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ORY-1001靶向赖氨酸特异性去甲基化酶1下调胶质母细胞瘤Notch/HES1通路的表达并发挥抗肿瘤作用
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作者 杨红丽 向亚运 +1 位作者 谭婷婷 雷阳 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期1620-1630,共11页
目的 探究赖氨酸特异性去甲基化酶1(LSD1)抑制剂ORY-1001对胶质母细胞瘤(GBM)的抑瘤作用和机制。方法 从公开数据库(TCGA和HPA)下载相关数据,分析LSD1在GBM和正常脑中的表达情况。将24只雌性BALB/c小鼠,随机分为对照组与ORY-1001组,12只... 目的 探究赖氨酸特异性去甲基化酶1(LSD1)抑制剂ORY-1001对胶质母细胞瘤(GBM)的抑瘤作用和机制。方法 从公开数据库(TCGA和HPA)下载相关数据,分析LSD1在GBM和正常脑中的表达情况。将24只雌性BALB/c小鼠,随机分为对照组与ORY-1001组,12只/组。肿瘤细胞种植后,每7 d用400μg/kg ORY-1001进行灌胃,检测肿瘤生长和动物生存时间,评估ORY-1001对GBM的抗肿瘤效应。检测A490 nm值测定ORY-1001对GBM细胞活力的影响。Western blotting检测ORY-1001对LSD1表达的影响。利用慢病毒试剂,构建稳定敲降LSD1的GBM细胞(sh-LSD1),并通过动物成瘤实验评估沉默LSD1在活体动物内的作用以检测LSD1药物抑制获得的表型特异性。运用生物信息学方法分析与LSD1相关的基因及通路。Western blotting检测沉默LSD1及不同剂量ORY-1001治疗后Notch/HES1通路的表达。通过慢病毒转染,构建稳定过表达Notch1(oeNotch1)的U87细胞。测定过表达Notch1后,ORY-1001对GBM动物模型肿瘤生长及生存时间的影响。通过ChIP揭示ORY-1001对Notch/HES1通路的具体调控机制。结果 LSD1在GBM中高表达,并与患者的预后呈负相关(P<0.001)。ORY-1001治疗以及LSD1基因沉默都使荷瘤动物肿瘤负荷减轻(P<0.05)和生存时间延长(P<0.001),对多种GBM细胞的活力均表现出抑制作用(P<0.05)。ORY-1001呈剂量依赖性地抑制LSD1的表达。Notch通路富集了与LSD1抑制相关的差异基因,LSD1沉默及ORY-1001治疗后Notch/HES1通路表达显著下调(P<0.05),逆转了ORY-1001对GBM的抗肿瘤作用(P<0.05)。结论 ORY-1001通过抑制GBM中LSD1的表达而下调Notch/HES1通路,并发挥抗肿瘤效应。 展开更多
关键词 赖氨酸异性去甲基化酶1 生信分析 胶质细胞 Notch/HES1通路 癌症治疗
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巢蛋白和阶段特异性胚胎抗原-1在大鼠2型星形胶质细胞中的表达 被引量:12
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作者 李春鹏 张晔 +3 位作者 夏春林 沈慧 张静 陆志方 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期153-157,共5页
目的观察1型和2型星形胶质细胞(T1A、T2A)是否表达神经干细胞的标志物、是否具有神经干细胞的特性。方法取新生大鼠脑皮质,体外培养纯化的O-2A祖细胞、T1A和T2A,应用激光共焦双重免疫荧光标记技术检测巢蛋白和阶段特异性胚胎抗原-1(SSEA... 目的观察1型和2型星形胶质细胞(T1A、T2A)是否表达神经干细胞的标志物、是否具有神经干细胞的特性。方法取新生大鼠脑皮质,体外培养纯化的O-2A祖细胞、T1A和T2A,应用激光共焦双重免疫荧光标记技术检测巢蛋白和阶段特异性胚胎抗原-1(SSEA-1)的表达;观察O-2A祖细胞、T1A和T2A在碱性成纤维生长因子(bFGF)和表皮生长因子(EGF)的培养液中生长方式的改变。结果巢蛋白在O-2A祖细胞和T2A中表达,T1A不表达;SSEA-1仅在T2A中表达。在干细胞培养基中培养10d,T2A形成能增殖和连续传代的细胞球,细胞球巢蛋白标记阳性,贴壁后分化细胞具有神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞样形态;但相同培养条件下的O-2A祖细胞和T1A生长方式无改变。结论巢蛋白和SSEA-1在两型星形胶质细胞中的表达存在差异,T2A具有神经干细胞的某些生物学特性。 展开更多
