长链非编码RNA XIST、微小RNA-212-3p对人卵巢颗粒细胞增殖和凋亡的影响

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作者 徐潇萌 尹程 +3 位作者 董冰 李跃文 刘适 陈隽 《妇儿健康导刊》 2024年第20期182-187,193,共7页

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)XIST与微小RNA-212-3p(miR-212-3p)对人卵巢颗粒细胞增殖和凋亡的影响。方法采用实时荧光定量PCR检测LncRNAXIST与miR-212-3p在人正常卵巢上皮细胞IOSE80和KGN细胞株中的表达水平;通过Starbase靶基因数据... 目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)XIST与微小RNA-212-3p(miR-212-3p)对人卵巢颗粒细胞增殖和凋亡的影响。方法采用实时荧光定量PCR检测LncRNAXIST与miR-212-3p在人正常卵巢上皮细胞IOSE80和KGN细胞株中的表达水平;通过Starbase靶基因数据库预测LncRNAXIST靶向miR-212-3p,并采用双萤光素酶报告实验进行验证;分别将XIST-plasmid和miR-212-3pmimic转染至KGN细胞,通过CCK-8实验、流式细胞术和蛋白质印迹法(Westernblot)实验分析LncRNAXIST与miR-212-3p对KGN细胞增殖和凋亡的影响。结果与IOSE80细胞系比较,在KGN细胞中LncRNAXIST呈低表达,miR-212-3p呈高表达(P<0.001);StarBase靶基因数据库预测显示,XIST与miR-212-3p存在结合位点;miR-212-3p mimic可降低XIST-WT的萤光素酶活性(P<0.01);CCK-8实验和流式细胞术实验结果显示,LncRNAXIST能够抑制KGN细胞增殖,促进细胞凋亡,转染miR-212-3pmimic能够部分抑制LncRNAXIST(P<0.001);Western blot实验结果显示,LncRNA XIST能够抑制B淋巴细胞瘤-2蛋白(Bcl-2)表达,促进Bax蛋白的表达,转染miR-212-3p mimic能够部分抑制Bax蛋白表达,促进Bcl-2蛋白的表达(P<0.001)。结论LncRNA XIST过表达能够抑制KGN细胞的增殖并促进其凋亡,其机制作用可能是通过靶向miR-212-3p实现的。 展开更多

关键词 长链非编码RNA XIST 微小rna-212-3p 人卵巢上皮细胞 细胞增殖 细胞凋亡

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微小RNA-212调控TOB2蛋白表达对转化因子-β1干预A549细胞诱导肺纤维化及上皮-间质转化的影响 被引量：3

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作者 靳立振 赵永华 于巧青 《安徽医药》 CAS 2021年第2期330-335,共6页

