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一种供RAPD分析用蜘蛛模板DNA的快速提取方法 被引量:10
1
作者 王智 颜亨梅 +3 位作者 唐果 徐湘 尹长民 傅俊江 《生命科学研究》 CAS CSCD 1999年第3期268-275,共8页
简要介绍了一种高效、快速提取蜘蛛模板 D N A 供 R A P D 分析的方法⒚该方法具有快速简便、重复性好的优点,提取的 D N A 无污染物产生,完全能满足 R A P D
关键词 蜘蛛 dna提取 RAPD 模板dna
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猕猴桃模板DNA的提取及RAPD-PCR最佳反应体系的建立 被引量:23
2
作者 陈万秋 李思光 +1 位作者 罗玉萍 陈少风 《生物技术通报》 CAS CSCD 2003年第3期40-43,共4页
以改良CTAB法从猕猴桃叶片中制备模板DNA ,优化了PCR热循环参数 ,建立了RAPD PCR扩增的最佳反应体系。实验结果表明 ,CTAB提取液中EDTA组分的浓度对模板提取影响很大 ,其最适浓度为 80mmol/L ;用异丙醇沉淀后不经乙醇洗涤纯化的DNA不会... 以改良CTAB法从猕猴桃叶片中制备模板DNA ,优化了PCR热循环参数 ,建立了RAPD PCR扩增的最佳反应体系。实验结果表明 ,CTAB提取液中EDTA组分的浓度对模板提取影响很大 ,其最适浓度为 80mmol/L ;用异丙醇沉淀后不经乙醇洗涤纯化的DNA不会影响扩增效果。PCR热循环参数为 :94℃预变性 5min ;94℃变性 1min ,37℃退火 1min ,72℃延伸 2min ,循环 4 0次 ;最后在 72℃延伸 6min。 展开更多
关键词 猕猴桃 模板dna 提取 RAPD-PCR 最佳反应体系
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隐孢子虫PCR检测中模板DNA提取方法比较 被引量:4
3
作者 严若峰 周金林 +1 位作者 李培英 钱应鹃 《中国兽医科技》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期22-24,共3页
用 4种不同方法抽提隐孢子虫卵囊DNA作模板 ,以 1对人工合成的寡聚核苷酸为引物进行聚合酶链反应 ,均能扩增出 5 40bp特异性DNA片段 ;比较这 4种方法的操作过程和卵囊最低检测量对它们进行综合评价 ,其中 2 0 g/L二硫苏糖醇冻融法最佳 ... 用 4种不同方法抽提隐孢子虫卵囊DNA作模板 ,以 1对人工合成的寡聚核苷酸为引物进行聚合酶链反应 ,均能扩增出 5 40bp特异性DNA片段 ;比较这 4种方法的操作过程和卵囊最低检测量对它们进行综合评价 ,其中 2 0 g/L二硫苏糖醇冻融法最佳 ,具有敏感、简便、快速等优点。 展开更多
关键词 隐孢子虫 腹泻 PCR检测 模板dna 提取方法 二硫苏糖醇冻融法
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模板DNA质量对单核苷酸多态性分析的影响 被引量:3
4
作者 张淑雅 李岩 +5 位作者 裴秀英 高玉婧 刘芳 蒋学锋 董晓薇 随瑞枝 《宁夏医学杂志》 CAS 2009年第7期584-586,F0003,共4页
目的探索在单核苷酸多态性分析中模板DNA质量对实验的影响以及提高模板DNA质量的途径。方法用PCR-RFLP法研究SNP rs1024611(G/A)的基因分型,从样本保存方式、保存时间及DNA提取方法三方面进行对比实验,观察其对模板DNA质量及SNP分析的... 目的探索在单核苷酸多态性分析中模板DNA质量对实验的影响以及提高模板DNA质量的途径。方法用PCR-RFLP法研究SNP rs1024611(G/A)的基因分型,从样本保存方式、保存时间及DNA提取方法三方面进行对比实验,观察其对模板DNA质量及SNP分析的影响。结果从抗凝血中提取DNA模板的得率比非抗凝血高,在SNP分析中,EDTA抗凝血效果最好、肝素抗凝血效果不好;基因组DNA在全血中的有效保存时间比提纯的DNA有效时间长;试剂盒法提取DNA的得率和纯度均高于传统的酚-氯仿法。结论可通过以下途径提高SNP研究中DNA模板的质量:采集血样用EDTA抗凝、分装成小份在-20℃冻存,避免反复冻融。使用前在37℃水浴中快速解冻,用试剂盒法提取DNA更适合于SNP的研究,提取的模板DNA要及时实验或分装后冻存于-20℃,若需长期保存模板DNA,保存全血优于保存纯化的DNA。 展开更多
