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鼻咽癌细胞亚株不同成瘤与转移潜能的分子机制 被引量:13
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作者 宋立兵 鄢践 +4 位作者 简少文 张玲 李满枝 李端 汪慧民 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2002年第2期158-162,共5页
背景与目的:我们已从鼻咽癌细胞株SUNE-1的克隆株中筛选出3个具有不同生物学特性的细胞亚株:5-8F(高成瘤、高转移)、6-10B(成瘤、不转移)和13-9B(不成瘤);在本研究中,我们从病毒和遗传两方面探讨鼻咽癌细胞株SUNE-1及其3个亚株的生物学... 背景与目的:我们已从鼻咽癌细胞株SUNE-1的克隆株中筛选出3个具有不同生物学特性的细胞亚株:5-8F(高成瘤、高转移)、6-10B(成瘤、不转移)和13-9B(不成瘤);在本研究中,我们从病毒和遗传两方面探讨鼻咽癌细胞株SUNE-1及其3个亚株的生物学特性差异的分子机制。方法:①PCR检测亚株中EB病毒(Epstein-Barrvirus,EBV)的BamHIW片段;②应用原位杂交技术检测SUNE-1及其3个亚株中EBV潜伏膜蛋白1(latentmembraneprotein1,LMP1)的表达状况;③应用比较基因组杂交(comparativegenomichybridization,CGH)检测SUNE-1及其3个亚株的基因扩增情况。结果:①在SUNE-1及其3个亚株中存在EBVBamHIW片段;②在3个亚株中,都能够检测到EBV-LMP1的表达,且表达强度一致。③CGH检测发现:SUNE-1的DNA拷贝数变呈现以1、2p、3、4、5p、6、7、9、10q、11、12q、13q、17q和18q增加和22q拷贝数减少为主;5-8F染色体变化以3p、7q、8q、9q、和10q拷贝数增加为主;而6-10B和13-9B除少数几个染色体区域发生缺失外,均无DNA拷贝数的增加。结论:鼻咽癌细胞株SUNE-1及其3个亚株,均有EBV的表达和存在不同的染色体变化,提示其生物学特性的差异可能主要由于染色体的变化引起,但EBV的感染对维持鼻咽癌的恶性程度可能起着重要的作用。 展开更多
关键词 鼻咽癌 细胞亚株 生物学特性 EB病毒 潜伏膜蛋白1 比较基因组杂交 转移潜能 分子机制
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全反式维甲酸提高人结肠癌细胞亚株SW480/M5对奥沙利铂敏感性 被引量:1
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作者 吕会增 魏波 +3 位作者 郑宗珩 陈新岐 叶小勇 卫洪波 《消化肿瘤杂志(电子版)》 2012年第3期170-175,共6页
目的探讨全反式维甲酸(all-trans retinoicacid,ATRA)提高人结肠癌细胞亚株SW480/M5对奥沙利铂(oxaliplatin,L-OHP)敏感性的可能机制。方法 MTT法筛选ATRA和L-OHP实验浓度。流式细胞仪检测ATRA对肿瘤细胞周期影响。分别用ATRA、L-OHP、A... 目的探讨全反式维甲酸(all-trans retinoicacid,ATRA)提高人结肠癌细胞亚株SW480/M5对奥沙利铂(oxaliplatin,L-OHP)敏感性的可能机制。方法 MTT法筛选ATRA和L-OHP实验浓度。流式细胞仪检测ATRA对肿瘤细胞周期影响。分别用ATRA、L-OHP、ATRA联合L-OHP作用SW480/M5细胞,MTT法检测药物对肿瘤细胞抑制率,流式细胞仪检测肿瘤细胞周期及凋亡率,原子光谱吸收仪检测肿瘤细胞DNA含铂(Pt)量。结果 L-OHP抑制SW480/M5细胞增殖的GI50为58.0mg/L,主要阻滞肿瘤细胞在S和G2/M期。ATRA8.0μmol/L作用24小时后,G1期细胞减少,S期细胞增多;作用72小时后,S期和G2/M期细胞增加并明显抑制肿瘤细胞增殖。8.0μmol/LATRA作用至48小时后联合L-OHP,两药联合由相加作用转变为协同作用;联合用药后S期和G2/M期细胞明显增多,细胞DNA含Pt量显著增加,呈时效依赖性。相对于单独用药,联合用药并不上调肿瘤细胞凋亡率。结论 ATRA通过改变SW480/M5细胞周期和提高细胞DNA含Pt量,明显增加肿瘤细胞对L-OHP敏感性。 展开更多
关键词 全反式维甲酸 奥沙利铂 人结肠癌细胞亚株SW480/M5 联合用药 药物敏感性
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汉族人肾透明细胞癌肺转移小鼠模型的建立及肺转移细胞亚株的筛选
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作者 翟羽佳 谭晓洁 +6 位作者 林丽萍 侯建国 武旗 常文军 马立业 姚明 曹广文 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第12期1446-1450,共5页
目的:建立可稳定传代的肾透明细胞癌小鼠肺转移模型,并在此基础上初步筛选出肾透明细胞癌特异性鼠肺转移细胞亚株,为后续研究奠定基础。方法:选用本实验室前期建立的肾透明细胞癌细胞株RCC05-TXJ,体外扩增培养制成细胞悬液后注射于NOD-S... 目的:建立可稳定传代的肾透明细胞癌小鼠肺转移模型,并在此基础上初步筛选出肾透明细胞癌特异性鼠肺转移细胞亚株,为后续研究奠定基础。方法:选用本实验室前期建立的肾透明细胞癌细胞株RCC05-TXJ,体外扩增培养制成细胞悬液后注射于NOD-SCID小鼠颈背部皮下,成瘤后取出瘤组织接种于另外NOD-SCID小鼠的肾包膜下,待有肉眼可见瘤块后,处死小鼠并取出肿瘤组织接种于新NOD-SCID小鼠的肾包膜下,反复数轮,直至出现稳定的鼠肺转移模型。此时取模型鼠肺转移组织,一部分继续接种于新鼠肾包膜下,反复数轮,尝试以转移组织诱导肺转移;另一部分进行原代培养,细胞经体外扩增纯化后制成悬液接种于新鼠肾包膜,数轮循环至产生肺转移,筛选能产生稳定鼠肺转移的细胞亚株。