目的：体外观察磁刺激对原代神经元迁移的影响。方法原代培养 SD 大鼠皮质神经元，分为正常组（control，C 组）、假刺激组（shame，S 组）、40％最大输出强度组（40％ of maximum intensity of stimulation，0．4T 组）、60％最大输出...目的：体外观察磁刺激对原代神经元迁移的影响。方法原代培养 SD 大鼠皮质神经元，分为正常组（control，C 组）、假刺激组（shame，S 组）、40％最大输出强度组（40％ of maximum intensity of stimulation，0．4T 组）、60％最大输出强度组（60％ of maximum intensity of stimulation，0．6T 组）。各组细胞接种于 transwell 小室内，自细胞接种后第2～6天接受磁刺激，连续刺激5 d，各组细胞于第6天同一时间染色，将 transwell 小室倒置，光学显微镜下计数。结果C 组有（2．6±0．548）个、S 组有（3．0±0．707）个细胞迁移，2组比较差异无统计学意义（P ＞0．05）；0．4T 组有（17．40±1．673）个、0．6T 组有（18．40±1．572）个细胞迁移，迁移的数量较 C 组及 S 组明显增多（P ＜0．05）。结论磁刺激可促进体外原代神经元迁移。展开更多
背景:神经元的培养和细胞转染技术是在体外研究神经元生长发育及生理病理机制的重要手段,但目前原代培养的皮质神经元往往纯度不高、转染效率不高。目的:建立一种简单、高效、稳定的原代神经元培养及转染方法。方法:无菌条件下分离新生1...背景:神经元的培养和细胞转染技术是在体外研究神经元生长发育及生理病理机制的重要手段,但目前原代培养的皮质神经元往往纯度不高、转染效率不高。目的:建立一种简单、高效、稳定的原代神经元培养及转染方法。方法:无菌条件下分离新生1 d SD大鼠大脑皮质,经0.25%的胰蛋白酶消化后离心,制备成单细胞悬液,以5×10~9L^(-1)细胞浓度接种至含神经元专用培养基的24孔细胞培养板进行原代培养,并于倒置显微镜下观察神经元形态的变化,使用神经元特异性标志物Tuj1和MAP2对培养的细胞进行鉴定;利用人工脂质体转染神经元,观察神经元转染效率。结果与结论:(1)体外培养的原代神经元具有较高的纯度,在培养第7天神经元特征明显,突起相互接触形成神经元网络,并表达神经元特异性标志物Tuj1与MAP2;利用人工脂质体转染神经元,转染效率较高;(2)采用该方法进行原代神经元培养,能够获得稳定的、高纯度的原代神经元;人工脂质体亦可高效率转染原代神经元。展开更多
文摘目的：体外观察磁刺激对原代神经元迁移的影响。方法原代培养 SD 大鼠皮质神经元，分为正常组（control，C 组）、假刺激组（shame，S 组）、40％最大输出强度组（40％ of maximum intensity of stimulation，0．4T 组）、60％最大输出强度组（60％ of maximum intensity of stimulation，0．6T 组）。各组细胞接种于 transwell 小室内，自细胞接种后第2～6天接受磁刺激，连续刺激5 d，各组细胞于第6天同一时间染色，将 transwell 小室倒置，光学显微镜下计数。结果C 组有（2．6±0．548）个、S 组有（3．0±0．707）个细胞迁移，2组比较差异无统计学意义（P ＞0．05）；0．4T 组有（17．40±1．673）个、0．6T 组有（18．40±1．572）个细胞迁移，迁移的数量较 C 组及 S 组明显增多（P ＜0．05）。结论磁刺激可促进体外原代神经元迁移。
文摘背景:神经元的培养和细胞转染技术是在体外研究神经元生长发育及生理病理机制的重要手段,但目前原代培养的皮质神经元往往纯度不高、转染效率不高。目的:建立一种简单、高效、稳定的原代神经元培养及转染方法。方法:无菌条件下分离新生1 d SD大鼠大脑皮质,经0.25%的胰蛋白酶消化后离心,制备成单细胞悬液,以5×10~9L^(-1)细胞浓度接种至含神经元专用培养基的24孔细胞培养板进行原代培养,并于倒置显微镜下观察神经元形态的变化,使用神经元特异性标志物Tuj1和MAP2对培养的细胞进行鉴定;利用人工脂质体转染神经元,观察神经元转染效率。结果与结论:(1)体外培养的原代神经元具有较高的纯度,在培养第7天神经元特征明显,突起相互接触形成神经元网络,并表达神经元特异性标志物Tuj1与MAP2;利用人工脂质体转染神经元,转染效率较高;(2)采用该方法进行原代神经元培养,能够获得稳定的、高纯度的原代神经元;人工脂质体亦可高效率转染原代神经元。
