中国母乳寡糖构成特征分析

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作者 米丽娟 闫竞宇 +2 位作者 郭珊珊 贾妮 逄金柱 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2024年第4期197-206,共10页

为了分析中国代表性地区健康乳母的母乳寡糖因地区、泌乳时间和血型基因型受到的影响,探究中国母乳寡糖的构成特征,采用纵向队列研究方法采集我国东西南北6个城市、109名健康母亲、3个泌乳阶段的母乳样本,利用超高效液相色谱-串联三重... 为了分析中国代表性地区健康乳母的母乳寡糖因地区、泌乳时间和血型基因型受到的影响,探究中国母乳寡糖的构成特征,采用纵向队列研究方法采集我国东西南北6个城市、109名健康母亲、3个泌乳阶段的母乳样本,利用超高效液相色谱-串联三重四极杆质谱分析23种母乳寡糖的质量浓度,并对母乳血型基因型归属状态进行分析。结果表明,昆明、济南和深圳的总母乳寡糖质量浓度和总岩藻糖基中性寡糖质量浓度显著高于北京、包头和西宁,其中包头地区母乳的3-岩藻糖基乳糖(3-fucosyllactose,3-FL)、二岩藻糖基乳糖(lactodifucotetraose,LDFT)和乳糖-N-二岩藻糖基新六糖II(lacto-N-neodifucohexaose II,LNn DFH-II)质量浓度分别显著低于深圳、济南和北京;8种中性寡糖和4种酸性寡糖随泌乳时间延长呈现显著降低趋势;3-FL含量随泌乳时间延长呈现显著上升,LDFT和LNn DFH-II也随泌乳时间延长呈上升趋势,但差异不显著;2种单岩藻糖基六糖在1月龄成熟乳时质量浓度达到最高,之后持平或者略降低;以寡糖类型推测的血型基因型分型发现,各城市乳母均以Se+Le+为主,但该类型母乳中除了乳糖-N-二岩藻糖基六糖II(lacto-N-difucohexaose II,LNDFH-II)、LNDFH-I&LNn DFH-I、6’-唾液酸化乳糖和唾液酸化-乳糖-四糖c质量浓度比其他血型基因型高以外,其他18种寡糖质量浓度均低于其他血型基因型。本研究揭示了地区、泌乳阶段和乳母血型基因型造成了母乳寡糖组成和含量的差异,可为生命早期婴幼儿营养摄入中母乳寡糖的精准化提供科学理论指导。 展开更多

关键词 母乳寡糖 地区 泌乳阶段 血型基因型

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柱前衍生—高效液相色谱荧光检测法测定乳制品中6种母乳寡糖 被引量：2

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作者 李绮淇 黄嘉乐 +2 位作者 穆姝夷 李绮珊 黄靖钧 《食品与机械》 CSCD 北大核心 2024年第4期54-58,共5页

目的:建立一种普及性强、灵敏度高,并能同时测定乳制品中6种母乳寡糖的高效液相色谱—荧光检测分析方法。方法:样品经冰醋酸沉淀,滤纸过滤后,经2-氨基苯甲酰胺溶液衍生,离心后经有机滤膜过滤,用AdvanceBio Glycan Map色谱柱分离,以乙腈-... 目的:建立一种普及性强、灵敏度高,并能同时测定乳制品中6种母乳寡糖的高效液相色谱—荧光检测分析方法。方法:样品经冰醋酸沉淀,滤纸过滤后,经2-氨基苯甲酰胺溶液衍生,离心后经有机滤膜过滤,用AdvanceBio Glycan Map色谱柱分离,以乙腈-50 mmol/L甲酸铵溶液(pH 4.4)为流动相,梯度洗脱分离,并使用荧光检测器检测。结果:6种母乳寡糖在1.00~400.0 mg/L质量浓度范围内线性关系良好,相关系数均>0.999,方法检出限为4.1~10.9 mg/kg,回收率为71.3%~90.2%,日内相对标准偏差(RSD)为1.0%~6.3%,日间相对标准偏差<10.0%。结论:该方法简单、快捷,可有效降低衍生峰的干扰,适用于乳制品中3′-岩藻糖基乳糖、2′-岩藻糖基乳糖、乳糖-N-四糖、乳糖-N-新四糖、3′-唾液乳糖和6′-唾液乳糖6种母乳寡糖的日常检测。 展开更多

