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香蕉枯萎病菌候选效应蛋白FoSSP80能抑制植物免疫反应
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作者 赵阳 刘爽 +3 位作者 王志彪 伍俊宇 陈代朋 郑丽 《热带生物学报》 2025年第1期87-97,共11页
香蕉枯萎病是香蕉的主要病害之一。香蕉枯萎病菌(Fusarium oxysporum f.sp.cubense,Foc)产生的效应蛋白在其侵染香蕉的过程中发挥了重要作用。实验室前期在Foc中筛选到候选效应蛋白FoSSP80,生物信息学分析发现FoSSP80含有信号肽、无跨... 香蕉枯萎病是香蕉的主要病害之一。香蕉枯萎病菌(Fusarium oxysporum f.sp.cubense,Foc)产生的效应蛋白在其侵染香蕉的过程中发挥了重要作用。实验室前期在Foc中筛选到候选效应蛋白FoSSP80,生物信息学分析发现FoSSP80含有信号肽、无跨膜结构域;利用酵母分泌系统证实了FoSSP80具有分泌功能;在烟草中瞬时表达能够抑制由BAX引起的细胞程序性死亡(PCD),且FoSSP80可以抑制活性氧(ROS)的积累和胼胝质的沉积;与野生型和回补菌株相比敲除突变体ΔFoSSP80在菌落形态、生长速率和分生孢子产生和致病性方面都没有显著差异。研究结果表明FoSSP80是一个经典分泌蛋白,且可以抑制植物的免疫反应。 展开更多
关键词 香蕉 枯萎病 效应蛋白 植物免疫
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根肿菌效应蛋白PBRA_000499功能研究
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作者 付钰 吴明婷 +1 位作者 徐姊玥 王茂林 《四川大学学报(自然科学版)》 北大核心 2025年第1期207-214,共8页
为了探究芸薹属根肿菌(Plasmodiophora brassicae Woronin)效应蛋白PBRA_000499的功能,本研究首先通过农杆菌介导的烟草瞬时表达实验验证PBRA_000499在植物免疫系统中的作用,发现PBRA_000499可以显著抑制由植物免疫诱导因子BAX、INF1诱... 为了探究芸薹属根肿菌(Plasmodiophora brassicae Woronin)效应蛋白PBRA_000499的功能,本研究首先通过农杆菌介导的烟草瞬时表达实验验证PBRA_000499在植物免疫系统中的作用,发现PBRA_000499可以显著抑制由植物免疫诱导因子BAX、INF1诱导的细胞程序性死亡,通过亚细胞定位发现PBRA_000499主要分布在细胞质中,随后进一步构建PBRA_000499的转基因拟南芥株系,通过与野生型拟南芥Col-0的对比接种实验,发现PBRA_000499转基因拟南芥比Col-0植株更加矮小且受胁迫程度更深,根部腐烂情况更加严重,病情指数更高.以上结果表明,PBRA_000499是由根肿菌分泌的细胞质效应蛋白,可以抑制植物的免疫系统,进而调节根肿菌的侵染过程,影响根肿病的发生. 展开更多
关键词 芸薹属根肿菌 效应蛋白 植物免疫
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青枯菌Ⅲ型效应蛋白调控植物免疫研究进展 被引量:1
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作者 吴幕绵 陈舒婷 +4 位作者 李涛 黎振兴 麦培婷 郝彦伟 宫超 《广东农业科学》 CAS 2024年第8期138-150,共13页
青枯菌(Ralstonia solanacearum)通常从寄主植物根部侵染维管束系统,引发青枯病(Bacterial wilt),造成植物产生不可逆的萎蔫、死亡。青枯病是一种毁灭性土传细菌病害,目前已成为制约我国茄科作物生产的主要病害之一。Ⅲ型分泌系统(Type... 青枯菌(Ralstonia solanacearum)通常从寄主植物根部侵染维管束系统,引发青枯病(Bacterial wilt),造成植物产生不可逆的萎蔫、死亡。青枯病是一种毁灭性土传细菌病害,目前已成为制约我国茄科作物生产的主要病害之一。Ⅲ型分泌系统(TypeⅢsecretion system,T3SS)在青枯菌侵染寄主过程中发挥重要作用,青枯菌利用T3SS向寄主细胞分泌大量Ⅲ型效应蛋白(TypeⅢeffectors,T3Es)以干扰寄主的免疫反应。