关键词 模板dna 单核苷酸多态性 保存
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猪氟烷基因杂合子模板DNA的制备及其用途
5
作者 刘铁铮 许康朴 +2 位作者 葛云山 徐晓波 谢云敏 《江苏农业学报》 CSCD 1996年第3期41-43,共3页
采用血液淋巴细胞大量制备了猪氟烷基因杂合子模板DNA。在氟烷基因PCR检测中将上述模板DNA作为空白对照可以有效地监控样品制备。
关键词 氟烷基因杂合子 模板dna 制备 PCR
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甲醇法制备的血模板DNA用于聚合酶链反应
6
作者 赵彤 朱慧萍 李勇 《卫生研究》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期115-116,共2页
建立从外周血标本制备用于聚合酶链反应的 DNA模板的甲醇法 ,并与 A/ B液法、Qiagen纯化柱法和 ISOCODE法进行比较。甲醇制备纸血片 DNA法为 :取直径为 3mm的血环 ,经甲醇固定后加去离子水 ,煮沸后离心 ,上清即为 DNA储备液。甲醇法与其... 建立从外周血标本制备用于聚合酶链反应的 DNA模板的甲醇法 ,并与 A/ B液法、Qiagen纯化柱法和 ISOCODE法进行比较。甲醇制备纸血片 DNA法为 :取直径为 3mm的血环 ,经甲醇固定后加去离子水 ,煮沸后离心 ,上清即为 DNA储备液。甲醇法与其它 3种制备模板 DNA的方法比较 ,具有提取的模板 DNA质量较高 ,血标本容易获得、保存且成本低 ,制备效率高 ,而且实验方法简单易行等诸多优点。 展开更多
关键词 模板dna 聚合酶链反应 外周血 甲醇法
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转基因杨树外源基因PCR检测模板DNA的快速制备
7
作者 王晓锋 潘建芝 +1 位作者 李燕玲 杜克久 《河北林果研究》 2009年第4期349-352,共4页
用带盖离心管定量取转基因毛白杨组培苗及其室外8 a生植株叶片,加入DNA提取缓冲液研磨,离心后取上清液稀释5倍。取1μL作为PCR模板DNA检测杨树外源Bt和Npt II基因。PCR产物经琼脂糖凝胶电泳检测,目的条带清晰,可重复性强。
关键词 转基因毛白杨 模板dna制备 PCR检测
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FTA卡在模板DNA制备中的应用研究 被引量:9
8
作者 付素兰 刘景武 +1 位作者 任天红 王国文 《中国卫生检验杂志》 CAS 2008年第6期1124-1125,1150,共3页
目的:本文详细介绍了一种简便、快速、安全的用于DNA制备的方法。方法:查阅了大量国内外关于FTA卡及其应用方面的文章。结果:详细介绍了FTA卡在模板DNA制备以及在基因的储藏、医学检测以及食源性致病菌的检测方面的具体应用。结论:FTA... 目的:本文详细介绍了一种简便、快速、安全的用于DNA制备的方法。方法:查阅了大量国内外关于FTA卡及其应用方面的文章。结果:详细介绍了FTA卡在模板DNA制备以及在基因的储藏、医学检测以及食源性致病菌的检测方面的具体应用。结论:FTA卡可作为一种通用、快速、简便的DNA模板制备方法可用于生物学各方面的研究。 展开更多
关键词 dna模板制备 FTA卡
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模板DNA用量对荧光STR复合扩增检测的影响 被引量:14
9
作者 顾丽华 平原 +1 位作者 程莉 周怀谷 《中国法医学杂志》 CSCD 2002年第2期77-80,共4页