关键词 柱前衍生法 母乳寡糖 乳制品 2-氨基苯甲酰胺

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L-岩藻糖对母乳寡糖(HMOs)合成的意义及其产业化研究进展 被引量：10

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作者 王永胜 王硕 +1 位作者 张慧林 李冲伟 《中国农学通报》 2019年第11期127-132,共6页

近年来,母乳寡糖的体外合成研究发展迅速,但其产业化进程相对滞后。为了探究其原因,笔者综述了数十年来国内外关于母乳寡糖合成的相关研究成果。结果表明,全细胞发酵合成法是当今公认最具有工业化潜力的母乳寡糖生产方法,同时发现,L-岩... 近年来,母乳寡糖的体外合成研究发展迅速,但其产业化进程相对滞后。为了探究其原因,笔者综述了数十年来国内外关于母乳寡糖合成的相关研究成果。结果表明,全细胞发酵合成法是当今公认最具有工业化潜力的母乳寡糖生产方法,同时发现,L-岩藻糖的价格很大程度上限制了母乳寡糖的产业化发展。如今L-岩藻糖的生产仍以天然产物提取为主,存在着原料单一、提取成本高等问题。今后应开发更多的L-岩藻糖生产方法,如利用生物技术手段构建高产L-岩藻糖菌株,同时从农业废弃物资源中提取L-岩藻糖亦具有较好的应用前景。 展开更多

关键词 母乳寡糖(HMOs) L-岩藻糖 体外合成 全细胞发酵合成 补救合成途径

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双歧杆菌代谢母乳寡糖机制的研究进展 被引量：3

4

作者 姜陈波 洪青 杭锋 《乳业科学与技术》 2017年第6期38-44,共7页

母乳寡糖(human milk oligosaccharides,HMO)结构复杂,其能够选择性地促进母乳喂养婴儿肠道中益生菌双歧杆菌的生长。婴儿肠道相关双歧杆菌具有糖苷酶等分子工具,使其能够代谢HMO,且代谢过程具有菌株特异性。本文总结了HMO的结构特点,... 母乳寡糖(human milk oligosaccharides,HMO)结构复杂,其能够选择性地促进母乳喂养婴儿肠道中益生菌双歧杆菌的生长。婴儿肠道相关双歧杆菌具有糖苷酶等分子工具,使其能够代谢HMO,且代谢过程具有菌株特异性。本文总结了HMO的结构特点,探讨了婴儿肠道相关双歧杆菌代谢HMO的机制,重点分析了双歧杆菌代谢HMO的种内差异以及代谢过程涉及到的分子工具的研究进展。 展开更多

关键词 双歧杆菌 母乳寡糖 代谢 糖苷水解酶

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嗜黏蛋白阿克曼氏菌生理活性及其对母乳寡糖代谢的研究进展 被引量：2

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作者 高玮 付晓丹 +3 位作者 辜自强 朱常亮 肖梦诗 牟海津 《食品研究与开发》 CAS 北大核心 2022年第21期190-199,共10页

