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微RNA-128-3p、沉默信息调节因子1(SIRT1)和AMP活化蛋白激酶(AMPK)对2型糖尿病合并非酒精性脂肪性肝病的诊断价值
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作者 李居一 倪英群 +1 位作者 张媛媛 刘怀珍 《临床肝胆病杂志》 北大核心 2025年第3期453-460,共8页
目的分析2型糖尿病(T2DM)合并非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)患者外周血中微RNA(miRNA)-128-3p、沉默信息调节因子1(SIRT1)和AMP活化蛋白激酶(AMPK)的表达情况,探讨mi RNA-128-3p对T2DM患者发生NAFLD的预测作用。方法选取2022年9月—2023年... 目的分析2型糖尿病(T2DM)合并非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)患者外周血中微RNA(miRNA)-128-3p、沉默信息调节因子1(SIRT1)和AMP活化蛋白激酶(AMPK)的表达情况,探讨mi RNA-128-3p对T2DM患者发生NAFLD的预测作用。方法选取2022年9月—2023年8月在安徽中医药大学第一附属医院住院的80例T2DM患者,分为T2DM组(40例)和合并NAFLD组(40例),并依据肝纤维化评分(NFS)分为T2DM合并进行性肝纤维化组(16例)和T2DM未合并进行性肝纤维化组(64例),收集基本资料和生化指标,采用定量实时PCR方法检测外周血miRNA-128-3p、SIRT1、AMPK的mRNA表达水平,Western Blot方法检测SIRT1、AMPK蛋白表达水平。正态分布的数据两组间比较采用成组t检验,偏态分布的数据两组间比较采用Mann-Whitney U检验,计数资料两组间比较采用χ^(2)检验;Logistic回归分析NAFLD及进行性肝纤维化的影响因素;使用受试者操作特征曲线(ROC曲线)以确定根据miRNA-128-3p水平判断发生NAFLD的最佳阈值。结果合并NAFLD组和T2DM组BMI、空腹血糖、糖化血红蛋白、空腹胰岛素、空腹C肽、ALT、AST、GGT、ALP、纤维连接蛋白、TG、HDL-C、总三碘甲状腺原氨酸(TT3)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、NFS比较差异均有统计学意义(P值均<0.05)。合并NAFLD组外周血miRNA-128-3p的mRNA表达水平高于T2DM组(t=-8.765,P<0.001),而SIRT1和AMPK的mRNA及蛋白表达水平均明显降低(P值均<0.001)。T2DM合并进行性肝纤维化组与T2DM未合并进行性肝纤维化组的年龄、ALT、游离三碘甲状腺原氨酸、TT3、超氧化物歧化酶、miRNA-128-3p比较差异均有统计学意义(P值均<0.05)。Logistic回归分析表明,miRNA-128-3p是发生NAFLD和进行性肝纤维化的独立危险因素(OR=8.221,95%CI:2.735~24.714,P<0.001;OR=1.493,95%CI:1.117~1.997,P=0.007);ROC曲线显示其曲线下面积为0.890(95%CI:0.829~0.950),最佳截断值为13.165,敏感度89.3%,特异度72.7%。结论miRNA-128-3p在T2DM合并NAFLD患者外周血中表达增高,SIRT1、AMPK表达降低,miRNA-128-3p水平对识别NAFLD及肝纤维化具有一定诊断价值。 展开更多
关键词 糖尿病 2型 非酒精性脂肪性肝病 微RNAS 抗衰老酶1 AMP活化蛋白激酶类
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甲基莲心碱调节丝裂原活化蛋白激酶/c-Jun氨基末端激酶信号通路对宫颈癌细胞恶性生物学行为的影响
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作者 汪振华 朱莉莉 +1 位作者 肖苏 彭超 《河北中医》 2025年第3期450-455,共6页
目的观察甲基莲心碱(Nef)通过调节丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)/c-Jun氨基末端激酶(JNK)信号通路对宫颈癌细胞恶性生物学行为的影响。方法使用不同浓度的Nef(0、5、10、15、20、25、30μmol/L)干预HeLa细胞,CCK-8法检测细胞存活率。将HeLa... 目的观察甲基莲心碱(Nef)通过调节丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)/c-Jun氨基末端激酶(JNK)信号通路对宫颈癌细胞恶性生物学行为的影响。方法使用不同浓度的Nef(0、5、10、15、20、25、30μmol/L)干预HeLa细胞,CCK-8法检测细胞存活率。