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尼克酰胺转甲基酶通过介导细胞内活性氧影响肝癌细胞铁死亡的作用研究
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作者 王锦春 戴永青 +3 位作者 王亚清 陈珏 刘祖平 李烨佳 《中国现代医生》 2024年第23期30-34,共5页
目的探究尼克酰胺转甲基酶介导细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)在肝癌细胞铁死亡中的影响及其机制。方法选取2019年3月至2020年2月于笔者医院接受治疗的40例原发性肝细胞癌患者作研究对象,分别取患者的癌旁组织标本及肝癌组... 目的探究尼克酰胺转甲基酶介导细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)在肝癌细胞铁死亡中的影响及其机制。方法选取2019年3月至2020年2月于笔者医院接受治疗的40例原发性肝细胞癌患者作研究对象,分别取患者的癌旁组织标本及肝癌组织标本。使用串联液相质谱仪检测细胞中甲基尼克酰胺(methyl nicotinamid,MNA)表达,使用流式细胞仪检测ROS及过氧化脂质的平均荧光强度,采用蛋白质印迹法(Western blot)法检测人肝癌细胞(SK-Hep-1、Hep3B)细胞表达的情况变化。采用免疫组化法检测癌旁组织、肝癌组织中尼克酰胺转甲基酶(nicotinamide N-methyltransferase,NNMT)及ROS水平,采用CCK-8法检测不同铁浓度细胞的生存活性。结果肝癌组织组中的MNA水平较癌旁组织组有所提升差异有统计学意义(P<0.05)。与癌旁组织组比较,肝癌组织组的ROS平均荧光强度表达升高,过氧化脂质平均的荧光强度表达降低,SK-Hep-1、Hep3B细胞表达量上升,差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组比较,NNMT组2、10、20及25μmol/L的细胞生存活性水平升高(P<0.05)。与NNMT组比较,铁抑制组不同铁浓度(2μmol/L、10μmol/L、20μmol/L、25μmol/L)的细胞生存活性表达下降差异有统计学意义(P<0.05)。结论经尼克酰胺转甲基酶介导可引导产生ROS及能量紊乱,提高了肿瘤细胞的死亡率。 展开更多
关键词 肝癌 尼克酰胺转甲基酶 细胞内活性氧 铁死亡
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细胞内活性氧及其DNA损伤产物在启动细胞癌变中的作用 被引量:12
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作者 朱茂祥 杨陟华 +2 位作者 龚诒芬 陆颖 曹珍山 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2001年第10期1024-1028,共5页
目的:研究辐射(60Coγ射线照射)和化学致癌物4-甲基亚硝胺-1-(3-吡啶基)-1-丁酮4methylnitrosamino13pyridyl1butanone,NNK诱发细胞(BEP2D)产生的活性氧(reactiveoxygenspecies,ROS)对DNA氧化损伤及其在启动细胞癌变中的作用。方法:细胞... 目的:研究辐射(60Coγ射线照射)和化学致癌物4-甲基亚硝胺-1-(3-吡啶基)-1-丁酮4methylnitrosamino13pyridyl1butanone,NNK诱发细胞(BEP2D)产生的活性氧(reactiveoxygenspecies,ROS)对DNA氧化损伤及其在启动细胞癌变中的作用。方法:细胞内H2O2和O2分别用2′7′-二氯荧光黄双乙酸盐DCFHDA和氢化乙锭HE标记,用流式细胞法测定荧光产物2′7′-二氯荧光黄DCF和溴乙锭EB荧光强度;8-羟基脱氧鸟嘌呤(8hydroxydeoxygunosine,OH8dG)含量用高压液相色谱结合电化学方法HPLCECD测定;用脂质体包埋法将目标DNA(来自NNK处理和60Coγ射线照射的BEP2D细胞)转染到受体细胞(C3H10T1/2)中,并用G418筛选阳性克隆细胞;用半固体琼脂试验检测细胞转化能力;用裸鼠成瘤试验鉴定细胞恶性转化。结果:NNK和60Coγ射线可诱发BEP2D细胞内ROS水平及OH8dG含量显著增高,并显示出良好的剂量效应关系;NNK处理和60Coγ射线照射的BEP2D细胞DNA分别转染到C3H10T1/2受体细胞后,细胞出现转化特性,裸鼠成瘤试验为阳性。结论:辐射和化学致癌物诱发细胞产生的ROS增高及其对DNA的氧化损伤可能启动了细胞癌变。 展开更多