目的 探讨模板DNA用量对荧光STR复合扩增检测的影响,寻求荧光STR复合扩增检测的最适扩增模板DNA用量。方法 采用模板DNA(9947A)不同的扩增用量,对Profiler Plus试剂盒的基因座进行扩增,在3100型全自动遗传分析仪上作了检测。结果 3100... 目的 探讨模板DNA用量对荧光STR复合扩增检测的影响,寻求荧光STR复合扩增检测的最适扩增模板DNA用量。方法 采用模板DNA(9947A)不同的扩增用量,对Profiler Plus试剂盒的基因座进行扩增,在3100型全自动遗传分析仪上作了检测。结果 3100型遗传分析仪检测的最适扩增模板DNA用量在0.31~2.5ng之间。结论 模板DNA量过高或过低均会影响荧光STR复合扩增检测结果的可靠性。 展开更多
关键词 STR 最适模板dna用量 PROFILER PLUS KIT 3100型全自动遗传分析仪
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一种基于模板DNA的PCR扩增难易预测方法
10
作者 范秀静 李楠 李春 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2012年第4期718-720,共3页
借助赋予四种碱基A,G,C,T四个三维空间中的点(0,0,1),(0,1,0),(-1,-1,0),(1,0,0),将一条DNA序列转化为一个二十四维向量。在此基础上利用Fisher线性判别法对人类基因组中189条基因片段进行PCR扩增难易预测,识别率达到了90%。
关键词 模板dna 24维向量 聚合酶链式反应(PCR)
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微量模板DNA扩增技术 被引量:1
11
作者 申艳乐 《刑事技术》 2003年第2期32-33,共2页
综述了任意引物PCR和巢式PCR两种方法应用于微量模板DNA扩增的原理和应用优势。
关键词 任意引物PCR 巢式PCR 微量模板dna扩增 法医学
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无细胞蛋白合成系统中细胞提取物和模板DNA的研究进展
12
作者 许博楠 冯佳 +1 位作者 周见庭 蒋建兰 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第12期100-114,共15页
无细胞蛋白合成系统(cell-free protein synthesis,CFPS)是一种体外蛋白质合成的高效平台,与体内蛋白合成系统相比,它突破了活细胞的限制,使蛋白合成反应可以在试管中进行,具有灵活、高效、可控性强的特点。近几年来,合成生物学领域新... 无细胞蛋白合成系统(cell-free protein synthesis,CFPS)是一种体外蛋白质合成的高效平台,与体内蛋白合成系统相比,它突破了活细胞的限制,使蛋白合成反应可以在试管中进行,具有灵活、高效、可控性强的特点。近几年来,合成生物学领域新技术的涌现推动了CFPS系统的快速发展,尤其在细胞提取物和模板DNA方面。细胞提取物和模板DNA是CFPS系统中不可或缺的重要组成,很大程度上决定了无细胞反应的效率和成本。本文综述了CFPS系统中细胞提取物和模板DNA方面的研究进展,主要介绍了最近新开发的细胞提取物系统的特点和应用前景,以及质粒DNA模板和线性DNA模板的研究进展。 展开更多
关键词 无细胞蛋白合成 细胞提取物 质粒dna模板 线性dna模板
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香蕉种质资源的AFLP鉴别与分类中DNA模板的制备 被引量:29
13
作者 易干军 于晓英 +1 位作者 霍合强 张秋明 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期345-348,共4页
