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持续静压力通过TRPV4信号通路调控大鼠软骨细胞凋亡
1
作者 梁秋娟 刘潇 +1 位作者 古丽奴儿·沙吾提 肖朋 《中国骨质疏松杂志》 北大核心 2025年第4期507-511,517,共6页
目的探讨持续静压力对大鼠软骨细胞凋亡的机制。方法制备并培养原代大鼠软骨细胞,设置正常对照组、30 kPa压力组、GSK205对照组、GSK205+30 kPa压力组。EdU荧光染色法检测软骨细胞在12、24、48 h的增殖率。采用流式检测软骨细胞在24、48... 目的探讨持续静压力对大鼠软骨细胞凋亡的机制。方法制备并培养原代大鼠软骨细胞,设置正常对照组、30 kPa压力组、GSK205对照组、GSK205+30 kPa压力组。EdU荧光染色法检测软骨细胞在12、24、48 h的增殖率。采用流式检测软骨细胞在24、48、72 h的凋亡率。荧光标记测定软骨细胞内48 h时钙离子浓度。免疫印迹法测定软骨细胞TRPV4、JNK、p-JNK、ERK1/2、p-ERK1/2、P38、p-P38蛋白24 h时相对表达水平。结果与正常对照组比较,30 kPa压力组软骨细胞在各观察时间增殖率均显著减少(P<0.05);细胞凋亡率均显著增加(P<0.05);细胞内钙离子荧光强度增强;细胞内TRPV4、磷酸化的JNK、磷酸化的ERK1/2、磷酸化的P38均显著提高(P<0.05)。与30 kPa压力组比较,给予TRPV4的阻断剂GSK205后,GSK205+30 kPa压力组的细胞增殖率显著上升;细胞凋亡率显著减少;细胞内钙离子荧光强度减弱;TRPV4、磷酸化的JNK、磷酸化的ERK1/2、磷酸化的P38均显著减少(P<0.05)。结论30 kPa持续静压力不仅抑制软骨细胞增殖,还增加软骨细胞凋亡,使细胞内钙离子浓度增加。持续静压力促进大鼠软骨细胞凋亡的可能分子机制为通过TRPV4力学信号感受器激活MAPK信号通路。 展开更多
关键词 软骨细胞 持续静压力 凋亡 TRPV4蛋白 MAPK信号通路
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持续静压力作用下牙周膜细胞骨保护素、核因子-κB受体活化因子配体表达的增龄性变化 被引量：2
2
作者 吴洁 崔占琴 +1 位作者 韩瑜 李文静 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第6期654-661,共8页
目的通过细胞实验观察持续静压力作用下人牙周膜细胞(HPDLCs)表达骨保护素(OPG)、核因子-κB受体活化因子配体(RANKL)的增龄性变化。方法组织块法原代培养HPDLCs,分为A组(13~18岁)、B组(19~29岁)、C组(30~44岁)。CCK-8检测HPDLCs的增殖... 目的通过细胞实验观察持续静压力作用下人牙周膜细胞(HPDLCs)表达骨保护素(OPG)、核因子-κB受体活化因子配体(RANKL)的增龄性变化。方法组织块法原代培养HPDLCs,分为A组(13~18岁)、B组(19~29岁)、C组(30~44岁)。CCK-8检测HPDLCs的增殖能力,β-半乳糖苷酶染色检测HPDLCs衰老情况。3组细胞均分别给予0、1.5、3、6、12、24、48、72 h体外持续静压力机械刺激,酶联免疫吸附测定法检测所提上清液中OPG、RANKL的表达。结果体外持续静压力刺激后,牙周膜细胞OPG表达水平随加力时间及年龄增长而增加(P<0.01)。RANKL表达水平随加力时间延长而增加,随年龄增长而下降(P<0.01)。OPG/RANKL比值随加力时间呈先下降后增加趋势,且随年龄增长而增加(P<0.01)。结论体外持续静压力作用下,增龄因素可上调牙周膜细胞OPG表达及OPG/RANKL比值,下调RANKL表达。 展开更多
关键词 增龄 正畸 人牙周膜细胞 持续静压力 骨保护素 核因子-ΚB受体活化因子配体
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持续静压力对成骨细胞系MC3T3-E1金属蛋白酶解离素28表达的影响 被引量：2
