目的观察心脏营养素-1(CT-1)是否能促进经诱导分化剂5-氮杂胞苷(5-aza)诱导的骨髓间充质干细胞(BMMSCs)分化为心肌样细胞,并研究其相关机制。方法自成年大鼠骨髓中分离BMMSCs,分别以普通培养基(A组)、加入含CT-1的培养基(B组)培养、经5-...目的观察心脏营养素-1(CT-1)是否能促进经诱导分化剂5-氮杂胞苷(5-aza)诱导的骨髓间充质干细胞(BMMSCs)分化为心肌样细胞,并研究其相关机制。方法自成年大鼠骨髓中分离BMMSCs,分别以普通培养基(A组)、加入含CT-1的培养基(B组)培养、经5-aza诱导后加入普通培养基(C组)及5-aza加入含CT-1的培养基(D组)培养。观察细胞形态的改变,并通过免疫组化分析分化后细胞表达心脏特异性肌钙蛋白T(cTnT)的情况。电镜观察分化后细胞的超微结构及实时荧光定量检测α-actin、β-myosin heavy chain(β-MHC)、Nkx2.5、GATA4基因表达。结果C、D组的BMMSCs在培养4周后均形成心肌样细胞形态,并且均表达cTnT;D组BMMSCs分化的心肌样细胞形成了肌管样结构;D组α-actin、β-MHC、Nkx2.5、GATA4基因表达明显高于C组。结论CT-1可能通过对GATA4、Nkx2.5基因表达的调控而促进5-aza诱导的BMMSCs分化为心肌样细胞。展开更多
文摘目的观察心脏营养素-1(CT-1)是否能促进经诱导分化剂5-氮杂胞苷(5-aza)诱导的骨髓间充质干细胞(BMMSCs)分化为心肌样细胞,并研究其相关机制。方法自成年大鼠骨髓中分离BMMSCs,分别以普通培养基(A组)、加入含CT-1的培养基(B组)培养、经5-aza诱导后加入普通培养基(C组)及5-aza加入含CT-1的培养基(D组)培养。观察细胞形态的改变,并通过免疫组化分析分化后细胞表达心脏特异性肌钙蛋白T(cTnT)的情况。电镜观察分化后细胞的超微结构及实时荧光定量检测α-actin、β-myosin heavy chain(β-MHC)、Nkx2.5、GATA4基因表达。结果C、D组的BMMSCs在培养4周后均形成心肌样细胞形态,并且均表达cTnT;D组BMMSCs分化的心肌样细胞形成了肌管样结构;D组α-actin、β-MHC、Nkx2.5、GATA4基因表达明显高于C组。结论CT-1可能通过对GATA4、Nkx2.5基因表达的调控而促进5-aza诱导的BMMSCs分化为心肌样细胞。
