异硫氰酸胍法快速提取二球悬铃木组织总RNA的研究 被引量：19

1

作者 李志能 黄文俊 +3 位作者 张佳琪 张俊卫 包满珠 刘国锋 《武汉植物学研究》 CSCD 北大核心 2007年第3期266-269,共4页

针对二球悬铃木组织中多酚物质含量较高的特点,采用异硫氰酸胍法从二球悬铃木花序和叶片中提取到质量高、完整性好的总RNA,28S rRNA的亮度约为18S rRNA的2倍,通过RT-PCR克隆到二球悬铃木中与拟南芥Leafy基因同源的部分编码区。高质量的... 针对二球悬铃木组织中多酚物质含量较高的特点,采用异硫氰酸胍法从二球悬铃木花序和叶片中提取到质量高、完整性好的总RNA,28S rRNA的亮度约为18S rRNA的2倍,通过RT-PCR克隆到二球悬铃木中与拟南芥Leafy基因同源的部分编码区。高质量的RNA为Northern杂交和利用同源序列法克隆二球悬铃木的相关基因提供了前提条件。 展开更多

关键词 二球悬铃木 多酚 异硫氰酸胍法 总RNA提取

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改良异硫氰酸胍法提取玛咖(Maca)叶片中总RNA研究 被引量：6

2

作者 程华 余龙江 +2 位作者 胡琼月 孙友平 陈善才 《生物技术》 CAS CSCD 2005年第2期45-47,共3页

为了获得质量较高的玛咖总RNA,对其总RNA的提取进行了研究。以玛咖无菌苗叶片为材料,通过改良的异硫氰酸胍法提取其总RNA。结果:所提取的总RNA纯度高、完整性好,电泳条带清晰,OD260/OD280值达到1.90±0.03,总RNA的得率达到252.57
... 为了获得质量较高的玛咖总RNA,对其总RNA的提取进行了研究。以玛咖无菌苗叶片为材料,通过改良的异硫氰酸胍法提取其总RNA。结果:所提取的总RNA纯度高、完整性好,电泳条带清晰,OD260/OD280值达到1.90±0.03,总RNA的得率达到252.57±1.12μg/g。表明改良的异硫氰酸胍法适合于玛咖叶片中RNA的提取,所提取的总RNA纯度高、完整性好,为进一步的玛咖分子生物学研究打下良好基础。 展开更多

关键词 玛咖 总RNA 提取 异硫氰酸胍法

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研磨-CTAB法与碱性异硫氰酸胍沸腾法提取真菌DNA的比较分析 被引量：18

3

作者 李晓红 陈世义 +2 位作者 钟淑霞 付爱华 赵翠杨 《中国实验诊断学》 2005年第3期364-365,共2页

目的对两种病原真菌基因组DNA提取方法[研磨-CTAB(十六烷基三甲基溴化胺)法及碱性异硫氰酸胍沸腾法]的提取效果进行比较,为临床真菌标本的前期处理提供有效参考。方法对来自于同一批培养基的4株申克孢子丝菌及6株普通真菌菌株分别采用研... 目的对两种病原真菌基因组DNA提取方法[研磨-CTAB(十六烷基三甲基溴化胺)法及碱性异硫氰酸胍沸腾法]的提取效果进行比较,为临床真菌标本的前期处理提供有效参考。方法对来自于同一批培养基的4株申克孢子丝菌及6株普通真菌菌株分别采用研磨-CTAB法及碱性异硫氰酸胍沸腾法抽提基因组DNA,并用紫外分光光度计测定基因组DNA样品OD260和OD280值,计算提取样品的浓度并估计核酸的纯度,然后采用配对资料t检验的统计学方法进行比较。结果碱性异硫氰酸胍沸腾法提取的DNA浓度及纯度均高于研磨-CTAB法,两者在统计学上存在显著差异(P<0·05)。结论碱性异硫氰酸胍沸腾法提取病原性真菌基因组DNA具有简便、快速、价廉等特点,适用于病原真菌分子生物学研究的标本前期处理。 展开更多