整个筛选过程均观察记录原位成瘤、淋巴及肺转移形成情况,并对肿瘤组织进行病理组织学观察及CA9(肾癌标志)、CD133(干细胞标志)表达检测。结果:以RCC05-TXJ细胞株接种所致NOD-SCID小鼠颈背部皮下肿瘤组织作为移植瘤材接种鼠肾包膜在第2轮即出现鼠肺转移,此后3~6轮以鼠肺转移组织移植肾包膜下,均能成功诱导转移。以鼠肺转移组织原代培养RCC细胞均获成功,第6轮原代培养细胞扩增纯化后制成的细胞悬液(RCC05-TXJ-L)接种于鼠肾包膜下,出现特异性肺转移,重复2轮实验结果稳定。RCC05-TXJ-L细胞具有生长速度快(传代时间约为2d)、原位成瘤时间短(1周左右)、接种后转移性较强、CA9及CD133表达升高等特点。结论:RCC05-TXJ在NOD-SCID小鼠体内多轮反复筛选可建立稳定的肾细胞癌鼠肺转移动物模型;在此基础上筛选出的肺转移性细胞亚株RCC05-TXJ-L可稳定诱导NOD-SCID鼠产生肺部转移。 展开更多
关键词 细胞 肺转移 动物模型 肺转移细胞亚株
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人卵巢癌耐药细胞亚株COC1/DDP的建立及其生物学特性的研究 被引量:2
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作者 陈惠祯 蔡红兵 《武汉市医学科研》 1997年第2期9-9,共1页
关键词 卵巢肿瘤 耐药细胞亚株 COC1 DDP 生物学特性
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鼻咽癌细胞肝转移亚株的建立 被引量:5
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作者 韩春 王爽 +1 位作者 刘莉 姚开泰 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期654-657,共4页
目的建立鼻咽癌细胞肝转移亚株,研究鼻咽癌肝转移机制。方法利用裸鼠体内传代的方法获得肝转移细胞亚株,并用体内和体外实验来观察其侵袭转移能力。结果经体内反复筛选得到肝转移能力高的亚株5-8F-H3B-EGFP,其侵袭性、运动性以及形成肝... 目的建立鼻咽癌细胞肝转移亚株,研究鼻咽癌肝转移机制。方法利用裸鼠体内传代的方法获得肝转移细胞亚株,并用体内和体外实验来观察其侵袭转移能力。结果经体内反复筛选得到肝转移能力高的亚株5-8F-H3B-EGFP,其侵袭性、运动性以及形成肝转移灶的能力均大于母系5-8F-EGFP,并具有较高的肝脏亲和性。结论该亚株的建立为今后研究鼻咽癌肝转移的分子机制奠定了基础。 展开更多
关键词 鼻咽癌 肝转移 肿瘤侵袭 细胞亚株
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全反式维甲酸对人结肠癌细胞亚株SW480/M5增殖和凋亡的影响 被引量:2
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作者 吕会增 李玺 +2 位作者 陈图峰 叶小勇 周如健 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期1321-1323,共3页
目的观察全反式维甲酸(ATRA)对人结肠癌细胞亚株SW480/M5增殖和凋亡的影响。方法噻唑蓝(MTT)比色法检测1、2、4、8μmoL/LATRA作用24、48、72h对SW480/M5细胞的抑制率。流式细胞仪检测8μmoL/LATRA作用24、48、72h及2、4μmoL/... 目的观察全反式维甲酸(ATRA)对人结肠癌细胞亚株SW480/M5增殖和凋亡的影响。方法噻唑蓝(MTT)比色法检测1、2、4、8μmoL/LATRA作用24、48、72h对SW480/M5细胞的抑制率。流式细胞仪检测8μmoL/LATRA作用24、48、72h及2、4μmoL/LATRA作用48h的肿瘤细胞周期和凋亡率。结果ATRA抑制SW480/M5细胞增殖作用呈一定时效和量效依赖性;8μmoL/LATRA作用72h明显抑制肿瘤细胞增殖,抑制率接近30%。2、4μmoL/LATRA作用SW480/M5细胞48h或8μmoL/L作用24h,肿瘤细胞G,期比例开始降低,S期比例增加(P〈0.05)。8μmoL/LATRA作用48h后,S期比例进一步增高,G2/M期细胞比例不增加;作用72h后,G,期细胞比例进一步下降,伴G2/M期细胞比例增加(P〈0.05)。8μmoL/LATRA作用24h无明显诱导SW480/M5细胞凋亡作用,作用48h或72h可诱导肿瘤细胞凋亡,但凋亡率差异无统计学意义(P〉0.05)。结论8μmol/LATRA作用48h或72h通过阻滞SW480/M5细胞在S期或(和G2/M)期,并诱导肿瘤细胞凋亡,可明显抑制肿瘤细胞增殖。 展开更多
关键词 全反式维甲酸 人结肠癌细胞亚株 细胞周期 凋亡
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不同转移特性稳定表达绿色荧光蛋白的乳腺癌MCF7细胞亚株的建立 被引量:1
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作者 罗政强 陈安民 +1 位作者 郭风劲 李新志 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期33-35,共3页
目的建立不同转移特性并稳定表达绿色荧光蛋白的人乳腺癌MCF7细胞亚株。方法转染绿色荧光蛋白(GFP)人MCF7细胞,通过有限稀释法得到10株亚株,细胞电泳得到电泳率最高(A2)、最低(c6)的两株,测定其增殖率、克隆形成率、体外侵袭... 目的建立不同转移特性并稳定表达绿色荧光蛋白的人乳腺癌MCF7细胞亚株。方法转染绿色荧光蛋白(GFP)人MCF7细胞,通过有限稀释法得到10株亚株,细胞电泳得到电泳率最高(A2)、最低(c6)的两株,测定其增殖率、克隆形成率、体外侵袭能力,行裸鼠皮下、原位成瘤试验。结果获得稳定表达绿色荧光蛋白不同转移特性的细胞亚株A2和c6,A2的群体倍增时间为25.6h,C6为41.8h;软琼脂形成率A2为30.7%,C6为14%;体外侵袭能力,A2的平均侵袭细胞数为(136.80±12.36)个,明显高于C6(73.62±9.76)个;裸小鼠皮下成瘤试验发现A2成瘤力强,并且A2原位接种后可出现骨转移。结论建立的细胞亚株有不同转移特性,有助于进一步研究乳腺癌骨转移的分子机制和治疗。 展开更多