目的探讨微小RNA-212(miR-212)对转化因子-β1(TGFβ1)干预A549细胞诱导肺纤维化及上皮-间质转化(EMT)的影响及可能的相关机制。方法体外培养A549细胞,实验分组:PBS组(常规培养)、TGFβ1组(含有5 ng/mL TGFβ1培养液培养)、TGFβ1+anti-... 目的探讨微小RNA-212(miR-212)对转化因子-β1(TGFβ1)干预A549细胞诱导肺纤维化及上皮-间质转化(EMT)的影响及可能的相关机制。方法体外培养A549细胞,实验分组:PBS组(常规培养)、TGFβ1组(含有5 ng/mL TGFβ1培养液培养)、TGFβ1+anti-miR-con组(转染anti-miR-con后使用含有5 ng/mL TGFβ1培养液培养)、TGFβ1+anti-miR-212组(转染antimiR-212后使用含有5 ng/mL TGFβ1培养液培养)、TGFβ1+anti-miR-212+si-con组(共转染anti-miR-212与si-con后使用含有5ng/mL TGFβ1培养液培养)、TGFβ1+anti-miR-212+si-TOB2组(共转染anti-miR-212与si-TOB2后使用含有5 ng/mL TGFβ1培养液培养)。实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)与蛋白免疫印迹法(Western blot)检测细胞中miR-212与TOB2的表达水平;甲基噻唑基四唑(MTT)检测干扰miR-212的表达对TGFβ1诱导A549细胞增殖的抑制作用,以及下调TOB2的表达对TGFβ1诱导A549细胞增殖的促进作用;双荧光素酶报告基因检测验证miR-212与TOB2的靶向关系;Western blot检测干扰miR-212的表达或下调TOB2的表达对细胞周期蛋白1(CyclinD1)、波形蛋白(Vimentin)、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、I型胶原a1(COL1a1)、上皮钙黏附素(E-cadherin)表达的影响。结果与PBS组比较,TGFβ1组细胞增殖率显著升高[(100.23±5.64)%比(218.34±16.38)%,P<0.05],miR-212[(1.00±0.14)比(6.07±0.86)]、CyclinD1[(0.54±0.06)比(0.89±0.07)]、Vimentin[(0.26±0.04)比(1.09±0.13)]、α-SMA[(0.43±0.05)比(0.86±0.07)]、COL1a1[(0.57±0.06)比(1.17±0.13)]的表达水平显著升高(P<0.05),而TOB2[(1.02±0.12)比(0.44±0.14)]、E-cadherin[(0.93±0.09)比(0.47±0.06)]的表达水平显著降低(P<0.05);干扰miR-212的表达可显著抑制TGFβ1诱导A549细胞增殖(P<0.05),抑制CyclinD1、Vimentin、α-SMA、COL1a1表达(P<0.05),促进Ecadherin表达(P<0.05);共转染WT-TOB2的miR-212组荧光素酶活性显著低于miR-con组(P<0.05),共转染MUT-TOB2的miR-212组与miR-con组荧光素酶活性比较差异无统计学意义;相较于TGFβ1+anti-miR-212+si-con组,TGFβ1+anti-miR-212+si-TOB2组A549细胞增殖率显著升高[(69.29±8.04)%比(88.27±9.26)%,P<0.05],CyclinD1[(0.59±0.08)比(0.75±0.11)]、Vimentin[(0.42±0.05)比(0.56±0.07)]、α-SMA[(0.38±0.06)比(0.53±0.06)]、COL1a1蛋白[(0.41±0.05)比(0.55±0.04)]表达水平显著升高(P<0.05),E-cadherin蛋白表达水平显著降低[(0.82±0.08)比(0.45±0.06),P<0.05]。结论干扰miR-212的表达可通过上调TOB2的表达而抑制TGFβ1诱导的A549细胞增殖及EMT进而发挥抗肺纤维化作用。 展开更多

关键词 肺纤维化 细胞增殖 微小rna-212 TOB2 转化因子-β1 A549细胞 上皮-间质转化

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前列腺癌患者血清miR-138-5p,miR-212-5p水平表达及与临床预后价值

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作者 张珑 李月峰 +2 位作者 吴涛 朱琳杰 王海东 《现代检验医学杂志》 CAS 2024年第5期30-34,共5页

目的 探究前列腺癌(prostate cancer)患者血清miR-138-5p,miR-212-5p水平表达及与临床预后价值。方法 选择2020年7月~2021年6月邯郸市第一医院收治的95例前列腺癌患者,根据术后两年的随访记录分为预后不良组(复发或死亡,n=52)和预后良好... 目的 探究前列腺癌(prostate cancer)患者血清miR-138-5p,miR-212-5p水平表达及与临床预后价值。方法 选择2020年7月~2021年6月邯郸市第一医院收治的95例前列腺癌患者,根据术后两年的随访记录分为预后不良组(复发或死亡,n=52)和预后良好组(未复发或好转,n=43),另选同期48例健康体检志愿者为健康对照组。实时荧光定量聚合酶链式反应(quantitative real-time fluorescence-PCR,qRT-PCR)检测血清miR-138-5p和miR-212-5p相对表达水平,收集并分析患者临床资料,多因素COX回归分析影响前列腺癌患者预后的因素;绘制受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线分析血清miR-138-5p和miR-212-5p对前列腺癌患者预后情况的预测价值;Pearson分析miR-138-5p,miR-212-5p与Gleason评分的相关性。结果 与健康对照组相比较,预后良好组、预后不良组患者血清miR-138-5p(0.88±0.10,0.83±0.09 vs 1.01±0.10),miR-212-5p(0.75±0.09,0.71±0.08 vs 1.02±0.11)水平显著降低,差异具有统计学意义(t=14.021,22.275;9.825,18.063,均P <0.05);前列腺癌患者预后情况与TNM分期、骨转移、组织分化程度、术前PSA水平以及Gleason评分有关(χ^(2)=4.417~7.187,t=14.235,均P <0.05);血清mi R-138-5p[HR(95%CI):0.871(0.785~0.966)],miR-212-5p[HR(95%CI):0.822(0.725~0.932)]为预后不良的保护因素(均P <0.05)。Gleason评分[HR(95%CI):1.253(1.026~1.530)],TNM分期[HR(95%CI):1.224(1.024~1.463)],骨转移[HR(95%CI):1.398(1.036~1.887)],组织分化程度[HR(95%CI):1.520(1.146~2.016)]和PSA水平[HR(95%CI):1.426(1.094~1.858)]为预后不良的危险因素(均P <0.05);血清miR-138-5p,miR-212-5p预测的曲线下面积(95%置信区间)[AUC(95%CI)]分别为0.883(95%CI:0.801~0.940),0.863(95%CI:0.777~0.925);血清miR-138-5p,miR-212-5p与Gleason评分均呈负相关(r=-0.610,-0.420,均P <0.05)。结论 前列腺癌患者血清miR-138-5p和miR-212-5p水平显著降低,且对前列腺癌患者预后具有一定辅助预测价值。 展开更多