国内外学者致力于探索青枯菌如何通过识别寄主体内的靶标蛋白来干扰寄主细胞、调控寄主免疫功能。因此,对青枯菌T3Es靶向识别的植物蛋白进行鉴定有助于了解青枯菌T3Es的生物学功能、青枯菌的致病过程,同时也有助于挖掘寄主中青枯病抗性相关蛋白及其作用机制。尽管大多数T3Es功能仍然未知,但目前已报道的青枯菌T3Es可通过多种分子机制干扰植物先天免疫、诱导植物发生超敏反应、影响植物代谢和激素信号传导通路等来调节寄主抗青枯病能力。该文综述青枯菌T3Es的特征、功能鉴定方法及其参与调控青枯菌致病性及植物免疫机制的研究进展,并对青枯菌T3Es与寄主互作机制研究进行展望,有助于更加深入地了解青枯菌的致病机理及寄主免疫系统的应答机理,为青枯菌诱导寄主抗性机制的解析及青枯病的防治提供有效参考。 展开更多
关键词 青枯菌 青枯病 Ⅲ型分泌系统 效应蛋白 靶标蛋白 致病性 免疫反应
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布鲁氏菌效应蛋白BspE基因缺失株的构建及其生物学特性研究
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作者 张思岚 支飞杰 +6 位作者 丁剑 宋银娟 郑福英 付强 储岳峰 史慧君 许健 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2024年第12期5128-5137,共10页
【目的】构建牛种布鲁氏菌(B.abortus)A19株效应蛋白BspE基因缺失株,探究其生长特性及在宿主细胞中的生存、黏附及入侵能力,并观察BspE蛋白的亚细胞定位情况。【方法】以牛种布鲁氏菌A19为研究对象,运用同源重组及SacB反向筛选技术构建... 【目的】构建牛种布鲁氏菌(B.abortus)A19株效应蛋白BspE基因缺失株,探究其生长特性及在宿主细胞中的生存、黏附及入侵能力,并观察BspE蛋白的亚细胞定位情况。【方法】以牛种布鲁氏菌A19为研究对象,运用同源重组及SacB反向筛选技术构建布鲁氏菌效应蛋白BspE基因缺失株A19ΔBspE,并通过质粒回补方法构建其回补株A19CΔBspE,比较3种菌株在体外的生长特性;通过平板计数方法分析BspE基因缺失对布鲁氏菌在细胞内的生存及黏附和入侵细胞能力的影响;通过间接免疫荧光试验检测BspE蛋白在RAW264.7细胞中的定位情况。【结果】菌液PCR结果显示,获得大小为2060 bp的特异性条带,成功构建BspE基因缺失株A19ΔBspE;Western blotting结果显示,获得大小约为14.59 ku的BspE-flag条带,成功构建回补株A19CΔBspE。生长曲线结果显示,在相同的培养条件下,A19ΔBspE与牛种布鲁氏菌A19、A19CΔBspE的生长趋势没有显著差异(P>0.05),均在8 h达对数生长期,32 h进入平台期。胞内增殖试验结果显示,在感染48 h内,A19ΔBspE在RAW264.7细胞中的生存能力与牛种布鲁氏菌A19、A19CΔBspE无显著差异(P>0.05)。细菌黏附和入侵试验结果显示,A19ΔBspE黏附和入侵RAW264.7细胞的能力与牛种布鲁氏菌A19、A19CΔBspE没有显著差异(P>0.05)。间接免疫荧光试验结果显示,BspE蛋白主要分布于核周区域。【结论】本研究证实了BspE基因的缺失不影响布鲁氏菌在体外的生长及在RAW264.7细胞中的生存、黏附及入侵能力,且BspE蛋白主要定位在核周区域,为后续研究布鲁氏菌效应蛋白BspE的生物学功能和致病机制奠定基础。 展开更多
关键词 布鲁氏菌 效应蛋白BspE 突变株 生物学特性
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香蕉枯萎病菌候选效应蛋白FoSSP20的鉴定和功能初探 被引量:1
5
作者 王田 符俐盈 +4 位作者 赵阳 刘爽 张玉芳 陈代朋 郑丽 《热带生物学报》 2024年第1期85-93,共9页