关键词 乳腺癌 绿色荧光蛋白 细胞亚株 骨转移
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采用反复照射方法建立放射抗拒性鼻咽癌细胞系亚株
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作者 彭露杏 陈甲信 +7 位作者 程金建 刘斐 焦伟 庞强 冯国生 李善观 莫晓云 伍欣星 《中国临床新医学》 2012年第12期1107-1109,共3页
目的为成功建立放射抗拒性鼻咽癌细胞系亚株,并探讨鼻咽癌放射抗拒机理。方法采用类似临床放疗的照射模式反复照射从人鼻咽癌细胞系CNE-3中分离出具有放射抗拒性的新细胞系亚株。结果采用类似临床放疗的照射模式反复照射分离出具有放射... 目的为成功建立放射抗拒性鼻咽癌细胞系亚株,并探讨鼻咽癌放射抗拒机理。方法采用类似临床放疗的照射模式反复照射从人鼻咽癌细胞系CNE-3中分离出具有放射抗拒性的新细胞系亚株。结果采用类似临床放疗的照射模式反复照射分离出具有放射抗拒性的新细胞系亚株CNE-3R,,其在传代3个月后仍表现出较稳定的放射抗拒性,其SF2值均>0.5。结论采用该研究方法能成功建立放射抗拒性鼻咽癌细胞系亚株,为研究鼻咽癌放射抗拒机理提供了必要的工具。 展开更多
关键词 反复照射 鼻咽癌 放射抗拒性 细胞
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胃癌耐药细胞株耐药谱的体外实验 被引量:13
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作者 蔡学君 张学庸 樊代明 《第四军医大学学报》 1994年第2期86-88,共3页
目的:观察胃癌细胞与抗肿瘤药作用后对不同药物的耐受情况.方法:胃癌细胞系SGC7901在体外分别与长春新碱(VCR),5氟尿嘧啶(5-Fu),阿霉素(ADM)及氨甲喋呤(MTX)作用,获得SGC7901/VCR,SG... 目的:观察胃癌细胞与抗肿瘤药作用后对不同药物的耐受情况.方法:胃癌细胞系SGC7901在体外分别与长春新碱(VCR),5氟尿嘧啶(5-Fu),阿霉素(ADM)及氨甲喋呤(MTX)作用,获得SGC7901/VCR,SGC7901/ADM,SGC7901/5-Fu及SGC7901/MTX4个耐药细胞株.体外细胞毒性实验观察它们对VCR,ADM,5-Fu,MTX,顺铂(CDDP)以及丝裂霉素以C(MMC)的敏感性.结果:4株细胞对VCR,MTX,5-Fu及MMC均有耐药,耐药指数为2.9~1583.SGC7901/VCR和SGC7901/ADM对ADM分别呈1.6倍和101倍耐药.SGC7901/ADM和SGC7901/5-Fu对CDDP呈6.3和2.5倍耐药.结论:4株胃癌细胞均产生了多药抗药性(Multidrugresistance,MDR),药物引起的耐受可分为单向性交叉耐药及双向性交叉耐药两种类型. 展开更多
关键词 胃肿瘤 药物耐受性 细胞亚株
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鼻咽癌细胞株SUNE-1异质性研究 被引量:21
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作者 宋立兵 汪慧民 +2 位作者 曾木圣 李满枝 简少文 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1998年第5期324-327,共4页
目的:对鼻咽癌细胞株SUNE1异质性进行研究;方法:应用软琼脂集落形成实验、动物实验及RNA指纹图谱差异显示对SUNE14亚株58F,94E,610B,139B进行体外转化能力、成瘤性、转移能力及基因表达... 目的:对鼻咽癌细胞株SUNE1异质性进行研究;方法:应用软琼脂集落形成实验、动物实验及RNA指纹图谱差异显示对SUNE14亚株58F,94E,610B,139B进行体外转化能力、成瘤性、转移能力及基因表达差异进行研究。结果:①4亚株体外转化能力、成瘤性和转移能力存在差异;②筛选出高成瘤、高转移潜能的亚株58F、94E,只成瘤不转移的610B,不成瘤的139B;③4亚株的基因表达存在异质性,并筛选出3条迁泳率不一致的差异片段。结论:SUNE14亚株为起源于同一母系的不同的单克隆细胞亚株;为筛选和克隆NPC发生发展相关基因的研究提供实验材料,亦为NPC的基因治疗、免疫治疗及化学治疗的研究提供实验依据。 展开更多
关键词 肿瘤异质性 细胞亚株 鼻咽肿瘤 SUNE-1
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Establishment of nude mice model of human osteosarcoma cell MG63 with different potential of metastasis 被引量:1
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作者 Wentao Zhu Fengjin Guo +1 位作者 Tao Xu Anming Chen 《The Chinese-German Journal of Clinical Oncology》 CAS 2007年第5期484-486,共3页