关键词 前列腺癌 微小rna-138-5p 微小rna-212-5p

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circMAN1A2调节miR-212-3p/DDIT4轴对胃癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响

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作者 曹博威 贾腾飞 +2 位作者 宋钉町 赵昱清 张文斌 《胃肠病学和肝病学杂志》 CAS 2024年第7期868-874,共7页

目的探究circMAN1A2靶向miR-212-3p/DNA损伤诱导转录子4(NDA damage-inducible transcript 4,DDIT4)轴对胃癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响。方法qRT-PCR法检测胃癌组织和细胞中circMAN1A2、miR-212-3p表达水平。荧光素酶检测circMAN1A2与... 目的探究circMAN1A2靶向miR-212-3p/DNA损伤诱导转录子4(NDA damage-inducible transcript 4,DDIT4)轴对胃癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响。方法qRT-PCR法检测胃癌组织和细胞中circMAN1A2、miR-212-3p表达水平。荧光素酶检测circMAN1A2与miR-212-3p、DDIT4和miR-212-3p的靶向关系。在胃癌细胞SGC-7901、HGC-27中转染si-NC、si-circMAN1A2、si-circMAN1A2+anti-NC、si-circMAN1A2+anti-miR-212-3p、miR-NC、miR-212-3p mimics,将未转染的SGC-7901、HGC-27细胞设为对照。平板克隆实验检测细胞增殖;细胞划痕及Transwell实验分别检测细胞迁移、侵袭能力。Western blotting检测增殖、迁移及侵袭相关蛋白表达。结果在胃癌组织及细胞中,circMAN1A2高表达,miR-212-3p低表达;下调circMAN1A2可以靶向上调miR-212-3p表达,且下调DDIT4表达,进而抑制胃癌细胞增殖、侵袭和迁移能力。抑制miR-212-3p表达可部分逆转抑制circMAN1A2表达对胃癌细胞恶性增殖的抑制作用。结论在胃癌细胞中抑制circMAN1A2表达可抑制胃癌细胞增殖、迁移与侵袭,其与调节miR-212-3p/DDIT4信号轴有关。 展开更多

关键词 环状RNA MAN1A2 微小rna-212-3p DNA损伤诱导转录子4 胃癌 增殖 侵袭 迁移

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LncRNA SNHG16调节miR-212-3p/FAM3C轴对食管癌细胞增殖迁移和侵袭的影响

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作者 侯英利 冯晓娜 +3 位作者 李春晖 张萌 董海平 殷星 《河北医学》 CAS 2024年第8期1238-1244,共7页

目的:探讨长链非编码小核仁RNA宿主基因16(LncRNA SNHG16)靶向微小RNA-212-3p(miR-212-3p)/序列相似家族3成员C(FAM3C)轴对食管癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法:体外培养人食管癌细胞KYSE-510作为研究对象,将其分为对照组、si-NC组... 目的:探讨长链非编码小核仁RNA宿主基因16(LncRNA SNHG16)靶向微小RNA-212-3p(miR-212-3p)/序列相似家族3成员C(FAM3C)轴对食管癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法:体外培养人食管癌细胞KYSE-510作为研究对象,将其分为对照组、si-NC组、si-SNHG16组、si-SNHG16+inhibitor NC组、si-SNHG16+miR-212-3p inhibitor组。各组细胞LncRNA SNHG16,miR-212-3p、FAM3C mRNA表达的检测用RT-qPCR法;用CCK-8试剂盒检测KYSE-510细胞增殖,用流式细胞术检测KYSE-510细胞凋亡,用划痕实验检测KYSE-510细胞迁移,用Transwell法检测KYSE-510细胞侵袭,双荧光素酶报告实验验证LncRNA SNHG16与miR-212-3p及miR-212-3p与FAM3C之间的靶向关系。结果:与对照组和si-NC组相比,si-SNHG16组中LncRNA SNHG16、FAM3C mRNA水平、OD值、划痕愈合率、细胞侵袭数降低,miR-212-3p水平、细胞凋亡率升高(P<0.05);与si-SNHG16+inhibitor NC组相比,si-SNHG16+miR-212-3p inhibitor组中miR-212-3p水平、细胞凋亡率降低、FAM3C mRNA水平、OD值、划痕愈合率、细胞侵袭数升高(P<0.05),而LncRNA SNHG16水平无差异(P>0.05);生物学信息网站预测miR-212-3p与LncRNA SNHG16和FAM3C均存在靶向结合位,且双荧光素酶报告基因实验验证了LncRNA SNHG16与miR-212-3p、miR-212-3p与FAM3C之间均存在靶向关系(P<0.05)。结论:在食管癌中LncRNA SNHG16表达上调,敲低LncRNA SNHG16的表达可靶向上调miR-212-3p,抑制FAM3C的表达,进而抑制食管癌细胞增殖、迁移和侵袭,促进食管癌细胞的凋亡。 展开更多