关键词 真菌基因组DNA 研磨-CTAB法 碱性异硫氰酸胍沸腾法

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异硫氰酸胍法提取梅花鹿鹿茸组织总RNA

4

作者 赵靖波 李光玉 +1 位作者 王凯英 刘佰阳 《特产研究》 2006年第2期56-59,63,共5页

采集6只2岁梅花鹿鹿茸样品，应用异硫氰酸胍法提取其总RNA，建立了鹿茸总RNA适宜提取条件。实验最终提取RNA的紫外吸收值为：A260／A280=1．73～1.86，A260／A230=2．16～2．53，经甲醛变性凝胶电泳可以清晰看到28s、18s、5s 3条带，其... 采集6只2岁梅花鹿鹿茸样品，应用异硫氰酸胍法提取其总RNA，建立了鹿茸总RNA适宜提取条件。实验最终提取RNA的紫外吸收值为：A260／A280=1．73～1.86，A260／A230=2．16～2．53，经甲醛变性凝胶电泳可以清晰看到28s、18s、5s 3条带，其亮度满足未降解RNA的特征，且无明显DNA污染。 展开更多

关键词 异硫氰酸胍法 梅花鹿 鹿茸 总RNA

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檀香心材总RNA提取方法的比较研究 被引量：6

5

作者 牛美云 程庆伟 +2 位作者 张月雅 张新华 马国华 《热带亚热带植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期20-25,共6页

为筛选檀香心材总RNA提取方法,对5种提取方法进行比较研究,包括Trizol法、改良CTAB法、SDS酸酚法、异硫氰酸胍-CTAB法、异硫氰酸胍-SDS法。结果表明,Trizol法和异硫氰酸胍-CTAB法不能提取出檀香心材总RNA,而SDS酸酚法、改良CTAB法和异... 为筛选檀香心材总RNA提取方法,对5种提取方法进行比较研究,包括Trizol法、改良CTAB法、SDS酸酚法、异硫氰酸胍-CTAB法、异硫氰酸胍-SDS法。结果表明,Trizol法和异硫氰酸胍-CTAB法不能提取出檀香心材总RNA,而SDS酸酚法、改良CTAB法和异硫氰酸胍-SDS法均能提取檀香心材总RNA。SDS酸酚法的A260 nm/A230 nm小于2.0,且RNA产率低,仅为(27.94±1.06)μg g–1,不能满足后续实验要求。而改良CTAB法和异硫氰酸胍-SDS法提取的总RNA带型清晰,完整性好,A260 nm/A280 nm为1.8~2.0,A260 nm/A230 nm大于2.0,RNA产率分别为(79.06±4.22)和(107.00±1.36)μg g–1。分别以改良CTAB法和异硫氰酸胍-SDS法提取的总RNA为模板,通过RT-PCR反应,扩增檀香Actin基因片段,结果二者扩增产物大小相同且条带单一,说明改良CTAB法与异硫氰酸胍-SDS法为檀香心材总RNA提取的较好方法。 展开更多

关键词 檀香 心材 RNA 改良CTAB法 异硫氰酸胍-sds法

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广藿香不同组织总RNA提取方法的筛选与优化 被引量：1

6

作者 陈英 吴友根 +3 位作者 杨东梅 张军锋 林尤奋 胡新文 《江苏农业科学》 北大核心 2014年第12期53-55,共3页

分别采用Trizol法、改良Trizol法、CTAB法、改良CTAB法和异硫氰酸胍-SDS法等5种方法提取广藿香叶、茎、根及愈伤组织的总RNA,并用琼脂糖凝胶电泳和紫外光谱检测其提取效果。结果表明,Trizol法适用于广藿香叶片总RNA的提取,改良CTAB法适... 分别采用Trizol法、改良Trizol法、CTAB法、改良CTAB法和异硫氰酸胍-SDS法等5种方法提取广藿香叶、茎、根及愈伤组织的总RNA,并用琼脂糖凝胶电泳和紫外光谱检测其提取效果。结果表明,Trizol法适用于广藿香叶片总RNA的提取,改良CTAB法适用于广藿香茎和愈伤组织总RNA的提取,而广藿香根总RNA的提取宜用改良Trizol法。RT-PCR检测结果表明,广藿香各组织的总RNA可直接用于分子克隆和基因表达分析等分子生物学试验。 展开更多

关键词 广藿香 总RNA 提取方法 TRIZOL法 CTAB法 异硫氰酸胍-sds法

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山药组织总RNA提取方法的比较与分析 被引量：18

7

作者 覃芳 王军民 +5 位作者 何海旺 何龙飞 李创珍 韦本辉 何虎翼 甘秀芹 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期755-759,共5页