为了鉴定课题组前期在Foc4基因组中筛选的候选效应蛋白的毒力功能,以从中选取的FoSSP20为研究对象,通过生物信息学分析其结构,并通过信号肽分泌实验、亚细胞定位实验、烟草瞬时表达实验和qRT-PCR初步分析其功能,结果显示,利用酵母分泌... 为了鉴定课题组前期在Foc4基因组中筛选的候选效应蛋白的毒力功能,以从中选取的FoSSP20为研究对象,通过生物信息学分析其结构,并通过信号肽分泌实验、亚细胞定位实验、烟草瞬时表达实验和qRT-PCR初步分析其功能,结果显示,利用酵母分泌实验验证FoSSP20的信号肽的分泌功能,亚细胞定位分析表明分泌蛋白定位于烟草(Nicotiana benthamiana)细胞的细胞膜和细胞核中。qRT-PCR结果分析表明FoSSP20在香蕉枯萎病菌侵染前期显著上调表达。以上结果表明,FoSSP20是一个经典分泌蛋白,可能在病原菌侵染过程中发挥作用。 展开更多
关键词 尖孢镰刀菌古巴专化型 效应蛋白 亚细胞定位 细胞死亡
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猕猴桃溃疡病菌Ⅲ型效应蛋白HopAH1的三维结构与生化功能分析
6
作者 张馨怡 郭宝佃 +2 位作者 韩晨阳 赵延存 刘凤权 《江苏农业科学》 北大核心 2024年第12期121-127,共7页
猕猴桃溃疡病危害严重,影响猕猴桃的产量。对猕猴桃溃疡病菌14个保守的Ⅲ型效应蛋白进行了功能域预测分析,发现HopAH1属于糖基水解酶超级家族。搜索同源蛋白并结合进化树分析发现,HopAH1与丁香假单胞菌番茄致病变种的效应蛋白亲缘关系较... 猕猴桃溃疡病危害严重,影响猕猴桃的产量。对猕猴桃溃疡病菌14个保守的Ⅲ型效应蛋白进行了功能域预测分析,发现HopAH1属于糖基水解酶超级家族。搜索同源蛋白并结合进化树分析发现,HopAH1与丁香假单胞菌番茄致病变种的效应蛋白亲缘关系较近,而与其他同源蛋白的亲缘关系相对较远。Alpha Fold2预测三维结构发现,HopAH1具有糖基水解酶GH5家族典型的桶状结构。酶活性测定试验发现HopAH1不能水解槐树豆胶、羧甲纤维素钠以及对硝基苯基-β-D半乳糖苷等3种底物,推测可能存在其他特异性底物。使用农杆菌介导的蛋白瞬时表达体系在本氏烟中表达HopAH1,发现不能引起烟草细胞坏死。研究结果将为HopAH1的作用机制研究提供参考。 展开更多
关键词 猕猴桃溃疡病菌 效应蛋白 三维结构 生化功能
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根瘤菌Ⅲ型分泌系统的效应蛋白种类及功能
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作者 毕宇 朱加楠 +3 位作者 甄涛 周舒扬 刘春燕 于德水 《黑龙江科学》 2024年第10期12-18,共7页
根瘤菌(Rhizobium sp.)是土壤中普遍存在的微生物,可以与豆科植物建立共生关系形成根瘤。共生关系的建立需要复杂的分子交换过程,而根瘤菌的Ⅲ型分泌系统在根瘤菌和豆科植物之间的结瘤和免疫反应中发挥着重要作用。综述了根瘤菌Ⅲ型分... 根瘤菌(Rhizobium sp.)是土壤中普遍存在的微生物,可以与豆科植物建立共生关系形成根瘤。共生关系的建立需要复杂的分子交换过程,而根瘤菌的Ⅲ型分泌系统在根瘤菌和豆科植物之间的结瘤和免疫反应中发挥着重要作用。综述了根瘤菌Ⅲ型分泌系统的组成及遗传特性与效应蛋白的合成路径、种类与功能及其在结瘤方面的影响等,为深入了解根瘤菌与寄主植物的结瘤机制提供参考。 展开更多
关键词 根瘤菌 Ⅲ型分泌系统 效应蛋白
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布鲁氏菌效应蛋白BspH部分生物信息学分析及与其互作宿主蛋白的筛选
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作者 印双红 张俊波 +6 位作者 孔凯旋 杜昌青 孙馨 李寅翠 张孟琴 王书利 易继海 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第9期938-945,共8页
为分析BspH蛋白的部分分子生物信息学及与其互作的宿主蛋白,本研究通过在线软件Predicting Antigenic Peptides分析BspH蛋白的抗原决定簇、SWISS MODEL预测BspH蛋白的三级结构。委托公司合成BspH基因并构建重组表达质粒pET-B2m-BspH,经... 为分析BspH蛋白的部分分子生物信息学及与其互作的宿主蛋白,本研究通过在线软件Predicting Antigenic Peptides分析BspH蛋白的抗原决定簇、SWISS MODEL预测BspH蛋白的三级结构。委托公司合成BspH基因并构建重组表达质粒pET-B2m-BspH,经酶切和测序鉴定正确后,将pET-B2m-BspH转化BL21(DE3)感受态细胞后经IPTG诱导表达重组BspH蛋白(rBspH),利用镍柱亲和层析法纯化该重组蛋白,并经SDS-PAGE检测。