关键词 胶质细胞谱系 O—2A祖细胞 巢蛋白 阶段异性胚胎抗原-1 免疫细胞化学 大鼠
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抗人内皮细胞特异性分子-1单克隆抗体的研制和初步鉴定 被引量:11
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作者 熊江霞 张素梅 +4 位作者 王雪 胡向阳 桂淑玉 周青 汪渊 《现代免疫学》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期217-220,共4页
运用B淋巴细胞杂交瘤技术 ,以人内皮细胞特异性分子 1(ESM 1)蛋白为抗原 ,经PEG融合 ,有限稀释法筛选 ,获得了 7株稳定分泌抗人ESM 1的杂交瘤细胞株 ,其中 3A7细胞株特异性尤为显著 ,效价高达 1∶6 0 0 0。所分泌抗体亚型为IgG2b ,West... 运用B淋巴细胞杂交瘤技术 ,以人内皮细胞特异性分子 1(ESM 1)蛋白为抗原 ,经PEG融合 ,有限稀释法筛选 ,获得了 7株稳定分泌抗人ESM 1的杂交瘤细胞株 ,其中 3A7细胞株特异性尤为显著 ,效价高达 1∶6 0 0 0。所分泌抗体亚型为IgG2b ,Westernblot结果表明对内皮细胞中的ESM 1蛋白及细胞培养上清中的ESM 1均可特异性识别。并观察到ESM 1主要分布在内皮细胞的细胞胞质伴胞核中。在肾组织中 ,ESM 1定位于血管内皮细胞 ,且肾癌标本中ESM 1阳性表达显著高于正常肾组织。免疫组化结果表明所获单抗具有一定的特异性和实用性。 展开更多
关键词 内皮细胞异性分子-1 单克隆抗体 性分析 免疫组化 肾癌
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胶质母细胞瘤中脑组织特异性血管生成抑制因子1的研究进展
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作者 刘维生 肖新如 王硕 《国际神经病学神经外科学杂志》 2008年第1期22-24,共3页
脑组织特异性血管生成抑制因子1(BAI1)是近年来从人类脑组织中提取的一种抑癌基因,它通过抑制肿瘤血管生成来发挥作用。有研究证明胶质母细胞瘤中BAI1表达水平下降,提示它与胶质母细胞瘤的发生、发展及预后关系密切,有必要对胶质瘤中的B... 脑组织特异性血管生成抑制因子1(BAI1)是近年来从人类脑组织中提取的一种抑癌基因,它通过抑制肿瘤血管生成来发挥作用。有研究证明胶质母细胞瘤中BAI1表达水平下降,提示它与胶质母细胞瘤的发生、发展及预后关系密切,有必要对胶质瘤中的BAI1基因进行深入研究。 展开更多
关键词 胶质细胞 脑组织异性血管生成抑制因子1 基因
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MEK转染的内皮细胞表达人内皮细胞特异性分子-1的初步研究 被引量:1
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作者 张素梅 汪渊 《安徽医科大学学报》 CAS 2004年第1期73-73,共1页
目的 人内皮细胞特异性分子 1(Humanendocellular specificmolecule 1,ESM 1)表达载体的构建及其体外表达 ,表达产物的纯化及多克隆抗体和单克隆抗体的制备。重组MEK基因的真核转染 ,转染的内皮细胞中ESM 1的表达。方法 用PCR方法扩增... 目的 人内皮细胞特异性分子 1(Humanendocellular specificmolecule 1,ESM 1)表达载体的构建及其体外表达 ,表达产物的纯化及多克隆抗体和单克隆抗体的制备。重组MEK基因的真核转染 ,转染的内皮细胞中ESM 1的表达。方法 用PCR方法扩增ESM 1的基因片段 ,扩增产物与T Vector连接 ,构建克隆载体 pGEM T ESM 1。在宿主菌中扩增重组质粒 ,提取质粒并进行酶切纯化 ,将目的基因插入pET 2 8b中构建成表达载体 ,再次转化入大肠杆菌XL1 blue ,蓝白选择、耐药性标记粗筛并挑取阳性克隆 ,经限制性内切酶酶谱分析、DNA序列分析两种方法鉴定。然后提取质粒 ,转化入大肠杆菌BL 2 1,用IPTG诱导表达。表达产物行SDS PAGE ,割下所需条带 ,用电洗脱方法纯化得到所需目的蛋白。免疫新西兰纯种大白兔 ,制备多抗 ,并用免疫双扩散法测定抗体效价 ;免疫BALB/C小鼠 ,制备抗人ESM 1的单克隆抗体。用重组MEK()基因转染人脐静脉内皮细胞ECV30 4 ,加以鉴定 ,并检测转染细胞中ESM 1表达的改变。结果 经限制性内切酶酶切图谱分析和DNA序列测定证明所构建质粒为 pET - 2 8b -ESM - 1重组质粒 ,SDS -PAGE证实获得的融合蛋白分子量为 2 4ku ,表达量约占菌体总蛋白的 2 4 %。所得多抗效价为 1:16 (免疫双扩散 ) ,单抗效价为 1:6 0 0 0 展开更多