3
作者 冯元 轩昆 +1 位作者 杨富生 樊淑梅 《牙体牙髓牙周病学杂志》 CAS 2008年第2期61-64,共4页
目的:研究持续静压力对成骨细胞系MC3T3-E1金属蛋白酶解离素28(ADAM28)表达的影响。方法:通过自制的细胞体外加载装置,将MC3T3-E1成骨样细胞分别施加50、100、150kPa的持续静压力1h,再分别培养24h、48h后,观察细胞在形态上的相应变化,... 目的:研究持续静压力对成骨细胞系MC3T3-E1金属蛋白酶解离素28(ADAM28)表达的影响。方法:通过自制的细胞体外加载装置,将MC3T3-E1成骨样细胞分别施加50、100、150kPa的持续静压力1h,再分别培养24h、48h后,观察细胞在形态上的相应变化,并用免疫组织化学染色的方法检测受力作用后ADAM28的染色情况。结果:细胞受力后,其ADAM28免疫组化染色强度随压力值的增大而明显降低;加压后细胞培养24h和48h两组染色强度无明显差异。结论:不同大小的静压力可以影响成骨细胞系MC3T3-E1上ADAM28金属蛋白酶解离素28表达强度,进而影响骨改建。 展开更多
关键词 成骨细胞 持续静压力 金属蛋白酶解离素28
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持续静压力作用下内质网应激对牙周膜细胞成骨分化的影响 被引量：1
4
作者 任庆源 何武林 +2 位作者 王庆 褚洪星 林海燕 《口腔疾病防治》 2019年第8期485-489,共5页
目的研究持续静压力(continuously compressive pressure,CCP)对人牙周膜细胞(human periodontal ligament cells,hPDLCs)内质网的影响及成骨分化的机制。方法用定制圆形玻璃片对体外培养的hPDLCs施加1 g/cm2CCP,分别加力0、2、4、6 h后... 目的研究持续静压力(continuously compressive pressure,CCP)对人牙周膜细胞(human periodontal ligament cells,hPDLCs)内质网的影响及成骨分化的机制。方法用定制圆形玻璃片对体外培养的hPDLCs施加1 g/cm2CCP,分别加力0、2、4、6 h后,进行碱性磷酸酶染色检测成骨分化情况,以及实时定量PCR检测蛋白激酶受体样内质网激酶(protein kinase receptorlike ER kinase,PERK)、真核翻译起始因子2α(eukaryotic translation initiation factor 2α,eIF2α)、转录激活因子4(transcription activation factor 4,ATF4)的表达情况,以加力0 h为对照组。结果hPDLCs经CCP处理后,其碱性磷酸酶染色呈蓝紫色,与对照组相比显著加深;经CCP处理后的各组hPDLCs,PERK、ATF4表达量均较对照组增高(P<0.05),且表达量随时间递增(P<0.05),eIF2α表达量均较对照组降低(P<0.05),且表达量随时间降低(P<0.05)。结论机械力刺激可促进内质网应激,激活PERK-eIF2α–ATF4信号通路,从而促进hPDLCs成骨分化。 展开更多
关键词 人牙周膜细胞 PERK-eIF2α-ATF4通路 内质网应激 持续静压力 成骨分化
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持续静压力环境下MC3T3-E1细胞的基因测序分析
5
作者 宋志靖 张浩令 +6 位作者 蒋宇航 王凯 宁浩驰 裴雪冬 陈海亮 宋敏 王薇 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第5期529-537,共9页