关键词 化学致癌物 辐射致癌 DNA损伤 启动细胞 细胞内活性氧
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6-姜酚诱导白血病细胞凋亡中细胞内活性氧及线粒体跨膜电位的改变 被引量:8
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作者 曾慧兰 韩新爱 +7 位作者 古晨 朱海扬 黄雪松 古建泉 钟启 刘冠杰 明伟杰 蔡昕妮 《中药材》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期584-587,共4页
目的:研究细胞内活性氧(ROS)及线粒体跨膜电位(ΔΨm)在6-姜酚诱导慢性粒细胞白血病K562细胞、人急性T淋巴细胞白血病MOLT4细胞凋亡中的变化,探讨线粒体途径在白血病信号转导中的作用。方法:用不同浓度6-姜酚作用K562细胞和MOLT4细胞,以... 目的:研究细胞内活性氧(ROS)及线粒体跨膜电位(ΔΨm)在6-姜酚诱导慢性粒细胞白血病K562细胞、人急性T淋巴细胞白血病MOLT4细胞凋亡中的变化,探讨线粒体途径在白血病信号转导中的作用。方法:用不同浓度6-姜酚作用K562细胞和MOLT4细胞,以2,7-二氯荧光素(2,7-d ichloro fluoresce inc iactate,DCFH-DA)为细胞内活性氧探针,罗丹明-123为反映线粒体膜电位荧光探针,流式细胞仪检测ROS水平和线粒体膜电位的变化。结果:不同浓度6-姜酚作用K562细胞后,ROS水平显著高于对照组(P<0.01),ΔΨm显著低于对照组(P<0.01)。姜酚作用MOLT4细胞后,ROS显著高于对照组(P<0.05)。结论:6-姜酚能诱导白血病细胞株K562及MOLT4细胞ROS水平升高,降低细胞ΔΨm,通过线粒体途径介导白血病细胞凋亡。 展开更多
关键词 6-姜酚 K562细胞 MOLT4细胞 细胞内活性氧 线粒体跨膜电位 凋亡
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细胞内活性氧在甲基乙二醛促人腹膜间皮细胞分泌血管内皮生长因子中的作用 被引量:6
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作者 洪富源 孙芳 +3 位作者 刘军 姚建 黄一新 唐知还 《肾脏病与透析肾移植杂志》 CAS CSCD 2005年第4期329-332,376,共5页
目的:观察葡萄糖降解产物甲基乙二醛(MGO)对人腹膜间皮细胞(HPMC)分泌血管内皮生长因子(VEGF)的影响及细胞内活性氧(ROS)在其中的作用。方法:分别用不同浓度的MGO及抗氧化剂N-酰-L-半胱氨酸(NAC)作用于细胞,用RT-PCR和ELISA方法测定HPMC... 目的:观察葡萄糖降解产物甲基乙二醛(MGO)对人腹膜间皮细胞(HPMC)分泌血管内皮生长因子(VEGF)的影响及细胞内活性氧(ROS)在其中的作用。方法:分别用不同浓度的MGO及抗氧化剂N-酰-L-半胱氨酸(NAC)作用于细胞,用RT-PCR和ELISA方法测定HPMC中VEGF的表达;再以氧化敏感的荧光染料2、7-二氢二氯荧光素(DCFH)染色,流式细胞仪测定细胞内ROS强度。结果:MGO能使细胞内ROS水平明显升高,呈浓度依赖效应;MGO同时以时效和量效方式促进HPMC中VEGF的表达;而NAC能够明显抑制MGO导致的细胞内ROS升高,同时抑制HPMC中VEGF的分泌。结论:MGO可能部分通过诱导细胞内ROS,促进HPMC表达VEGF,从而引起腹膜新生血管的增加,最终导致腹膜失超滤现象。 展开更多
关键词 人腹膜间皮细胞 活性氧 血管内皮生长因子 腹膜透析 分泌血管内皮生长因子 细胞内活性氧 甲基乙二醛 血管内皮生长因子(VEGF) 细胞内ROS ELISA方法
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淫羊藿素对K562细胞增殖及细胞内活性氧的影响 被引量:2
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作者 马婷 李子坚 +4 位作者 王丽娜 李卓 牟晓丽 吕莹 席亚明 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期1003-1007,共5页