将HeLa细胞分为对照组、Nef低剂量组(5μmol/L Nef)、Nef中剂量组(10μmol/L Nef)、Nef高剂量组(15μmol/L Nef)、SP600125组(15μmol/L Nef+10μmol/L MAPK/JNK信号通路抑制剂SP600125),各组细胞使用相应剂量的药物干预24 h。细胞划痕实验检测各组细胞迁移情况;Transwell小室法检测细胞侵袭;DCFH-DA法检测细胞活性氧(ROS)水平;试剂盒法检测细胞丙二醛(MDA)、总超氧化物歧化酶(SOD)水平;流式细胞术检测细胞凋亡水平;Western blot法检测细胞p-JNK1/2/JNK1/2、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)蛋白表达。结果与0μmol/L相比,5、10、15、20、25、30μmol/L的Nef呈剂量依赖性降低HeLa细胞存活率(P<0.05),半数抑制浓度(IC50值)为(16.96±2.53)μmol/L。为保证Nef对HeLa细胞的作用效果并保证HeLa细胞具有一定存活率方便收集细胞,选取5、10、15μmol/L的Nef浓度作为低、中、高剂量组。与对照组相比,Nef低、中、高剂量组细胞划痕愈合率、细胞侵袭个数、细胞SOD水平、MMP-2、Bcl-2蛋白表达明显降低(P<0.05),细胞ROS、MDA水平、细胞凋亡率以及细胞p-JNK1/2/JNK1/2、Bax蛋白表达明显升高(P<0.05),且呈剂量依赖(P<0.05)。与Nef高剂量组相比,SP600125组细胞划痕愈合率、细胞侵袭个数、细胞SOD水平以及MMP-2、Bcl-2蛋白表达明显升高(P<0.05),细胞ROS、MDA水平、细胞凋亡率以及细胞p-JNK1/2/JNK1/2、Bax蛋白表达明显降低(P<0.05)。结论Nef可通过激活MAPK/JNK信号通路抑制宫颈癌细胞恶性生物学行为。 展开更多
关键词 宫颈肿瘤 甲基莲心碱 丝裂原活化蛋白激酶 JNK丝裂原活化蛋白激酶类 肿瘤浸润 肿瘤转移 细胞凋亡
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高亲和型酪氨酸蛋白激酶类受体和上皮性钙黏连蛋白与鼻腔鼻窦腺样囊性癌病理及预后的关系
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作者 黄菊芳 张玉杰 +2 位作者 李蓓 单林霞 张璐 《医药论坛杂志》 2024年第20期2203-2207,2212,共6页
目的分析高亲和型酪氨酸蛋白激酶类受体(tyrosine protein kinase-like receptor,TrkA)、上皮型钙黏蛋白(epithelial calreticulin,E-cadherin)与鼻腔鼻窦腺样囊性癌病理、预后的关系。方法回顾性收集2019年1月—2021年7月郑州大学第一... 目的分析高亲和型酪氨酸蛋白激酶类受体(tyrosine protein kinase-like receptor,TrkA)、上皮型钙黏蛋白(epithelial calreticulin,E-cadherin)与鼻腔鼻窦腺样囊性癌病理、预后的关系。方法回顾性收集2019年1月—2021年7月郑州大学第一附属医院收治鼻腔鼻窦腺样囊性癌患者样本68例。用免疫组化SP法检测鼻腔鼻窦腺样囊性癌患者组织标本中TrkA、E-cadherin的表达,分析鼻腔鼻窦腺样囊性癌患者的TrkA、E-cadherin表达及与其病理特征的关系。进行随访,用寿命表法计算鼻腔鼻窦腺样囊性癌患者生存状况。用Kaplan-Meir生存曲线分析鼻腔鼻窦腺样囊性癌患者组织中TrkA、E-cadherin的表达与其生存率的关系;用Cox比例风险模型分析影响鼻腔鼻窦腺样囊性癌患者总生存期的危险因素。结果68例鼻腔鼻窦腺样囊性癌患者标本中,TrkA表达阳性率为60例(88.23%),E-cadherin表达阳性率为13例(19.11%)。Ⅲ期~Ⅳ期、实质型、局部有复发者的TrkA高表达占比高于Ⅰ期~Ⅱ期、筛状型/管状型、局部无复发者,差异具有统计学意义(P<0.05);Ⅲ期~Ⅳ期、实质型、局部复发、淋巴结侵犯者的E-cadherin低表达占比高于Ⅰ期~Ⅱ期、筛状型/管状型、局部无复发者,差异具有统计学意义(P<0.05)。经随访了解,18例死亡,1年、2年生存率分别为88.23%、73.52%。经Kaplan-Meir生存曲线得知,TrkA高表达2年生存率为66.67%,低于TrkA低表达组90.00%,差异具有统计学意义(P<0.05);E-cadherin低表达2年生存率为72.13%,低于E-cadherin高表达组的85.71%,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论鼻腔鼻窦腺样囊性癌组织中TrkA主要呈高表达,E-cadherin主要呈低表达,两者在鼻腔鼻窦腺样囊性癌发生、发展及预后具有一定作用。进一步探究TrkA和E-cadherin在该癌症中的具体功能和作用机制,对于临床开发新的治疗策略及准确评估患者预后具有重要意义,可为相关治疗提供坚实的理论依据。 展开更多
关键词 高亲和型酪氨酸蛋白激酶类受体 上皮性钙黏连蛋白 鼻腔鼻窦腺样囊性癌 病理特征 预后情况
