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橡胶树次生体胚发生及其再生植株遗传稳定性的分子检测 被引量：13
1
作者 华玉伟 黄关青 +1 位作者 龙青姨 黄华孙 《热带作物学报》 CSCD 2009年第5期644-650,共7页
以热研7-33-97花药为材料,建立橡胶树次生体胚发生和植株再生体系,主要包括初生花药体胚诱导、次生体胚发生和次生胚植株再生三个步骤。结果表明,来自花药初生异常胚和初生子叶期胚的0.2～0.3cm胚块均能成功诱导次生体胚发生,并均能获... 以热研7-33-97花药为材料,建立橡胶树次生体胚发生和植株再生体系,主要包括初生花药体胚诱导、次生体胚发生和次生胚植株再生三个步骤。结果表明,来自花药初生异常胚和初生子叶期胚的0.2～0.3cm胚块均能成功诱导次生体胚发生,并均能获得成熟子叶期胚。以初生异常胚为外植体,每个胚块获得子叶期胚数为0.64个。以初生子叶期胚为外植体连续3次诱导次生体胚发生,随诱导次数增加,体胚发生频率先上升,后保持稳定。2,4-D对次生体胚植株再生具有明显影响,添加4.5μmol/L和9μmol/L2,4-D植株再生培养基中植株再生频率达到85.0%。AFLP检测次生体胚植株遗传稳定结果显示:(1)来自初生异常胚的次生体胚植株60.0%植株DNA发生变异;(2)来自初生子叶期胚的次生体胚植株,随次生体胚发生次数增加,检测到DNA变异植株频率由30.0%升高到52.4%。AFLP聚类分析结果显示,次生体胚植株与热研7-33-97高度相似,相似系数大于0.904。 展开更多
关键词 橡胶树 次生体胚发生 分子标记 遗传稳定性
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PTC_(3)和PPM抑菌剂对橡胶树组培中常见污染菌的抑菌效果及对橡胶树次生体胚发生效率影响 被引量：1
2
作者 成镜 李季 +4 位作者 戴雪梅 徐正伟 周权男 黄天带 黄关青 《热带农业科学》 2021年第3期68-73,共6页
以热研7-33-97橡胶树组织培养材料为试验材料,通过分子鉴定的方法确认橡胶树组织培养中常见污染源是红青霉菌。研究不同浓度植物组织抗菌剂PTC_(3)(0.2、0.4、0.6、0.8、1、1.2、1.4、1.6、1.8、2.0mL/L)和PPM (0.5、0.55、0.6、0.65、... 以热研7-33-97橡胶树组织培养材料为试验材料,通过分子鉴定的方法确认橡胶树组织培养中常见污染源是红青霉菌。研究不同浓度植物组织抗菌剂PTC_(3)(0.2、0.4、0.6、0.8、1、1.2、1.4、1.6、1.8、2.0mL/L)和PPM (0.5、0.55、0.6、0.65、0.7、0.75、0.8、0.85、0.9、0.95 mL/L)抑菌剂对红青霉菌的生长抑制率,及其对橡胶树次生体胚发生效率的影响,结果表明,当PTC_(3)抑菌剂浓度为1 mL/L时,对红青霉菌有一定的抑制作用,培养2 d时和培养5 d时,对真菌的生长抑制率最高分别为18.1%、22.3%。当PPM抑菌剂浓度为0.6、0.65、0.7、0.85、0.95 mL/L时,培养2 d,对真菌的生长抑制率分别为18.6%、17.4%、17.2%、19.2%、16.3%。培养5 d时,所有抑菌剂浓度处理对真菌均没有生长抑制作用。同时发现PTC_(3)和PPM对橡胶树次生体胚发生有一定的促进作用,PTC_(3)促进效果稍好一些。 展开更多
关键词 橡胶树 次生体胚发生 污染 红青霉菌 PTC_3 PPM
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不同凝固剂对橡胶树花药培养次生体胚发生的影响 被引量：1
3
作者 王祥军 李维国 +4 位作者 黄华孙 高新生 吴春太 张晓飞 黄肖 《中国热带农业》 2013年第6期45-48,共4页
以热研7-33-97的花药为材料,分别以Phytagel和Agar powder作为凝固剂配制培养基,比较了两种不同培养基对橡胶树花药培养次生体胚发生的诱导效果。结果表明,不同凝固剂对橡胶树花药培养次生体胚发生有着显著的影响。Phytagel培养基的次... 以热研7-33-97的花药为材料,分别以Phytagel和Agar powder作为凝固剂配制培养基,比较了两种不同培养基对橡胶树花药培养次生体胚发生的诱导效果。结果表明,不同凝固剂对橡胶树花药培养次生体胚发生有着显著的影响。Phytagel培养基的次生体胚愈伤组织诱导率显著高于Agar powder培养基,而且次生体胚愈伤组织在Phytagel培养基中的生长情况明显较Agar powder培养基好。Phytagel培养基的次生体胚发生率和每块愈伤组织所诱导出的胚状体数目均显著高于Agar powder培养基,而且Agar powder培养基的次生体胚易发生褐化和玻璃化现象。但二者所诱导的正常胚状体比例差异不显著。总体上,Phytagel培养基诱导橡胶树花药培养次生体胚发生的效果优于Agar powder培养基。 展开更多
关键词 凝固剂 橡胶树 花药培养 次生体胚发生
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栓皮栎体细胞胚胎发生的细胞组织学观察(英文) 被引量：10
4