目的:探讨淫羊藿素(icaritin,ICT)对慢性髓系白血病K562细胞增殖及细胞内活性氧(ROS)的影响。方法:MTT法检测ICT对K562细胞增殖的影响;流式细胞术检测K562细胞的凋亡情况;Western blot法检测PARP蛋白表达变化;流式细胞术检测细胞中ROS... 目的:探讨淫羊藿素(icaritin,ICT)对慢性髓系白血病K562细胞增殖及细胞内活性氧(ROS)的影响。方法:MTT法检测ICT对K562细胞增殖的影响;流式细胞术检测K562细胞的凋亡情况;Western blot法检测PARP蛋白表达变化;流式细胞术检测细胞中ROS水平。结果:ICT对K562细胞增殖有明显的抑制作用,且呈一定的浓度依赖性(r=0.837);凋亡细胞比例增多;PARP蛋白表达量增加;细胞内活性氧水平明显增高。结论:淫羊藿素具有抑制K562细胞增殖并诱导其凋亡的作用,其机制可能与升高细胞内活性氧有关。 展开更多
关键词 淫羊藿素 K562细胞 诱导凋亡 细胞内活性氧
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细胞内活性氧在晚期糖基化终产物促肾小球系膜细胞合成纤维连接蛋白中的作用 被引量:1
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作者 黄培基 李健榕 +1 位作者 黄国良 刘礼斌 《四川大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期1142-1144,共3页
目的观察晚期糖基化终末产物(AGEs)对大鼠肾小球系膜细胞合成和分泌纤维连接蛋白的影响及细胞内活性氧(ROS)在其中的作用。方法在体外制备AGEs,分别用不同浓度的(0,100,500,1000μg/mL)AGEs及抗氧化剂N-酰-L-半胱氨酸(NAC 30 mmol/L)作... 目的观察晚期糖基化终末产物(AGEs)对大鼠肾小球系膜细胞合成和分泌纤维连接蛋白的影响及细胞内活性氧(ROS)在其中的作用。方法在体外制备AGEs,分别用不同浓度的(0,100,500,1000μg/mL)AGEs及抗氧化剂N-酰-L-半胱氨酸(NAC 30 mmol/L)作用于肾小球系膜细胞,以氧化敏感的荧光染料2、7-二氢二氯荧光素(DCFH)染色,流式细胞仪测定细胞内ROS强度;再用RT-PCR和ELISA方法测定系膜细胞中纤维连接蛋白的表达。结果AGEs能使细胞内ROS水平明显升高(P<0.05),呈现浓度依赖效应;AGEs同时以时效和量效方式促进肾小球系膜细胞中纤维连接蛋白基因和蛋白的表达(P<0.05);而NAC能够明显抑制AGEs所致的细胞内ROS升高,同时抑制肾小球系膜细胞中纤维连接蛋白的合成和分泌(P<0.05)。结论AGEs可能部分通过诱导细胞内ROS,促进肾小球系膜细胞表达分泌纤维连接蛋白,从而引起肾小球系膜基质增生,最终导致肾小球纤维化,而抗氧化治疗可能有助于阻止糖尿病肾病的氧化应激损害和肾小球纤维化的发展进程。 展开更多
关键词 糖基化终产物 肾小球系膜细胞 糖尿病肾病 细胞内活性氧 纤维连接蛋白
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紫色丝膜菌抗氧化及降低细胞内活性氧作用 被引量:4
7
作者 王春颖 高杰 +3 位作者 孟振晗 杨勇智 王旭 马超美 《食用菌学报》 CSCD 北大核心 2017年第1期83-88,共6页
贺兰山紫蘑菇是主要分布在内蒙古阿拉善盟和宁夏境内贺兰山地区的野生食用菌。以贺兰山紫蘑菇的主要代表种—紫色丝膜菌(Cortinarius purpurascens)为材料,对其抗氧化活性进行研究。结果表明:紫色丝膜菌甲醇提取物乙酸乙酯相的活性最好,... 贺兰山紫蘑菇是主要分布在内蒙古阿拉善盟和宁夏境内贺兰山地区的野生食用菌。以贺兰山紫蘑菇的主要代表种—紫色丝膜菌(Cortinarius purpurascens)为材料,对其抗氧化活性进行研究。结果表明:紫色丝膜菌甲醇提取物乙酸乙酯相的活性最好,在0.5 mg/mL的浓度下对DPPH和羟基自由基的清除率分别达88.3%和96.8%;紫色丝膜菌甲醇提取物乙酸乙酯相可显著保护自由基诱导的DNA断裂;在0.05 mg/mL时对叔丁基过氧化氢引起的细胞内活性氧水平有极显著降低作用,在0.15mg/mL时可将细胞内升高的活性氧降低到正常水平。 展开更多
关键词 紫色丝膜菌 清除自由基 保护DNA损伤 降低细胞内活性氧
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水飞蓟宾对阿尔茨海默病模型大鼠学习记忆功能及神经细胞内活性氧的影响分析
8
作者 陈培 杨晓帆 +1 位作者 杨旭芳 冯华 《全科口腔医学电子杂志》 2019年第24期186-186,188,共2页