嗜黏蛋白阿克曼氏菌(Akkermansia muciniphila)被认为是下一代益生菌,在宿主体内的丰度与结肠炎、糖尿病、肥胖、动脉粥样硬化等诸多疾病呈负相关。该文综述A. muciniphila的基本生理特性、活性功能及关键蛋白的研究进展,总结A. mucinip... 嗜黏蛋白阿克曼氏菌(Akkermansia muciniphila)被认为是下一代益生菌,在宿主体内的丰度与结肠炎、糖尿病、肥胖、动脉粥样硬化等诸多疾病呈负相关。该文综述A. muciniphila的基本生理特性、活性功能及关键蛋白的研究进展,总结A. muciniphila对多种母乳寡糖的代谢能力及代谢产物对婴儿肠道微生物群的影响,以及外膜蛋白Amuc_1100的特性和生理功能,为阐明A. muciniphila在婴儿肠道健康中的作用机制和深度开发提供依据。 展开更多

关键词 嗜黏蛋白阿克曼氏菌 外膜蛋白Amuc_1100 母乳寡糖 糖苷酶 婴儿肠道健康

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母乳寡糖的生物合成研究进展 被引量：11

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作者 陈坚 邓洁莹 +2 位作者 李江华 刘龙 堵国成 《中国食品学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2016年第11期1-8,共8页

母乳目前被认为是最好的婴幼儿营养剂,其和牛乳最重要的差别在于含寡糖的种类和结构的不同。现有很多研究证明了母乳寡糖(HMOs)在抵御胃肠道病原微生物感染和维持胃肠道微生态平衡方面具有非常重要的作用。迄今已有多种方法提取或合成HM... 母乳目前被认为是最好的婴幼儿营养剂,其和牛乳最重要的差别在于含寡糖的种类和结构的不同。现有很多研究证明了母乳寡糖(HMOs)在抵御胃肠道病原微生物感染和维持胃肠道微生态平衡方面具有非常重要的作用。迄今已有多种方法提取或合成HMOs,其中生物合成方法因不使用有毒试剂且方便大规模生产,而被用来合成多种HMO。生物合成HMOs的方法可分为两步——碳骨架的构建和岩藻糖基化或唾液酸化。目前合成HMOs的代谢途径大多在大肠杆菌内构建。对母乳寡糖作用机理与合成方法的研究,使其在未来作为婴幼儿奶粉中普遍的添加剂成为可能。 展开更多

关键词 母乳寡糖(HMOs) 生物合成 岩藻糖乳糖

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母乳寡糖的研究进展 被引量：5

7

作者 揭良 苏米亚 +2 位作者 贾宏信 陈文亮 齐晓彦 《食品工业》 CAS 北大核心 2020年第10期258-261,共4页

母乳是一种富含营养和生物活性物质的复杂生物液体,是婴儿最佳的天然食物,支持新生儿的健康生长发育。母乳寡糖(HMOs)是一类人体不能消化而肠道有益菌可发酵利用的复杂碳水化合物,是母乳中第三大固体成分,对新生儿提供保护的重要组成部... 母乳是一种富含营养和生物活性物质的复杂生物液体,是婴儿最佳的天然食物,支持新生儿的健康生长发育。母乳寡糖(HMOs)是一类人体不能消化而肠道有益菌可发酵利用的复杂碳水化合物,是母乳中第三大固体成分,对新生儿提供保护的重要组成部分。HMOs可作为信号分子,直接与宿主细胞相互作用,对婴儿肠道免疫调节作用。然而,由于地域差异和遗传因素等影响,母乳中HMOs含量和种类都存在很大差异性。对母乳寡糖相关研究和文献包括HMOs的组成、组成影响因素及对新生儿生长功能等方面进行总结和评述;对关于HMOs的知识背景进行介绍,并对未来中国母乳寡糖研究进行探讨。 展开更多

关键词 母乳寡糖 母乳 婴幼儿营养

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婴儿肠道菌群的定植及母乳寡糖对肠道菌群的影响 被引量：7

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作者 余梦秋 屠文娟 《中华实用儿科临床杂志》 CSCD 北大核心 2020年第19期1517-1520,共4页

