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冰片对兔角膜上皮细胞的损伤作用 被引量:1
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作者 修春 伍海涛 +5 位作者 王奇 梁小雯 廖南英 魏秀芳 宓穗卿 王宁生 《广州中医药大学学报》 CAS 2015年第5期903-907,共5页
【目的】观察冰片对兔角膜上皮细胞的损伤作用。【方法】以浓度分别为100、200、400μg/m L的冰片作用于兔角膜上皮细胞,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞活性,Annexin V-异硫氰酸荧光素/碘化丙啶(Annexin V-FITC/PI)双染法流式细胞... 【目的】观察冰片对兔角膜上皮细胞的损伤作用。【方法】以浓度分别为100、200、400μg/m L的冰片作用于兔角膜上皮细胞,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞活性,Annexin V-异硫氰酸荧光素/碘化丙啶(Annexin V-FITC/PI)双染法流式细胞仪检测细胞凋亡率;Real-time PCR法检测细胞凋亡相关基因Caspase-3 m RNA的表达。【结果】不同浓度的冰片均可抑制兔角膜上皮细胞的活性;与正常对照组比较,冰片组可增加兔角膜上皮细胞的凋亡率,增强Caspase-3 m RNA的表达(P<0.05或P<0.01)。【结论】冰片能抑制兔角膜上皮细胞的生长,诱导细胞发生凋亡,其机制与增强凋亡相关基因Caspase-3m RNA的表达有关。 展开更多
关键词 冰片/药理学 兔角膜上皮细胞 细胞凋亡 细胞培养 基因表达调控
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Baicalein对兔角膜上皮细胞的毒性分析 被引量:1
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作者 张黎 胡燕华 《眼科研究》 CSCD 北大核心 2007年第7期537-539,共3页
目的探讨12-LOX选择性抑制剂baicalein的药物毒性,为baicalein的临床应用提供参考。方法体外原代培养兔角膜上皮细胞,加入30μmol/L baicalein继续培养2、4、6d,MTT法测定细胞抑制率。制作兔角膜上皮缺损模型,同浓度baicalein制成滴眼... 目的探讨12-LOX选择性抑制剂baicalein的药物毒性,为baicalein的临床应用提供参考。方法体外原代培养兔角膜上皮细胞,加入30μmol/L baicalein继续培养2、4、6d,MTT法测定细胞抑制率。制作兔角膜上皮缺损模型,同浓度baicalein制成滴眼药局部应用,观察其对在体兔角膜上皮增生和移行的影响。结果30μmol/L baicalein对体外原代培养兔角膜上皮细胞作用2d的细胞抑制率为2.6%,作用4d、6d对细胞生长没有明显的抑制作用。缺损闭合实验显示此浓度baicalein对在体兔角膜上皮细胞的增生和移行无任何影响。结论30μmol/L baicalein安全,对兔角膜上皮细胞的生长无影响。 展开更多
关键词 MTT法 毒性 兔角膜上皮细胞 BAICALEIN
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直流电场对培养兔角膜上皮细胞形态及活力的影响
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作者 杨小丽 杨桢 易美超 《川北医学院学报》 CAS 2014年第2期167-169,共3页
目的:观察直流电场对体外培养兔角膜上皮细胞形态及活力的影响。方法:采用组织块培养法培养兔角膜上皮细胞并进行传代培养,将第4代角膜上皮细胞置于强度为8 V/cm的直流电场中暴露4 h,停止电场作用后继续培养12 h;未置于电场中的角膜上... 目的:观察直流电场对体外培养兔角膜上皮细胞形态及活力的影响。方法:采用组织块培养法培养兔角膜上皮细胞并进行传代培养,将第4代角膜上皮细胞置于强度为8 V/cm的直流电场中暴露4 h,停止电场作用后继续培养12 h;未置于电场中的角膜上皮细胞作为对照。显微成像系统观察细胞形态改变,各时间点培养的细胞行台盼蓝染色计数,比较各组活细胞率。结果:直流电场作用后大部分角膜上皮细胞变长,并垂直于场线方向排列,停止电场暴露后,大多数细胞恢复正常形态及分布。实验组和对照组活细胞率差异无统计学意义(P>0.05)。结论:短时间直流电场作用对培养的兔角膜上皮细胞的形态及活力无明显影响。 展开更多
关键词 电场 兔角膜上皮细胞 细胞形态 细胞活力
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兔角膜上皮细胞培养方法的建立及^(60)Coγ射线照射后的形态定量学研究
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作者 高亚兵 杨瑞彪 +4 位作者 彭瑞云 熊呈琦 杨红 崔玉芳 王德文 《中国体视学与图像分析》 2001年第3期141-144,共4页
