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布鲁菌疫苗株Rev.1全基因序列的测定与分析
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作者 于环宇 张志丹 +10 位作者 刘建奇 赵丹彤 赵丽霞 刘国英 宋庆庆 王国华 潘相臣 刘冬冬 田普厚 石顺利 关平原 《畜牧与饲料科学》 2020年第5期91-95,共5页
为促进布鲁菌病Rev.1疫苗及相关疫苗的研发,该研究提取Rev.1疫苗株核酸,应用PacBio平台进行全基因序列测定与分析。结果表明,Rev.1疫苗株基因组大小约3299187 bp,G+C含量为57.2%,组装为染色体1、染色体2两条环状基因组,大小分别为212137... 为促进布鲁菌病Rev.1疫苗及相关疫苗的研发,该研究提取Rev.1疫苗株核酸,应用PacBio平台进行全基因序列测定与分析。结果表明,Rev.1疫苗株基因组大小约3299187 bp,G+C含量为57.2%,组装为染色体1、染色体2两条环状基因组,大小分别为2121370、1177817 bp,G+C含量分别为57.2%、57.3%。将其Ery、BLS和VirB10基因序列与9株GenBank上发表的布鲁菌参考菌株的Ery、BLS和VirB10基因序列进行比较分析,存在不同程度的差异,同源性为97.4%~100%。 展开更多
关键词 布鲁 布鲁菌rev.1疫苗株 全基因组测序 基因序列对比
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布鲁氏菌A19疫苗株全基因组测序及比较基因组学分析 被引量:6
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作者 王姝懿 赵学亮 +2 位作者 孙柯 呼和巴特尔 王文龙 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第11期1002-1008,共7页
目的探索布鲁氏杆菌A19疫苗株全基因组的结构、分子生物学的功能,并对其生物信息学进行研究。方法采用Illumina Hiseq 4000和PacBio对A19进行全基因组测序,并与GenBank上的8株菌进行比较基因组学解析。A19基因组3286167 bp,预测3371个基... 目的探索布鲁氏杆菌A19疫苗株全基因组的结构、分子生物学的功能,并对其生物信息学进行研究。方法采用Illumina Hiseq 4000和PacBio对A19进行全基因组测序,并与GenBank上的8株菌进行比较基因组学解析。A19基因组3286167 bp,预测3371个基因,GC含量57.25%。通过注释COG库,对应基因有2560个,将其归入22类COG中;根据比对KEGG库,得到2544个基因,共参与33类代谢通路。结果综合两个数据库结果发现,大多数A19预测基因中的基因功能主要与膜运输、氨基酸转运及碳水化合物代谢有关。结论通过分析发现,A19和猪羊牛种布鲁氏菌之间存在一定差异,并找出牛种毒力基因。本实验通过测序A19全基因组,为布鲁菌疫苗的研究提供思路。 展开更多
关键词 布鲁 布鲁疫苗A19 全基因组测序 比较基因组学研究
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布氏菌病活疫苗(Rev.1株)冻干保护剂工艺的研究 被引量:2
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作者 韩志玲 王英 +5 位作者 辛向国 张利平 赵利平 赵丹彤 赵丽霞 谯小燕 《兽医导刊》 2020年第1期91-92,共2页