关键词 MEK 基因转染 人内皮细胞异性分子-1 多克隆抗体 单克隆抗体 基因表达
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小鼠抗星形胶质细胞上调基因1(AEG-1)单克隆抗体的制备及应用
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作者 路蔓 龙敏 +2 位作者 郜赵伟 刘冲 张惠中 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期1690-1694,共5页
目的制备并纯化具有高特异性的抗星形胶质细胞上调基因1(AEG-1)单克隆抗体(mAb),并进行异硫氰酸荧光素(FITC)标记,鉴定标记的mAb与肿瘤细胞的结合能力。方法小鼠腹水诱生法制备并纯化抗AEG-1 mAb,Western blot法和免疫组织化学染色检测... 目的制备并纯化具有高特异性的抗星形胶质细胞上调基因1(AEG-1)单克隆抗体(mAb),并进行异硫氰酸荧光素(FITC)标记,鉴定标记的mAb与肿瘤细胞的结合能力。方法小鼠腹水诱生法制备并纯化抗AEG-1 mAb,Western blot法和免疫组织化学染色检测mAb的纯度及免疫活性。流式细胞术检测FITC标记mAb的标记效率,流式细胞术及免疫细胞化学染色检测FITC标记mAb与肿瘤细胞的结合能力。结果纯化得到了具有较高纯度的抗AEG-1 mAb,免疫活性良好;流式细胞术检测结果显示,FITC标记的mAb标记的肿瘤细胞表面荧光强度明显增加,标记率可达到90%以上;FITC标记的mAb可特异性识别并结合AEG-1阳性表达的肿瘤细胞,还能与小鼠体内注射的肿瘤细胞结合,在BALB/c小鼠血液中可检测出荧光染色阳性的肿瘤细胞。结论成功制备出小鼠抗AEG-1 mAb并进行了FITC标记,标记的mAb在体内外均可与肿瘤细胞特异性结合。 展开更多
关键词 星形胶质细胞上调基因1(AEG-1) 单克隆抗体 异硫氰酸荧光素标记 肿瘤异性
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经自身肿瘤细胞激活的脑胶质瘤特异性CTL免疫表型变化研究
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作者 汪泱 袁铿 +1 位作者 江紫生 江全 《南昌大学学报(医学版)》 CAS 1997年第4X期103-104,共2页
关键词 胶质 肿瘤细胞激活 免疫表型 异性CTL 胶质细胞 A-LAK细胞 抗肿瘤活性 医学科学研究 细胞表型 单克隆抗体
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产毒性大肠杆菌菌毛抗原F_(41)单克隆抗体的制备及其特异性研究
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作者 李元 吕苹 +1 位作者 吴玉水 汪美先 《单克隆抗体通讯》 CSCD 1989年第3期22-26,共5页
本文报道以纯化的产毒性大肠杆菌菌毛F_(41)抗原,利用杂交瘤技术获得5株抗F_(41)抗原的单克隆抗体(1F6,2C5,3B6为IgG 1。1 H 5,4E11为IgM)。腹水抗体效价达10^(-6)培养上清抗体效价10^(-3)。通过免疫扩散、免疲印迹法及固相菌体ELISA试... 本文报道以纯化的产毒性大肠杆菌菌毛F_(41)抗原,利用杂交瘤技术获得5株抗F_(41)抗原的单克隆抗体(1F6,2C5,3B6为IgG 1。1 H 5,4E11为IgM)。腹水抗体效价达10^(-6)培养上清抗体效价10^(-3)。通过免疫扩散、免疲印迹法及固相菌体ELISA试验证实,5株单克隆抗体均为针对ETEC菌毛F_(41)抗原的特异性抗体;红血球凝集抑制及肠上皮细胞粘附阻断试验证明1F6、2C5、3B6具有生物学活性,1H5与4E11无生物学活性,这可能(1)建立ELISA捕捉法,从粪便中直接检测F_(41)抗原以及用玻板凝集试验鉴定临床分离菌株。(2)用于F_(41)抗原性的分析及ETEC基因工程疫苗的监控手段。(3)为ETEC·F_(41)菌的致病性研究及被动免疫预防急性腹泻提供依据。 展开更多