在运用AFLP技术进行香蕉种质资源的鉴别与分类时,成功的关键之一是HMW基因组DNA的成功制备和避免降解,为了获得高纯度的HMW香蕉模板DNA和清晰的AFLP指纹图谱,以粉蕉为试材进行了用不同方法从不同植物体部位提取香蕉DNA的研究。结果表明... 在运用AFLP技术进行香蕉种质资源的鉴别与分类时,成功的关键之一是HMW基因组DNA的成功制备和避免降解,为了获得高纯度的HMW香蕉模板DNA和清晰的AFLP指纹图谱,以粉蕉为试材进行了用不同方法从不同植物体部位提取香蕉DNA的研究。结果表明,以香蕉未展开的幼叶、成熟叶、新根为材料提取的DNA量足以进行AFLP分析,但考虑到取材的方便性,最好选用未展开的幼叶或成熟叶;用改进后的SDS、CTAB法均可以获得HMW基因组DNA和AFLP指纹图谱,SDS法(用氯仿异-戊醇溶液抽提3次)提取的DNA量将近是CTAB法提取的DNA量的2倍,但SDS法提取的DNA纯度不如CTAB法提取的高。两种方法提取的DNA片段大小一致,大约在16kb左右。 展开更多
关键词 香蕉 AFLP 模板dna 种质资源 鉴别 提取 制备
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不同方法提取鳗鲡病原菌DNA模板的差异分析 被引量:3
14
作者 熊静 关瑞章 +2 位作者 郭松林 黄文树 关淑芳 《集美大学学报(自然科学版)》 CAS 2012年第3期161-166,共6页
利用吸光值、琼脂糖电泳及PCR差异扩增等指标,对酚-氯仿法、水煮法、碱裂解法3种方法制备的鳗鲡病原菌DNA模板进行了差异分析.结果表明:1)不同方法提取的病原菌模板DNA的浓度、纯度及分子质量大小存在差异,但以这3种方法提取的病原菌DN... 利用吸光值、琼脂糖电泳及PCR差异扩增等指标,对酚-氯仿法、水煮法、碱裂解法3种方法制备的鳗鲡病原菌DNA模板进行了差异分析.结果表明:1)不同方法提取的病原菌模板DNA的浓度、纯度及分子质量大小存在差异,但以这3种方法提取的病原菌DNA为模板,均能成功扩增到细菌16S rD-NA和外膜蛋白的保守序列.其中,酚-氯仿提取的模板DNA浓度较低、纯度较高;水煮法和碱裂解法提取的模板DNA浓度较高、纯度较低.2)电泳显示,3种方法获得的模板DNA扩增出的16S rDNA保守序列条带均一,没有显著差异,但在外膜蛋白保守序列的扩增中却因菌种和模板提取方法的不同而存在差异. 展开更多
关键词 模板dna 水煮法 碱裂解法 酚-氯仿提取法 16Srdna 外膜蛋白基因
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实时荧光定量PCR模板DNA快速制备的方法建立与应用 被引量:11
15
作者 王忠发 《中华预防医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期248-250,共3页
实时荧光定量PCR技术于1996年美国Appied Biosystems公司推出,由于该技术不仅实现PCR从定性到定量的飞跃,而且与常规PCR相比,具有特异性更强、敏感度更高、操作简便快速、可以有效解决常规PCR污染问题等优点,已广泛应用于突发公共... 实时荧光定量PCR技术于1996年美国Appied Biosystems公司推出,由于该技术不仅实现PCR从定性到定量的飞跃,而且与常规PCR相比,具有特异性更强、敏感度更高、操作简便快速、可以有效解决常规PCR污染问题等优点,已广泛应用于突发公共卫生事件应急处置中病原体的检测。提高实时荧光定量PCR的检测速度,服务于突发公共卫生事件应急检测是当前备受关注的技术问题。实时荧光定量PCR由模板制备和PCR两部分组成,缩短模板制备时间就可提高实时荧光定量PCR的检测速度。 展开更多
关键词 实时荧光定量PCR技术 模板dna 快速制备 突发公共卫生事件 模板制备 污染问题 应急处置 检测
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福建柏RAPD模板高纯度、大分子量DNA的提取研究 被引量:1
16
作者 李晓青 朱锦懋 +1 位作者 安平 金雅平 《福建林业科技》 北大核心 1999年第3期1-3,共3页
以福建柏为实验材料, 从多方面探讨提取高纯度、大分子量模板 D N A 的最佳处理方法, 进而总结出一般植物模板 D N A 提取的关键步骤。
关键词 福建柏 RAPD模板dna 高纯度 大分子量 提取
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一种经济高效的酵母菌落PCR模板DNA制备方法的建立 被引量:2
17