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黄酮类化合物对蛋白激酶的抑制作用 被引量:10
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作者 农朝赞 黄华艺 《中国新药与临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第8期548-551,共4页
黄酮类化合物对丝裂原激活的蛋白激酶(MAPK)、细胞周期素依赖的蛋白激酶 (CDKs)、表皮生长因子受体 (EGFR)及Akt /蛋白激酶B活性均有较强的抑制作用 ,从而干预细胞信号转导 ,诱导细胞凋亡 ,抗肿瘤细胞增殖 ,促进抑癌基因表达和抑制癌基... 黄酮类化合物对丝裂原激活的蛋白激酶(MAPK)、细胞周期素依赖的蛋白激酶 (CDKs)、表皮生长因子受体 (EGFR)及Akt /蛋白激酶B活性均有较强的抑制作用 ,从而干预细胞信号转导 ,诱导细胞凋亡 ,抗肿瘤细胞增殖 ,促进抑癌基因表达和抑制癌基因表达。该类化合物抗肿瘤作用机制与它们能抑制各种细胞信号转导途径中的蛋白激酶有关 ,其有作为化学预防和化学治疗药物的潜在用途。 展开更多
关键词 黄酮 蛋白激酶类 蛋白酶抑制药
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凝集素类受体蛋白激酶参与植物发育的研究进展
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作者 彭小群 张丽君 +1 位作者 邹雅琦 王梦龙 《惠州学院学报》 2024年第3期35-42,共8页
凝集素类受体蛋白激酶(Lectin receptor-like kinases,LecRLKs)是高等植物中的一类类受体蛋白激酶(Receptor-like kinases,RLKs),具有参与植物生长发育及胁迫耐受等多种功能。LecRLKs在结构上主要包括胞外凝集素结构域、跨膜连接区及激... 凝集素类受体蛋白激酶(Lectin receptor-like kinases,LecRLKs)是高等植物中的一类类受体蛋白激酶(Receptor-like kinases,RLKs),具有参与植物生长发育及胁迫耐受等多种功能。LecRLKs在结构上主要包括胞外凝集素结构域、跨膜连接区及激酶结构域,根据胞外凝集素结构域的不同,LecRLKs可分为3种类型:G型、L型及C型。根据近年来的研究,发现LecRLK家族中存在能够参与植物种子萌发、株高、茎和叶片发育、花器官发育和生殖发育的基因,这表明LecRLK家族基因与植物发育过程存在密切的关系。该文综述了植物凝集素类受体蛋白激酶的结构与分类,重点讨论相关凝集素受体蛋白激酶在植物发育过程中的作用,旨在加深对凝集素类受体蛋白激酶在植物发育过程中所发挥作用的理解,并为农业生产和作物改良育种提供理论依据。 展开更多
关键词 植物 受体蛋白激酶 凝集素受体蛋白激酶 生长发育
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丝裂原活化蛋白激酶类和蛋白激酶C在转化生长因子β1诱导肾小管细胞结缔组织生长因子表达中的作用 被引量:2
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作者 陈楠 邢静萍 王伟铭 《中华肾脏病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第11期728-733,共6页
目的了解转化生长因子β1(TGF-β1)诱导肾小管细胞结缔组织生长因子(CTGF)表达的机制,特别是蛋白激酶C(PKC)和丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)在CTGF基因表达中的作用及其对Smad磷酸化的影响。方法分别应用PKC抑制剂G06850以及MAPK的... 目的了解转化生长因子β1(TGF-β1)诱导肾小管细胞结缔组织生长因子(CTGF)表达的机制,特别是蛋白激酶C(PKC)和丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)在CTGF基因表达中的作用及其对Smad磷酸化的影响。方法分别应用PKC抑制剂G06850以及MAPK的3个组成成分ERK、JNK和p38MAPK的抑制剂PD98059、U0126、SP600125和SB203580阻断相应通路,观察其对TGF.131诱导的CTGF表达以及Smad2/Smad3磷酸化的影响。结果TGF-β1(5μg/L)以时间依赖方式诱导HK-2细胞中Smad2/Smad3的磷酸化,从基础值0.87±0.09上升至2h时高峰2.350±0.11。PKC抑制剂G06850(5μmol/L)和ERK抑制剂PD98059(10μmol/L)、U0126(10μmol/L)可部分抑制TGF-β1诱导的CTGF表达,而p38MAPK抑制剂SB203580(20μmol/L)和JNK抑制剂SP600125(10μmol/L)对TGF-β1诱导的CTGF的表达无影响。PKC抑制剂G06850(5μmol/L)可减少TGF-β1诱导的Smad2/Smad3磷酸化,而ERK抑制剂PD98059(10μmol/L)和U0126(10μmol/L)对Smad2/Smad3的磷酸化没有影响。结论在肾小管上皮细胞中,TGF-β1诱导CTGF的表达需要PKC和Ras/MEK/ERK的参与。PKC以Smad依赖的方式参与肾小管上皮细胞中TGF-β1诱导的CTGF的表达,而Ras/MEK/ERK对CTGF表达的调节不依赖于Smads。 展开更多