将纯化的rBspH免疫日本大耳兔4次,4免后1周即首免后49 d采血分离血清制备BspH蛋白多克隆抗体(PAb)并经ELISA检测其效价,采用western blot检测该PAb与BspH蛋白的反应性。预测结果显示,BspH蛋白有19个抗原决定簇,三级结构以α-螺旋为主。SDS-PAGE结果显示,在65 ku处出现目的条带,且rBspH主要以包涵体的形式表达,纯化效果较好。ELISA和western blot结果显示,制备的PAb效价为1:1024000,且该PAb可以与纯化的rBspH反应,在65 ku处出现特异性条带。将委托公司构建的重组诱饵质粒pGBKT7-BspH和pGADT7共转化酵母菌感受态细胞,30℃培养3 d~5 d后上述转化的酵母菌在DDO/X培养板上长出蓝色菌落,表明p GBKT7-BspH质粒已转入酵母菌中,且表达了诱饵蛋白BspH;在TDO/X和QDO/X/A培养板上均不生长,且在DDO/X培养板上形成的菌落大小和数量与阴性对照酵母菌基本一致,表明诱饵蛋白BspH在酵母菌中无自激活活性和毒性。在此基础上,将pGBKT7-BspH和小鼠RAW264.7细胞cDNA文库共转化酵母菌Y2H Gold感受态细胞,以表达的BspH作为诱饵蛋白,采用酵母双杂交技术从上述cDNA文库中初步鉴定与BspH存在相互作用的宿主蛋白,结果显示共有28个阳性菌落变蓝,分别提取该28个阳性菌落中的质粒并测序,将测序后的序列在NCBI数据库进行BLASTX比对分析,共得到18种同源性为88.93%~100%并能与BspH蛋白相互作用的宿主蛋白,对其中的5个宿主蛋白进一步经回交验证试验,结果显示,BspH与5个宿主蛋白AKIP1、UBXN1、HSP90AA1、PRC1、PGM1均存在互作。本研究表达并纯化了布鲁氏菌效应蛋白BspH,制备了BspH蛋白的PAb,并筛选到与BspH蛋白互作的5个宿主蛋白,为进一步探究BspH蛋白在布鲁氏菌感染中的功能及其致病机制提供参考依据。 展开更多
关键词 布鲁氏菌 效应蛋白BspH 生物信息学分析 酵母双杂交 互作蛋白
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橡胶树白粉菌保守效应蛋白致病机制研究
9
作者 刘鑫雨 何礼娟 +3 位作者 殷金瑶 林春花 李潇 缪卫国 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2024年第9期1886-1894,共9页
白粉菌可侵染多种重要作物,而橡胶树白粉菌(Erysiphe quercicola)引起的橡胶树白粉病严重威胁天然橡胶产业。为探究橡胶树白粉菌致病分子机制,前期对橡胶树白粉菌HO-73菌株进行基因组测序分析,预测出133个潜在的效应蛋白(candiate secre... 白粉菌可侵染多种重要作物,而橡胶树白粉菌(Erysiphe quercicola)引起的橡胶树白粉病严重威胁天然橡胶产业。为探究橡胶树白粉菌致病分子机制,前期对橡胶树白粉菌HO-73菌株进行基因组测序分析,预测出133个潜在的效应蛋白(candiate secreted effector proteins, CSEPs),这类CSEPs仅在白粉菌群中具有同源蛋白。本研究鉴定了其中一个在橡胶树白粉菌中较为保守的效应蛋白—CSEP02974。利用酵母系统测定信号肽功能的试验表明,CSEP02974为分泌蛋白。利用农杆菌介导的本氏烟草转化,瞬时表达CSEP02974-GFP,并进行烟草中的定位分析,结果显示CSEP02974是一个细胞质效应蛋白。进一步在拟南芥表达CSEP02974可抑制几丁质和flg22诱导的活性氧(ROS)爆发和胼胝质积累,表明CSEP02974是白粉菌抑制植物免疫的毒性因子。通过喷施外源双链RNA,使橡胶树白粉菌中CSEP02974基因沉默。致病性分析表明,沉默该基因会导致病菌扩展侵染受抑制。综上,本研究鉴定到保守的橡胶树白粉菌致病因子,为进一步了解橡胶树-白粉菌的相互作用机制提供新的线索。 展开更多
关键词 橡胶树 白粉菌 效应蛋白
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印度梨形孢效应蛋白CSN5的生物信息学分析
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作者 刘凌云 吕玉茹 +2 位作者 周子晨 王汶淏 岳静 《工业微生物》 CAS 2024年第6期131-134,共4页