作者 刘微 戴凌燕 +3 位作者 苗青 彭辉 张东杰 李志江 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第7期848-852,共5页
目的建立一种经济高效、结果稳定的酵母菌落PCR模板DNA制备方法。方法将乙酸乙酯处理与高温破壁相结合,建立乙酸乙酯-高温破壁法制备酵母菌落PCR模板DNA,并以此方法对酵母进行目的基因扩增与阳性转化子的筛选。同时,以酵母基因组DNA及... 目的建立一种经济高效、结果稳定的酵母菌落PCR模板DNA制备方法。方法将乙酸乙酯处理与高温破壁相结合,建立乙酸乙酯-高温破壁法制备酵母菌落PCR模板DNA,并以此方法对酵母进行目的基因扩增与阳性转化子的筛选。同时,以酵母基因组DNA及高温破壁法制备的模板作为对照。结果乙酸乙酯-高温破壁法制取的模板可直接用于菌落PCR扩增目的基因片段以及筛选阳性转化子,与提取酵母基因组DNA相比,采用乙酸乙酯-高温破壁法制取模板的准确率可达90%以上,而高温破壁法制备模板结果不稳定。结论本实验建立的方法简单高效,结果稳定,成本低廉,可满足大规模筛选阳性转化子。 展开更多
关键词 酵母 菌落PCR 模板dna 基因组dna 阳性转化子
原文传递
猕猴桃雌雄性别的AFLP鉴别中DNA模板的制备 被引量:32
18
作者 张潞生 李传友 +3 位作者 贾建航 李绍华 王斌 肖兴国 《果树科学》 CSCD 北大核心 1999年第3期171-175,共5页
基因组DNA的成功制备和避免降解是AFLP成功的关键。描述了猕猴桃AFLP研究中的DNA模板制备方法,尤其是DNA的提取和纯化,以及基因组DNA的酶切中常见的问题及其相应的解决措施。应用这些方法得到了猕猴桃清晰的AFLP指纹图谱。
关键词 猕猴桃 AFLP dna模板 性别鉴定
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非洲菊SRAP标记的DNA模板制备及反应体系优化 被引量:12
19
作者 李达 吴莉英 +5 位作者 唐前瑞 邱收 姚觉 周红灿 魏湘萍 于晓英 《湖南农业大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期196-199,共4页
为获得非洲菊清晰的SRAP标记图谱,对非洲菊DNA的提取方法及其SRAP-PCR反应体系的影响因子进行了初步探讨,建立了扩增多态性高、重复性好、带型清晰的DNA模板和SRAP-PCR反应体系.最佳SPAR-PCR反应体系:在50μL的反应总体系中,Mg2+2.0mmol... 为获得非洲菊清晰的SRAP标记图谱,对非洲菊DNA的提取方法及其SRAP-PCR反应体系的影响因子进行了初步探讨,建立了扩增多态性高、重复性好、带型清晰的DNA模板和SRAP-PCR反应体系.最佳SPAR-PCR反应体系:在50μL的反应总体系中,Mg2+2.0mmol/L,dNTPs0.3mmol/L,DNA模板100ng,DNA聚合酶2.0U,上游、下游引物各0.22mmol/L.扩增程序:在94℃预变性4min,反应前5个循环在94℃变性1min,35℃复性1min,72℃延伸1min的条件下运行,随后的30个循环复性温度提高到55℃,最后72℃延伸5min. 展开更多
关键词 非洲菊 dna模板 SRAP-PCR反应体系
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苹果基因组AFLP分析的DNA模板的制备及技术体系的建立 被引量:13
20
作者 王彩虹 王倩 +3 位作者 戴洪义 贾建航 王斌 束怀瑞 《山东农业大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2001年第2期197-200,共4页
AFLP对模板的质量要求较高。在苹果上用常规的SDS法提取基因组DNA ,若加以适当纯化 ,也可以达到AFLP分析的要求。另外 ,在AFLP分析体系中 ,应注意选择性扩增模板的浓度 ,以及选用适当的引物组合 ,同时也应掌握好变性的条件。
关键词 苹果 dna模板 AFLP分析 基因组 制备 技术体系 SDS法
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