布氏菌病活疫苗(Rev.1株)的冻干工艺借鉴、采纳布氏菌病活疫苗(S2株)成熟的冻干工艺及菌液的配比,对冻干保护剂的选择进行了优化。我们选择蔗糖明胶保护剂和蔗糖脱脂乳保护剂,保护剂与布鲁氏菌Rev.1株菌液以16的比例混合,冻干后测定其... 布氏菌病活疫苗(Rev.1株)的冻干工艺借鉴、采纳布氏菌病活疫苗(S2株)成熟的冻干工艺及菌液的配比,对冻干保护剂的选择进行了优化。我们选择蔗糖明胶保护剂和蔗糖脱脂乳保护剂,保护剂与布鲁氏菌Rev.1株菌液以16的比例混合,冻干后测定其活菌含量。结果显示,3批使用蔗糖脱脂乳保护剂的不同配比比例的冻干疫苗活菌数分别为12×10^9CFUmL、12.44×10^9CFUmL、12.65×10^9CFUmL;使用蔗糖明胶再加入终浓度约1%硫脲的不同配比比例的冻干疫苗活菌数分别为12.34×10^9CFUmL、12.62×10^9CFUmL、12.91×10^9CFUmL;使用蔗糖明胶的不同配比比例的冻干疫苗活菌数分别为12.22×10^9CFUmL、12.64×10^9CFUmL、12.8×10^9CFUmL。3种冻干保护剂对冻干疫苗的活菌含量影响无明显差异,但使用蔗糖明胶保护剂制备冻干疫苗时加入适量硫脲可适当增加冻干疫苗的耐热性,因此我们选择10%明胶、20%蔗糖冻干保护剂与菌液以1∶6配比比例混合,再加入终浓度约为1%的硫脲作为布氏菌病活疫苗(Rev.1株)的冻干工艺。 展开更多
关键词 布氏病活疫苗(rev.1) 冻干保护剂 配比比例
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基于HOOF-Prints技术的布鲁菌疫苗株基因序列遗传变异分析
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作者 唐莉娟 刘君 +2 位作者 陈创夫 王远志 张辉 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第11期891-893,共3页
通过分析布鲁菌疫苗株基因序列遗传变异情况,为疫苗的免疫保护力的评价提供理论依据,本研究利用高变量八聚物寡核苷酸指纹技术(HOOF-Prints)对国内主要布鲁菌疫苗-羊种布鲁菌疫苗M5、猪种布鲁菌疫苗S2、牛种布鲁菌疫苗S19、人用布鲁菌疫... 通过分析布鲁菌疫苗株基因序列遗传变异情况,为疫苗的免疫保护力的评价提供理论依据,本研究利用高变量八聚物寡核苷酸指纹技术(HOOF-Prints)对国内主要布鲁菌疫苗-羊种布鲁菌疫苗M5、猪种布鲁菌疫苗S2、牛种布鲁菌疫苗S19、人用布鲁菌疫苗104M进行序列分析,并基于布鲁菌标准参考株采用软件DNAMAN进行系统进化树分析。结果表明4种疫苗株的基因序列均发生了变异,但系统进化树分析显示这些疫苗株与对应的参考株遗传关系仍然最近,同时表明该指纹技术在分子水平上可以用于分析和了解国内主要疫苗的变异情况,为疫苗的免疫效果提供理论依据。 展开更多
关键词 HOOF—Prints 布鲁疫苗 遗传进化
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M5-90△26株和A19-△VirB12株布病新型疫苗免疫效果评估
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作者 于伟伟 山巴图 +5 位作者 薛新梅 宫玉玲 杨楠 夏绪进 巴图宝力岱 艾合麦提江·吐尔逊 《农业工程技术》 2024年第31期34-35,共2页
为了解新型布鲁菌病疫苗使用效果,试验设置试验组与对照组,试验组接种新型疫苗,即布鲁氏菌基因缺失活疫苗M5-90△26株、A19-△VirB12株;对照组接种布鲁氏菌病活疫苗M5株和A19株,开展免疫安全观察,并检测转阳率。试验结果表明,疫苗整体... 为了解新型布鲁菌病疫苗使用效果,试验设置试验组与对照组,试验组接种新型疫苗,即布鲁氏菌基因缺失活疫苗M5-90△26株、A19-△VirB12株;对照组接种布鲁氏菌病活疫苗M5株和A19株,开展免疫安全观察,并检测转阳率。试验结果表明,疫苗整体安全性较好;2种新型布病疫苗免疫14天后,转阳率均达到98%~100%,M5-90△26株在30~60天后开始转阳率出现加大幅度下降,建议M5-90△26株在免疫后15~30天内开展免疫抗体监测评估;A19-△VirB12株疫苗在同期抗体转阳率略高于布鲁氏菌病活疫苗A19株,建议A19-△VirB12株疫苗在免疫后15~60天内均可开展免疫抗体监测评估。 展开更多
关键词 布鲁 疫苗 M5-90△26 A19-△VirB12 抗体转阳率 免疫效果
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布鲁菌104M∶Omp19过表达株的构建与免疫保护性评价 被引量:1
