产β-甘露聚糖酶的罗耳阿太菌（Athelia roffsii）菌株CBS191．62，发酵培养5日，发酵液离心去菌体，上清经硫酸铵沉淀，琼脂糖凝胶（DEAE Sepharose Fast Flow）层析、羟基磷灰石（Hydroxylapatite）层析和冷冻干燥等步骤，β-甘露聚...产β-甘露聚糖酶的罗耳阿太菌（Athelia roffsii）菌株CBS191．62，发酵培养5日，发酵液离心去菌体，上清经硫酸铵沉淀，琼脂糖凝胶（DEAE Sepharose Fast Flow）层析、羟基磷灰石（Hydroxylapatite）层析和冷冻干燥等步骤，β-甘露聚糖酶的比活提高了15．1倍，获得凝胶电泳均一的蛋白样品。经SDS-PAGE测定β-甘露聚糖酶分子量为42kDa，证明该酶为单聚体；用等电聚焦电泳测得其等电点为2．95；该酶的最适反应温度为30℃，在不超过50℃时酶活较稳定；酶反应的最适pH为5．0，pH稳定范围为5．5～7．0。重金属离子Zn^2＋、Fe^3＋、Co^2＋、Hg^2＋能强烈抑制该酶活性，而Mg^2＋、Al^3＋对该酶有部分的抑制作用，低浓度的Li＋、Mn^2＋、Ca^2＋对该酶基本没有影响。展开更多
文摘利用响应面分析法优化乙醇醇沉提取罗耳阿太菌胞外多糖(Athelia rolfsii exopolysaccharides,AEPS)工艺,并探究其保湿特性及黏度稳定性。以AEPS提取量为指标,在单因素试验的基础上,应用Box-Behnken试验设计优化多糖提取工艺。以壳聚糖和尿素作对照,研究AEPS吸湿及保湿性能,同时研究温度、pH值和离子(Mg2+、Ca2+、Na+、K+)浓度对AEPS黏度稳定性的影响。结果表明:AEPS醇沉最佳条件为浓缩倍数3、醇沉时间17 h、醇沉温度5℃、无水乙醇体积为发酵液的1.7倍,所得AEPS提取量为12.24 g/L;AEPS吸湿及保湿性能明显优于壳聚糖和尿素,1 mg/m L AEPS(黏度57 m Pa·s)保湿性最好;在5~95℃范围内,35℃时AEPS黏度最低,35℃以外多糖黏度都高于51 m Pa·s,但在pH 1~12、离子浓度0~1.0 mol/L范围内,AEPS黏度几乎不受影响。
文摘产β-甘露聚糖酶的罗耳阿太菌（Athelia roffsii）菌株CBS191．62，发酵培养5日，发酵液离心去菌体，上清经硫酸铵沉淀，琼脂糖凝胶（DEAE Sepharose Fast Flow）层析、羟基磷灰石（Hydroxylapatite）层析和冷冻干燥等步骤，β-甘露聚糖酶的比活提高了15．1倍，获得凝胶电泳均一的蛋白样品。经SDS-PAGE测定β-甘露聚糖酶分子量为42kDa，证明该酶为单聚体；用等电聚焦电泳测得其等电点为2．95；该酶的最适反应温度为30℃，在不超过50℃时酶活较稳定；酶反应的最适pH为5．0，pH稳定范围为5．5～7．0。重金属离子Zn^2＋、Fe^3＋、Co^2＋、Hg^2＋能强烈抑制该酶活性，而Mg^2＋、Al^3＋对该酶有部分的抑制作用，低浓度的Li＋、Mn^2＋、Ca^2＋对该酶基本没有影响。