关键词 产毒性大肠杆菌 单克隆抗体 异性研究 菌毛抗原 ELISA捕捉法 肠上皮细胞粘附 制备 ETEC 临床分离菌株 基因工程疫苗 抗体效价 杂交瘤技术 免疫印迹法 异性抗体 红血球凝集 生物学活性 致病性研究 IgG1 培养上清 免疫扩散
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CRTER关注“肾移植排斥反应中特异性抗体及细胞因子的作用”内容
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《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2010年第53期9940-9940,共1页
肾移植排斥反应中特异性抗体补体与移植排斥反应尿单核细胞趋化蛋白1与肾移植后急性排斥反应:有相关性吗?
关键词 移植排斥反应 异性抗体 移植肾 肾移植急性排斥反应 细胞因子 单核细胞趋化蛋白1 Fas/FasL 学术
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肾移植排斥反应中特异性抗体及细胞因子的作用
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《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期950-950,共1页
1慢性移植肾肾病肾组织中转化生长因子β1、金属蛋白酶2、金属蛋白酶组织抑制剂1的表达及意义 推荐理由:慢性移植肾肾病是造成肾移植后期移植肾丢失的主要原因,其发病原因包括免疫因素和非免疫性等多种因素,这些因素最终都造成移植... 1慢性移植肾肾病肾组织中转化生长因子β1、金属蛋白酶2、金属蛋白酶组织抑制剂1的表达及意义 推荐理由:慢性移植肾肾病是造成肾移植后期移植肾丢失的主要原因,其发病原因包括免疫因素和非免疫性等多种因素,这些因素最终都造成移植肾的纤维化并引起移植肾功能的丧失,而细胞外基质积聚则是肾纤维化的主要病理基础和特征。 展开更多
关键词 移植排斥反应 肾组织 异性抗体 细胞因子 慢性移植肾肾病 金属蛋白酶组织抑制剂1 转化生长因子β1 细胞外基质积聚
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抑制SSRP1对胶质瘤细胞增殖、化疗敏感性的影响 被引量:1
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作者 陶祥 张文斐 +2 位作者 冀保卫 张戈 陈治标 《中国临床神经外科杂志》 2022年第9期760-764,共5页
目的 探讨结构特异性识别蛋白1(SSRP1)与胶质瘤预后的相关性,以及抑制SSRP1对胶质瘤细胞增殖及化疗敏感性的影响。方法 应用生信分析方法,检索中国胶质瘤数据库CGGA数据集,分析SSRP1表达与胶质瘤预后相关性。体外培养胶质瘤U251、U87细... 目的 探讨结构特异性识别蛋白1(SSRP1)与胶质瘤预后的相关性,以及抑制SSRP1对胶质瘤细胞增殖及化疗敏感性的影响。方法 应用生信分析方法,检索中国胶质瘤数据库CGGA数据集,分析SSRP1表达与胶质瘤预后相关性。体外培养胶质瘤U251、U87细胞,应用CBL0137抑制SSRP1,应用替莫唑胺(TMZ)检测化疗敏感性。应用CCK8法检测细胞增殖,利用免疫印迹法检测MAPK信号通路(p-38、ERK及JNK)表达。结果 生信分析结果显示,胶质瘤SSRP1呈高表达,随胶质瘤级别增加,SSRP1表达明星上调(P<0.05);SSRP1高表达胶质瘤总生存期明显缩短(P<0.05)。抑制SSRP1,明显抑制体外培养U251、U87细胞增殖(P<0.05),增加U251、U87细胞对TMZ化疗敏感性(P<0.05),对U251、U87细胞p-38、ERK及JNK蛋白表达水平无明显影响,但明显降低U251、U87细胞p-38、ERK及JNK蛋白磷酸化水平(P<0.05)。结论 胶质瘤SSRP1呈高表达,与病人不良预后有关;抑制SSRP1,明显抑制胶质瘤细胞增殖,并增加其对TMZ的化疗敏感性,其机制可能与抑制MAPK信号通路有关。 展开更多
关键词 胶质 结构异性识别蛋1(SSRP1) CBL0137 细胞增殖 U251细胞 U87细胞 化疗敏感性 预后
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Hax-1对胶质瘤细胞增殖、迁移和侵袭的作用 被引量:6