文章通过分析CSN5效应蛋白,为印度梨形孢与植物互作研究提供了新的思路和方向,有助于深入探究相关问题。同时,采用生物信息学软件Protpapram、ProtScale、NCBI-CD-search等预测了CSN5的主要特性。CSN5蛋白由369个氨基酸组成,为稳定亲水... 文章通过分析CSN5效应蛋白,为印度梨形孢与植物互作研究提供了新的思路和方向,有助于深入探究相关问题。同时,采用生物信息学软件Protpapram、ProtScale、NCBI-CD-search等预测了CSN5的主要特性。CSN5蛋白由369个氨基酸组成,为稳定亲水性蛋白,且其特异性保守结构域属于Mov34/MPN/PAD-1家族。生物信息学分析表明,CSN5蛋白保守性较强,能够与多种蛋白相互作用去泛素化,为效应蛋白提高植物抗逆性奠定了基础。 展开更多
关键词 印度梨形孢 效应蛋白 生物信息学
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从效应蛋白多样性看革兰氏阳性菌Ⅶ型分泌系统功能多样性
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作者 张旸 王德禹 吴旸 《微生物与感染》 2024年第3期177-185,共9页
Ⅶ型分泌系统(type VII secretion system,T7SS)是唯一的仅存在于革兰氏阳性细菌中的分泌系统。T7SS在细菌与细菌、细菌与宿主、细菌与环境的相互作用中发挥着重要功能,与细菌的生长和致病性密切相关。T7SS的功能多样性与其所分泌的效... Ⅶ型分泌系统(type VII secretion system,T7SS)是唯一的仅存在于革兰氏阳性细菌中的分泌系统。T7SS在细菌与细菌、细菌与宿主、细菌与环境的相互作用中发挥着重要功能,与细菌的生长和致病性密切相关。T7SS的功能多样性与其所分泌的效应蛋白的多样性密切相关。因此,本文将围绕T7SS所分泌的效应蛋白展开讨论,对效应蛋白的结构和功能、分泌机制及其基因转录水平的调控方式等研究进行综述,以期为进一步研究细菌的T7SS提供新的思路。 展开更多
关键词 Ⅶ型分泌系统 结核分枝杆菌 金黄色葡萄球菌 效应蛋白
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致病疫霉菌效应蛋白Pi05440毒性功能验证及寄主候选靶标筛选
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作者 张蝶 陈胜男 +3 位作者 赵迪 王荟洁 王洪洋 刘晶 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期434-442,共9页
致病疫霉菌(Phytophthora infestans)侵染时会分泌大量效应蛋白进入寄主细胞,通过操纵寄主靶标抑制植物免疫反应。为研究致病疫霉菌效应蛋白Pi05440的功能,本研究重点分析了Pi05440的蛋白特征、毒性功能及鉴定其寄主靶标;利用生物信息... 致病疫霉菌(Phytophthora infestans)侵染时会分泌大量效应蛋白进入寄主细胞,通过操纵寄主靶标抑制植物免疫反应。为研究致病疫霉菌效应蛋白Pi05440的功能,本研究重点分析了Pi05440的蛋白特征、毒性功能及鉴定其寄主靶标;利用生物信息学数据库,预测Pi05440的保守结构域和信号肽。构建pRI101-GFP-Pi05440表达载体用于Pi05440的亚细胞定位和毒性功能分析;同时,利用酵母双杂交技术对Pi05440的寄主靶标蛋白进行了筛选和鉴定。结果表明,Pi05440基因全长969 bp,编码322个氨基酸。结构预测结果显示Pi05440含有3个典型的KAZAL功能域。亚细胞定位结果表明Pi05440定位在质膜和细胞间隙。在本氏烟中瞬时表达该基因显著促进致病疫霉菌扩展。通过酵母双杂交筛选,初步鉴定到3个Pi05440的候选靶标蛋白,分别为马铃薯过氧化氢酶12、马铃薯几丁质酶以及马铃薯MYB-like A蛋白。本研究为探究致病疫霉菌效应蛋白Pi05440及其靶标蛋白如何调控植物免疫提供了重要线索。 展开更多
关键词 致病疫霉菌 效应蛋白 亚细胞定位 酵母双杂交 靶标蛋白
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铜绿假单胞菌潜在Ⅵ型分泌系统效应蛋白PA0423的鉴定及功能研究
