抗原。 方法 以日本血吸虫急感患者血清免疫球蛋白 (Ig)作为靶分子 ,免疫筛选噬菌体随机十二肽库。经过 3轮吸附 洗脱 扩增的淘筛过程 ,随机挑取 10个蓝色噬菌斑扩增 ,用ELISA检测其免疫活性 ,并通过对并殖吸虫病及旋毛虫病患者血清的检测分析其诊断日本血吸虫病的价值。 结果  6个克隆可以与日本血吸虫急感患者血清免疫球蛋白 (Ig)特异结合。其中A492 值最高的克隆(SjA1)具有较好的特异性和灵敏性。  结论 从噬菌体随机十二肽库中筛选到的克隆对日本血吸虫病具有较高的诊断价值。 展开更多
关键词 噬菌体十二肽库 筛选 日本血吸虫病 诊断抗原 免疫球蛋白
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胸膜肺炎放线杆菌诊断抗原的制备及初步临床应用 被引量:4
5
作者 陈凡 何启盖 +4 位作者 陈焕春 吴斌 刘正飞 Ross Bowle Pat Blackall 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期478-482,共5页
利用14个血清型的胸膜肺炎放线杆菌的标准菌株制备诊断抗原,通过玻片凝集试验,琼脂扩散试验和对流免疫电泳,以标准抗血清作为参考,检验各种诊断抗原的灵敏性和特异性。分别用凝集抗原、超声波处理抗原和酚水抗原对来自湖北、湖南、江西... 利用14个血清型的胸膜肺炎放线杆菌的标准菌株制备诊断抗原,通过玻片凝集试验,琼脂扩散试验和对流免疫电泳,以标准抗血清作为参考,检验各种诊断抗原的灵敏性和特异性。分别用凝集抗原、超声波处理抗原和酚水抗原对来自湖北、湖南、江西、河南、安徽5省猪场的155份送检血清进行检测。结果表明可以对送检血清快速、准确地进行鉴别诊断和血清分型。 展开更多
关键词 胸膜肺炎 放线杆菌 诊断抗原 灵敏性 特异性 血清
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细粒棘球蚴病诊断抗原研究进展 被引量:8
6
作者 安晓雪 余华 +1 位作者 严玉宝 杨光友 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2010年第4期85-89,共5页
细粒棘球蚴病严重危害人畜健康,给畜牧业造成巨大经济损失。该病的早期诊断有很重要的意义。囊液抗原、原头节抗原和囊壁抗原等天然抗原是用于该病诊断的主要抗原,但存在敏感性差、特异性弱等缺点。近年来,人们合成了AgB、Ag5、EpC1、Eg... 细粒棘球蚴病严重危害人畜健康,给畜牧业造成巨大经济损失。该病的早期诊断有很重要的意义。囊液抗原、原头节抗原和囊壁抗原等天然抗原是用于该病诊断的主要抗原,但存在敏感性差、特异性弱等缺点。近年来,人们合成了AgB、Ag5、EpC1、EgTPx等重组抗原,将其用于诊断,并获得了较高的敏感性和特异性。论文将用于诊断的天然抗原和重组抗原进行了综述。 展开更多
关键词 细粒棘球蚴病 诊断抗原 囊液抗原 重组抗原
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细粒棘球绦虫(中国大陆株)诊断抗原P-29基因的表达、纯化及免疫原性初步分析 被引量:4
7
作者 师志云 李昭宇 +4 位作者 卜阳 王娅娜 李宗吉 马锐 赵巍 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第11期1065-1067,共3页
目的对细粒棘球绦虫(Echinococcus granulosus,Eg)诊断抗原P-29(diagnostic antigen P-29)重组质粒进行原核表达、纯化,并初步分析重组蛋白的免疫原性。方法从重组质粒EgP-29/pGEM-T中获取诊断抗原P-29基因,亚克隆于表达载体pET-28a构... 目的对细粒棘球绦虫(Echinococcus granulosus,Eg)诊断抗原P-29(diagnostic antigen P-29)重组质粒进行原核表达、纯化,并初步分析重组蛋白的免疫原性。方法从重组质粒EgP-29/pGEM-T中获取诊断抗原P-29基因,亚克隆于表达载体pET-28a构建基因工程菌株,并表达、纯化重组蛋白,经Western-blot、ELISA分析重组蛋白的免疫原性。结果成功构建原核重组表达载体EgP-29/pET-28a/BL21(DE3)plysS,并纯化出浓度较高的重组蛋白。ELISA检测显示,用表达、纯化的重组蛋白免疫小鼠,诱导产生了特异性抗体IgG,Western-blotting鉴定该抗体能识别重组抗原及天然抗原原头蚴。结论重组蛋白具有良好的免疫原性。 展开更多