目的对阿尔茨海默病模型大鼠进行实验研究,探讨水飞蓟宾在改善学习记忆功能及清除神经细胞内活性氧等方面的作用和影响。方法选取72只健康雄性Wistar大鼠作为阿尔茨海默病模型,分为低剂量水飞蓟宾组、中剂量水飞蓟宾组、高剂量水飞蓟宾... 目的对阿尔茨海默病模型大鼠进行实验研究,探讨水飞蓟宾在改善学习记忆功能及清除神经细胞内活性氧等方面的作用和影响。方法选取72只健康雄性Wistar大鼠作为阿尔茨海默病模型,分为低剂量水飞蓟宾组、中剂量水飞蓟宾组、高剂量水飞蓟宾组、多奈哌齐组、空白对照组以及模型组,实施Morris水迷宫训练,同时进行细胞培养及药物处理,检测大鼠的大鼠学习记忆功能及神经细胞内活性氧清除效果。结果与空白对照组相比,模型组大鼠的行为能力和空间探索能力明显下降,学习记忆功能相对更低,而神经细胞内活性氧含量较高。与模型组相比,水飞蓟宾组大鼠的行为能力和空间探索能力明显改善,学习记忆功能相对更高,而神经细胞内活性氧含量相对更低。结论水飞蓟宾在阿尔茨海默病模型大鼠中的应用,能够在一定程度上改善其学习记忆功能,同时清除神经细胞内活性氧,说明水飞蓟宾具有治疗阿尔茨海默病的可能性,还需要持续进行研究、探索,并在临床实践应用中进行验证。 展开更多
关键词 水飞蓟宾 阿尔兹海默病 学习记忆功能 神经细胞内活性氧
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胃癌细胞中线粒体DNA D-环区的突变及其对细胞内活性氧水平和细胞周期的影响 被引量:3
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作者 赵一兵 杨宏宇 陈国玉 《中华胃肠外科杂志》 CAS 2005年第4期368-370,共3页
目的研究线粒体DNAD-环区在胃癌细胞中的突变对细胞内活性氧水平及细胞周期的影响。方法采用PCR方法对20例胃癌组织及其邻近的正常胃黏膜线粒体DNAD-环区进行扩增并测序,根据测序结果分为突变组和无突变组;用流式细胞仪测定两组活性氧... 目的研究线粒体DNAD-环区在胃癌细胞中的突变对细胞内活性氧水平及细胞周期的影响。方法采用PCR方法对20例胃癌组织及其邻近的正常胃黏膜线粒体DNAD-环区进行扩增并测序,根据测序结果分为突变组和无突变组;用流式细胞仪测定两组活性氧及细胞周期,以比较两组中活性氧及细胞周期的差异。结果在20例癌组织中,有7例(35%)存在线粒体DNAD-环区突变,突变位点18个,其中4个属微卫星不稳定。突变组中的活性氧、细胞增殖及凋亡率较无突变组均显著增高(P<0.05)。结论胃癌细胞线粒体DNAD-环区是一个具有高度突变性的区域。线粒体DNAD-环区的突变可能在胃癌的发生、发展过程中起着重要的作用。 展开更多
关键词 线粒体DNA 细胞内活性氧 D-环区 细胞周期 胃癌细胞 水平 微卫星不稳定 PCR方法 流式细胞 胃癌组织 突变位点 细胞增殖 胃黏膜 凋亡率 突变性 测序
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野西瓜极性生物碱对HepG-2细胞内活性氧、Ca^(2+)和Caspase-9,3活性的影响
10
作者 于蕾 高世勇 +2 位作者 邹翔 汲晨锋 季宇彬 《中国药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第23期1827-1831,共5页
目的为研究野西瓜极性生物碱(Capparis spinosa L.polar alkaloid)诱导人肝癌细胞HepG-2细胞凋亡的线粒体机制,观察了野西瓜极性生物碱对HepG-2细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)、Ca2+浓度和Caspase-9,3的影响。方法经流式细... 目的为研究野西瓜极性生物碱(Capparis spinosa L.polar alkaloid)诱导人肝癌细胞HepG-2细胞凋亡的线粒体机制,观察了野西瓜极性生物碱对HepG-2细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)、Ca2+浓度和Caspase-9,3的影响。方法经流式细胞仪观察野西瓜极性生物碱对活性的影响;激光共聚焦显微镜检测野西瓜极性生物碱作用前后,HepG-2细胞内Ca2+浓度的变化;酶标仪检测Caspase-9,3活性。结果野西瓜极性生物碱可不同程度的升高HepG-2细胞活性氧水平和Ca2+浓度,还可以引起Caspase-9,3活性的增加。结论野西瓜极性生物碱引起HepG-2细胞内活性氧增加,造成细胞内Ca2+超载,启动Caspase级联反应,诱导HepG-2细胞凋亡。 展开更多