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作者 杨巧玲 宰晓东 +6 位作者 殷瑛 李汭桦 钱梦樱 赵陶然 李耀辉 付玲 徐俊杰 《生物技术通讯》 CAS 2018年第1期1-6,共6页
目的:利用表达载体p NSGro E2His构建104M∶Omp19过表达株,以增强现有布鲁菌疫苗104M株免疫保护效果。方法:以布鲁菌疫苗104M株基因组为模板,通过PCR扩增得到Omp19基因;将经过Bam HⅠ和XbaⅠ双酶切的Omp19基因连接到经同样双酶切处理的p... 目的:利用表达载体p NSGro E2His构建104M∶Omp19过表达株,以增强现有布鲁菌疫苗104M株免疫保护效果。方法:以布鲁菌疫苗104M株基因组为模板,通过PCR扩增得到Omp19基因;将经过Bam HⅠ和XbaⅠ双酶切的Omp19基因连接到经同样双酶切处理的p NSGro E2His载体上,构建Omp19-p NSGro E2His过表达质粒;将构建的过表达质粒转化布鲁菌104M株感受态细胞,利用氯霉素抗性筛选构建成功的104M∶Omp19过表达株;通过皮下免疫BALB/c小鼠,从激发的抗体水平、细胞因子水平以及对抗布鲁菌A19株攻毒后的保护作用等方面评价104M∶Omp19过表达株的免疫保护效力。结果:PCR及Western印迹验证表明获得了104M∶Omp19过表达突变株;免疫评价实验显示104M∶Omp19在抗体水平、细胞因子水平与攻毒保护性方面均优于104M,低剂量免疫即可达到较好的保护效果。结论:布鲁菌疫苗104M株过表达Omp19抗原后,免疫保护效果显著增强,可作为一种新的布鲁菌疫苗候选菌株进行后续研究。 展开更多
关键词 布鲁疫苗 104M Omp19 过表达
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韩国开发成功针对H5N1禽流感病毒的疫苗菌株
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《中国兽药杂志》 2004年第3期25-25,共1页
关键词 韩国 H5N1禽流感病毒 疫苗 遗传因子 禽流感
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俄推广布鲁氏菌82菌株疫苗防制牛布病
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作者 谢敏康 《畜牧兽医科技信息》 2000年第12期12-12,共1页
目前,俄罗斯牛布鲁氏病仍在10个州、2个边疆区和12个共和国内流行,给养牛业造成重大的经济损失。过去一般都应用布鲁氏菌株19号疫苗进行接种防制,但这种菌苗存在一定的缺点,给防制本病造成困难。以后,为了寻找有效的菌苗。
关键词 布鲁 疫苗防制 布鲁 养牛业 经济损失 造成困难 疫苗接种 安全地区 布鲁
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韩国开发禽流感H5N1病毒的疫苗菌株
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《兽药与饲料添加剂》 2004年第2期36-36,共1页
关键词 韩国 禽流感 H5N1病毒 疫苗 遗传因子
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口服△virG宋内志贺菌减毒活疫苗WRSS1株在健康成人中的Ⅰ期评价
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作者 王剑虹 《国外医学(预防.诊断.治疗用生物制品分册)》 2003年第3期134-135,共2页
关键词 △virG宋内志贺减毒活疫苗 WRSS1 I期评价 健康成人 临床试验 多价痢疾疫苗
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一类具有疫苗接种的双菌株流感模型的动力学分析 被引量:1
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作者 王晓静 梁宇 +3 位作者 郭松柏 陈靖宜 李佳慧 郭德玉 《河南师范大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2023年第3期48-55,共8页