关键词 长链非编码小核仁RNA宿主基因16 微小rna-212-3p/序列相似家族3成员C 食管癌 增殖 迁移 侵袭

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索拉非尼联合卡培他滨治疗肝细胞肝癌疗效及对患者血清miR-212和miR-132水平的影响 被引量：13

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作者 曹绍华 王庆庆 张金冉 《陕西医学杂志》 CAS 2020年第5期615-618,共4页

目的:观察索拉非尼联合卡培他滨治疗肝细胞肝癌(HCC)的疗效及对患者血清miR-212和miR-132水平的影响。方法:选取70例HCC患者,随机数表法分为两组,试验组35例给予索拉非尼联合卡培他滨治疗,对照组35例采取索拉非尼治疗。比较两组临床疗... 目的:观察索拉非尼联合卡培他滨治疗肝细胞肝癌(HCC)的疗效及对患者血清miR-212和miR-132水平的影响。方法:选取70例HCC患者,随机数表法分为两组,试验组35例给予索拉非尼联合卡培他滨治疗,对照组35例采取索拉非尼治疗。比较两组临床疗效、血清miR-212和miR-132水平,血清白细胞介素-2(IL-2)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、干扰素-γ(INF-γ)水平、不良反应发生情况及1年生存率。结果:试验组疾病控制率为82.86%高于对照组60.00%(P<0.05);治疗后,试验组的TNF-α水平低于对照组(P<0.05);治疗后,试验组的miR-212、miR-132水平均高于对照组(P<0.05);试验组患者手足综合征和恶心呕吐的发生率高于对照组(P<0.05),两组疲乏、贫血和白细胞下降的发生率相比无统计学差异(P>0.05);试验组1年生存率为74.29%(26/35)高于对照组的51.43%(18/35),差异有统计学意义(P<0.05)。结论:索拉非尼联合卡培他滨治疗HCC患者,可提高疾病控制率,患者血清miR-212和miR-132水平升高,不良反应可耐受。 展开更多

关键词 肝细胞肝癌 治疗 卡培他滨 索拉非尼 微小rna-212 微小rna-132

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原发性胆汁性肝硬化患者血清中miR-132和miR-212的表达及意义 被引量：5

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作者 韦利强 梁会涛 +1 位作者 秦东春 刘红春 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期532-534,538,共4页

目的探讨原发性胆汁性肝硬化(PBC)患者血清中微小RNA-132(miR-132)和miR-212水平的变化及其临床意义。方法收集PBC患者、其他肝病患者和健康对照组各37例血清标本;用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测miR-132和miR-212的水平,并分... 目的探讨原发性胆汁性肝硬化(PBC)患者血清中微小RNA-132(miR-132)和miR-212水平的变化及其临床意义。方法收集PBC患者、其他肝病患者和健康对照组各37例血清标本;用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测miR-132和miR-212的水平,并分析其与疾病严重程度的相关性。结果与健康对照组及其他肝病组比较,PBC患者血清miR-132和miR-212的水平显著降低(P均<0.05)。PBC组血清miR-132与ALP、AST呈负相关(r=-0.67,r=-0.61,P均<0.05);而血清miR-212与ALP、AST无相关性(r=-0.34,r=-0.25,P均>0.05)。结论 miR-132和miR-212可能参与了PBC的发病机制,有望作为PBC的诊断和治疗靶点。 展开更多

关键词 微小rna-132 微小rna-212 原发性胆汁性肝硬化 实时荧光定量聚合酶链反应

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妊娠期高血压孕妇血清miR-212-3p和miR-590-3p水平与胎儿生长受限的相关性分析

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作者 郭书焕 张青 +1 位作者 马学玲 周斌 《中国现代医药杂志》 2023年第7期52-56,共5页