关键词 转化生长因子Β 蛋白激酶C 丝裂原活化蛋白激酶类 结缔组织 生长因子 肾小管上皮细胞 信号传导
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甘草次酸通过抑制p38丝裂原活化蛋白激酶信号通路促进脂多糖诱导的小胶质细胞M2极化 被引量:2
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作者 张盟盟 尹涛 +1 位作者 王睿健 张文超 《中华老年心脑血管病杂志》 CAS 北大核心 2024年第4期450-454,共5页
目的探究甘草次酸(GA)通过抑制p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)信号通路促进脂多糖(LPS)诱导的小胶质细胞M2极化。方法将小鼠BV2小胶质细胞分为阴性对照(NC)组、LPS组(100μg/ml LPS)、GA组(100μg/ml LPS+10μmol/L GA)、GA+抑制剂组(... 目的探究甘草次酸(GA)通过抑制p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)信号通路促进脂多糖(LPS)诱导的小胶质细胞M2极化。方法将小鼠BV2小胶质细胞分为阴性对照(NC)组、LPS组(100μg/ml LPS)、GA组(100μg/ml LPS+10μmol/L GA)、GA+抑制剂组(100μg/ml LPS+10μmol/L GA+10μmol/ml p38 MAPK通路抑制剂)、抑制剂组(100μg/ml LPS+10μmol/ml p38 MAPK通路抑制剂)和GA+激活剂组(100μg/ml LPS+10μmol/L GA+300 ng/ml p38 MAPK通路激活剂)。用细胞计数试剂盒8法测定细胞活力,酶联免疫吸附测定炎性因子水平,倒置显微镜观察细胞形态,Western blot检测精氨酸酶1(Arg-1)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)及p38 MAPK通路相关蛋白表达水平。结果与LPS组比较,GA组和抑制剂组细胞足突增多、胞体变大、细胞间隔缩小,白细胞介素(IL)1β、IL-6、iNOS、P53蛋白、磷酸化p38 MAPK(p-p38 MAPK)表达显著降低(22.53±0.53、24.13±1.00 vs 29.56±1.46,10.37±0.59、10.16±0.21 vs 15.13±1.00,0.39±0.01、0.38±0.01 vs 1.12±0.01,0.34±0.01、0.31±0.01 vs 0.89±0.01,0.40±0.01、0.40±0.02 vs 0.88±0.01,P<0.05),IL-10、Arg-1表达显著升高(177.33±7.57、187.21±6.87 vs 64.67±11.50,0.41±0.01、0.44±0.03 vs 0.10±0.01,P<0.05)。与GA组比较,GA+抑制剂组细胞足突增多、胞体变大,IL-1β、IL-6、iNOS、P53蛋白、p-p38 MAPK表达显著降低,IL-10、Arg-1表达显著升高(P<0.05);GA+激活剂组细胞足突减少、胞体变小,IL-1β、IL-6、iNOS、P53蛋白、p-p38 MAPK表达显著升高,IL-10、Arg-1表达显著降低(P<0.05)。结论GA可通过阻断p38 MAPK信号通路促进LPS诱导的小鼠BV2小胶质细胞M2极化。 展开更多
关键词 甘草次酸 P38丝裂原活化蛋白激酶类 脂多糖 小神经胶质细胞
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CRISPR-Cas9蛋白激酶文库筛选胰腺癌多药耐药共同靶点的价值
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作者 曾思媛 兰斌 +1 位作者 王慧玲 张超杰 《医学临床研究》 2024年第12期1828-1832,共5页
【目的】分析CRISPR-Cas9蛋白激酶文库筛选胰腺癌(PDAC)多药耐药共同靶点的价值。【方法】在KPC小鼠模型衍生的PDAC细胞系TB32047中通过慢病毒转染全蛋白激酶组文库,分别使用IC90药物浓度的奥沙利铂、氟尿嘧啶、伊利替康连续处理上述细... 【目的】分析CRISPR-Cas9蛋白激酶文库筛选胰腺癌(PDAC)多药耐药共同靶点的价值。【方法】在KPC小鼠模型衍生的PDAC细胞系TB32047中通过慢病毒转染全蛋白激酶组文库,分别使用IC90药物浓度的奥沙利铂、氟尿嘧啶、伊利替康连续处理上述细胞3周。通过CRISPR-Cas9功能缺失筛选,进行下一代测序和MAGeCK VISPR分析以鉴定候选基因。采用MTT、流式细胞术、细胞集落形成实验检测细胞周期蛋白依赖性激酶7(CDK7)耗竭或靶向抑制与PDAC FOLFIRINOX化疗方案的协同作用。【结果】CDK7在三种化疗药物筛选中均排名靠前,是PDAC多药耐药的共同靶点。利用CRISPR-Cas9完全敲除CDK7或使用THZ1抑制CDK7的表达后,PDAC细胞增殖减慢,细胞周期阻滞,细胞凋亡增加,细胞集落形成能力减弱,并与FOLFIRINOX协同促进PDAC细胞凋亡。【结论】CDK7为PDAC多药耐药的共同靶点,CDK7是抑制PDAC化疗耐药性的新靶点。 展开更多