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作者 王彩虹 蒋梦媛 邵煜涵 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期297-305,共9页
【目的】探讨Ⅵ型分泌系统(type Ⅵ secretion system, T6SS)新的效应蛋白及其功能。【方法】以铜绿假单胞菌PAO1为研究对象,通过基因敲除、免疫印迹、免疫共沉淀、种内和种间竞争、大肠杆菌毒性实验以及结晶紫生物膜等实验探索PA0423... 【目的】探讨Ⅵ型分泌系统(type Ⅵ secretion system, T6SS)新的效应蛋白及其功能。【方法】以铜绿假单胞菌PAO1为研究对象,通过基因敲除、免疫印迹、免疫共沉淀、种内和种间竞争、大肠杆菌毒性实验以及结晶紫生物膜等实验探索PA0423的分泌方式和功能。【结果】免疫印迹和免疫共沉淀实验表明PA0423可以与PA0262相互作用,且PA0423的分泌依赖于H2-T6SS;竞争实验表明PA0423是H2-T6SS依赖的抗菌效应蛋白,且具有种间竞争优势;PA0423具有大肠杆菌毒性且PA0422为其免疫蛋白;PA0423能够影响细菌生物膜的形成。【结论】PA0423为H2-T6SS依赖的抗菌效应蛋白,其具有杀菌功能且影响细菌生物膜的形成。 展开更多
关键词 铜绿假单胞菌 Ⅵ型分泌系统 PA0423 效应蛋白
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沙眼衣原体T3SS效应蛋白CT622通过激活ERK/p38 MAPK信号通路抑制Hela299细胞凋亡
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作者 胡艺宝 彭彬峰 +2 位作者 曹倩 雷文波 刘双全 《中南医学科学杂志》 CAS 2024年第3期324-328,共5页
目的探究沙眼衣原体Ⅲ型分泌系统(T3SS)效应蛋白CT622对Hela299细胞凋亡的影响机制。方法设置不同质量浓度CT622蛋白刺激Hela299细胞,筛选最佳刺激质量浓度。将细胞实验分为PBS组(空白对照)、肿瘤坏死因子(TNF)-α组(阳性对照)、CT622组... 目的探究沙眼衣原体Ⅲ型分泌系统(T3SS)效应蛋白CT622对Hela299细胞凋亡的影响机制。方法设置不同质量浓度CT622蛋白刺激Hela299细胞,筛选最佳刺激质量浓度。将细胞实验分为PBS组(空白对照)、肿瘤坏死因子(TNF)-α组(阳性对照)、CT622组、CT622+TNF-α组、CT622+PD98059(ERK1/2抑制剂)组、CT622+SB203580(p38抑制剂)组、CT622+TNF-α+PD98059组、CT622+TNF-α+SB203580组。Hoechst33258染色和流式细胞术检测Hela299细胞的凋亡情况。Western blotting检测凋亡相关蛋白裂解的Caspase-3(cleaved-Casepase-3)、B细胞淋巴瘤(Bcl)-2、Bcl-2相关X蛋白(Bax)和凋亡信号通路中信号分子ERK/p38 MAPK蛋白的表达。结果5 mg/L CT622蛋白为Hela299细胞最佳刺激质量浓度。CT622蛋白显著抑制Hela299细胞的凋亡,并上调ERK1/2、p38 MAPK和Bcl-2蛋白表达,下调Bax和Caspase-3蛋白表达。分别利用ERK1/2和p38 MAPK抑制剂与CT622联合处理可以明显增加Hela299细胞凋亡程度。结论T3SS效应蛋白CT622通过激活ERK/p38 MAPK信号通路抑制Hela299细胞凋亡。 展开更多
关键词 沙眼衣原体 CT622效应蛋白 ERK/p38 MAPK信号通路 细胞凋亡
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玉米穗腐病致病南方镰孢菌菌株JX18-4效应蛋白的预测及分析
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作者 苏月贵 唐照磊 +2 位作者 杜青 陈培鑫 李石初 《江苏农业科学》 北大核心 2024年第23期124-128,共5页