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作者 陆正 刘小江 +1 位作者 管诚 管义祥 《中国临床神经外科杂志》 2021年第2期101-105,共5页
目的探讨造血干细胞特异性相关结合蛋白-1(Hax-1)对胶质瘤细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法选择2018年9月至2019年6月手术切除并得到术后病理证实的胶质瘤组织35例和颅脑损伤内减压术切除的正常脑组织35例,采用qRTPCR检测Hax-1 mRNA水... 目的探讨造血干细胞特异性相关结合蛋白-1(Hax-1)对胶质瘤细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法选择2018年9月至2019年6月手术切除并得到术后病理证实的胶质瘤组织35例和颅脑损伤内减压术切除的正常脑组织35例,采用qRTPCR检测Hax-1 mRNA水平;同时检测胶质瘤细胞系(U87、A172、T98及U343)和人星形胶质细胞(NHAs)Hax-1 mRAN水平。使用Lipofectamine 2000法将Hax-1 siRNAs和阴性对照siRNA转染U87细胞构建Hax-1低表达细胞株,将Hax-1高表达质粒和PCDNA3.1空载质粒转染U343细胞构建Hax-1过表达细胞株,使用蛋白印迹法验证转染效果,采用CCK-8法检测细胞增殖,采用Transwell小室实验检测细胞迁移和侵袭,免疫印迹法检测NF-κB信号通路相关蛋白表达水平(NF-κB、CCND1、C-myc、MMP-2、MMP-9)。结果胶质瘤组织Hax-1 mRNA水平明显高于正常脑组织(P<0.05);胶质瘤细胞系(U87、A172、T98及U343)Hax-1 mRNA水平明显高于人星形胶质细胞(P<0.05),其中U87细胞Hax-1 mRNA水平最高,U343细胞最低。U343细胞转染Hax-1过表达质粒后,Hax-1蛋白水平显著增高(P<0.05),细胞增殖、侵袭、迁移能力均明显增强(P<0.05),NF-κB p65及IκBα蛋白磷酸化水平以及CCND1、C-Myc、MMP-2、MMP-9蛋白表达水平明显增高(P<0.05)。U87细胞转染Hax-1 siRNA后Hax-1蛋白水平显著降低(P<0.05),细胞增殖、侵袭、迁移能力均明显降低(P<0.05),NF-κB p65及IκBα蛋白磷酸化水平以及CCND1、CMyc、MMP-2、MMP-9蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。结论胶质瘤组织Hax-1呈高表达,明显促进肿瘤细胞增殖、侵袭和迁移,其机制可能与激活NF-κB信号通路有关。 展开更多
关键词 胶质 Hax-1 造血干细胞异性相关结合蛋白-1 细胞增殖 细胞迁移 细胞侵袭
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脑室内注射CARv3-TEAM-E T细胞用于治疗复发性胶质母细胞瘤
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《中华神经外科疾病研究杂志》 CAS 2024年第2期54-54,共1页
在一项首次由研究人员发起的开放标签临床试验研究中,三名复发性胶质母细胞瘤患者接受了CARv3-TEAM-E T细胞治疗.CARv3-TEAM-E T细胞是一种嵌合抗原受体(CAR)T细胞,通过分泌T细胞结合抗体分子(TEAM),来靶向表皮生长因子受体(EGFR)变体... 在一项首次由研究人员发起的开放标签临床试验研究中,三名复发性胶质母细胞瘤患者接受了CARv3-TEAM-E T细胞治疗.CARv3-TEAM-E T细胞是一种嵌合抗原受体(CAR)T细胞,通过分泌T细胞结合抗体分子(TEAM),来靶向表皮生长因子受体(EGFR)变体Ⅲ肿瘤特异性抗原以及野生型EGFR蛋白. 展开更多
关键词 肿瘤异性抗原 脑室内注射 临床试验研究 抗体分子 复发性胶质细胞 嵌合抗原受体 CAR T细胞
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SENP1参与慢性间歇低氧小胶质细胞极化及神经元损伤机制的研究进展
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作者 汪宏伟 刘松 《医学综述》 2020年第1期1-5,共5页