关键词 胰腺肿瘤 蛋白激酶类 抗药性 多药 基因文库
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水稻LRR型类受体蛋白激酶胞外区的原核表达及多克隆抗体制备 被引量:19
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作者 程彦伟 李亮 +4 位作者 沈嵘 齐耀程 刘晓宇 王宁 张炜 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2008年第9期1077-1083,共7页
前期研究表明,水稻根尖细胞质膜类受体蛋白激酶OsRLK的表达受盐胁迫诱导.为了进一步研究该激酶的生理功能,通过反转录PCR得到OsRLK胞外区cDNA片段,将其亚克隆至pET29a原核表达载体并在大肠杆菌中实现了高表达,表达量约为细胞总蛋白的30%... 前期研究表明,水稻根尖细胞质膜类受体蛋白激酶OsRLK的表达受盐胁迫诱导.为了进一步研究该激酶的生理功能,通过反转录PCR得到OsRLK胞外区cDNA片段,将其亚克隆至pET29a原核表达载体并在大肠杆菌中实现了高表达,表达量约为细胞总蛋白的30%.重组蛋白经SDS-PAGE分离,染色切胶收集后,作为抗原免疫新西兰家兔,分离抗血清,经纯化得到1∶20000效价的多克隆抗体.Western blot结果显示,该抗体能特异识别在原核表达系统内表达的抗原,以及水稻根尖细胞质膜组分中的LRR型类受体蛋白激酶,并且在蛋白质水平证实该激酶为盐胁迫响应蛋白. 展开更多
关键词 LRR型受体蛋白激酶 水稻 原核表达 多克隆抗体
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大豆类受体蛋白激酶基因(rlpk2)RNAi双元表达载体的构建及其转基因 被引量:12
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作者 李小平 邓楠 +4 位作者 马媛媛 李鹏丽 王勇 张韧 王宁宁 《分子细胞生物学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2006年第1期1-8,共8页
植物类受体蛋白激酶(plant receptor-like kinases RLKs)以其特有的结构在植物的生长、发育和防御等多种生理生化过程中发挥着重要的作用。利用RNA干扰技术(RNA interference RNAi)来研究RLKs的功能已日趋成熟。本文根据植物中hpRNA(hai... 植物类受体蛋白激酶(plant receptor-like kinases RLKs)以其特有的结构在植物的生长、发育和防御等多种生理生化过程中发挥着重要的作用。利用RNA干扰技术(RNA interference RNAi)来研究RLKs的功能已日趋成熟。本文根据植物中hpRNA(hairpin RNA)的原理,以大豆类受体蛋白激酶基因rlpk2为靶基因,在rlpk2-cDNA序列3'端选择312bp作为构建RNAi的序列,借助中间克隆载体,经过三次亚克隆,最后形成含rlpk2-RNAi表达盒的双元表达载体pART27-R2,并转入农杆菌LBA4404。采用农杆菌介导大豆子叶节转化方法,共获得了三株转基因植株。转基因植株 RT-PCR分析表明rlpk2基因已被成功敲减(knock-down),并且发现敲减大豆叶片中的rlpk2基因表达明显改善大豆叶片的光合能力,结合前期研究结果,表明rlpk2基因可能在维持叶绿体的结构及保护叶绿体膜系统的完整性方面起负调节作用。 展开更多
关键词 大豆 受体蛋白激酶 RNAI 双元表达载体
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沙门菌效应分子SopB激活HeLa细胞MAPK蛋白激酶的磷酸化 被引量:3
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作者 陶永清 刘崇基 +7 位作者 李健娇 徐新 王津晗 韩娜 张磊 赵辉 阮海华 王昌禄 《中国医药生物技术》 CSCD 2011年第6期432-436,共5页