目的:通过对持续静压力环境下MC3T3-E1细胞的基因测序,筛选出Hub基因并分析其与骨质疏松症相关性。方法:采用MTT检测细胞增殖和免疫荧光检测细胞骨架蛋白,筛选出最佳实验条件。用TRIzol法提取RNA与基因测序,通过Mfuzz聚类、富集分析、G... 目的:通过对持续静压力环境下MC3T3-E1细胞的基因测序,筛选出Hub基因并分析其与骨质疏松症相关性。方法:采用MTT检测细胞增殖和免疫荧光检测细胞骨架蛋白,筛选出最佳实验条件。用TRIzol法提取RNA与基因测序,通过Mfuzz聚类、富集分析、GSVA分析,利用NCBI GEO数据库、Genecards数据库、molecular signatures database数据库,分析对比持续静压力环境下MC3T3-E1细胞差异表达基因,筛选Hub基因,对比分析其与骨质疏松症信号通路关联的分子学机制。结果:在持续静压力环境下,MC3T3-E1细胞增殖显著降低,在1.0 MPa处理8 h和0.5 MPa处理24 h细胞模型组的细胞骨架中,微管蛋白和肌动蛋白的抑制作用显著。通过空白组与模型组基因测序对比后发现29164个差异基因,其中14489个上调、14675个下调。这些差异基因涉及1658个GO功能,包括1096 GO_BP(生物过程),255 GO_CC(细胞组分),307 GO_MF(分子功能),MC3T3-E1细胞在持续静压力作用下受到差异基因调控的信号转导通路有305个。最后筛选出的Hub基因为BTK、CSF1R、MATK、NOS1、PDGFRB,骨质疏松症中MATK表达显著(P<0.05),与5个核心基因相对应的AUC曲线下面积为BTK(0.900)、CSF1R(0.850)、MATK(0.950)、NOS1(0.650)、PDGFRB(0.800)。通过对5个核心基因进行GSVA分析,得出MATK涉及3个关键信号传导途径:INFLAMMATORY-RESPONSE、HEDGEHOG-SIGNALING和KRAS-SIGNALING-DN。结论:持续静压力可降低MC3T3-E1细胞增殖活性,并降低细胞骨架中微管蛋白和肌动蛋白表达;MATK可能作为持续静压力环境下调控MC3T3-E1细胞成骨基因,并与骨质疏松症3个关键信号传导途径相关。 展开更多
关键词 MC3T3-E1细胞 持续静压力 基因测序 骨质疏松症
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压力与牙周膜细胞对体外诱导脐血单核细胞分化为破骨样细胞的影响 被引量：2
6
作者 吴承琼 周洪 王晓荣 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期318-322,共5页
目的研究持续静压力和人牙周膜细胞对体外诱导脐血单核细胞分化为破骨样细胞的影响,初步探讨静压力和牙周膜细胞在正畸性骨改建中的作用机制。方法密度梯度离心法分离脐血,收集单个核细胞。用组织块酶消化法培养获得牙周膜细胞。建立tra... 目的研究持续静压力和人牙周膜细胞对体外诱导脐血单核细胞分化为破骨样细胞的影响,初步探讨静压力和牙周膜细胞在正畸性骨改建中的作用机制。方法密度梯度离心法分离脐血,收集单个核细胞。用组织块酶消化法培养获得牙周膜细胞。建立transwell共培养系统,下层接种脐血单个核细胞,上层接种牙周膜细胞。A组为单核细胞与牙周膜细胞共培养加力;B组为单核细胞培养加力,另设不加力对照组A’、B’组。采用倒置相差显微镜观察及TRAP染色,骨磨片染色等方法检测破骨样细胞的形成及功能。结果A组下层细胞在加力后第2天出现细胞融合现象,3 d时可见明显的多核破骨样细胞,TRAP染色阳性,骨磨片染色可见典型的骨吸收陷窝。其他组仅有极少量多核细胞形成,未见骨吸收陷窝。结论静压力作用下,牙周膜细胞可以刺激脐血单核细胞分化为破骨样细胞。 展开更多
关键词 脐血单核细胞 牙周膜细胞 持续静压力 破骨样细胞
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力学刺激对成骨细胞ClC-3氯通道影响的实验研究 被引量：1
7
作者 王蓉 郝英 段小红 《牙体牙髓牙周病学杂志》 CAS 北大核心 2013年第3期181-183,共3页