依据甲型H1N1流感的传播机理,构建了一类SVEI SI RR的传染病模型.计算了控制再生数R c,证明了无病平衡点的全局稳定性和地方病平衡点的存在性,进而对模型的主要参数进行了敏感性分析,最后进行了数值模拟.结果表明:感染规模随着潜伏期感... 依据甲型H1N1流感的传播机理,构建了一类SVEI SI RR的传染病模型.计算了控制再生数R c,证明了无病平衡点的全局稳定性和地方病平衡点的存在性,进而对模型的主要参数进行了敏感性分析,最后进行了数值模拟.结果表明:感染规模随着潜伏期感染者自愈率1-p的增大而减少;耐药性菌株的感染人数随着治疗率f的提高而逐渐增大;累计感染人数随着疫苗接种率η的增大而逐渐减小,并且相比于未接种疫苗的情况,当疫苗接种率达到0.3时,累计感染人数降低约0.47倍.因此,科学合理地进行药物治疗,加大疫苗接种的覆盖率对控制甲型H1N1流感的传播有着非常重要的作用. 展开更多
关键词 甲型H1N1流感 耐药性 敏感性 疫苗接种 敏感性分析 稳定性
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NO/ADMA在布鲁菌侵染小鼠机体过程中的响应特征 被引量:1
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作者 胡梦薇 许万云 +3 位作者 刘朋涛 严国 汪文伦 高剑峰 《动物医学进展》 北大核心 2016年第2期50-56,共7页
本试验旨在研究布鲁菌侵染小鼠过程中一氧化氮(NO)的作用,以及NO和非对称性二甲基精氨酸(ADMA)在此过程的相互作用关系。以布鲁菌标准疫苗株M5侵染小鼠,首先用小鼠的血清进行虎红平板凝集(RBPT)和试管凝集试验(SAT),再用Griess试剂法和E... 本试验旨在研究布鲁菌侵染小鼠过程中一氧化氮(NO)的作用,以及NO和非对称性二甲基精氨酸(ADMA)在此过程的相互作用关系。以布鲁菌标准疫苗株M5侵染小鼠,首先用小鼠的血清进行虎红平板凝集(RBPT)和试管凝集试验(SAT),再用Griess试剂法和ELISA法测定对照组和侵染组不同组织和血清中的NO和ADMA含量,对小鼠肝脏和脾脏的各个侵染时间段进行CFU计数观察。结果显示,用布鲁菌M5侵染小鼠后,RBPT和SAT在14d时检测到有阳性反应。侵染组和空白对照组NO总含量上变化不大,但侵染组血清中的NO含量随时间出现下降,而肝脾中NO含量随时间出现上升,其他各组织NO含量波动不明显。而ADMA的总趋势与NO相反。CFU计数结果显示,小鼠肝脾内布鲁菌的数量在14d时一直处于增长状态,28d时布鲁菌的数量下降,表明布鲁菌的分裂繁殖和机体NO的含量存在一定的关系。 展开更多
关键词 布鲁疫苗M5 一氧化氮 非对称性二甲基精氨酸
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产毒性大肠杆菌菌毛抗原F_(41)单克隆抗体的制备及其特异性研究
13
作者 李元 吕苹 +1 位作者 吴玉水 汪美先 《单克隆抗体通讯》 CSCD 1989年第3期22-26,共5页
本文报道以纯化的产毒性大肠杆菌菌毛F_(41)抗原,利用杂交瘤技术获得5株抗F_(41)抗原的单克隆抗体(1F6,2C5,3B6为IgG 1。1 H 5,4E11为IgM)。腹水抗体效价达10^(-6)培养上清抗体效价10^(-3)。通过免疫扩散、免疲印迹法及固相菌体ELISA试... 本文报道以纯化的产毒性大肠杆菌菌毛F_(41)抗原,利用杂交瘤技术获得5株抗F_(41)抗原的单克隆抗体(1F6,2C5,3B6为IgG 1。1 H 5,4E11为IgM)。腹水抗体效价达10^(-6)培养上清抗体效价10^(-3)。通过免疫扩散、免疲印迹法及固相菌体ELISA试验证实,5株单克隆抗体均为针对ETEC菌毛F_(41)抗原的特异性抗体;红血球凝集抑制及肠上皮细胞粘附阻断试验证明1F6、2C5、3B6具有生物学活性,1H5与4E11无生物学活性,这可能(1)建立ELISA捕捉法,从粪便中直接检测F_(41)抗原以及用玻板凝集试验鉴定临床分离菌株。(2)用于F_(41)抗原性的分析及ETEC基因工程疫苗的监控手段。(3)为ETEC·F_(41)菌的致病性研究及被动免疫预防急性腹泻提供依据。 展开更多