慢性间歇低氧(CIH)诱导的中枢神经系统(CNS)炎症反应是阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)神经认知功能障碍最重要的病理机制之一。小胶质细胞是维持CNS内环境稳定最重要的免疫反应细胞,不同的极化状态对神经元细胞产生损害或保护作... 慢性间歇低氧(CIH)诱导的中枢神经系统(CNS)炎症反应是阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)神经认知功能障碍最重要的病理机制之一。小胶质细胞是维持CNS内环境稳定最重要的免疫反应细胞,不同的极化状态对神经元细胞产生损害或保护作用,准确调控小胶质细胞极化状态是控制炎症反应的关键,有助于维持神经认知功能正常。小类泛素相关修饰物(SUMO)修饰广泛参与机体蛋白翻译后修饰,SUMO特异性蛋白酶1是一种关键的去SUMO化蛋白酶,两者可能参与小胶质细胞极化状态、CNS炎症反应及神经元损伤或凋亡的调控。因此,深入了解CIH小胶质细胞极化及炎症反应机制,能为防治OSAHS神经认知功能障碍提供新思路。 展开更多
关键词 小类泛素相关修饰物 小类泛素相关修饰物异性蛋白酶1 慢性间歇低氧 小胶质细胞 神经元
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长期ART中HIV-1抗体的水平变化特点及其与HIV-1储存库相关关系的研究
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作者 张晴 高林 +5 位作者 郭晓燕 孜来古丽·米吉提 郭云天 CHEN Wei-wei 焦艳梅 王福生 《传染病信息》 2022年第1期46-50,共5页
目的分析HIV-1感染者在长期抗反转录病毒治疗(antiretroviral therapy,ART)前后血浆中p24抗体和总HIV-1特异性抗体水平变化特点及其与HIV-1储存库关系。方法选取2009年11月—2013年7月于我中心接受ART满5年的27例HIV-1感染者作为研究对... 目的分析HIV-1感染者在长期抗反转录病毒治疗(antiretroviral therapy,ART)前后血浆中p24抗体和总HIV-1特异性抗体水平变化特点及其与HIV-1储存库关系。方法选取2009年11月—2013年7月于我中心接受ART满5年的27例HIV-1感染者作为研究对象,采用荧光素酶免疫吸附试验和酶联免疫吸附试验,分别检测患者接受ART 0、1、3、5年时间点的p24抗体和总HIV-1特异性抗体的水平,同时对其与总HIV-1 DNA和细胞相关RNA(cell-associated RNA,CA-RNA)的水平进行相关性分析。结果在ART 0、1、3、5年时,p24抗体水平分别为2.450(1.910~5.460)、1.460(1.080~2.160)、1.280(1.120~1.800)、1.570(1.090~2.180)LU;总HIV-1特异性抗体水平分别为3.378(3.157~3.710)、3.489(3.237~3.622)、3.446(2.742~3.573)、3.336(2.860~3.566)。p24抗体与总HIV-1 DNA和CA-RNA的水平均呈正相关(r分别为0.407、0.305,P均<0.05);总HIV特异性抗体水平与总HIV-1 DNA和CA-RNA水平没有相关性(r分别为0.155、0.165,P均>0.05)。结论总HIV-1特异性抗体水平在ART期间没有明显变化,且与HIV-1储存库大小没有相关性,p24抗体水平随着ART时间增加呈逐渐降低的趋势,与HIV-1储存库的大小呈正相关,可为HIV-1特异性抗体和HIV-1储存库大小关系的研究提供依据。 展开更多
关键词 HIV-1 HIV-1异性抗体 p24抗体 HIV-1储存库 总HIV-1 DNA 细胞相关RNA 抗反转录病毒治疗 相关性
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多发性硬化症患者抗糖基化自身髓鞘少突胶质细胞糖蛋白抗体水平升高
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作者 Gaertner S. De Graaf K.L. +2 位作者 Greve B. Weissert R. 朱光明 《世界核心医学期刊文摘(神经病学分册)》 2005年第7期39-39,共1页