目的探讨妊娠期高血压孕妇血清微小RNA-212-3p(miR-212-3p)、微小RNA-590-3p(miR-590-3p)与胎儿生长受限的关系。方法选取我院2020年6月~2022年12月收治的172例妊娠期高血压孕妇,根据胎儿生长情况将其分为正常组(胎儿正常)93例和病例组... 目的探讨妊娠期高血压孕妇血清微小RNA-212-3p(miR-212-3p)、微小RNA-590-3p(miR-590-3p)与胎儿生长受限的关系。方法选取我院2020年6月~2022年12月收治的172例妊娠期高血压孕妇,根据胎儿生长情况将其分为正常组(胎儿正常)93例和病例组(胎儿生长受限)79例。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测血清miR-212-3p、miR-590-3p水平;采用Pearson相关分析检验发生胎儿生长受限的妊娠期高血压孕妇血清miR-212-3p、miR-590-3p水平与一般资料的相关性;绘制受试者工作特征曲线(ROC)评估血清miR-212-3p、miR-590-3p水平对妊娠期高血压孕妇胎儿生长受限的预测价值;采用多因素Logistic回归分析检验妊娠期高血压孕妇发生胎儿生长受限的影响因素。结果病例组血清miR-212-3p、miR-590-3p水平及子宫动脉阻力指数(RI)、子宫动脉搏动指数(PI)、子宫动脉收缩末期峰值流速/舒张末期峰值流速(S/D)高于正常组,新生儿体质量低于正常组,差异有统计学意义(P<0.05)。发生胎儿生长受限的妊娠期高血压孕妇血清miR-212-3p、miR-590-3p水平与新生儿体质量呈负相关(P<0.05),与子宫动脉RI、子宫动脉PI、子宫动脉S/D呈正相关(P<0.05)。血清miR-212-3p、miR-590-3p水平单独及二者联合检测的AUC分别为0.862、0.891、0.948。血清miR-212-3p、miR-590-3p是影响妊娠期高血压孕妇发生胎儿生长受限的独立危险因素(P<0.05)。结论发生胎儿生长受限的妊娠期高血压孕妇血清miR-212-3p、miR-590-3p水平升高,二者可作为胎儿生长受限的预测指标。 展开更多

关键词 妊娠期高血压 血清 胎儿生长受限 微小rna-212-3p 微小rna-590-3p

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垂体生长激素腺瘤患者血清miR-212与SIRT1表达及与预后相关性 被引量：1

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作者 李剑 刘志刚 +1 位作者 赵军 陈宁军 《西部医学》 2020年第9期1328-1332,共5页

目的探讨微小RNA-212(miR-212)、沉默信息调节因子1(SIRT1)在垂体生长激素(GH)腺瘤患者血清中的表达水平及与预后的关系。方法纳入2016年1月~2019年8月空军军医大学第一附属西京医院收诊的58例垂体GH腺瘤患者设为观察组,选取同期于本院... 目的探讨微小RNA-212(miR-212)、沉默信息调节因子1(SIRT1)在垂体生长激素(GH)腺瘤患者血清中的表达水平及与预后的关系。方法纳入2016年1月~2019年8月空军军医大学第一附属西京医院收诊的58例垂体GH腺瘤患者设为观察组,选取同期于本院体检的62例健康者设为健康组;采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测所有研究对象血清miR-212、SIRT1、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)表达水平;比较不同预后垂体GH腺瘤患者血清miR-212、SIRT1、HIF-1α、VEGF水平;采用Pearson法分析垂体GH腺瘤患者血清miR-212、SIRT1表达水平与HIF-1α、VEGF相关性及miR-212表达水平与SIRT1的关系;采用受试者特征工作曲线(ROC)评价血清miR-212、SIRT1对垂体GH腺瘤患者预后的诊断价值。结果观察组患者血清miR-212表达水平明显低于健康组(t=7.434,P<0.05),血清SIRT1、HIF-1α、VEGF表达水平明显高于健康组(P<0.05);未缓解组垂体GH腺瘤患者血清miR-212表达水平明显低于缓解组(P<0.05),血清SIRT1、HIF-1α、VEGF表达水平明显高于缓解组(t=2.536、3.242、2.638,P<0.05);垂体GH腺瘤患者血清miR-212表达水平与HIF-1α、VEGF、SIRT1水平均呈负相关(P<0.05),血清SIRT1表达水平与HIF-1α、VEGF呈正相关(P<0.05);血清miR-212、SIRT1水平对垂体GH腺瘤患者不良预后评估的曲线下面积(AUC)为0.873、0.862,对应截断值分别为0.52、1.94,此时对应灵敏度分别为81.3%、75.0%,特异度分别为88.1%、85.7%;两者联合诊断垂体GH腺瘤的AUC为0.938,其灵敏度、特异度分别为93.8%、81.0%。结论垂体GH腺瘤血清miR-212表达下调,SIRT1表达上调,两者可能与HIF-1α、VEGF相互作用,进而协同垂体GH腺瘤发生与发展,miR-212、SIRT1有望成为评估垂体GH腺瘤预后的参考指标,两者联合检测可有效提高垂体GH腺瘤预后价值。 展开更多