关键词 野西瓜极性生物碱 人肝癌HEPG-2细胞 细胞凋亡 细胞内活性氧 Ca2+浓度 Caspase-9 3
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脑热清对小鼠的腹腔巨噬细胞内游离钙及活性氧的作用
11
作者 岳晓莉 王芳 +2 位作者 李萍 张颖 蒋玉凤 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第8期1642-1642,共1页
目的:实时监测脑热清口服液(NRQ)对小鼠腹腔巨噬细胞内活性氧(ROS)及游离钙([Ca2+]i)的作用. 方法:取小鼠腹腔巨噬细胞,原代培养24小时,分别以荧光探针二氯荧光素二酯(H2 DCFDA)和Fluo-3-AM标记细胞内ROS及[Ca2+]i,并用EDTA和维拉帕米... 目的:实时监测脑热清口服液(NRQ)对小鼠腹腔巨噬细胞内活性氧(ROS)及游离钙([Ca2+]i)的作用. 方法:取小鼠腹腔巨噬细胞,原代培养24小时,分别以荧光探针二氯荧光素二酯(H2 DCFDA)和Fluo-3-AM标记细胞内ROS及[Ca2+]i,并用EDTA和维拉帕米螯合细胞外钙,阻断细胞膜钙离子通道,通过激光共聚焦显微系统动态观察NRQ的作用. 展开更多
关键词 小鼠腹腔巨噬细胞 细胞内游离钙 细胞内活性氧 脑热清口服液 Fluo-3-AM [CA^2+]I 细胞内ROS 二氯荧光素 钙离子通道
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清开灵对小鼠腹腔巨噬细胞内游离钙及活性氧的作用
12
作者 王芳 岳晓莉 +2 位作者 李萍 张颖 蒋玉凤 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第8期1637-1637,共1页
目的:动态观察清开灵(QKL)对小鼠腹腔巨噬细胞内活性氧及游离钙的作用. 方法:原代培养小鼠腹腔巨噬细胞,分别以荧光探针二氯荧光素二酯(H2 DCFDA)和Fluo-3-AM标记细胞内活性氧及游离钙,通过激光共聚焦系统动态观察QKL的作用.
关键词 小鼠腹腔巨噬细胞 细胞内游离钙 细胞内活性氧 清开灵 Fluo-3-AM 动态观察 二氯荧光素 激光共聚焦 原代培养
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丹参对血管紧张素Ⅱ诱导的肾小球系膜细胞表达TGF-β_1,ROS和PAI-1的影响 被引量:38
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作者 袁军 鲁艳芳 +1 位作者 陈陶后 曾祥法 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第22期2400-2404,共5页
目的:探讨丹参对血管紧张素Ⅱ致肾小球硬化的干预作用。方法:采用血管紧张素Ⅱ刺激系膜细胞增殖,同时加入不同剂量的丹参注射液分别对系膜细胞作用24 h。观察系膜细胞纤溶酶原激活剂抑制物-1(plasminogen activator inhibitor-1,PAI-1)m... 目的:探讨丹参对血管紧张素Ⅱ致肾小球硬化的干预作用。方法:采用血管紧张素Ⅱ刺激系膜细胞增殖,同时加入不同剂量的丹参注射液分别对系膜细胞作用24 h。观察系膜细胞纤溶酶原激活剂抑制物-1(plasminogen activator inhibitor-1,PAI-1)mRNA、培养上清液中的PAI-1蛋白和转化生长因子β1(transforming growth factorβ1,TGF-β1)的含量,以及细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平的变化。结果:丹参明显抑制住了由血管紧张素Ⅱ刺激大鼠肾脏系膜细胞而产生的PAI-1 mRNA以及蛋白表达的升高,且其抑制作用的强弱与丹参注射液的剂量密切相关。丹参还明显下调了因血管紧张素Ⅱ刺激后TGF-β1的表达增加以及细胞内ROS水平的升高。结论:丹参下调血管紧张素Ⅱ诱导的系膜细胞PAI-1表达的增加,以及抑制TGF-β1的分泌增加与细胞内ROS水平的增高,从而发挥抗肾小球硬化的作用。 展开更多
关键词 丹参 纤溶酶原激活剂抑制物 转化生长因子Β1 细胞内活性氧
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人参三七川芎提取物延缓血管紧张素Ⅱ诱导内皮细胞衰老机制的研究 被引量:8