Antibodies against native glycosylated myelin-oligodendroc- yte-glycoprotein (MOG) were measured by ELISA in patients with multiple scler osis (MS) and controls. Anti-MOG IgM antibodies were elevated during the first ... Antibodies against native glycosylated myelin-oligodendroc- yte-glycoprotein (MOG) were measured by ELISA in patients with multiple scler osis (MS) and controls. Anti-MOG IgM antibodies were elevated during the first demyelinating event.Higher MOG-specific IgG antibodies were found in patients d uring relapses and in secondary chronic progressive MS compared to patients in r emission and healthy controls. Antibodies against native MOG may be a potential biomarker for MS. 展开更多
关键词 多发性硬化症 髓鞘 少突胶质细胞 蛋白抗体 MYELIN IgG GLYCOPROTEIN progressive biomarker 异性
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优化的SD大鼠小胶质细胞原代培养、纯化及采用高内涵细胞成像分析技术进行的细胞鉴定 被引量:4
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作者 刘检 王宇红 +3 位作者 凌佳 刘林 孟盼 杨蕙 《沈阳药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第11期968-973,共6页
目的建立一种优化的大鼠小胶质细胞(microglia,MG)原代培养及纯化方法,采用高内涵细胞成像分析技术(high content analysis,HCA)对其进行细胞鉴定。方法取1 d的新生SD大鼠,解剖显微镜下分离大脑皮质,机械剪碎成1 mm^3组织块,加入质量分... 目的建立一种优化的大鼠小胶质细胞(microglia,MG)原代培养及纯化方法,采用高内涵细胞成像分析技术(high content analysis,HCA)对其进行细胞鉴定。方法取1 d的新生SD大鼠,解剖显微镜下分离大脑皮质,机械剪碎成1 mm^3组织块,加入质量分数为0. 125%的胰蛋白酶和质量分数为0. 1%的胶原酶(体积比为1∶1)消化10 min后进行体外培养,分别观察接种5、7 d后小胶质细胞基本形态结构;采用低速震摇+温和消化+差速贴壁的三联法纯化细胞,分别观察纯化1、3、6 d后小胶质细胞基本形态结构;采用HCA技术对小胶质细胞进行其特异性抗体(ionized calcium binding adapter molecule 1,Iba-1)免疫细胞化学染色鉴定。结果经优化法培养的小胶质细胞,数量多、纯度高、活性好,细胞胞体狭长,突起形状不规则,呈单极、双极、蜘蛛状或其它分枝状,且分别可见静息态与活化态的细胞,并呈现典型的小胶质细胞特征和良好的生长状态;经优化法培养的小胶质细胞,采用HCA进行Iba-1免疫细胞化学染色鉴定,MG纯度质量分数达98%以上。结论建立了一种小胶质细胞原代培养及纯化方法,同时采用HCA技术成功对其进行细胞鉴定,为后续小胶质细胞相关体外研究奠定了良好的实验基础。 展开更多
关键词 小胶质细胞 原代培养 纯化 鉴定 小胶质细胞异性抗体(iba-1) 高内涵细胞成像分析技术(HCA)
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电针对脊髓损伤大鼠星形胶质细胞的影响及机制 被引量:20
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作者 何娟 王忠华 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期253-257,共5页