关键词 产毒性大肠杆 单克隆抗体 特异性研究 毛抗原 ELISA捕捉法 肠上皮细胞粘附 制备 ETEC 临床分离 基因工程疫苗 抗体效价 杂交瘤技术 免疫印迹法 特异性抗体 红血球凝集 生物学活性 致病性研究 IgG1 培养上清 免疫扩散
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布鲁菌BAB基因的原核表达及间接ELISA检测方法的建立 被引量:4
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作者 杭天宇 赵洪哲 +4 位作者 宋前进 张静 姬智 温永俊 关平原 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2020年第11期3641-3650,共10页
本研究以布鲁菌Rev.1株基因组为模板,扩增BAB基因序列,将其克隆至原核表达载体pET-30a(+),获得重组质粒pET-30a-BAB,对重组质粒进行原核表达,经Western blotting检测后,利用表达产物构建检测布鲁菌病的间接ELISA方法。结果表明,本试验... 本研究以布鲁菌Rev.1株基因组为模板,扩增BAB基因序列,将其克隆至原核表达载体pET-30a(+),获得重组质粒pET-30a-BAB,对重组质粒进行原核表达,经Western blotting检测后,利用表达产物构建检测布鲁菌病的间接ELISA方法。结果表明,本试验成功克隆并表达了BAB基因,纯化表达产物经SDS-PAGE分析显示,本研究获得较纯的重组BAB蛋白;Western blotting试验表明,表达蛋白可与布鲁菌羊阳性血清发生特异性反应,具有良好的反应原性;以重组BAB蛋白作为包被抗原,建立并优化了检测BAB抗体的间接ELISA方法。确定最佳包被条件:BAB蛋白包被量0.25μg/mL,血清稀释度为1∶400;封闭液为3%猪源明胶;二抗稀释度为1∶6000;显色时间为10 min。应用建立方法对临床40份羊血清进行检测,计算得出临界值为0.607。即当待检血清的P/N≥1.5,且D450 nm≥0.607时,判定为阳性,当D450 nm≤0.561时,判定为阴性,当0.607<D450 nm<0.561时,判定为疑似值,需要进行复检。与虎红平板试验和试管凝集试验比较,阳性符合率为100%,阴性符合率为71.88%,总符合率为77.5%。 展开更多
关键词 布鲁 rev.1 BAB基因 原核表达 ELISA
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鉴别布鲁菌A19疫苗株的双重荧光定量PCR方法的建立与应用 被引量:1
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作者 董浩 原霖 +4 位作者 刘洋 徐阳 陈亚娜 沈子莹 梁春南 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第9期1845-1850,共6页
为建立一种可以鉴别布鲁菌A19疫苗株和其他布鲁菌的双重荧光定量PCR方法,分别设计特异性扩增布鲁菌BCSP31基因序列和A19疫苗株缺失序列的2套引物探针,对引物和探针浓度进行优化,并对其敏感性、特异性和重复性进行评价。结果表明,用该方... 为建立一种可以鉴别布鲁菌A19疫苗株和其他布鲁菌的双重荧光定量PCR方法,分别设计特异性扩增布鲁菌BCSP31基因序列和A19疫苗株缺失序列的2套引物探针,对引物和探针浓度进行优化,并对其敏感性、特异性和重复性进行评价。结果表明,用该方法对2种阳性质粒标准品的最低检测限均为10拷贝/μL;该方法扩增A19疫苗株的核酸时只呈现出1条特异性的扩增曲线,扩增其他布鲁菌菌株(包括疫苗株与野毒株)的核酸时,会出现2条特异性的扩增曲线,而非布鲁菌的细菌核酸均未出现特异性的扩增曲线。该方法的批内和批间重复变异系数均小于3%,重复性良好。对122份临床样品的检测结果显示该方法的阳性样品检出率高于套式PCR检测方法和Bruce-Ladder PCR方法,并可对A19疫苗株的核酸进行鉴别。本研究建立的鉴别布鲁菌A19疫苗株的双重荧光定量PCR方法特异性好、灵敏度高、重复性好,可作为临床上进行A19疫苗株鉴别的一种检测方法。 展开更多