采用异硫氰酸胍-巯基乙醇联合变性法、Trizol法和CTAB-LiCl法等3种方法,分别对山药叶片和块茎进行总RNA提取效果进行了比较。结果表明,Trizol法难以提取RNA,异硫氰酸胍-巯基乙醇联合变性法提取RNA效果不理想,存在DNA污染,这2种方法不适... 采用异硫氰酸胍-巯基乙醇联合变性法、Trizol法和CTAB-LiCl法等3种方法,分别对山药叶片和块茎进行总RNA提取效果进行了比较。结果表明,Trizol法难以提取RNA,异硫氰酸胍-巯基乙醇联合变性法提取RNA效果不理想,存在DNA污染,这2种方法不适合于富含多糖类物质的山药组织总RNA的提取;CTAB-LiCl法提取叶片和块茎组织总RNA质量高、完整性好、成功率高,可作为山药类植物总RNA提取的首选方法。 展开更多

关键词 山药 RNA提取 异硫氰酸胍-巯基乙醇联合变性法 TRIZOL法 CTAB—LiCl法

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2种大豆总RNA提取方法的改良 被引量：11

8

作者 刘易科 孙洪波 +3 位作者 简波 胡珀 高小伟 侯文胜 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2006年第12期83-86,共4页

对大豆总RNA的提取方法T rizo l法和异硫氰酸胍法进行了改良,比较了改良前后2种方法的提取效果。结果表明,2种改良方法提取的大豆总RNA质量较高、完整性较好,完全可以满足后续研究要求,RNA产率均超过220μg/g。改良T rizo l法适用于大... 对大豆总RNA的提取方法T rizo l法和异硫氰酸胍法进行了改良,比较了改良前后2种方法的提取效果。结果表明,2种改良方法提取的大豆总RNA质量较高、完整性较好,完全可以满足后续研究要求,RNA产率均超过220μg/g。改良T rizo l法适用于大豆根、茎、叶及生长点总RNA的提取,而改良异硫氰酸胍法适用于大豆根、茎及生长点总RNA的提取。 展开更多

关键词 大豆 RNA提取 改良异硫氰酸胍法 改良Trizol法

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一种改进的多浆旱生植物霸王叶和根总RNA提取方法 被引量：11

9

作者 伍国强 席杰军 +2 位作者 周向睿 马清 王锁民 《分子植物育种》 CAS CSCD 2008年第1期197-200,共4页

针对多浆旱生植物霸王富含多酚和多糖类物质的特点,在常规异硫氰酸胍方法的基础上进行改进,摸索出一种霸王叶和根总RNA提取的方法。本方法主要通过在提取缓冲液中加入4%β-巯基乙醇以去除多酚物质的干扰;用2mol/L醋酸钠(pH4.0)、水饱和... 针对多浆旱生植物霸王富含多酚和多糖类物质的特点,在常规异硫氰酸胍方法的基础上进行改进,摸索出一种霸王叶和根总RNA提取的方法。本方法主要通过在提取缓冲液中加入4%β-巯基乙醇以去除多酚物质的干扰;用2mol/L醋酸钠(pH4.0)、水饱和酚和氯仿:异戊醇(24:1)抽提以去除多糖和蛋白物质。采用该方法提取的霸王总RNA纯度高、完整性好,电泳条带清晰,OD260/OD280值在1.8￣2.0之间,其质量完全可以满足进一步分子生物学研究的要求。 展开更多

关键词 霸王 多酚 多糖 改进的异硫氰酸胍法 RNA提取

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三七总RNA提取方法的对比研究 被引量：18

10

作者 陈莉 朱华 +3 位作者 李糰 蓝秀万 黄勇奇 吴耀生 《生物技术通讯》 CAS 2005年第5期528-530,共3页

比较利用改进的异硫氰酸胍一步法、异硫氰酸胍高盐法、CTAB法和Thomas'RNA提取法等4种方法提取三七根茎2个部位总RNA的可行性。结果表明,改进的异硫氰酸胍一步法和异硫氰酸胍高盐法能有效地抑制酚类物质、多糖及皂苷等次级代谢产物... 比较利用改进的异硫氰酸胍一步法、异硫氰酸胍高盐法、CTAB法和Thomas'RNA提取法等4种方法提取三七根茎2个部位总RNA的可行性。结果表明,改进的异硫氰酸胍一步法和异硫氰酸胍高盐法能有效地抑制酚类物质、多糖及皂苷等次级代谢产物对总RNA的影响,可从三七根茎中获得质量高、完整性好的总RNA。RT-PCR分析显示提取的总RNA具有反转录活性。这2种方法具有快速、简单、有效的特点。 展开更多