关键词 细粒棘球绦虫 诊断抗原P-29基因 蛋白表达 纯化 免疫原性
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以P33重组蛋白为诊断抗原建立牛瑟氏泰勒虫病乳胶凝集试验 被引量:11
8
作者 许应天 张守发 +1 位作者 郑寓硕 张桓 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期347-349,共3页
本试验用P33重组蛋白建立了牛瑟氏泰勒虫病乳胶凝集试验。对81份被检血清的检测结果,阳性率为44.4%,明显高于血涂片镜检法的21.0%(P<0.01),而且在该病流行地区的不同牧场、不同性别和不同年龄牛的阳性率之间未见显著差异。试验表明,... 本试验用P33重组蛋白建立了牛瑟氏泰勒虫病乳胶凝集试验。对81份被检血清的检测结果,阳性率为44.4%,明显高于血涂片镜检法的21.0%(P<0.01),而且在该病流行地区的不同牧场、不同性别和不同年龄牛的阳性率之间未见显著差异。试验表明,以P33重组蛋白作为诊断抗原具有特异性强、抗原易纯化和成本低等优点。 展开更多
关键词 瑟氏泰勒虫病 乳胶凝集试验 P33重组蛋白 诊断抗原
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猪传染性萎缩性鼻炎微量凝集反应诊断抗原的制备 被引量:8
9
作者 鲁承 金鑫 扬咏洁 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2003年第11期38-39,共2页
试验制备了猪支气管败血波氏杆菌微量凝集反应用诊断抗原 ,对延边州内某猪场的 6 4份血清进行了猪传染性萎缩性鼻炎的微量凝集反应 ,检出阳性血清 2 6份 (40 .6 3% )。应用甲醛灭活的免疫原免疫家兔 ,制备了抗支气管败血波氏杆菌阳性血... 试验制备了猪支气管败血波氏杆菌微量凝集反应用诊断抗原 ,对延边州内某猪场的 6 4份血清进行了猪传染性萎缩性鼻炎的微量凝集反应 ,检出阳性血清 2 6份 (40 .6 3% )。应用甲醛灭活的免疫原免疫家兔 ,制备了抗支气管败血波氏杆菌阳性血清 ,其抗体效价可达 1∶12 80。 展开更多
关键词 传染性萎缩性鼻炎 微量凝集反应 诊断抗原 制备
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水貂阿留申病基因工程诊断抗原的制备 被引量:3
10
作者 张蕾 柴秀丽 +9 位作者 冯佩平 张海玲 胡博 白雪 赵建军 冯卓 王振军 徐磊 闫喜军 吴威 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2015年第7期1686-1691,共6页
本研究旨在建立一种生产水貂阿留申病(Aleutian disease,AD)诊断抗原的新方法。试验提取水貂阿留申病毒(Aleutian disease virus,ADV)的基因组,PCR扩增ADV核衣壳蛋白VP2基因,构建重组表达质粒BacmidVP2,脂质体介导其转染昆虫细胞Sf9获... 本研究旨在建立一种生产水貂阿留申病(Aleutian disease,AD)诊断抗原的新方法。试验提取水貂阿留申病毒(Aleutian disease virus,ADV)的基因组,PCR扩增ADV核衣壳蛋白VP2基因,构建重组表达质粒BacmidVP2,脂质体介导其转染昆虫细胞Sf9获得重组杆状病毒AcMVPV-VP2。电镜下观察表达的VP2蛋白,Western blotting检测目的蛋白的反应原性。以传统接毒方法生产的AD诊断抗原作对照,通过对流免疫电泳试验检测表达蛋白的生物学活性。结果表明,表达的重组VP2蛋白在电镜下组装成病毒样颗粒且能与ADV阳性血清发生反应。与商业诊断抗原相比,重组抗原诊断AD的阴阳性的符合率为100%。该方法可成为生产AD诊断抗原的替代方法。 展开更多
关键词 水貂阿留申病 基因工程 诊断抗原
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鸡毒支原体平板凝集诊断抗原的研制 被引量:4