Objective: To establish a nude mice model of human osteosarcoma lung metastasis. Methods: The growth of human osteosarcoma cell sublines M8 and M6 was determined by MTT assay. 2 × 107 cells were injected into the... Objective: To establish a nude mice model of human osteosarcoma lung metastasis. Methods: The growth of human osteosarcoma cell sublines M8 and M6 was determined by MTT assay. 2 × 107 cells were injected into the tail vein of nude mice. Mice were sacrificed started on week 4 after injection, and lung metastases were evaluated under both mac-roscopic and microscopic observation with HE staining. Results: The growth of low-metastatic subline M6 was lower than high-metastatic sublines M8. Seventeen mice after injected M8 had occurred lung metastases while only one mice had oc-curred in M6 group. Moreover, M8 cells within metastases were arrangement disorder with variable nuclear hyperchromasia. Conclusion: A mouse model for human osteosarcoma cancer lung metastasis can be established by injection different ability of metastasis MG63 cells into tail vein. 展开更多
关键词 OSTEOSARCOMA POTENTIAL lung metastasis
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Subcellular Accumulation of Cadmium in Corn and WheatPlants at Different Levels of Phosphorus 被引量:1
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作者 YANG ZHENGSHAOJIAN 《Pedosphere》 SCIE CAS CSCD 1999年第2期169-176,共8页
Corn and wheat plants were grown in a nutrient culture solution at four levels of phosphorus (0, 0.12,0.60 and 3.0 mmol L-1) and two levels of cadmium (0 and 4.0 pmol L--1) in greenhouse for a 18-day period.The concen... Corn and wheat plants were grown in a nutrient culture solution at four levels of phosphorus (0, 0.12,0.60 and 3.0 mmol L-1) and two levels of cadmium (0 and 4.0 pmol L--1) in greenhouse for a 18-day period.The concentrations of phosphorus and cadmium in cell wall, cytoplasm and vacuoles of roots and leaveswere examined by cell fractionation techniques. With increasing phosphorus in medium, the contents of Pin cell wall, cytoplasm and vacuoles of corn and wheat roots and leaves increased. The highest content of Pwas observed in cell wall, next in vacuoles, and the lowest in cytoplasm. The wheat subcellular fractions inboth roots and leaves had higher concentrations of phosphorus than those of corn. Increasing phosphorus inmedium significantly inhibited the intracellular Cd accumulation in both species. However, at P concentrationup to 3.0 mmol L--1, the Cd content in cell wall was increased. Increasing phosphorus resulted in reductionof the subcellular Cd content in corn and wheat leaves. Compared with corn, the wheat roots had a higherCd content in the cell wall and vacuoles and a lower in cytoplasm, while in leaf subcellular fractions thewheat cell had a higher Cd content in its vacuoles and a lower one in its cytoplasm. The results indicate thatphosphorus may be involved in sequestration of Cd ionic activity in both cell wall and vacuoles by forminginsoluble Cd phosphate. 展开更多