婴儿期是肠道菌群形成和发展的关键时期,其肠道菌群主要来源于母体与其之间的菌群交换。剖宫产、早期接触抗生素和配方奶喂养可能会破坏微生物群的建立,并对健康产生不利影响。母乳寡糖(HMOs)是一类结构多样的非共轭聚糖,母乳中含量丰富... 婴儿期是肠道菌群形成和发展的关键时期,其肠道菌群主要来源于母体与其之间的菌群交换。剖宫产、早期接触抗生素和配方奶喂养可能会破坏微生物群的建立,并对健康产生不利影响。母乳寡糖(HMOs)是一类结构多样的非共轭聚糖,母乳中含量丰富,可调节婴儿肠道菌群组成,对婴儿肠道健康产生有益影响。为了解婴儿肠道菌群的定植特点及HMOs对肠道菌群的影响,现就此综述如下。 展开更多

关键词 肠道菌群 菌群紊乱 母乳寡糖 婴儿

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工程菌-酵母耦合高密度发酵生产乳糖-N-二糖

9

作者 李竹英 张洪涛 +3 位作者 李嘉怡 张子梦 韩成 许淳 《食品与发酵工业》 北大核心 2025年第6期120-126,共7页

乳糖-N-二糖(lacto-N-biose,LNB)是母乳寡糖(human milk oligosaccharides,HMOs)的主要组成部分,也是双歧因子候选者之一,但是目前缺少经济的大规模合成技术。该研究利用蔗糖磷酸化酶和LNB磷酸化酶的非依赖能荷再生优势,以酿酒酵母为能... 乳糖-N-二糖(lacto-N-biose,LNB)是母乳寡糖(human milk oligosaccharides,HMOs)的主要组成部分,也是双歧因子候选者之一,但是目前缺少经济的大规模合成技术。该研究利用蔗糖磷酸化酶和LNB磷酸化酶的非依赖能荷再生优势,以酿酒酵母为能源供给细胞,建立了双菌共培养高效合成LNB的方法。首先构建了E.coli JM109(DE3)/pET28a-GalT1、E.coli JM109(DE3)/pET28a-GalT2、E.coli JM109(DE3)/pET28a-BLUSP的工程菌,筛选出合成二磷酸尿苷葡萄糖(uridine diphosphate glucose,UDP-Glc)产量高达10.5 g/L的最优菌株E.coli JM109(DE3)/pET28a-GalT1。然后与构建的工程菌E.coli JM109(DE3)/pET28a-SPase、E.coli JM109(DE3)/pET28a-GalE和E.coli JM109(DE3)/pET28a-BiGalHexNAcP四菌耦合发酵,LNB产量为6.78 g/L。最后构建了共表达菌株E.coli JM109(DE3)(含有质粒pRSFDuet1-SPase-GalT1和pETDuet1-GalE-BiGalHexNAcP),外源添加辅因子尿苷一磷酸(uridine monophosphate,UMP)(浓度为20 mmol/L),将其与酵母耦合发酵,LNB最高产量为28.66 g/L,与四菌株耦合发酵相比,产量提高了323%。这是目前关于LNB产量最高的报道。研究结果为低成本生产乳糖-N-二糖提供了新的技术路线。 展开更多

关键词 乳糖-N-二糖 蔗糖 蔗糖磷酸化酶 耦合发酵 母乳寡糖

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基于耦合发酵策略的乳酰-N-三糖Ⅱ模块化合成研究

10

作者 黎玉 李忠霞 +4 位作者 邓明超 王志杰 周文 Wengang CHAI 张洪涛 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2024年第15期16-24,共9页