关键词 三七 改进的异硫氰酸胍一步法 异硫氰酸胍高盐法 总RNA 提取

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白菜花药组织总RNA提取方法比较及其分析 被引量：16

11

作者 史公军 侯喜林 易金鑫 《西北农业学报》 CAS CSCD 2004年第3期97-99,共3页

以白菜花药组织为试材,利用异硫氰酸胍法和改良Tris-硼酸法提取花药总RNA。结果显示两种方法提取RNA的产量都较高,异硫氰酸胍法提取纯度低,但省时高效,适用于对模板要求低的RNA提取。而改良Tris-硼酸法提取花药RNA的产量高、质量好、纯... 以白菜花药组织为试材,利用异硫氰酸胍法和改良Tris-硼酸法提取花药总RNA。结果显示两种方法提取RNA的产量都较高,异硫氰酸胍法提取纯度低,但省时高效,适用于对模板要求低的RNA提取。而改良Tris-硼酸法提取花药RNA的产量高、质量好、纯度高,适用于mRNA差异显示及基因表达的Northern印迹等的RNA提取。 展开更多

关键词 白菜 花药组织 总RNA 提取 异硫氰酸胍法 改良Tris-硼酸法

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槟榔黄化病组织RNA提取方法的比较 被引量：5

12

作者 周亚奎 杨云 +2 位作者 隋春 甘炳春 魏建和 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期153-156,共4页

为了从发生黄化病的槟榔茎、叶、花中提取到完整的RNA,采用了CTAB法、Trizol法和异硫氰酸胍法提取槟榔黄化病组织RNA。从RNA的完整性、产率和纯度方面对这几种方法进行了比较,结果表明,异硫氰酸胍法所得RNA完整性较好,条带清晰无明显降... 为了从发生黄化病的槟榔茎、叶、花中提取到完整的RNA,采用了CTAB法、Trizol法和异硫氰酸胍法提取槟榔黄化病组织RNA。从RNA的完整性、产率和纯度方面对这几种方法进行了比较,结果表明,异硫氰酸胍法所得RNA完整性较好,条带清晰无明显降解,OD260/OD280介于1.8-2.0之间,RNA得率较高,为120μg/g以上,并能成功进行反转录制备cDNA,表明该RNA可以进行后续分子生物学操作。 展开更多

关键词 槟榔 黄化病 RNA提取 异硫氰酸胍法

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甘蔗种质总RNA提取方法的研究 被引量：7

13

作者 王英 羊玉花 +3 位作者 邱海燕 尚珂 文稀 庄南生 《中国农学通报》 CSCD 北大核心 2009年第24期68-72,共5页

甘蔗是重要的糖料及能源作物之一。甘蔗种质RNA的提取是甘蔗分子生物学研究的前提。以成熟甘蔗的叶片为材料,通过对前人的植物RNA提取方法进行改良,寻求最佳的甘蔗总RNA提取方法。通过改良最后得到的异硫氰酸胍法Ⅲ具有成本低、操作简... 甘蔗是重要的糖料及能源作物之一。甘蔗种质RNA的提取是甘蔗分子生物学研究的前提。以成熟甘蔗的叶片为材料,通过对前人的植物RNA提取方法进行改良,寻求最佳的甘蔗总RNA提取方法。通过改良最后得到的异硫氰酸胍法Ⅲ具有成本低、操作简单、省时等特点。用该法提取得到的甘蔗总RNA经琼脂糖凝胶电泳可获得28S、18S和5SrRNA3条带,并且28SrRNA的亮度大于18SrRNA的亮度。表明该方法提取的RNA完整性好,纯度高。另外对所得部分甘蔗种质的总RNA进行RT-PCR检测,可特异扩增出目标片段,说明用异硫氰酸胍法Ⅲ提取的甘蔗种质总RNA,可以直接用于后续的分子生物学试验。 展开更多

关键词 甘蔗 RNA提取 异硫氰酸胍法

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白色念珠菌总RNA的提取方法 被引量：5

14

作者 张云峰 焦立新 +4 位作者 贺丹 宋文刚 孙文通 横山耕治 王丽 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期359-361,共3页

目的:探讨提取白色念珠菌总RNA的方法。方法:白色念珠菌标准菌株经SDA培养基培养后,采用改良的异硫氰酸胍一步法提取总RNA。以此为基础,进行反转录PCR反应。结果:得到的RNA经过紫外分光光度计检测浓度达到0.7g.L-1以上;琼脂糖凝胶电泳... 目的:探讨提取白色念珠菌总RNA的方法。方法:白色念珠菌标准菌株经SDA培养基培养后,采用改良的异硫氰酸胍一步法提取总RNA。以此为基础,进行反转录PCR反应。结果:得到的RNA经过紫外分光光度计检测浓度达到0.7g.L-1以上;琼脂糖凝胶电泳证实为完整、均一的总RNA;将此法提取的RNA反转录成cDNA后经过PCR扩增,可获得清晰的目的条带。结论:该方法简便、快速,提取的总RNA可以用于进一步基因克隆、表达。 展开更多