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作者 杨静 雷燕 +2 位作者 方素萍 崔巍 陈可冀 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期524-528,共5页
目的探讨人参三七川芎提取物对血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)诱导的内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)衰老的影响。方法体外培养的HUVECs加入终浓度为10-6mol/LAngⅡ诱导细胞衰老,造成内皮细胞衰老模型。... 目的探讨人参三七川芎提取物对血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)诱导的内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)衰老的影响。方法体外培养的HUVECs加入终浓度为10-6mol/LAngⅡ诱导细胞衰老,造成内皮细胞衰老模型。细胞分为AngⅡ衰老模型组、空白对照组、人参三七川芎高剂量组、人参三七川芎低剂量组和缬沙坦组,采用SA-β-半乳糖染色法观察细胞衰老改变,流式细胞仪分析细胞周期,激光共聚焦显微镜观察细胞内活性氧(ROS)含量,硝酸还原酶法检测培养液一氧化氮(NO)和抗超氧阴离子水平,Western-blot检测各组细胞AngⅡ1型和2型受体(AT1R和AT2R)、NAD(P)H氧化酶p47phox的蛋白表达。结果AngⅡ衰老模型组与空白对照组比较,β-gal染色阳性细胞数明显增多,细胞停滞在G0-G1期,激光共聚焦显微镜下ROS荧光强度明显增强,培养液中抗超氧阴离子、NO含量减少,p47phox蛋白表达明显上调,AT1R表达较空白对照组上调。给予高、低剂量中药处理后改善了细胞的衰老状态,β-gal染色阳性细胞数减少,G0-G1期细胞减少,G2-M期细胞增加,ROS荧光强度减弱,抗超氧阴离子、NO含量较AngⅡ衰老模型组增加,p47phox蛋白表达下调,AT1R表达较AngⅡ衰老模型组下调。结论人参三七川芎提取物能够延缓AngⅡ诱导的HUVECs衰老,可通过AT1R下调NAD(P)H氧化酶p47phox表达,进而使ROS产生减少,可能是益气活血中药延缓内皮细胞衰老的主要原因之一。 展开更多
关键词 人参三七川芎提取物 血管紧张素Ⅱ NAD(P)H氧化酶 内皮细胞 衰老 细胞内活性氧
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白藜芦醇对PM2.5诱导的内皮细胞氧化应激和凋亡的保护作用 被引量:9
15
作者 刘方芳 金瑶 +4 位作者 李明 吴彤 王芳 邝枣园 李岩 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期273-277,共5页
目的研究白藜芦醇(Resveratrol,RES)对细颗粒物PM2.5诱导人血管内皮细胞氧化应激和凋亡的保护作用。方法体外培养血管内皮细胞株EA.hy926,分为对照组、PM2.5组(采用100μg·mL^(-1)PM2.5处理)和不同浓度RES组(采用终浓度为5,10,20μ... 目的研究白藜芦醇(Resveratrol,RES)对细颗粒物PM2.5诱导人血管内皮细胞氧化应激和凋亡的保护作用。方法体外培养血管内皮细胞株EA.hy926,分为对照组、PM2.5组(采用100μg·mL^(-1)PM2.5处理)和不同浓度RES组(采用终浓度为5,10,20μmol·L^(-1)的RES预处理2h后再给予100μg·mL^(-1)的PM2.5)。分别采用CCK-8法检测各组细胞活性;荧光染色法检测细胞内活性氧(Reactive oxidative species,ROS)水平;Annexin V-FITC/PI双标记流式细胞术检测细胞凋亡情况;Western Blot法检测凋亡相关蛋白Cytochrome C和Caspase3的表达。结果与对照组比较,PM2.5对EA.hy926细胞的活性具有明显的抑制作用(P<0.01),可诱导细胞内ROS生成增多、细胞凋亡(P<0.01)并促使凋亡相关蛋白Cytochrome C表达增高(P<0.01)和Caspase3活化(P<0.05);与PM2.5组比较,不同浓度RES预处理能显著抑制PM2.5诱导的ROS生成及细胞凋亡(P<0.01),同时可见Cytochrome C表达下调(P<0.05,P<0.01)和Caspase3活化减少(P<0.05,P<0.01)。结论白藜芦醇可以降低PM2.5诱导的血管内皮细胞氧化应激和凋亡,减轻PM2.5对血管内皮细胞的毒性,对其具有保护作用。 展开更多