母乳寡糖在调节婴儿肠道菌群和保障婴儿健康方面都有积极的作用。乳酰-N-三糖Ⅱ(lacto-N-trioseⅡ,LNTⅡ)是母乳寡糖的核心结构单元。目前合成LNTⅡ的方法存在价格昂贵、操作繁琐等缺点。该研究以乳糖和N-乙酰氨基葡萄糖为底物用三菌株... 母乳寡糖在调节婴儿肠道菌群和保障婴儿健康方面都有积极的作用。乳酰-N-三糖Ⅱ(lacto-N-trioseⅡ,LNTⅡ)是母乳寡糖的核心结构单元。目前合成LNTⅡ的方法存在价格昂贵、操作繁琐等缺点。该研究以乳糖和N-乙酰氨基葡萄糖为底物用三菌株耦合发酵策略合成LNTⅡ。首先构建用于合成N-乙酰氨基葡萄糖-1-磷酸(N-acetylglucosamine-1-phosphate,GlcNAc-1-P)模块的Escherichia coli JM109(DE3)/pET28a-nahK工程菌,优化发酵条件后,GlcNAc-1-P最高产量为16.88 g/L,转化率为70.05%。然后构建分别包含agx1、agx2、pmglmU基因的3株工程菌,并筛选出E.coli JM109(DE3)/pET28a-agx1,其合成尿苷二磷酸乙酰氨基葡萄糖(uridine diphosphate acetylglucosamine,UDP-GlcNAc)的能力最优,在优化的生产体系中UDP-GlcNAc的最大产量为24.78 g/L。最后构建工程菌E.coli JM109(DE3)/pET28a-lgtA并与E.coli JM109(DE3)/pET28a-nahK、E.coli JM109(DE3)/pET28a-agx1耦合发酵合成LNTⅡ,通过优化三菌株耦合发酵体系,LNTⅡ产量达到3.03 g/L,比优化前提高近4倍。该文基于三菌株耦合发酵策略实现了LNTⅡ的合成,这种策略具有通用性强、简便快捷和成本低廉的优点,将为母乳寡糖的规模化生产提供一种新方法。 展开更多

关键词 LNTⅡ 耦合发酵 母乳寡糖 UDP-GLCNAC GlcNAc-1-P

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妊娠期糖尿病母亲与健康母亲初乳寡糖浓度差异分析

11

作者 申飞飞 仲书钰 +2 位作者 陈鹏 郑玉芹 吴尤佳 《现代医学》 2024年第8期1211-1214,共4页

目的:比较妊娠期糖尿病(GDM)患者和健康母亲初乳中母乳寡糖(HMO)浓度的差异,为优化GDM患者的新生儿喂养提供指导。方法:随机收集南通大学附属医院产科GDM患者初乳样本38例和健康母亲初乳样本80例,记录母亲的产前体重、身高、产次、孕周... 目的:比较妊娠期糖尿病(GDM)患者和健康母亲初乳中母乳寡糖(HMO)浓度的差异,为优化GDM患者的新生儿喂养提供指导。方法:随机收集南通大学附属医院产科GDM患者初乳样本38例和健康母亲初乳样本80例,记录母亲的产前体重、身高、产次、孕周等临床特征。利用超高效液相色谱串联质谱法对初乳中HMO浓度进行检测,并根据Se基因表达情况进行分类。比较不同分组的GDM患者与健康母亲初乳中HMO、乳糖、总糖浓度,分析初乳中HMO、乳糖、总糖浓度与母亲临床特征之间的相关性。结果:在不同分泌类型的母亲初乳中,与正常健康母亲相比GDM对HMO、乳糖、总糖的浓度产生的影响不同。总HMO浓度最高为正常Se^(+)组,GDM Se^(+)组次之;乳糖最高为GDM Se^(-)组,正常Se^(+)组次之;总糖浓度最高为正常Se^(+)组,GDM Se^(+)组次之;GDM Se^(+)组乳糖、总糖浓度较正常Se^(+)组均降低,差异均有统计学意义(均P<0.05);GDM Se^(-)组乳糖浓度较正常Se^(-)组升高,差异有统计学意义(P<0.05)。与GDM Se^(-)组比较,GDM Se^(+)组仅岩藻糖类HMO、总HMO升高,岩藻糖和唾液酸类HMO降低,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论:在Se^(+)组GDM与正常健康母亲相比,初乳HMO、乳糖、总糖浓度减少,建议针对GDM母亲母乳喂养儿童,补充特定HMO促进婴儿早期生长发育。 展开更多