关键词 念珠菌 白色 聚合酶链反应 RNA提取 异硫氰酸胍法

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植物RNA提取方法的研究进展 被引量：21

15

作者 张晓丽 代红军 《北方园艺》 CAS 北大核心 2014年第8期175-178,共4页

高质量的RNA是进行植物分子生物学研究的重要前提,由于植物组织细胞内组成成分的复杂多样性,使得植物组织RNA的提取方法具有多样性。现对已报道的异硫氰酸胍法、苯酚-SDS法、CTAB法、改良CTAB法、Trizol法等RNA提取方法在各种植物组织... 高质量的RNA是进行植物分子生物学研究的重要前提,由于植物组织细胞内组成成分的复杂多样性,使得植物组织RNA的提取方法具有多样性。现对已报道的异硫氰酸胍法、苯酚-SDS法、CTAB法、改良CTAB法、Trizol法等RNA提取方法在各种植物组织中的研究结果进行概括,旨在为进一步开展RNA提取工作提供参考。 展开更多

关键词 RNA提取 异硫氰酸胍法 苯酚-sds法 CTAB法Trizol法 研究进展

原文传递

两种铁皮石斛总RNA提取方法的比较研究 被引量：6

16

作者 容天聚 文国松 +2 位作者 钱雄 查应洪 徐绍忠 《云南农业大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期703-707,共5页

铁皮石斛是我国重点保护药材,因其富含多糖及次生代谢物,用普通的方法难以从叶中提取到能满足构建全长cDNA文库等分子生物学实验对高质量RNA需要的总RNA。分别通过对异硫氰酸胍法和CTAB法进行改良。异硫氰酸胍法:往裂解液中加入PVP,通过... 铁皮石斛是我国重点保护药材,因其富含多糖及次生代谢物,用普通的方法难以从叶中提取到能满足构建全长cDNA文库等分子生物学实验对高质量RNA需要的总RNA。分别通过对异硫氰酸胍法和CTAB法进行改良。异硫氰酸胍法:往裂解液中加入PVP,通过PVP去除多酚;用56℃热水水浴5min加速组织细胞裂解;抽提时间由原来15 min缩短为5min;根据材料多糖多酚的多寡情况适当增加裂解液。CTAB法:根据材料多糖多酚的多寡情况适当增加CTAB裂解液;用LiCl对RNA进行选择性过夜沉淀;灵活处理,适当增大LiCl浓度。结果表明用改良后的2种方法均可提取到总RNA,经对比发现,改良CTAB法提取效果更好,可重复性强,抽取到的RNA更适合于后续的分子生物学实验。 展开更多

关键词 铁皮石斛 多糖 总RNA提取 异硫氰酸胍法 CTAB法

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半夏叶片总RNA四种提取方法及效果的比较 被引量：7

17

作者 吴林 薛建平 +1 位作者 徐有明 田振东 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期901-905,共5页

目的 针对三叶半夏成熟叶片化学成分复杂，富含多糖、酚类及其他多种化学物质的特点，选择优化一种简便、经济、高效的半夏成熟叶片高质量总RNA提取方法。方法 用4种不同的RNA抽提方法如异硫氰酸胍法、皂土法、CTAB—LiCl法和改进的SDS... 目的 针对三叶半夏成熟叶片化学成分复杂，富含多糖、酚类及其他多种化学物质的特点，选择优化一种简便、经济、高效的半夏成熟叶片高质量总RNA提取方法。方法 用4种不同的RNA抽提方法如异硫氰酸胍法、皂土法、CTAB—LiCl法和改进的SDS／酚法提取总RNA，通过电泳、紫外分光光度计检测以及RT-PCR验证等对提取结果进行分析比较。结果 4种方法均能从半夏成熟叶片中提取到总RNA。其中皂土法的提取过程只需3～4h，是其他3种提取方法所用时间的一半。提取1g叶片的成本只有其他3种方法的1／13～1／14。此法提取的总RNA18S、28S带型清晰无弥散，完整性好，无严重的蛋白质和其他杂质污染，A260/A280为1．8～2．O，A260／A230大于2．O，且总RNA的产率高，为365．744μg／g鲜重，提取的总RNA适用于RT-PCR试验。结论 皂土法提取的RNA完全适用于DDRT-PCR、Northern blotting、cDNA文库构建等分子生物学研究，是一种快速、经济，适于抽提半夏总RNA的好方法。 展开更多