目的研究沙门菌感染宿主细胞的过程中,沙门菌III型分泌系统分泌的效应蛋白SopB对宿主细胞蛋白激酶MAPK的激活作用,同时寻找SopB蛋白与MAPK激活有关的结构域。方法通过基因克隆的方法将沙门菌SopB全长基因以及各种SopB truncation均被克... 目的研究沙门菌感染宿主细胞的过程中,沙门菌III型分泌系统分泌的效应蛋白SopB对宿主细胞蛋白激酶MAPK的激活作用,同时寻找SopB蛋白与MAPK激活有关的结构域。方法通过基因克隆的方法将沙门菌SopB全长基因以及各种SopB truncation均被克隆至pCS2-EGFP质粒载体中,利用磷酸钙转染法将该SopB重组质粒转染至HeLa细胞,24h后通过westernblot方法利用磷酸化的pERK1/2、p-p38以及pJNK抗体检测HeLa细胞MAPK蛋白激酶受SopB激活的情况。结果在HeLa细胞中过量表达SopB蛋白能够显著诱导蛋白激酶MAPK的磷酸化激活,进一步在HeLa细胞中表达SopB各种truncation片段证实,SopB对HeLa细胞MAPK蛋白激酶的激活与其N末端29个氨基酸直接相关。结论 SopB可以激活宿主细胞MAPK信号途径,且这种活性与其N末端29个氨基酸有关。 展开更多
关键词 沙门菌属 丝裂原激活蛋白激酶类 蛋白激酶类 泛素化 磷酰化
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植物体细胞胚胎发生受体类蛋白激酶的生物学功能 被引量:10
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作者 石雅丽 张锐 +1 位作者 林芹 郭三堆 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期551-559,共9页
体细胞胚胎发生受体类蛋白激酶(Somatic embryogenesis receptor-like kinases,SERKs)属于膜富亮氨酸重复序列受体类蛋白激酶(Leucine-rich repeat sequence receptor-like kinase,LRR-RLK)家族的第二亚类。SERK具有典型的胞外信号受体... 体细胞胚胎发生受体类蛋白激酶(Somatic embryogenesis receptor-like kinases,SERKs)属于膜富亮氨酸重复序列受体类蛋白激酶(Leucine-rich repeat sequence receptor-like kinase,LRR-RLK)家族的第二亚类。SERK具有典型的胞外信号受体结构域、跨膜结构域和胞内激酶活性结构域,研究发现SERKs在植物生命活动中承担着多个角色。文章简述了SERKs的典型结构域特征,重点介绍该类蛋白在体细胞胚发生、生殖发育、激素感应和病理反应方面发挥的功能,同时对该蛋白激酶的研究价值和应用前景进行了探讨。 展开更多
关键词 体细胞胚胎发生受体蛋白激酶 膜富亮氨酸重复序列受体蛋白激酶 生物功能
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植物类受体蛋白激酶的研究进展 被引量:10
13
作者 石翠翠 高雷更 +3 位作者 惠颖 胡京蕊 路佳 葛荣朝 《河北师范大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2010年第2期216-220,共5页
植物类受体蛋白激酶是一类定位在质膜上,具有胞外结构域、跨膜结构域和胞内激酶域的蛋白质.简要介绍类受体蛋白激酶的结构、种类以及其在植物生长发育过程中的作用,并对近几年植物类受体蛋白激酶的研究进展进行了综述.
关键词 受体蛋白激酶 信号转导 抗逆性
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植物类受体蛋白激酶的研究进展 被引量:15
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作者 闫锋 祝传书 庞保平 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期851-858,共8页
植物类受体蛋白激酶(receptor-like protein kinase,RLKs)通过胞外结构域识别病原信号分子,发生磷酸化、去磷酸化反应而开启或关闭下游靶蛋白,调节植物固有免疫反应,诱导抗病防御反应。目前对植物类受体蛋白激酶的功能、信号传导和配体... 植物类受体蛋白激酶(receptor-like protein kinase,RLKs)通过胞外结构域识别病原信号分子,发生磷酸化、去磷酸化反应而开启或关闭下游靶蛋白,调节植物固有免疫反应,诱导抗病防御反应。目前对植物类受体蛋白激酶的功能、信号传导和配体识别等方面的研究已成为该领域的重点。本文对近年来国内外有关植物类受体蛋白激酶的结构、功能及其在植物抗病防御反应中的作用研究进行综述,为今后进一步深入研究植物类受体蛋白激酶的生理生化功能及应用提供参考。 展开更多
关键词 植物 受体蛋白激酶 信号传导 抗性
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一个棉花类受体蛋白激酶基因的克隆与表达分析 被引量:8
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作者 杨郁文 何冰 +1 位作者 张保龙 倪万潮 《棉花学报》 CSCD 北大核心 2011年第1期15-21,共7页