作者 张存旭 姚增玉 +1 位作者 赵忠 戚建华 《植物生理与分子生物学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期33-38,共6页
以栓皮栎未成熟合子胚为外植体,在添加0.25mg/L 2,4-D和0.5mg/L 6-BA的MS培养基上6周可诱导产生2种类型的胚性愈伤组织,一种表面具光泽、白色;另一种表面光滑湿润具光泽,色泽淡黄或无色透明。组织切片表明,胚性愈伤组织的细胞体积小,细... 以栓皮栎未成熟合子胚为外植体,在添加0.25mg/L 2,4-D和0.5mg/L 6-BA的MS培养基上6周可诱导产生2种类型的胚性愈伤组织,一种表面具光泽、白色;另一种表面光滑湿润具光泽,色泽淡黄或无色透明。组织切片表明,胚性愈伤组织的细胞体积小,细胞核大,细胞质浓,细胞排列紧密;非胚性愈伤组织细胞的体积大,细胞核小,细胞质稀薄。胚性细胞团培养在不含激素的培养基上可诱导产生体细胞胚。体细胞胚直接起源于胚性细胞团表皮或近表皮的单细胞,经历与合子胚相似的球形胚、心形胚、鱼雷胚和子叶胚发育阶段。所有发育时期的体细胞胚的胚轴、子叶均产生次生体胚,它们起源于细胞质较浓的表皮单细胞。 展开更多
关键词 组织学 体细胞胚 次生体胚发生 栓皮栎
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橡胶树次生体胚植株染色体数目和DNA含量分析研究 被引量：3
5
作者 王天地 华玉伟 黄华孙 《热带农业科学》 2013年第5期33-37,共5页
遗传稳定是离体繁殖植物种苗的关键。本研究利用染色体制片和流式细胞术,对1～10个增殖世代的次生体胚植株的染色体数目及DNA含量进行了分析,发现1～10个增殖世代的次生体胚植株染色体数目以2n=36为主,且DNA含量与芽接无性系相同,说明1... 遗传稳定是离体繁殖植物种苗的关键。本研究利用染色体制片和流式细胞术,对1～10个增殖世代的次生体胚植株的染色体数目及DNA含量进行了分析,发现1～10个增殖世代的次生体胚植株染色体数目以2n=36为主,且DNA含量与芽接无性系相同,说明1～10个增殖世代的次生体胚植株在染色体水平保持遗传稳定。 展开更多
关键词 橡胶树 次生体胚发生 体胚植株 染色体数目 DNA含量
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基因型对橡胶树胚状体遗传转化瞬时表达影响的研究 被引量：2
6
作者 黄天带 华玉伟 +2 位作者 周权男 孙爱花 戴雪梅 《热带农业科学》 2012年第12期27-32,共6页
侵染后抗性胚状体诱导频率低是影响橡胶树遗传转化发展的主要原因,而橡胶树次生体胚发生体系具有体胚增殖效率及植株再生率高的优点。以3个综合性状优良的橡胶树无性系次生体细胞胚状体为受体,研究其对根癌农杆菌的耐侵染能力、GUS基因... 侵染后抗性胚状体诱导频率低是影响橡胶树遗传转化发展的主要原因,而橡胶树次生体胚发生体系具有体胚增殖效率及植株再生率高的优点。以3个综合性状优良的橡胶树无性系次生体细胞胚状体为受体,研究其对根癌农杆菌的耐侵染能力、GUS基因的瞬时表达情况,探讨不同无性系胚状体对农杆菌转化的反应。结果表明:3个无性系农杆菌污染情况无显著差异,长菌的外植体经无菌水和抗生素水洗涤3 d后即可恢复生长;侵染后每30个胚褐化了1.2～5个胚,占侵染总胚数的4.00%～16.67%,品种间褐化面积无显著差异;热研87-6-62的总蓝斑数显著高于其它2个无性系,平均每个胚染上14.29个蓝斑,热研7-33-97和PR107稍差,但每个胚也能分别染上8.14和8.72个蓝斑。因此3个无性系均可以胚状体作为遗传转化的受体。此结果对利用胚状体为受体改良橡胶树优良无性系奠定良好基础。 展开更多
关键词 橡胶树 遗传转化 胚状体 次生体胚发生 受体
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根癌农杆菌介导的橡胶树花药愈伤组织遗传转化体系的建立 被引量：33
7
作者 黄天带 李哲 +3 位作者 孙爱花 周权男 华玉伟 黄华孙 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第10期1691-1697,共7页
为建立根癌农杆菌介导的橡胶树遗传转化体系,以花药愈伤组织为受体,研究了农杆菌菌株、共培养温度、共培养时间、乙酰丁香酮(AS)等因素对遗传转化效率的影响。结果表明,农杆菌菌株、共培养温度和共培养时间对转化效率具有显著影响,AS不... 为建立根癌农杆菌介导的橡胶树遗传转化体系,以花药愈伤组织为受体,研究了农杆菌菌株、共培养温度、共培养时间、乙酰丁香酮(AS)等因素对遗传转化效率的影响。结果表明,农杆菌菌株、共培养温度和共培养时间对转化效率具有显著影响,AS不影响转化效率。2.2万个花药愈伤组织经EHA105菌株侵染后,转入未添加AS的培养基,22℃共培养6d,通过50mgL-1卡那霉素抗性筛选、叶片GUS染色、uidA和NptII基因PCR特异扩增、PCR产物测序及NptII基因Southern检测,鉴定出11株转基因植株,并通过嫁接和次生体胚发生,获得来自8个转基因株系的681株转基因植株,移栽成活253株。 展开更多
关键词 橡胶树 根癌农杆菌 花药愈伤组织 遗传转化 次生体胚发生
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