关键词 半夏 RNA提取 皂土法 异硫氰酸胍法 CTAB—LiCl法 SDS/酚法

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药用植物白木香高质量总RNA提取方法的研究 被引量：6

18

作者 吴宏清 王磊 +3 位作者 郭维 高晓霞 白玲 章卫民 《中药材》 CAS CSCD 北大核心 2013年第7期1055-1059,共5页

目的:白木香次生代谢产物成分复杂,干扰其总RNA的提取,一般的提取方法无法获得总RNA或总RNA降解严重。为获得高质量的总RNA,本实验开展了白木香正常及结香组织采集及高质量总RNA提取方法的研究。方法:对从野外采集的白木香样品,用改良CT... 目的:白木香次生代谢产物成分复杂,干扰其总RNA的提取,一般的提取方法无法获得总RNA或总RNA降解严重。为获得高质量的总RNA,本实验开展了白木香正常及结香组织采集及高质量总RNA提取方法的研究。方法:对从野外采集的白木香样品,用改良CTAB-LiCl法、去温浴的改良CTAB-LiCl法、SDS酸酚法、改良异硫氰酸胍-CTAB法和EASYspin RN09试剂盒5种方法分别对白木香叶、白木香枝条、白木香树干中的白木样品和结香样品进行RNA提取。结果:研究表明白木香枝条的离体样品室温保存5 h内不影响总RNA质量,确定EASYspin RN09试剂盒是白木香叶RNA的最佳提取方法,改良异硫氰酸胍-CTAB法是其他白木香组织RNA的最佳提取方法。结论:用改良异硫氰酸胍-CTAB法大量提取白木香树干中的白木样品及结香样品RNA,其28S∶18S为1.2～1.4,RIN值为6.8～7.5,并应用于转录组测序。 展开更多

关键词 白木香 总RNA提取 改良异硫氰酸胍-CTAB法

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黄河鲶不同组织中RNA提取纯化方法研究 被引量：9

19

作者 吴旭东 侯玉霞 张文吉 《淡水渔业》 CSCD 北大核心 2006年第2期24-26,共3页

从组织提取RNA的完整性对于分子生物学研究是至关重要的。RNA提取方法有多种。采取异硫氰酸胍法从黄河鲶肌肉、血液、全鱼、肾脏、肝脏、卵巢中提取出完整RNA,结果表明,通过该方法所提取RNA质量高,效果好,可以用于进一步的分子生物学研究。

关键词 黄河鲶 RNA提取 异硫氰酸胍法

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魔芋叶片中4种总RNA提取方法的比较 被引量：9

20

作者 张雅琼 郭华春 《分子植物育种》 CAS CSCD 2010年第1期196-200,共5页

本研究分别利用TRIzol法、异硫氰酸胍法、改良的CTAB法及试剂盒这4种方法提取魔芋叶片的总RNA,并用紫外光谱和琼脂糖凝胶电泳对各个提取效果进行鉴定。反复试验的结果表明:TRIzol法难以提取魔芋叶片总RNA,异硫氰酸胍法提取的总RNA浓度... 本研究分别利用TRIzol法、异硫氰酸胍法、改良的CTAB法及试剂盒这4种方法提取魔芋叶片的总RNA,并用紫外光谱和琼脂糖凝胶电泳对各个提取效果进行鉴定。反复试验的结果表明:TRIzol法难以提取魔芋叶片总RNA,异硫氰酸胍法提取的总RNA浓度低、杂质较多且有部分降解,这两种方法不适宜用于魔芋叶片总RNA提取;试剂盒方法提取的总RNA产率和纯度较高,但稳定性差、成功率低且成本较高;改良的CTAB法利用PVP和β-巯基乙醇去除酚类物质,水饱和酚-氯仿去除蛋白质,醋酸钾去除多糖,该方法提取得到的总RNA的纯度较高,OD260/OD280值为1.893,而且效果稳定,有良好的可重复性。因此,我们认为改良的CTAB法是一种简便、快速且经济的提取魔芋叶片总RNA的方法。 展开更多

关键词 魔芋 RNA抽提 TRIZOL法 异硫氰酸胍法 试剂盒法 改良CTAB法

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