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作者 翟新验 奚增禄 +2 位作者 富强 张延钢 卢胜明 《中国家禽》 北大核心 2004年第14期21-22,共2页
关键词 鸡毒支原体 抗体 慢性呼吸道疾病 平板凝集诊断抗原 酶联免疫吸附法
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以GST-BC_(48)重组蛋白作诊断抗原对延边地区驽巴贝斯虫病血清流行病学调查 被引量:4
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作者 许应天 梁晚枫 +1 位作者 宋建臣 张守发 《畜牧与兽医》 北大核心 2003年第12期34-34,共1页
关键词 延边地区 驽巴贝斯虫病 血清流行病学 GST-BC48重组蛋白 诊断抗原 ELISA法
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日本血吸虫特异性抗体与诊断抗原的应用研究进展 被引量:2
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作者 郑莉 徐兴建 董惠芬 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期463-466,共4页
关键词 日本血吸虫病 特异性抗体 诊断抗原 检测成本 抗体检测 疫情监测 辅助诊断 短程抗体 进展综述 血清学
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血吸虫病免疫诊断抗原研究进展 被引量:3
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作者 郑辉 吴赟 沈继龙 《临床输血与检验》 CAS 2008年第3期281-285,共5页
血吸虫病仍然是我国重要的公共卫生问题之一,诊断抗原一直是血吸虫病诊断研究热点。随着分子生物学技术的发展,血吸虫病的诊断抗原已由最初的粗抗原发展成为组分抗原及由基因重组的方法生产合成的重组抗原。本文综述了近年来血吸虫免疫... 血吸虫病仍然是我国重要的公共卫生问题之一,诊断抗原一直是血吸虫病诊断研究热点。随着分子生物学技术的发展,血吸虫病的诊断抗原已由最初的粗抗原发展成为组分抗原及由基因重组的方法生产合成的重组抗原。本文综述了近年来血吸虫免疫诊断抗原的研究进展,并分析了诊断抗原存在的问题及将来的发展趋势。 展开更多
关键词 血吸虫病 诊断抗原 重组抗原
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结核分支杆菌免疫学诊断抗原的研究进展 被引量:9
15
作者 吴燕 朱中元 《中国热带医学》 CAS 2006年第2期338-339,共2页
关键词 结核分支杆菌 人类免疫缺陷病毒感染 诊断抗原 免疫学 结核病人 MTB感染 死灰复燃 早期诊断 传染病 旅游业
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副结核病诊断抗原研究进展 被引量:1
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作者 徐凤宇 姜秀云 +1 位作者 么乃全 钱爱东 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期1038-1040,共3页
副结核病是由禽分枝杆菌副结核亚种(Myco-bacterium aviumsubsp.Paratuberculosis,MAP)引起的多种动物共患的慢性、肠道肉芽肿性传染病,也称Johne's病,呈世界性分布,在我国被列入二类动物疫病。调查表明,美国大约20%~40%的奶牛群感... 副结核病是由禽分枝杆菌副结核亚种(Myco-bacterium aviumsubsp.Paratuberculosis,MAP)引起的多种动物共患的慢性、肠道肉芽肿性传染病,也称Johne's病,呈世界性分布,在我国被列入二类动物疫病。调查表明,美国大约20%~40%的奶牛群感染MAP, 展开更多
关键词 结核病 诊断抗原 动物疫病 世界性分布 分枝杆菌 肉芽肿性 传染病 调查表