关键词 布鲁 A19疫苗 荧光定量PCR 鉴别诊断
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Cu/Zn SOD蛋白在布鲁菌S19疫苗株中的过表达及鉴定 被引量:1
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作者 邓雨明 段开放 +2 位作者 侯欢欢 张燕 彭其胜 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期711-715,共5页
以Cu/Zn SOD为目的基因,通过基因工程技术分别构建了组成型过表达系统pBBR-trc-sod和诱导型过表达系统pBBR-lacPtrc-sod,在布鲁菌S19疫苗株中进行了Cu/Zn SOD的过表达。同时,以大肠杆菌为宿主表达纯化的重组Cu/Zn SOD蛋白免疫家兔制备... 以Cu/Zn SOD为目的基因,通过基因工程技术分别构建了组成型过表达系统pBBR-trc-sod和诱导型过表达系统pBBR-lacPtrc-sod,在布鲁菌S19疫苗株中进行了Cu/Zn SOD的过表达。同时,以大肠杆菌为宿主表达纯化的重组Cu/Zn SOD蛋白免疫家兔制备多克隆抗体,对2种过表达系统中Cu/Zn SOD蛋白的表达量进行分析。结果显示,诱导型Cu/Zn SOD过表达系统的表达量更高,且能与所制备的多抗发生特异性反应。结果表明,构建的过表达系统能够实现Cu/Zn SOD蛋白在布鲁菌S19疫苗株中过表达;同时,该试验也提示我们这种表达系统可应用于布鲁菌S19疫苗的抗原改造。 展开更多
关键词 布鲁 S19疫苗 铜锌超氧化物歧化酶
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布鲁菌疫苗株A19全基因组测序及功能分析 被引量:6
17
作者 王姝懿 赵学亮 +2 位作者 孙珂 呼和巴特尔 王文龙 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期1770-1775,共6页
采用Illumina Hiseq和PacBio测序技术对布鲁菌A19进行全基因组测序,并进行GO注释、VFDB注释、ARDB注释、CRISPR以及基因岛预测等生物信息学分析。结果显示:A19全基因组大小为3.28 Mb,GC含量分布未见异常,含1个CRISPR和16个基因岛,通过G... 采用Illumina Hiseq和PacBio测序技术对布鲁菌A19进行全基因组测序,并进行GO注释、VFDB注释、ARDB注释、CRISPR以及基因岛预测等生物信息学分析。结果显示:A19全基因组大小为3.28 Mb,GC含量分布未见异常,含1个CRISPR和16个基因岛,通过GO数据库注释发现,参与生物学途径的基因5 311个、细胞组份基因有3 350个、分子功能基因有3 078个;通过VFDB注释发现,与毒力相关的基因82个,主要包括脂多糖(LPS)、纤连结合蛋白、virB四型分泌系统等毒力相关因子;通过ARDB数据库注释发现,与耐药相关的基因1个,该基因的表达产物通过影响焦磷酸异构酶的表达,从而产生对抗生素的耐药。本试验通过A19全基因组测序,为布鲁菌病的治疗和致病机制的研究及疫苗的开发奠定了基础。 展开更多
关键词 布鲁 布鲁疫苗A19 全基因组测序 功能分析
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布鲁菌S2疫苗株免疫牛与牛种、羊种布鲁菌自然感染牛ELISA鉴别诊断方法的建立 被引量:6
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作者 武宁 王晶钰 +6 位作者 刘万华 邱渊皓 任娟娟 唐攀 曹晓蕾 陈占莉 江越德 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期243-247,共5页