目的观察电针治疗脊髓损伤大鼠的行为功能及脊髓损伤部位胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和阶段性特异性胚胎抗原-1(SSEA-1)的表达,阐明电针对脊髓损伤后反应性星形胶质细胞增生及分化的影响及其机制。方法将60只SD大鼠随机分为假手术组、模型... 目的观察电针治疗脊髓损伤大鼠的行为功能及脊髓损伤部位胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和阶段性特异性胚胎抗原-1(SSEA-1)的表达,阐明电针对脊髓损伤后反应性星形胶质细胞增生及分化的影响及其机制。方法将60只SD大鼠随机分为假手术组、模型组和电针治疗组,每组20只。分别于脊髓损伤造模后第3、7、14、28天时进行BBB评分(Basso-Beaie-Bresnehan scale),并用免疫组化方法检测大鼠脊髓损伤部位GFAP和SSEA-1变化并与对照组比较。结果电针组与模型组在3d和7d时,GFAP和SSEA-1阳性细胞数有差异(P<0.01),7d时阳性细胞数达到峰值,在14d时电针组和模型组的阳性细胞数有差异(P<0.05),而在28d时,电针组和模型组GFAP阳性细胞无明显差异(P>0.05),但SSEA-1阳性细胞有统计学差异(P<0.05)。结论电针治疗能够增加脊髓损伤模型大鼠星形胶质细胞逆分化,激发星形胶质细胞的干细胞潜能,从而促进损伤后脊髓功能的恢复;损伤后的脊髓GFAP和SSEA-1阳性表达的高峰期都在7d,提示脊髓损伤后7d内可能为电针治疗介入的黄金期。 展开更多
关键词 大鼠 脊髓损伤 星形胶质细胞 阶段性异性胚胎抗原-1(SSEA-1) 胶质纤维酸性蛋白(GFAP) 电针
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口蹄疫病毒VP1基因C末端串连表达及其抗体ELISA方法的初步建立 被引量:1
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作者 彭贵青 陈焕春 +3 位作者 钱平 李祥敏 洪琦 顾贫 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期670-674,共5页
口蹄疫病毒主要免疫原性基因VP1的B细胞和T细胞抗原表位位于其C末端,参照Taiwanse97(AJ294928)设计了1对特异性引物,扩增出VP1基因C末端。序列分析表明:其C末端长285bp,编码74个氨基酸,与O/HKN/12/91、O/PEN/TAW/99核苷酸和氨基酸同源... 口蹄疫病毒主要免疫原性基因VP1的B细胞和T细胞抗原表位位于其C末端,参照Taiwanse97(AJ294928)设计了1对特异性引物,扩增出VP1基因C末端。序列分析表明:其C末端长285bp,编码74个氨基酸,与O/HKN/12/91、O/PEN/TAW/99核苷酸和氨基酸同源性分别为95%、93%和96%、93%;利用同尾酶Xho 、Sal 将VP1基因C末端串连起来;再将单拷贝和双拷贝C末端基因插入到原核表达载体pGEX-KG后,转化BL21(DE3),在IPTG诱导下获得表达,经Westernblot检测证实表达产物具有活性。以表达产物包被ELISA板,初步建立了特异、敏感的ELISA诊断方法。同时用表达产物免疫Balb/c小鼠,能产生一定的抗O型口蹄疫病毒的抗体。 展开更多
关键词 抗体 表达产物 末端 ELISA方法 VP1基因 T细胞抗原 表位 口蹄疫病毒 O型口蹄疫 异性引物
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抗入肝细胞癌单克隆抗体的产生及其相应抗原P60的免疫组化定位研究 被引量:6
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作者 陈志南 刘彦仿 杨继震 《单克隆抗体通讯》 CSCD 1989年第2期33-36,共4页
本文用肝癌手术标本,制备细胞悬液,免疫BALB/c小鼠,融合产生杂交瘤,用ABC染色法筛选单克隆抗体,获得特异性较好的杂交瘤-HAb_(18),抗体亚类为小鼠IgG1,抗原经亲和层析获得,分子量为60KD,过碘酸-Schiffs染色阴性,脂蛋白电泳阴性,PI:8.2... 本文用肝癌手术标本,制备细胞悬液,免疫BALB/c小鼠,融合产生杂交瘤,用ABC染色法筛选单克隆抗体,获得特异性较好的杂交瘤-HAb_(18),抗体亚类为小鼠IgG1,抗原经亲和层析获得,分子量为60KD,过碘酸-Schiffs染色阴性,脂蛋白电泳阴性,PI:8.2。肝癌免疫组化染色阳性率为75%。 展开更多
关键词 单克隆抗体 定位研究 细胞 抗原 BALB/c小鼠 ABC染色法 免疫组化染色 鼠IgG1 脂蛋白电泳 细胞悬液 抗体亚类 亲和层析 60KD 杂交瘤 异性 分子量 过碘酸 阳性率 肝癌 阴性
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