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以重组蛋白作为诊断抗原用ELISA方法对马梨形虫病调查 被引量:2
17
作者 于龙政 孙福余 张守发 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2006年第8期27-28,共2页
关键词 马梨形虫病 ELISA方法 诊断抗原 重组蛋白 血液原虫病 呼吸困难 经济损失 季节性
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囊尾蚴病诊断抗原研究进展 被引量:2
18
作者 石团员 张龙现 宁长申 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期412-414,共3页
关键词 囊尾蚴病 诊断抗原 人畜共患寄生虫病 免疫学诊断方法 酶联免疫吸附试验 猪带绦虫 免疫印迹试验 动物体内
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卫氏并殖吸虫成虫的特异性诊断抗原 被引量:1
19
作者 张灯 王中全 +3 位作者 崔晶 范清堂 毛福荣 晋雪香 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2003年第4期538-540,共3页
目的 :寻找诊断并殖吸虫病的特异性抗原。方法 :应用SDS PAGE和Westernblot对卫氏并殖吸虫成虫可溶性抗原中的蛋白组分进行分析。结果 :卫氏并殖吸虫成虫可溶性抗原蛋白经SDS PAGE后显示 14条蛋白带 ,其中相对分子质量为 5 30 0 0、310 ... 目的 :寻找诊断并殖吸虫病的特异性抗原。方法 :应用SDS PAGE和Westernblot对卫氏并殖吸虫成虫可溶性抗原中的蛋白组分进行分析。结果 :卫氏并殖吸虫成虫可溶性抗原蛋白经SDS PAGE后显示 14条蛋白带 ,其中相对分子质量为 5 30 0 0、310 0 0、2 5 0 0 0、16 0 0 0、110 0 0是主带 ;相对分子质量为 5 30 0 0和 340 0 0的条带可与华支睾吸虫病患者血清反应 ;10 80 0 0、94 0 0 0、6 5 0 0 0的条带可与血吸虫病患者血清反应 ;5 80 0 0、5 30 0 0、4 30 0 0的条带可与旋毛虫感染的大鼠血清、小鼠血清及旋毛虫病患者血清反应。 370 0 0的蛋白带只能被斯氏狸殖吸虫感染的大鼠血清和并殖吸虫病患者血清所识别 ,而不与华支睾吸虫病、血吸虫病患者血清、旋毛虫感染的大鼠和小鼠血清、旋毛虫病患者血清、正常大鼠、小鼠血清及正常人血清发生交叉反应。结论 :卫氏并殖吸虫成虫可溶性抗原中相对分子质量为 370 0 0的蛋白组分为卫氏并殖吸虫成虫的特异性抗原 。 展开更多
关键词 卫氏并殖吸虫成虫 特异性诊断抗原 并殖吸虫病 成虫抗原 免疫印迹
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日本血吸虫童虫早期诊断抗原模拟表位的初步筛选研究 被引量:1
20
作者 刘湘 宁勇 +4 位作者 薛津若 陈琳 何立 蒋明森 陈刚 《中国医学创新》 CAS 2013年第20期1-2,共2页
目的:利用噬菌体随机12肽库技术筛选日本血吸虫感染早期诊断抗原。方法:用日本血吸虫感染后21d兔血清从噬菌体12肽库中经3轮筛选,有效地富集与早期感染兔血清有亲和力的噬菌体克隆。随机挑取11个单克隆分别纯化、扩增,随后采用ELISA、DO... 目的:利用噬菌体随机12肽库技术筛选日本血吸虫感染早期诊断抗原。方法:用日本血吸虫感染后21d兔血清从噬菌体12肽库中经3轮筛选,有效地富集与早期感染兔血清有亲和力的噬菌体克隆。随机挑取11个单克隆分别纯化、扩增,随后采用ELISA、DOT-ELISA等检测方法,挑选出与早期感染兔血清有高亲和力的噬菌体克隆。结果:挑选出3个与感染后21d兔血清具有高亲和力的噬菌体单克隆。结论:用感染后21d兔血清从噬菌体随机12肽库中能筛选到日本血吸虫童虫早期诊断抗原模拟表位。 展开更多
关键词 日本血吸虫 童虫 早期诊断抗原 模拟表位 筛选
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