背景:以往研究表明,骨髓干细胞是子宫内膜细胞的子宫外来源,参与损伤后子宫内膜的再生功能重建。目的:探讨小鼠骨髓间充质干细胞在体外能否向子宫内膜上皮细胞方向分化。方法:将第2代骨髓间充质干细胞、子宫内膜间质细胞分别进行以下4...背景:以往研究表明,骨髓干细胞是子宫内膜细胞的子宫外来源,参与损伤后子宫内膜的再生功能重建。目的:探讨小鼠骨髓间充质干细胞在体外能否向子宫内膜上皮细胞方向分化。方法:将第2代骨髓间充质干细胞、子宫内膜间质细胞分别进行以下4组不同处理:1第1组为单纯小鼠骨髓间充质干细胞,用含体积分数为2%胎牛血清的DMEM/F12培养液培养;2第2组为单纯小鼠骨髓间充质干细胞,用含体积分数为2%胎牛血清、10-7 mol/Lβ-雌二醇、10μg/L表皮生长因子的DMEM/F12培养液培养;3第3组为用Transwell小室进行骨髓间充质干细胞与子宫内膜间质细胞共培养,用含体积分数为2%胎牛血清的DMEM/F12培养液培养;4第4组为用Transwell小室进行骨髓间充质干细胞与子宫内膜间质细胞共培养,用含体积分数为2%胎牛血清、10-7 mol/Lβ-雌二醇、10μg/L表皮生长因子的DMEM/F12培养液培养。上述各组处理第5天,收集培养板底部骨髓间充质干细胞,RT-PCR检测上皮细胞标记(CK7,CK18,CK19,EMA)的基因表达,免疫荧光化学方法检测角蛋白表达。第3组细胞共培养后的第1,3,5,7天,RT-PCR检测上皮细胞标记(CK7,CK18,CK19,EMA)的基因表达。结果与结论:1CK7 m RNA表达在各组中依次上升,并在第4组中达到最高,各组之间经比较差异有显著性意义。第2,3,4组CK18,CK19 m RNA的表达均较第1组显著升高,且第2,3,4组间比较差异无显著性意义。EMA m RNA在第2,4组的表达比第1,3组升高,但组间比较差异也无显著性意义。2第4组角蛋白呈强阳性表达,第3组呈弱阳性表达,第1,2组呈阴性表达。3随着时间的推移,CK7 m RNA表达量不断上升,且第5,7天的表达量显著高于第1,3天,不同时间经比较差异有显著性意义。CK18,CK19,EMA m RNA在不同时间的表达量差异无显著性意义。4实验结果表明,小鼠骨髓间充质干细胞在一定条件下可向子宫内膜上皮细胞方向分化。外源性因素和内源性间质细胞分泌因子联合作用下,其促进小鼠骨髓间充质干细胞向子宫内膜上皮细胞方向分化的作用最显著。展开更多
文摘背景:以往研究表明,骨髓干细胞是子宫内膜细胞的子宫外来源,参与损伤后子宫内膜的再生功能重建。目的:探讨小鼠骨髓间充质干细胞在体外能否向子宫内膜上皮细胞方向分化。方法:将第2代骨髓间充质干细胞、子宫内膜间质细胞分别进行以下4组不同处理:1第1组为单纯小鼠骨髓间充质干细胞,用含体积分数为2%胎牛血清的DMEM/F12培养液培养;2第2组为单纯小鼠骨髓间充质干细胞,用含体积分数为2%胎牛血清、10-7 mol/Lβ-雌二醇、10μg/L表皮生长因子的DMEM/F12培养液培养;3第3组为用Transwell小室进行骨髓间充质干细胞与子宫内膜间质细胞共培养,用含体积分数为2%胎牛血清的DMEM/F12培养液培养;4第4组为用Transwell小室进行骨髓间充质干细胞与子宫内膜间质细胞共培养,用含体积分数为2%胎牛血清、10-7 mol/Lβ-雌二醇、10μg/L表皮生长因子的DMEM/F12培养液培养。上述各组处理第5天,收集培养板底部骨髓间充质干细胞,RT-PCR检测上皮细胞标记(CK7,CK18,CK19,EMA)的基因表达,免疫荧光化学方法检测角蛋白表达。第3组细胞共培养后的第1,3,5,7天,RT-PCR检测上皮细胞标记(CK7,CK18,CK19,EMA)的基因表达。结果与结论:1CK7 m RNA表达在各组中依次上升,并在第4组中达到最高,各组之间经比较差异有显著性意义。第2,3,4组CK18,CK19 m RNA的表达均较第1组显著升高,且第2,3,4组间比较差异无显著性意义。EMA m RNA在第2,4组的表达比第1,3组升高,但组间比较差异也无显著性意义。2第4组角蛋白呈强阳性表达,第3组呈弱阳性表达,第1,2组呈阴性表达。3随着时间的推移,CK7 m RNA表达量不断上升,且第5,7天的表达量显著高于第1,3天,不同时间经比较差异有显著性意义。CK18,CK19,EMA m RNA在不同时间的表达量差异无显著性意义。4实验结果表明,小鼠骨髓间充质干细胞在一定条件下可向子宫内膜上皮细胞方向分化。外源性因素和内源性间质细胞分泌因子联合作用下,其促进小鼠骨髓间充质干细胞向子宫内膜上皮细胞方向分化的作用最显著。