关键词 白藜芦醇 PM2.5 血管内皮细胞 氧化应激 凋亡 细胞内活性氧
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黑果腺肋花楸花色苷对人皮肤成纤维细胞紫外辐射损伤的保护作用 被引量:16
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作者 张永祥 国石磊 +2 位作者 彭利沙 朱凤妹 李军 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期1088-1092,共5页
为了探讨黑果腺肋花楸花色苷对紫外辐射所致人皮肤成纤维细胞氧化损伤的保护作用,将体外培养的人皮肤成纤维细胞分为对照组、辐射组和辐射给药组。采用MTT法检测不同浓度花色苷添加量对细胞增殖的保护作用,以选择最优添加浓度。采用化... 为了探讨黑果腺肋花楸花色苷对紫外辐射所致人皮肤成纤维细胞氧化损伤的保护作用,将体外培养的人皮肤成纤维细胞分为对照组、辐射组和辐射给药组。采用MTT法检测不同浓度花色苷添加量对细胞增殖的保护作用,以选择最优添加浓度。采用化学荧光法检测细胞活性氧(ROS)含量,ELISA法检测细胞MMP-1分泌水平。结果表明:UVA辐照剂量为10 J/cm2条件下,与辐射组相比,MTT法显示花色苷添加组浓度为125μg/m L对损伤细胞增殖保护作用有极显著的提高(P<0.01),同时,125μg/m L花色苷添加组能够显著降低辐射损伤后细胞ROS含量以及MMP-1分泌水平(P<0.01)。由此可见,适宜浓度的黑果腺肋花楸花色苷能够降低细胞ROS含量及MMP-1分泌水平,从而对辐射损的细胞起到一定的保护作用。 展开更多
关键词 黑果腺肋花楸花色苷 皮肤成纤维细胞 辐射损伤 细胞内活性氧
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硫化氢对氧化型低密度脂蛋白诱导的人脐静脉内皮细胞凋亡的影响 被引量:8
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作者 任重 赵战芝 +4 位作者 彭湘萍 谢巍 刘艳文 索荣 姜志胜 《中国动脉硬化杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期891-896,共6页
目的探讨硫化氢对氧化型低密度脂蛋白诱导的人脐静脉内皮细胞凋亡的影响及有关机制。方法人脐静脉内皮细胞分别经不同浓度(25、50、100、200μmol/L)和不同时间(6、12、24 h)硫氢化钠预孵育24 h后加入100 mg/L氧化型低密度脂蛋白处理24 ... 目的探讨硫化氢对氧化型低密度脂蛋白诱导的人脐静脉内皮细胞凋亡的影响及有关机制。方法人脐静脉内皮细胞分别经不同浓度(25、50、100、200μmol/L)和不同时间(6、12、24 h)硫氢化钠预孵育24 h后加入100 mg/L氧化型低密度脂蛋白处理24 h,Hoechst 33258荧光染色和流式细胞术检测细胞凋亡,罗丹明123染色检测细胞线粒体膜电位变化,双氢罗丹明123染色检测细胞内活性氧的含量变化。结果硫氢化钠预处理能以时间和浓度依赖性的方式抑制氧化型低密度脂蛋白诱导的人脐静脉内皮细胞凋亡(均P<0.01),硫氢化钠或N-乙酰半胱氨酸预先处理能显著阻断氧化型低密度脂蛋白引起的人脐静脉内皮细胞线粒体膜电位降低、活性氧生成增多(均P<0.05)。结论硫化氢能显著抑制氧化型低密度脂蛋白诱导的人脐静脉内皮细胞凋亡,其机制与减少细胞线粒体膜电位及降低活性氧生成有关。 展开更多
关键词 硫化氢 氧化型低密度脂蛋白 N-乙酰半胱氨酸 人脐静脉内皮细胞 凋亡 细胞线粒体膜电位 细胞内活性氧
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辛硫磷对大鼠肝细胞凋亡的影响 被引量:4
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作者 任建新 刘学忠 +5 位作者 李慧敏 薛彬 赵瑞英 达剑森 卞建春 刘宗平 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期350-354,共5页
