目的:分析实用细胞冻存技术在自体造血干细胞移植中的应用。方法:收集11例患者自体造血干细胞移植(AHSCT)动员的外周血造血干细胞,收集袋总容量100~150 m L,其中二甲基砜(DMSO)占总容量的10%、异体同型病毒灭活血浆占20%、外周血造血干...目的:分析实用细胞冻存技术在自体造血干细胞移植中的应用。方法:收集11例患者自体造血干细胞移植(AHSCT)动员的外周血造血干细胞,收集袋总容量100~150 m L,其中二甲基砜(DMSO)占总容量的10%、异体同型病毒灭活血浆占20%、外周血造血干细胞占70%。超净台无菌操作分装后放置于-20℃的冰箱冻存12 h,再置于-80℃冰箱冻存。与常用冻存技术做对照,移植前复苏干细胞,检测细胞活性、单个核细胞计数(MNC)和CD34+细胞的回收率;移植后观察患者粒细胞、血小板植入时间。结果:复苏干细胞后检测细胞活性(89.10±3.98)%,MNC和CD34+细胞的回收率分别为(91.84%±2.32)%和(90.59%±1.72)%,与对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05);移植后粒细胞中位植入时间+12 d、血小板中位植入时间+18 d,与对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:DMSO与病毒灭活血浆是一种经济、易操作的干细胞冷冻保护剂。展开更多
研究人乳头瘤病毒特异性 T 细胞系细胞冻存后细胞的存活率及功能。应用包含10%二甲基亚砜、90%小牛血清的冻存液冻存6个 T 细胞系（5个 CD4 T 细胞系，1个 CD8 T 细胞系）细胞，液氮中冻存32~54个月后复苏，台盼蓝染色法检测复苏后 T ...研究人乳头瘤病毒特异性 T 细胞系细胞冻存后细胞的存活率及功能。应用包含10%二甲基亚砜、90%小牛血清的冻存液冻存6个 T 细胞系（5个 CD4 T 细胞系，1个 CD8 T 细胞系）细胞，液氮中冻存32~54个月后复苏，台盼蓝染色法检测复苏后 T 细胞系细胞的存活率，用酶联免疫斑点法（enzyme-linked immunospot assay，ELISPOT）检测复苏后 T 细胞系细胞的功能。结果显示，6个 T 细胞系细胞液氮冻存解冻后细胞的存活率为24.7%~93.5%，过夜培养后细胞的存活率为2.5%~72.2%。CD8 T 细胞系细胞的存活率高于 CD4 T细胞系细胞。6个复苏后的 T 细胞系细胞在 PHA 诱导后均能分泌 IFN-γ。人乳头瘤病毒特异性 T 细胞系细胞冻存复苏后能够保持较好的存活率和功能。展开更多
文摘研究人乳头瘤病毒特异性 T 细胞系细胞冻存后细胞的存活率及功能。应用包含10%二甲基亚砜、90%小牛血清的冻存液冻存6个 T 细胞系（5个 CD4 T 细胞系，1个 CD8 T 细胞系）细胞，液氮中冻存32~54个月后复苏，台盼蓝染色法检测复苏后 T 细胞系细胞的存活率，用酶联免疫斑点法（enzyme-linked immunospot assay，ELISPOT）检测复苏后 T 细胞系细胞的功能。结果显示，6个 T 细胞系细胞液氮冻存解冻后细胞的存活率为24.7%~93.5%，过夜培养后细胞的存活率为2.5%~72.2%。CD8 T 细胞系细胞的存活率高于 CD4 T细胞系细胞。6个复苏后的 T 细胞系细胞在 PHA 诱导后均能分泌 IFN-γ。人乳头瘤病毒特异性 T 细胞系细胞冻存复苏后能够保持较好的存活率和功能。