关键词 垂体生长激素腺瘤 微小rna-212 沉默信息调节因子1 联合检测 评估预后

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北五味子多糖对缺氧/复氧心肌细胞氧化应激损伤的保护作用 被引量：6

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作者 刘蕾 赵雪东 王智彬 《中西医结合心脑血管病杂志》 2022年第12期2174-2179,共6页

目的观察北五味子多糖(SCP)对缺氧/复氧(H/R)诱导的心肌细胞凋亡及氧化应激损伤的影响及对微小RNA-212-3p(miR-212-3p)/10号染色体上缺失的磷酸酶和张力蛋白同源物(PTEN)分子轴的调控机制。方法体外培养大鼠心肌细胞H9c2,建立H/R损伤模... 目的观察北五味子多糖(SCP)对缺氧/复氧(H/R)诱导的心肌细胞凋亡及氧化应激损伤的影响及对微小RNA-212-3p(miR-212-3p)/10号染色体上缺失的磷酸酶和张力蛋白同源物(PTEN)分子轴的调控机制。方法体外培养大鼠心肌细胞H9c2,建立H/R损伤模型,分别采用不同剂量SCP处理细胞;采用流式细胞术检测细胞凋亡率;采用酶标法检测乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量;实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测miR-212-3p、PTEN表达量;应用双荧光素酶报告实验验证miR-212-3p、PTEN靶向关系。结果H/R处理后,细胞凋亡率升高(P<0.05),LDH、MDA含量与PTEN表达量升高(P<0.05),SOD含量与miR-212-3p表达量降低(P<0.05);SCP可降低细胞凋亡率与LDH、MDA含量及PTEN表达水平(P<0.05),提高SOD含量及miR-212-3p表达水平(P<0.05);双荧光素酶报告实验证实miR-212-3p可靶向结合PTEN;干扰miR-212-3p表达可减轻SCP对H/R诱导的心肌细胞凋亡及氧化应激损伤的作用。结论SCP可能通过促进miR-212-3p表达,抑制PTEN表达,从而抑制H/R诱导的心肌细胞凋亡,减轻氧化应激损伤。 展开更多

关键词 心肌细胞 H9C2 北五味子多糖 缺氧/复氧 微小rna-212-3p 凋亡 氧化应激 实验研究

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环状RNA ITCH对高糖诱导的心脏成纤维细胞活化的影响与机制研究

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作者 许峥嵘 任卫东 +5 位作者 谷君 宁改君 李小菊 赵香 史丽 胡利梅 《中华老年心脑血管病杂志》 CAS 北大核心 2023年第8期870-874,共5页

目的 探讨环状RNA ITCH(Circ-ITCH)对高糖诱导的心脏成纤维细胞(CF)活化的影响及其机制。方法 体外培养人CF(HCF),按照处理方法的不同分为对照组、高糖组、过表达载体阴性对照(OV-NC)组、Circ-ITCH过表达载体(OV-Circ-ITCH)组;模拟物阴... 目的 探讨环状RNA ITCH(Circ-ITCH)对高糖诱导的心脏成纤维细胞(CF)活化的影响及其机制。方法 体外培养人CF(HCF),按照处理方法的不同分为对照组、高糖组、过表达载体阴性对照(OV-NC)组、Circ-ITCH过表达载体(OV-Circ-ITCH)组;模拟物阴性对照[微小RNA(miR)-NC]组、miR-212-3p模拟物(miR-212-3p mimics)组、抑制物阴性对照(inhibitor-NC)组、miR-212-3p抑制物(miR-212-3p inhibitor)组;Circ-ITCH过表达载体+模拟物阴性对照(OV-Circ-ITCH+miR-NC)组、Circ-ITCH过表达载体+miR-212-3p模拟物(OV-Circ-ITCH+miR-212-3p mimics)组、Circ-ITCH过表达载体+小分子干扰RNA阴性对照(OV-Circ-ITCH+si-NC)组和Circ-ITCH过表达载体+Samd同源物7小分子干扰RNA(OV-Circ-ITCH+si-Smad7)组,除对照组外,其余各组转染12 h后采用30 mmol/L D-葡萄糖处理进行高糖诱导,检测Circ-ITCH、miR-212-3p、Smad7表达、细胞活力及胶原纤维沉积,并验证miR-212-3p与Circ-ITCH、Smad7靶向关系。结果 与对照组比较,高糖组Circ-ITCH、Smad7 mRNA和蛋白表达降低(0.45±0.05 vs 0.99±0.07,0.51±0.06 vs 0.99±0.08,0.68±0.05 vs 1.16±0.07,P<0.05),miR-212-3p表达升高(2.17±0.12 vs 1.01±0.08,P<0.05),Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达及细胞活力升高(P<0.05),胶原纤维沉积增多。Circ-ITCH过表达升高高糖诱导的HCF细胞中Smad7表达,降低miR-212-3p、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、α-SMA表达及细胞活力,减少胶原纤维沉积。miR-212-3p过表达抑制高糖诱导的HCF细胞中Smad7表达,而抑制miR-212-3p表达则相反。miR-212-3p过表达或抑制Smad7表达均减弱Circ-ITCH过表达对高糖诱导的HCF细胞增殖、胶原纤维沉积的影响。HCF细胞中miR-212-3p与Circ-ITCH、Smad7存在靶向关系。结论 Circ-ITCH靶向抑制miR-212-3p并上调Smad7表达,抑制高糖诱导的HCF细胞活化。 展开更多