通过给大鼠肝细胞培养液中加入辛硫磷(染毒终浓度分别为3、10、30、100和300/zmol/L)染毒,于12、24h后用流式细胞仪分别测定细胞凋亡率、细胞死亡率和细胞内活性氧(ROS)水平,并在扫描电镜和荧光显微镜下观察细胞凋亡情况,研究... 通过给大鼠肝细胞培养液中加入辛硫磷(染毒终浓度分别为3、10、30、100和300/zmol/L)染毒,于12、24h后用流式细胞仪分别测定细胞凋亡率、细胞死亡率和细胞内活性氧(ROS)水平,并在扫描电镜和荧光显微镜下观察细胞凋亡情况,研究了辛硫磷对原代培养大鼠肝细胞凋亡的影响。结果显示,辛硫磷具有明显的细胞毒性,在3~100μmol/L范围内随着染毒剂量的增大和染毒时间的延长,细胞死亡率、凋亡率和ROS水平显著升高,且发生了明显的细胞凋亡的形态学变化;但300μmol/L辛硫磷培养24h,肝细胞凋亡率和ROS水平下降,死亡率升高。表明辛硫磷对肝细胞有直接的毒性作用,并通过产生ROS诱导了肝细胞凋亡。 展开更多
关键词 大鼠 辛硫磷 细胞 细胞凋亡 细胞内活性氧
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汉防己甲素抑制肝癌细胞增生的作用 被引量:6
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作者 荆绪斌 李涛 +3 位作者 杨绮华 郭光华 胡辉 陈素钻 《世界华人消化杂志》 CAS 2003年第8期1223-1226,共4页
目的:研究汉防己甲素(tetrandrine,TTD)对肝癌细胞的作用及其机制。方法:采用MTT比色法观察了TTD对肝癌细胞增生的影响;采用流式细胞仪法观察了TTD对肝癌细胞内活性氧的影响;采用琼脂凝胶电泳法观察了DNA片断化的梯形条带。结果:10 and... 目的:研究汉防己甲素(tetrandrine,TTD)对肝癌细胞的作用及其机制。方法:采用MTT比色法观察了TTD对肝癌细胞增生的影响;采用流式细胞仪法观察了TTD对肝癌细胞内活性氧的影响;采用琼脂凝胶电泳法观察了DNA片断化的梯形条带。结果:10 and 20μmol/L TTD作用于肝癌细胞系24,48,72h后其增生率分别为90.1±1.0% and 77.5±2.0%,70.2±2.9% and 56.6±1.6%,61.6±2.0% and 47.2±1.9%(F=40.025,P<0.001);0、10和20μmol/L TTD作用于肝癌细胞系2h后O_2^-为35%、36.6%、63.2%;H_2O_2为24.5%、40.5%、84.6%。48h后20μmol/L TTD组肝癌细胞出现典型的凋亡表现。结论:TTD能够通过诱导肝癌细胞内活性氧的产生,而引起细胞凋亡,呈明显的剂量依赖性。 展开更多
关键词 汉防己甲素 细胞增生 细胞内活性氧 原发性肝痛 中医药治疗
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三七总皂苷对毒胡萝卜素引起的肝细胞内质网应激的作用 被引量:5
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作者 余晶 邱华 +3 位作者 龙富立 石清兰 陈月桥 毛德文 《中华中医药学刊》 CAS 2013年第7期1572-1574,共3页
目的:探索三七总皂苷对毒胡萝卜素引起的huh 7细胞内质网应激的作用及其机制。方法:对毒胡萝卜素和三七总皂苷干预培养的肝细胞,应用MTT法检测细胞活力,荧光探针DCFH-DA测定细胞内活性氧(ROS)生成量。免疫印迹测定Akt,PCNA,磷酸化应激... 目的:探索三七总皂苷对毒胡萝卜素引起的huh 7细胞内质网应激的作用及其机制。方法:对毒胡萝卜素和三七总皂苷干预培养的肝细胞,应用MTT法检测细胞活力,荧光探针DCFH-DA测定细胞内活性氧(ROS)生成量。免疫印迹测定Akt,PCNA,磷酸化应激激活的c-Jun蛋白水平。结果:毒胡萝卜素0.8 mmol.L-1孵育1 h可诱导显著huh 7细胞损伤,细胞活力下降到(40±3.2)%,ROS生成量比未处理细胞多5.4倍。细胞经三七总皂苷150μmol.L-1与毒胡萝卜素共孵育后,细胞存活率提高到(94.5±9.84)%;三七总皂苷能显著抑制毒胡萝卜素引起的huh 7细胞ROS生成,ROS生成下降60%(P<0.01)。三七总皂苷抑制毒胡萝卜素引起huh 7细胞死亡和ROS生成随剂量增加抑制作用加强。三七总皂苷抑制毒胡萝卜素激发huh 7细胞磷酸化c-Jun表达,提高细胞Akt,PCNA水平。结论:三七总皂苷抑制毒胡萝卜素引起的肝细胞应激损伤而导致的细胞死亡,其作用机制是通过减少细胞内活性氧生成,抑制毒胡萝卜素激活磷酸化c-Jun,提高细胞Akt,PCNA水平,降低了内质网应激。 展开更多
关键词 三七总皂苷 huh 7细胞 细胞内活性氧 磷酸化c-Jun
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