关键词 母乳寡糖 妊娠期糖尿病 超高效液相色谱串联质谱法 初乳

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基于混菌耦合发酵策略合成3′-唾液酸乳糖 被引量：1

12

作者 游星 郭进 +7 位作者 张洪涛 闫竞宇 CHAI Wengang 周文 刘栗彤 黎玉 吴剑荣 詹晓北 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2021年第17期8-14,共7页

唾液酸乳糖在婴幼儿配方奶粉产业展现出潜在、广阔的市场前景,但是目前缺少有效、廉价的合成方法。针对该问题,首先构建了2株工程菌JM109(DE3)/pET28a-neuA和JM109(DE3)/pET28a-nst,分别用于合成胞苷单磷酸-N-乙酰神经氨酸(cytidine 5′... 唾液酸乳糖在婴幼儿配方奶粉产业展现出潜在、广阔的市场前景,但是目前缺少有效、廉价的合成方法。针对该问题,首先构建了2株工程菌JM109(DE3)/pET28a-neuA和JM109(DE3)/pET28a-nst,分别用于合成胞苷单磷酸-N-乙酰神经氨酸(cytidine 5′-monophosphate N-acetylneuraminic acid,CMP-Neu5Ac)和3′-唾液酸乳糖;然后优化了JM109(DE3)/pET28a-neuA合成CMP-Neu5Ac体系;最后通过将啤酒酵母、JM109(DE3)/pET28a-neuA和JM109(DE3)/pET28a-nst耦合发酵,实现了3′-唾液酸乳糖的3菌株全细胞耦合催化合成。由于采用混菌耦合发酵策略来进行3′-唾液酸乳糖的生产,其生产模式不再像酶法一样繁琐和价格高昂,并且实现了CMP-Neu5Ac的高效再生和供给,为经济且规模化生产3′-唾液酸乳糖奠定了技术基础。 展开更多

关键词 CMP-Neu5Ac 3′-唾液酸乳糖 耦合发酵 生物合成 母乳寡糖

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合成生物学与食品制造 被引量：11

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作者 刘延峰 周景文 +1 位作者 刘龙 陈坚 《合成生物学》 2020年第1期84-91,共8页

随着全球环境污染加剧、气候持续变化和人口不断增长,如何保障安全、营养和可持续的食品供给面临巨大挑战。这些挑战对未来食品供给方式和功能提出了新的要求。采用合成生物学技术,创建适用于食品工业的细胞工厂,将可再生原料转化为重... 随着全球环境污染加剧、气候持续变化和人口不断增长,如何保障安全、营养和可持续的食品供给面临巨大挑战。这些挑战对未来食品供给方式和功能提出了新的要求。采用合成生物学技术,创建适用于食品工业的细胞工厂,将可再生原料转化为重要食品组分、功能性食品添加剂和营养化学品是解决食品领域所面临问题的重要途径。本文首先介绍了合成生物学对食品制造领域创新和突破的重要性。其次,以基于合成生物学制造植物蛋白肉所需关键组分、黄酮类植物天然提取物和母乳寡糖这三种典型食品为例,探讨了目前食品合成生物学的任务与挑战。最后,对我国合成生物学与食品制造领域的发展趋势进行了总结和展望。通过加强食品合成生物学等具有重大意义的食品生物技术的开发和应用,开展新食品资源开发和高值利用、多样化食品生产方式变革、功能性食品添加剂和营养化学品制造,并率先实现产业化,将抢占世界科技的前沿和产业高地,造福人类。 展开更多

关键词 合成生物学 食品制造 人造食品 植物天然产物 母乳寡糖

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乳酰-N-新四糖的生理功能、生物合成及其衍生化研究进展 被引量：2