为建立区分猪种布鲁菌S2疫苗株接种奶牛与布鲁菌自然感染奶牛,BLAST比对分析羊种、牛种、猪种、犬种、沙林鼠种和绵羊种6种布鲁菌基因序列,发现repA-related基因是猪种布鲁菌与牛种及羊种布鲁菌的差异基因。设计引物PCR扩增获得repA-rel... 为建立区分猪种布鲁菌S2疫苗株接种奶牛与布鲁菌自然感染奶牛,BLAST比对分析羊种、牛种、猪种、犬种、沙林鼠种和绵羊种6种布鲁菌基因序列,发现repA-related基因是猪种布鲁菌与牛种及羊种布鲁菌的差异基因。设计引物PCR扩增获得repA-related基因片段,克隆并原核表达得到了布鲁菌repA-related融合蛋白,以repA-related蛋白建立间接ELISA检测方法。用repA-related蛋白间接ELISA检测猪种S2疫苗株接种动物血清为阳性,检测牛种和羊种布鲁菌自然感染动物血清为阴性。repA-related蛋白间接ELISA能从试管凝聚实验(SAT)及常规ELISA检测阳性的奶牛血清样本中,区分出S2疫苗接种牛与牛种布鲁菌感染牛。 展开更多
关键词 布鲁 布鲁S2疫苗 repA-related蛋白 间接ELISA 鉴别诊断
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布鲁菌疫苗株S2全基因组测序及功能分析 被引量:2
19
作者 红梅 冯陈晨 +3 位作者 岳建伟 刘宁 呼和巴特尔 王文龙 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期1358-1362,共5页
为找出布鲁菌疫苗株S2基因组分泌性蛋白、参与生物学途径基因、细胞组件基因、分子功能基因、毒力相关因子及耐药基因,对布鲁菌疫苗株S2全基因组测序并进行Ⅲ型分泌系统效应蛋白预测、GO注释、VFDB注释、ARDB注释。全基因组测序结果表明... 为找出布鲁菌疫苗株S2基因组分泌性蛋白、参与生物学途径基因、细胞组件基因、分子功能基因、毒力相关因子及耐药基因,对布鲁菌疫苗株S2全基因组测序并进行Ⅲ型分泌系统效应蛋白预测、GO注释、VFDB注释、ARDB注释。全基因组测序结果表明,S2基因组大小约为3.3 Mb,杂合度和重复度较低,GC含量分布未出现异常。通过Ⅲ型分泌系统效应蛋白预测未找出S2分泌性蛋白。通过GO数据库注释,发现参与生物学途径基因有3 823个、细胞组件基因有1 949个、分子功能基因有2 585个。通过VFDB数据库注释,找出S2基因组有79个毒力相关基因,其中最大基因为8 604bp,最小基因为180bp。通过ARDB数据库注释,找出S2基因组有13个耐药基因,最大基因为3 225bp,最小基因为333bp;其中功能注释的有GL002835基因,是枯草杆菌肽类基因,此基因耐受抗微生物类药物。本研究为进一步了解布鲁菌S2基因组基本功能奠定了基础。 展开更多
关键词 布鲁 布鲁疫苗S2 全基因组测序 功能分析
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鉴别布鲁菌S2疫苗株的双重实时荧光PCR方法的建立与应用 被引量:2
20
作者 董浩 原霖 +6 位作者 赵明海 刘巍 许中衎 沈子莹 徐阳 王传彬 梁春南 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第12期2399-2403,2420,共6页
为了建立一种鉴别布鲁菌S2疫苗株和其他种类布鲁菌的双重实时荧光PCR检测方法,通过查阅文献,分别设计了特异性扩增布鲁菌IS711插入序列和S2疫苗株缺失序列的2套引物探针,并对引物和探针浓度进行了优化,对其敏感性、特异性和重复性进行... 为了建立一种鉴别布鲁菌S2疫苗株和其他种类布鲁菌的双重实时荧光PCR检测方法,通过查阅文献,分别设计了特异性扩增布鲁菌IS711插入序列和S2疫苗株缺失序列的2套引物探针,并对引物和探针浓度进行了优化,对其敏感性、特异性和重复性进行了评价,同时,使用该方法对不同类型的临床样品进行了检测。结果表明,用该方法对2种阳性质粒标准品的最低检测限均为10 copies/μL;该方法能特异性鉴别S2疫苗株,其他非布鲁菌的细菌核酸均未有特异性的扩增曲线;批内和批间重复变异系数均小于3%,重复性良好。对112份临床样品的检测结果显示该方法的阳性样品检出率高于套式PCR检测方法,并可以成功对S2疫苗株的核酸进行鉴别。该研究建立的鉴别布鲁菌S2疫苗株的双重实时荧光PCR方法特异性好、灵敏度高、重复性好,具有较好的临床应用价值。 展开更多
关键词 布鲁 S2疫苗 实时荧光PCR 鉴别诊断
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