利用简并引物扩增、染色体步移以及RT-PCR的方法,分离了棉花的一个类受体蛋白激酶基因的全长序列。序列分析表明,该基因没有内含子,开放读码框的长度为2964 bp,编码的多肽序列含有988个氨基酸并与拟南芥控制花器官脱落的基因HAESA-like... 利用简并引物扩增、染色体步移以及RT-PCR的方法,分离了棉花的一个类受体蛋白激酶基因的全长序列。序列分析表明,该基因没有内含子,开放读码框的长度为2964 bp,编码的多肽序列含有988个氨基酸并与拟南芥控制花器官脱落的基因HAESA-like2具有60%左右的相似性,将该基因命名为GRLK5。半定量RT-PCR分析发现GRLK5在种子、茎皮、根和纤维中的表达量较高,并且受ABA的诱导表达。将GRLK5整合到植物表达载体pCAMBIA2301中,构建植物过量表达载体,通过农杆菌介导,采用叶盘法转化烟草,PCR检测证明目的基因已经整合到烟草基因组中。 展开更多
关键词 棉花 受体蛋白激酶 表达分析
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二尖瓣病变患者左房心肌总蛋白激酶C活性及亚类含量的变化 被引量:3
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作者 曹舸 萧锡俊 +2 位作者 徐燕华 傅明德 聂良明 《四川大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期688-690,共3页
目的 探讨二尖瓣病变患者左房心肌总蛋白激酶 C(PKC)活性及 PKCα、β亚类含量与心房颤动(AF)之间可能存在的关系。方法  35例患者分为四组 ,A组 :二尖瓣狭窄 (MS)伴 AF;B组 :为窦性心率 (SR)的二尖瓣狭窄 ;C组 :二尖瓣关闭不全 (MR)... 目的 探讨二尖瓣病变患者左房心肌总蛋白激酶 C(PKC)活性及 PKCα、β亚类含量与心房颤动(AF)之间可能存在的关系。方法  35例患者分为四组 ,A组 :二尖瓣狭窄 (MS)伴 AF;B组 :为窦性心率 (SR)的二尖瓣狭窄 ;C组 :二尖瓣关闭不全 (MR)伴 AF;D组 :为 SR的二尖瓣关闭不全。分别检测各组总 PKC活性及 PKCα、PKCβ亚类含量。结果 各组间总 PKC活性无明显差异 (P>0 .0 5 )。伴有 AF的二尖瓣病变患者 (MS或 MR)其左房心肌 PKCα含量低于 SR的二尖瓣病变患者 (MS或 MR) ;而 PKCβ含量却高于 SR的二尖瓣病变患者 ,但上述差异尚未达到统计处理的显著性水平 (P>0 .0 5 )。结论 左房心肌总 PKC活性与二尖瓣病变患者 AF发生的关系不明显 ,但左房心肌 PKC亚类含量水平的变化与 展开更多
关键词 蛋白激酶C亚 心房纤颤 二尖瓣病变 蛋白激酶C活性
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紫花苜蓿盐诱导类受体蛋白激酶基因MsSIK1的克隆及功能分析 被引量:10
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作者 郭鹏 邢鑫 +1 位作者 张万筠 姜健 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第23期4573-4581,共9页
【目的】对紫花苜蓿(Medicago sativa L.cv.Zhongmu-1)stress-induced protein kinase gene 1(Ms SIK1)进行克隆与表达研究,了解该基因的分子机制及其应用。【方法】以紫花苜蓿叶片总RNA为模板,根据同源克隆设计简并引物,利用RT-PCR结合... 【目的】对紫花苜蓿(Medicago sativa L.cv.Zhongmu-1)stress-induced protein kinase gene 1(Ms SIK1)进行克隆与表达研究,了解该基因的分子机制及其应用。【方法】以紫花苜蓿叶片总RNA为模板,根据同源克隆设计简并引物,利用RT-PCR结合RACE技术,获得Ms SIK1的编码序列。利用同源性比对进行序列分析。通过SMART网站(http://smart.embl-heidelberg.de/)模拟该基因的蛋白结构。构建Ms SIK1的亚细胞定位瞬时表达载体,使用基因枪转化法将Ms SIK1与GFP在洋葱表皮细胞中融合瞬时表达并观察其亚细胞定位荧光信号。通过Real time-PCR分析Ms SIK1在Na Cl、ABA和干旱处理条件下的表达特征。利用农杆菌侵染方法获得转基因拟南芥植株,通过RT-PCR对转基因植株进行表达鉴定,获得转基因植株后,利用转基因株系进行盐处理进而对成苗期转基因拟南芥性状鉴定。在盐胁迫处理下,测定野生型与转基因株系的叶绿素含量、MDA含量进而验证该基因的抗盐功能。【结果】获得Ms SIK1编码序列2 478 bp,编码825个氨基酸。该蛋白C端与多种植物激酶具有相当高的同源性,模拟蛋白结构发现该基因具有类受体蛋白激酶高度保守的丝氨酸/苏氨酸结构域、跨膜结构域和富含亮氨酸重复序列的膜外结构域。Real time-PCR分析表明该基因在Na Cl、ABA和干旱处理条件下上调表达,其中在盐处理条件下,Ms SIK1表达先升高后降低,在处理4 h时达到最大值(约为对照值的7倍)。