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作者 孟佳炜 朱莺莺 +3 位作者 罗国聪 万李 张文立 沐万孟 《中国食品学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2022年第3期320-328,共9页

母乳寡糖(human milk oligosaccharides,HMOs)因具有益生元功能、免疫调节功能、抗病原体及毒素以及肠道细胞增殖分化的调节功能等多种生理功能,近年来备受关注。其中乳酰-N-新四糖(LNnT)作为营养强化剂被广泛添加到婴儿配方奶粉中。HMO... 母乳寡糖(human milk oligosaccharides,HMOs)因具有益生元功能、免疫调节功能、抗病原体及毒素以及肠道细胞增殖分化的调节功能等多种生理功能,近年来备受关注。其中乳酰-N-新四糖(LNnT)作为营养强化剂被广泛添加到婴儿配方奶粉中。HMOs可分为中性寡糖,岩藻糖基化寡糖及唾液酸化寡糖,LNnT作为HMOs重要的核心结构之一,可通过唾液酸化及岩藻糖基化得到多种衍生物。目前不断有研究证实这些衍生物对人体具有独特的作用,其中LNnT及其衍生物在食品及制药行业的商业价值及应用潜力巨大,对其合成方法的探索成为一大研究热点。化学方法因各种副反应问题而使合成进程受阻;酶法合成和代谢工程合成的生物策略凭借酶反应的特异性而被认为是最具前景的合成方法,发展迅猛。本文简述LNnT及其衍生物的生理功能及生物合成进程,指出生物合成手段的优势与不足,展望其未来的发展方向。 展开更多

关键词 母乳寡糖 乳酰-N-新四糖 生理功能 生物合成 衍生化

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多细胞耦合转化N-乙酰氨基葡萄糖和乳糖生产唾液酸乳糖 被引量：3

15

作者 周文 游星 +4 位作者 张洪涛 李忠霞 邓超明 许淳 黎玉 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第11期4621-4634,共14页

唾液酸乳糖是母乳寡糖(human milk oligosaccharides,HMOs)中含量最丰富的唾液酸化低聚糖之一,对婴幼儿的健康发育有重要作用,但是其目前缺乏高效、廉价的生产工艺。针对该问题,本研究建立了多菌株两步法耦合生物合成唾液酸乳糖方法。... 唾液酸乳糖是母乳寡糖(human milk oligosaccharides,HMOs)中含量最丰富的唾液酸化低聚糖之一,对婴幼儿的健康发育有重要作用,但是其目前缺乏高效、廉价的生产工艺。针对该问题,本研究建立了多菌株两步法耦合生物合成唾液酸乳糖方法。第一步构建2株工程菌,大肠杆菌JM109(DE3)/pET28a-BT0453和JM109(DE3)/pET28a-nanA,用于耦合合成中间产物N-乙酰神经氨酸,在2株工程菌株细胞生物量比为1:1,反应时间为32h的条件下,得到的N-乙酰神经氨酸最高产量为20.4g/L。第二步向上述发酵液中添加大肠杆菌JM109(DE3)/pET28a-neuA、JM109(DE3)/pET28a-nst和面包酵母,通过三菌株耦合发酵合成3’-唾液酸乳糖(3’-sialyllactose,3’-SL)。在底物N-乙酰氨基葡萄糖、乳糖浓度均为200mmol/L,面包酵母细胞生物量为150g/L,辅因子Mg^(2+)浓度为20 mmol/L的优化条件下,发酵24 h,发酵液中3’-唾液酸乳糖的最高产量达到55.04 g/L,底物N-乙酰氨基葡萄糖的转化率为43.47%。研究结果为低成本生产3’-唾液酸乳糖提供了一条新的技术路线。 展开更多

关键词 3’-唾液酸乳糖 N-乙酰氨基葡萄糖 耦合发酵 两步法合成 母乳寡糖

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