目的:观察不同时长的持续静压力刺激对成骨细胞形态和ClC-3氯通道的影响。方法:取小鼠成骨样细胞系MC3T3-E1随机分为两组,实验组在1atm持续性静压力下培养;对照组常规培养。培养8、24 h取各组细胞在倒置显微镜下观察细胞形态;q-RT PCR... 目的:观察不同时长的持续静压力刺激对成骨细胞形态和ClC-3氯通道的影响。方法:取小鼠成骨样细胞系MC3T3-E1随机分为两组,实验组在1atm持续性静压力下培养;对照组常规培养。培养8、24 h取各组细胞在倒置显微镜下观察细胞形态;q-RT PCR检测细胞Clcn3 mRNA表达水平。结果:持续静压力刺激后8 h,细胞形态与对照组相比无明显改变,但24 h后,细胞更细长,细胞间隙变大。q-RT PCR检测显示,压力刺激后各时间点成骨细胞Clcn3 mRNA表达水平均明显高于对照组(P<0.05),并且随压力刺激延长,Clcn3 mRNA表达水平也随之升高(P<0.05)。结论:一定时间和大小的力学刺激能引起成骨细胞形态及ClC-3氯通道的变化。 展开更多
关键词 成骨细胞 持续性静压力 ClC-3氯通道 q-RT PCR
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持续性静压力对成骨样细胞MC3T3-E1生物学特性的影响 被引量：9
8
作者 侯晋 段小红 +1 位作者 吴军正 汪卫国 《临床口腔医学杂志》 2004年第1期9-11,共3页
目的 :研究持续性静压力对成骨样细胞MC3T3 -E1生物学特性的影响。方法 :利用已建立的细胞体外加力装置 ,给MC3T3 -E1细胞施加 2atm的持续性静压力 ,应用细胞计数 ,生化分析和放射免疫等方法 ,观察受力后不同时间细胞增殖、碱性磷酸酶... 目的 :研究持续性静压力对成骨样细胞MC3T3 -E1生物学特性的影响。方法 :利用已建立的细胞体外加力装置 ,给MC3T3 -E1细胞施加 2atm的持续性静压力 ,应用细胞计数 ,生化分析和放射免疫等方法 ,观察受力后不同时间细胞增殖、碱性磷酸酶活性以及骨钙素表达量等方面的变化。结果 :加力组细胞增殖速度减缓 ,实验组和对照组的细胞群体倍增时间分别为 72 .96h和 63 .3 6h ;随着培养时间的延长 ,细胞碱性磷酸酶活性增强 ,但加力组和对照组无明显差异 (P >0 .0 5 ) ;持续性静压力作用 2 4h后 ,与对照组相比 ,加力组骨钙素分泌的增加有显著差异 (P <0 .0 5 )。结论 :一定大小的持续性静压力在抑制MC3T3 -E1细胞生长的同时促进其分化成熟。 展开更多
关键词 成骨细胞 持续性静压力 碱性磷酸酶 骨钙素
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不同压力刺激对大鼠牙槽骨成骨细胞环氧合酶-2表达的影响 被引量：4
9
作者 段小红 毛勇 +1 位作者 汪卫国 张少锋 《临床口腔医学杂志》 2008年第6期341-344,共4页
目的:研究SD大鼠牙槽骨成骨细胞在不同压力刺激下环氧合酶-2(COX-2)蛋白的表达特点。方法:采用自行研制的可调压式细胞培育箱对原代培养的牙槽骨成骨细胞加载持续性静压力和间歇性静压力,用免疫细胞化学染色和Western blot检测COX-2蛋... 目的:研究SD大鼠牙槽骨成骨细胞在不同压力刺激下环氧合酶-2(COX-2)蛋白的表达特点。方法:采用自行研制的可调压式细胞培育箱对原代培养的牙槽骨成骨细胞加载持续性静压力和间歇性静压力,用免疫细胞化学染色和Western blot检测COX-2蛋白的表达。结果:COX-2蛋白的表达强度随着压力刺激作用时间的延长逐渐增强,但两种不同压力刺激对其表达量无显著性差异。结论:一定范围内不同形式的压力刺激均可诱导大鼠牙槽骨成骨细胞COX-2蛋白表达,并继而影响牙槽骨成骨细胞的增殖、分化、成熟,继而影响牙槽骨的吸收及新生和重建。 展开更多
关键词 成骨细胞 环氧合酶-2 持续性静压力 间歇性静压力
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