关键词 CADMIUM CORN PHOSPHORUS subcellular accumulation WHEAT
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Different responses of HepG2 subclones to low dose ethaselen
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作者 张国州 熊堃 +2 位作者 马薇薇 徐伟 曾慧慧 《Journal of Chinese Pharmaceutical Sciences》 CAS CSCD 2016年第4期302-309,共8页
As a synthesized antineoplastic organoselenium compound, ethaselen is known to induce apoptosis in tumor cells via dose-dependent thioredoxin reductase (TrxR) inhibition. Thioredoxin, the multifunctional biological ... As a synthesized antineoplastic organoselenium compound, ethaselen is known to induce apoptosis in tumor cells via dose-dependent thioredoxin reductase (TrxR) inhibition. Thioredoxin, the multifunctional biological substrate of TrxR, is then left in the oxidized state, which subsequently leads to intracellular accumulation of reactive oxygen species (ROS), cell cycle arrest and/or apoptosis. However, the low dose effect of ethaselen remains largely unknown. Several subclones have been derived from HepG2 cells by using single cell or colony isolation. The low dose of ethaselen was defined as the drug concentration of retaining 〉90% HepG2 cells alive. The HepG2 cells were used as reference of its subclones (SM01, SM02 and SM03), and the cell cycle transition, intracellular proteins change, colony formation and sphere growth were assayed in treatment of low dose ethaselen. HepG2 and its subclones differently responded to lethal dose of cisplatin or 5-fluorouracil. Low dose of ethaselen (1 μm) modulated the cell cycle transition at 12 h of treatment, but ceils were partially recovered at 24 h of treatment though some proteins were still affected. Low dose of ethaselen did not inhibit the small colony (diameter 〉 100 μm) formation and sphere growth of HepG2 and SM01. However, low dose of ethaselen could specifically inhibit the survival, large colony (diameter 〉500 μm) formation and sphere growth of SM03, although SM03 could be rapidly recovered from ethaselen-induced cell cycle check. HepG2 and its subclone cells could survive but respond differently to treatment of low dose ethaselen (1 μM). Low dose of ethaselen could significantly inhibit a HepG2 subclone (SM03) in cell survival and colony growth. 展开更多
关键词 Low dose ORGANOSELENIUM Ceil subcloning HETEROGENEITY Tumor cell
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