为挖掘与玉米受体蛋白互作进而触发免疫反应的南方镰孢菌效应蛋白,基于南方镰孢菌菌株JX18-4全基因组编码蛋白序列,利用Signal P、WoLFP SORT、Target P、TMHMM和big PI Predictor等生物信息学软件预测出分泌蛋白684个,随后再用Effector... 为挖掘与玉米受体蛋白互作进而触发免疫反应的南方镰孢菌效应蛋白,基于南方镰孢菌菌株JX18-4全基因组编码蛋白序列,利用Signal P、WoLFP SORT、Target P、TMHMM和big PI Predictor等生物信息学软件预测出分泌蛋白684个,随后再用EffectorP软件预测出效应蛋白157个,随后筛选出氨基酸残基数<400且半胱氨酸残基数≥4的效应蛋白115个。植物与寄主互作(PHI)和碳水化合物酶类(CAZymes)分析结果表明,获得PHI和CAZymes数据库注释的效应蛋白数分别为14、26个。10个效应蛋白获得PHI和CAZymes 2个数据库注释,其中6个候选效应蛋白的注释结果一致。本研究所预测出的南方镰孢菌菌株JX18-4效应蛋白将会为南方镰孢菌引起的玉米穗腐病的致病机制及防控方法研究提供了参考依据。 展开更多
关键词 南方镰孢菌 玉米穗腐病 全基因组 分泌蛋白 效应蛋白
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小麦条锈菌效应蛋白Hasp58抑制植物免疫的功能分析 被引量:2
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作者 陈增菊 王婷 +3 位作者 汤春蕾 赵梦鑫 康振生 王晓杰 《麦类作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期239-246,共8页
为明确小麦条锈菌吸器特异表达效应蛋白Hasp58抑制植物免疫的功能,利用PCR获得Hasp58的全长cDNA序列;借助生物信息学软件预测Hasp58的信号肽;将Hasp58构建到pGR106载体用于农杆菌(Agrobactrium tumefacien)介导的烟草瞬时表达系统,明确H... 为明确小麦条锈菌吸器特异表达效应蛋白Hasp58抑制植物免疫的功能,利用PCR获得Hasp58的全长cDNA序列;借助生物信息学软件预测Hasp58的信号肽;将Hasp58构建到pGR106载体用于农杆菌(Agrobactrium tumefacien)介导的烟草瞬时表达系统,明确Hasp58抑制细胞坏死的毒性功能;将Hasp58构建到pCambia1302载体用于烟草细胞定位,明确Hasp58定位情况;将Hasp58构建到pEDV6载体用于荧光假单胞杆菌(Pseudomonas fluorescens)介导的小麦瞬时表达系统,对小麦胼胝质、过敏性坏死面积、活性氧、菌丝面积、菌丝长度进行统计分析,明确Hasp58抑制寄主植物PAMPs引发的免疫反应(PTI)和效应蛋白诱导的免疫反应(ETI)功能。结果表明,条锈菌Hasp58的cDNA全长为1 026 bp,编码342个氨基酸,N端含26_aa的信号肽;通过农杆菌侵染,在烟草中瞬时表达Hasp58,发现其能够抑制由BAX诱导的细胞坏死,为条锈菌的候选效应蛋白;烟草细胞定位发现,含有信号肽和缺失信号肽的Hasp58与GFP融合表达均定位在细胞质,推测该效应蛋白在胞质作用;利用细菌的三型分泌系统在小麦中瞬时表达Hasp58,发现其能够抑制荧光假单胞杆菌引起的胼胝质积累,导致由无毒性条锈菌小种CYR23引起的小麦过敏性坏死面积和活性氧减少,使菌丝面积和长度增加。推测小麦条锈菌效应蛋白Hasp58可抑制寄主植物的PAMPs引发的免疫反应(PTI)和效应蛋白诱导的免疫反应(ETI),并促进自身侵染。 展开更多
关键词 条锈菌 效应蛋白 PAMPs引发的免疫反应(PTI) 效应蛋白诱导的免疫反应(ETI)
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白叶枯病菌和细菌性条斑病菌多样性的TALE效应蛋白调控水稻抗(感)病性机理与利用策略 被引量:11
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作者 李争 熊鹂 +3 位作者 纪志远 邹丽芳 邹华松 陈功友 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第14期2894-2901,共8页