在干旱胁迫处理时,Ms SIK1受诱导表达增强明显,当处理2 h时表达量达到最大值(约为对照值的6倍);ABA处理时,Ms SIK1被诱导表达明显,当处理3 h时表达量达到最大值,约为对照值的6.8倍。Ms SIK1与GFP融合瞬时表达的洋葱表皮细胞中的荧光信号主要集中于质膜附近,转化空载体的洋葱表皮细胞中的荧光信号分布于细胞各个部位。转基因植株的RT-PCR鉴定表明,T1代6个株系中所得到的Ms SIK1条带明显、亮度高,且T1-10中表达量最高;但在野生型中检测不到该条带,说明外源基因已经整合到拟南芥染色体中并能遗传到子代。成苗期转基因拟南芥盐处理后发现T3-2、T3-6、T3-10转基因株系较野生型植株长势好,说明Ms SIK1的转入提高了拟南芥的抗盐性。与对照相比,转Ms SIK1拟南芥在Na Cl处理下,叶绿素含量下降较少,其中,野生型叶绿素含量降低了77%,T3-3降低了53%,T3-6降低了44%,T3-10降低了35%;同样盐胁迫下,3个转基因株系的MDA含量积累较少,其中,野生型MDA的含量是T3-10株系的1.3倍。【结论】Ms SIK1作为一个类受体蛋白激酶受多种逆境胁迫诱导,该基因的过量表达提高了拟南芥的抗盐性。 展开更多
关键词 紫花苜蓿 MsSIK1 受体蛋白激酶 盐胁迫 功能研究
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大豆类受体蛋白激酶基因rlpk2启动子克隆及初步分析 被引量:8
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作者 李鹏丽 马媛媛 +3 位作者 李小平 张丽文 王勇 王宁宁 《植物生理与分子生物学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期315-319,共5页
用双链接头介导的基因组DNA步行技术获得了大豆中与衰老相关的类受体蛋白激酶基因rlpk25'侧翼1801bp启动子序列(Prlpk2,GenBank登录号:AY870314)。序列分析结果表明,这一启动子片段中有响应细胞分裂素、脱落酸、赤霉素和生长素等激... 用双链接头介导的基因组DNA步行技术获得了大豆中与衰老相关的类受体蛋白激酶基因rlpk25'侧翼1801bp启动子序列(Prlpk2,GenBank登录号:AY870314)。序列分析结果表明,这一启动子片段中有响应细胞分裂素、脱落酸、赤霉素和生长素等激素作用和响应干旱、寒冷及伤害等逆境胁迫的多个顺式作用元件。构建启动子Prlpk2与报告基因GUS融合基因的双元表达载体pRlpk2-GUS,并通过农杆菌介导法转化大豆幼苗和微型番茄Micro-Tom的子叶外植体,染色结果表明这1801bp的启动子Prlpk2可以有效地驱动GUS基因在大豆幼苗生长点和番茄愈伤组织中瞬时表达。 展开更多
关键词 大豆 受体蛋白激酶 基因组DNA步行 启动子 衰老 瞬时表达
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植物富亮氨酸重复类受体蛋白激酶的研究进展 被引量:12
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作者 查笑君 马伯军 +1 位作者 潘建伟 杨金水 《浙江师范大学学报(自然科学版)》 CAS 2010年第1期7-12,共6页
介绍了植物富亮氨酸重复类受体蛋白激酶(LRR-RLK)的结构与分类;分别以CLAVATA1,BRI1,FLS2为例,阐述了LRR-RLK基因在植物生长发育、激素信号转导和植物抗病防御等方面的生理功能及作用机制;总结了LRR-RLK作用模型、信号通路间的交互作用... 介绍了植物富亮氨酸重复类受体蛋白激酶(LRR-RLK)的结构与分类;分别以CLAVATA1,BRI1,FLS2为例,阐述了LRR-RLK基因在植物生长发育、激素信号转导和植物抗病防御等方面的生理功能及作用机制;总结了LRR-RLK作用模型、信号通路间的交互作用及展望. 展开更多
关键词 富亮氨酸重复受体蛋白激酶 植物 功能 作用机制
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植物类受体蛋白激酶研究概况 被引量:10
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作者 张兆沛 王志伟 张慧蓉 《山西农业科学》 2009年第8期75-78,共4页
类受体蛋白激酶基因是目前植物中发现的主要的数目最大的一类受体基因。类受体蛋白激酶的鉴定和生理功能的研究对阐明植物胁迫反应机制、提高农作物的产量和抗逆性具有重要的理论意义和应用价值。综述了植物类受体蛋白激酶的结构、种类... 类受体蛋白激酶基因是目前植物中发现的主要的数目最大的一类受体基因。类受体蛋白激酶的鉴定和生理功能的研究对阐明植物胁迫反应机制、提高农作物的产量和抗逆性具有重要的理论意义和应用价值。综述了植物类受体蛋白激酶的结构、种类、研究进展及意义,并探讨了今后的研究重点。 展开更多
关键词 植物 胁迫 受体蛋白激酶
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