关键词 RNA 环状 循环微RNA 成纤维细胞 Smad7蛋白质 微小rna-212-3p

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没食子酰芍药苷对白细胞介素8诱导的人脐静脉血管内皮细胞增殖和迁移的影响

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作者 孙贺军 孔永红 +2 位作者 陈新蕾 张海龙 夏海清 《安徽医药》 CAS 2022年第8期1510-1515,共6页

目的研究没食子酰芍药苷(GPF)对白细胞介素8(IL-8)诱导的人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)增殖和迁移的影响及潜在分子机制。方法用100、200和400μmol/L GPF分别处理100μg/L IL-8诱导的HUVECs,实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)... 目的研究没食子酰芍药苷(GPF)对白细胞介素8(IL-8)诱导的人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)增殖和迁移的影响及潜在分子机制。方法用100、200和400μmol/L GPF分别处理100μg/L IL-8诱导的HUVECs,实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)和蛋白质印迹法(Western blotting)分别检测HUVECs细胞中miR-212-3p、激活转录因子2(ATF2)、增殖细胞核抗原(PCNA)和基质金属蛋白酶-2(MMP-2)的表达,四氮唑蓝(MTT)和Transwell实验分别测定HUVECs细胞存活率和细胞迁移,双荧光素酶报告系统验证miR-212-3p与ATF2的调控关系。结果与对照0μmol/L组相比,100μmol/L、200μmol/L和400μmol/L的GPF可抑制IL-8诱导的HUVECs增殖和迁移,促进miR-212-3p表达,抑制ATF2表达,呈剂量依赖趋势;低表达miR-212-3p可逆转400μmol/L GPF对IL-8诱导的HUVECs细胞增殖和迁移的抑制作用;miR-212-3p靶向ATF2,调控ATF2的表达;低表达ATF2可部分逆转低表达miR-212-3p对GPF处理的IL-8诱导的HUVECs细胞增殖和迁移的作用。结论GPF通过miR-212-3p/ATF2途径抑制IL-8诱导的HUVECs细胞增殖和迁移。 展开更多

关键词 人脐静脉内皮细胞 内皮 血管 没食子酰芍药苷 微小rna-212-3p 激活转录因子2 增殖 迁移

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NR2F1-AS1靶向miR-212-3p/GSK-3β影响类风湿关节炎滑膜成纤维细胞增殖和凋亡 被引量：1

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作者 何宁 唐长友 周贤超 《现代免疫学》 CAS 北大核心 2023年第2期122-128,136,共8页