培育和种植抗病品种是防治水稻白叶枯病和条斑病的有效措施。最近几年有关TALE效应蛋白调控水稻抗(感)病性研究取得了突破性进展,这将改变水稻抗性品种培育策略。为此,本文对稻黄单胞菌-水稻互作系统中已知TALE效应蛋白与水稻中的已知... 培育和种植抗病品种是防治水稻白叶枯病和条斑病的有效措施。最近几年有关TALE效应蛋白调控水稻抗(感)病性研究取得了突破性进展,这将改变水稻抗性品种培育策略。为此,本文对稻黄单胞菌-水稻互作系统中已知TALE效应蛋白与水稻中的已知或未知抗(感)病基因(R或S)的对应关系进行了归纳,并就tale基因进化及对应水稻R或S基因发掘进行了分析。另外,文中还对以TALE为基础发展而来的TALEN技术遗传修饰水稻感病基因的前景进行了展望。利用TALEN技术可将高产优质但感病的水稻品种(材料)转变为高产优质兼广谱抗病的水稻品种(材料)。 展开更多
关键词 水稻 稻黄单胞菌 TALE效应蛋白 抗(感)病机理 TALEN
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一个细菌的致命之旅——嗜肺军团菌分泌系统及效应蛋白的研究进展 被引量:9
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作者 陆勇军 李向辉 曾咏伦 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期1093-1101,共9页
嗜肺军团菌是引起军团菌肺炎以及庞蒂亚克热的革兰氏阴性胞内病原细菌,嗜肺军团菌侵染宿主的主要特点是可以通过其IVB型毒力分泌系统,向宿主细胞内分泌超过150种的底物效应蛋白。通过这些效应蛋白的作用,嗜肺军团菌能够调整宿主细胞的... 嗜肺军团菌是引起军团菌肺炎以及庞蒂亚克热的革兰氏阴性胞内病原细菌,嗜肺军团菌侵染宿主的主要特点是可以通过其IVB型毒力分泌系统,向宿主细胞内分泌超过150种的底物效应蛋白。通过这些效应蛋白的作用,嗜肺军团菌能够调整宿主细胞的胞内运输途径,改变内外环境来伪装自己的吞噬泡,干扰宿主的细胞周期,抑制宿主细胞的凋亡,从而有效逃避宿主细胞的防御功能,创造出理想的胞内增殖环境。最后,效应蛋白还可以帮助军团菌从宿主细胞中逃逸。目前,嗜肺军团菌已经成为"病原菌-宿主相互作用"的重要研究模型,其毒力分泌系统及其底物效应蛋白的功能也成为细胞微生物学的研究热点。对嗜肺军团菌分泌系统及效应蛋白的研究不仅能够帮助阐明病原细菌的致病机理,还有助于推动对宿主免疫机制的更深层次的研究。文章主要针对嗜肺军团菌的毒力分泌系统,尤其是IVB型分泌系统的结构和功能,以及底物效应蛋白的研究进展进行了综述,向读者展示出一个小小的细菌所拥有的那令人惊叹的、如此狡猾的生存策略和它精致的杀伤武器。 展开更多
关键词 嗜肺军团菌 毒力 IVB型分泌系统 效应蛋白
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衣原体Ⅲ型分泌系统效应蛋白研究进展 被引量:2
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作者 刘良专 吴移谋 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期376-378,共3页
关键词 Ⅲ型分泌系统 效应蛋白 衣原体 革兰染色阴性 代谢活性 宿主细胞 致病机制 毒力蛋白
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Rho GTP酶参与肿瘤调控的下游效应蛋白 被引量:1
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作者 陈玉霞 刁飞 《生命的化学》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期252-254,共3页
小G蛋白Rho家族是一类能结合GTP的蛋白质,在哺乳动物细胞的信号转导系统中发挥着“分子开关”样的重要作用。Rho蛋白通过其下游效应蛋白介导发挥多种生物学效应,包括调控细胞骨架重组、黏附和运动等。近年来,Rho蛋白在肿瘤细胞的增殖、... 小G蛋白Rho家族是一类能结合GTP的蛋白质,在哺乳动物细胞的信号转导系统中发挥着“分子开关”样的重要作用。Rho蛋白通过其下游效应蛋白介导发挥多种生物学效应,包括调控细胞骨架重组、黏附和运动等。近年来,Rho蛋白在肿瘤细胞的增殖、分化、凋亡和转移的调控中的作用渐受重视。该文就介导RhoGTP酶调控肿瘤发生发展的几个下游蛋白作一介绍。 展开更多
关键词 RHO GTP酶 肿瘤 效应蛋白
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