为探讨核受体亚族2F组成员1的反义RNA 1(nuclear receptor subfamily 2 group F member 1 antisense RNA 1,NR2F1-AS1)对类风湿关节炎(rheumatoid arthritis, RA)滑膜成纤维细胞(synovial fibroblast, SF)增殖和凋亡的影响及可能的机制... 为探讨核受体亚族2F组成员1的反义RNA 1(nuclear receptor subfamily 2 group F member 1 antisense RNA 1,NR2F1-AS1)对类风湿关节炎(rheumatoid arthritis, RA)滑膜成纤维细胞(synovial fibroblast, SF)增殖和凋亡的影响及可能的机制,首先以正常SF为对照,采用qRT-PCR检测RA-SF中NR2F1-AS1和miR-212-3p表达,Western blotting检测糖原合酶激酶3β(glycogen synthase kinase 3β,GSK-3β)蛋白表达,然后转染NR2F1-AS1小干扰RNA、miR-212-3p模拟物、GSK-3β小干扰RNA或共转染NR2F1-AS1小干扰RNA与miR-212-3p抑制剂至RA-SF,用CCK-8法检测细胞增殖,FACS检测细胞凋亡,Western blotting检测增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen, PCNA)和裂解的Caspase-3(cleaved-Caspase-3)表达,双荧光素酶报告基因试验验证NR2F1-AS1与miR-212-3p及miR-212-3p与GSK-3β的调控关系。结果显示,与正常SF比较,RA-SF中NR2F1-AS1、GSK-3β蛋白表达升高(P<0.001),miR-212-3p表达降低(P<0.001);敲减NR2F1-AS1、过表达miR-212-3p或敲减GSK-3β的RA-SF活性和PCNA蛋白表达降低(P<0.001),而凋亡率和cleaved-Caspase-3蛋白表达升高(P<0.001);NR2F1-AS1靶向结合miR-212-3p,且敲减NR2F1-AS1的RA-SF中miR-212-3p表达升高(P<0.05),GSK-3β蛋白表达降低(P<0.05);GSK-3β是miR-212-3p的靶基因,且过表达miR-212-3p的RA-SF中GSK-3β蛋白表达降低(P<0.05);敲减miR-212-3p降低了敲减NR2F1-AS1对RA-SF活性、凋亡及PCNA、cleaved-Caspase-3蛋白表达的影响。该研究提示,NR2F1-AS1可能通过靶向调控miR-212-3p/GSK-3β轴促进RA-SF增殖并阻碍其凋亡,其可能成为RA治疗的分子靶点。 展开更多

关键词 核受体亚族2F组成员1的反义RNA 1 类风湿关节炎 滑膜成纤维细胞 微小rna-212-3p 糖原合酶激酶3Β 增殖 凋亡

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lncRNA LEF1-AS1通过miR-212-5p影响IL-1β诱导的软骨细胞凋亡及炎性因子分泌

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作者 姜春乾 李永全 +1 位作者 叶松庆 陈明浩 《现代免疫学》 CAS 北大核心 2023年第2期129-136,共8页

为探讨长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)淋巴增强因子1反义RNA 1(lymphatic enhancer factor 1 antisense RNA 1,LEF1-AS1)靶向miR-212-5p对IL-1β诱导的软骨细胞凋亡和炎性因子分泌的影响,采用qRT-PCR分析骨关节炎(osteoarth... 为探讨长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)淋巴增强因子1反义RNA 1(lymphatic enhancer factor 1 antisense RNA 1,LEF1-AS1)靶向miR-212-5p对IL-1β诱导的软骨细胞凋亡和炎性因子分泌的影响,采用qRT-PCR分析骨关节炎(osteoarthritis, OA)患者软骨细胞中LEF1-AS1和miR-212-5p的表达。用10 ng/mL的IL-1β处理人正常软骨细胞建立体外OA细胞模型。运用FACS分析软骨细胞凋亡率;ELISA检测培养上清液中IL-6、TNF-α、IFN-γ水平;qRT-PCR检测LEF1-AS1和miR-212-5p表达水平。同时,将LEF1-AS1小干扰RNA、miR-212-5p模拟物转染软骨细胞,并检测抑制LEF1-AS1或过表达miR-212-5p对IL-1β诱导的软骨细胞凋亡及炎性因子分泌的影响。qRT-PCR和双荧光素酶报告基因试验分析LEF1-AS1与miR-212-5p的靶向关系。结果显示,IL-1β处理显著增加软骨细胞的凋亡率(P<0.05),增加IL-6、TNF-α和IFN-γ的分泌量(P<0.05),上调LEF1-AS1表达(P=0.000),下调miR-212-5p表达(P=0.000)。抑制LEF1-AS1表达或过表达miR-212-5p可降低IL-1β诱导的软骨细胞的凋亡率(P<0.05),抑制IL-6、TNF-α和IFN-γ的分泌量(P<0.05)。miR-212-5p是LEF1-AS1的靶基因。抑制miR-212-5p表达能够减弱抑制LEF1-AS1对IL-1β诱导的软骨细胞凋亡及炎性因子分泌的影响(P<0.05)。该研究提示,抑制lncRNA LEF1-AS1可通过上调miR-212-5p减少IL-1β诱导的软骨细胞凋亡及炎性因子分泌。 展开更多

关键词 淋巴增强因子1反义RNA 1 骨关节炎 软骨细胞 微小rna-212-5p 白细胞介素1Β 细胞凋亡 炎症

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