建立角膜上皮细胞培养的方法,并观察电离辐射照射后的形态计量改变。用角膜组织块培养原代细胞并传至3代,以10、20、30和50Gy ^(60)Coγ射线对离体细胞样品进行照射,观察照后不同时间其形态学改变,并用图像分析仪对细胞核、细胞浆... 建立角膜上皮细胞培养的方法,并观察电离辐射照射后的形态计量改变。用角膜组织块培养原代细胞并传至3代,以10、20、30和50Gy ^(60)Coγ射线对离体细胞样品进行照射,观察照后不同时间其形态学改变,并用图像分析仪对细胞核、细胞浆的面积及核浆比进行定量分析。发现正常的角膜上皮细胞呈多角形或棱形,胞核位于细胞正中或偏中;照射后细胞胞核、胞浆明显增大,胞质内可见空泡,界限不清,核空泡化,核膜破裂,核浓缩、碎裂等。形态计量结果证明照后细胞核与细胞浆明显增大(p<0.01),其核浆比随照后时间的延长而减小(p<0.01),均以20~30Gy组最为明显,表明照射引起胞浆的改变(肿胀)比核更明显。本研究结果为进一步研究角膜上皮细胞的照射效应提供了基础。 展开更多
关键词 兔角膜上皮细胞 体外培养 照射 图像分析
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兔角膜上皮细胞短时暴露试验的影响因素
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作者 石莹 宋瑞霞 +1 位作者 阮鸿洁 张宏伟 《环境卫生学杂志》 2019年第5期489-493,共5页
目的观察兔角膜上皮细胞短时暴露试验(short-term exposure test,STE test)的影响因素。方法兔角膜上皮细胞分别按3×10^3和6×10^3细胞/孔的初始密度接种,苯扎氯胺等12种化学物质分别以5%和0.05%剂量对细胞染毒5 min后,采用MT... 目的观察兔角膜上皮细胞短时暴露试验(short-term exposure test,STE test)的影响因素。方法兔角膜上皮细胞分别按3×10^3和6×10^3细胞/孔的初始密度接种,苯扎氯胺等12种化学物质分别以5%和0.05%剂量对细胞染毒5 min后,采用MTT法和CCK-8法显色,计算细胞存活率,采用传统法和STE积分法对上述化学物质的眼刺激性进行评价。结果以3×10^3细胞/孔和6×10^3细胞/孔两种密度接种的细胞,染毒后细胞存活率结果相关性显著。MTT和CCK-8两种显色法测定的细胞存活率结果相关性显著。传统法和STE积分法两种判定标准对重度眼刺激性物质和轻微眼刺激性物质分级判断结果一致。结论细胞初始接种密度、不同显色方法和结果判定标准是兔角膜上皮细胞短时暴露试验结果的影响因素,可采用3×10^3细胞/孔或6×10^3细胞/孔作为试验初始接种密度,采用CCK-8法测定细胞活性,STE积分法判定受试物对眼的刺激强度。 展开更多
关键词 眼刺激性 兔角膜上皮细胞 显色法
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兔角膜上皮细胞短期暴露实验替代兔眼刺激实验的可行性研究 被引量:7
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作者 李向辉 邱璐 邱知红 《药学服务与研究》 CAS CSCD 2009年第3期182-185,共4页
目的:探讨用兔角膜上皮细胞(SIRC)模型对眼用制剂包装材料的浸提液进行短时暴露(STE)实验,以替代动物眼刺激实验的可行性。方法:在眼用制剂包装材料的浸提液中加入不同浓度的阳性物质,同时进行STE实验和兔眼刺激实验,比较两种实验分级... 目的:探讨用兔角膜上皮细胞(SIRC)模型对眼用制剂包装材料的浸提液进行短时暴露(STE)实验,以替代动物眼刺激实验的可行性。方法:在眼用制剂包装材料的浸提液中加入不同浓度的阳性物质,同时进行STE实验和兔眼刺激实验,比较两种实验分级的一致程度。结果:两种方法对不同浓度的阳性浸提液进行实验分级的一致程度为78.6%,统计学分析证明两种方法具有相当的一致性。以动物实验的分级为标准,STE实验的灵敏度和特异性分别为100%和80%,假阳性率为20%,假阴性率为0%。结论:SIRC的STE眼刺激实验有潜力作为眼用制剂包装材料眼刺激性实验的替代方法。 展开更多
关键词 兔角膜上皮细胞 眼刺激实验 Draize实验 包装材料
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人羊膜上皮细胞混悬液治疗兔急性角膜碱烧伤的实验研究 被引量:2
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作者 张艳艳 刘红玲 +1 位作者 张红 傅少颖 《国际眼科杂志》 CAS 2017年第10期1823-1829,共7页
目的:结合体外细胞实验和在体动物实验研究羊膜上皮细胞(amnion epithelial cell,AEC)混悬液对兔角膜上皮细胞(cornea epithelial cell,CEC)生物学行为的影响及对急性角膜碱烧伤的治疗作用。方法:细胞实验:实验组将AEC及CEC于Transwell... 目的:结合体外细胞实验和在体动物实验研究羊膜上皮细胞(amnion epithelial cell,AEC)混悬液对兔角膜上皮细胞(cornea epithelial cell,CEC)生物学行为的影响及对急性角膜碱烧伤的治疗作用。方法:细胞实验:实验组将AEC及CEC于Transwell小室中培养,上室为AEC混悬液,下室接种CEC,对照组上室仅为培养基,于不同时间点行CCK-8法检测CEC的增殖活性;免疫细胞化学法检测PCNA表达;细胞划痕法观察细胞迁移能力。动物实验:采用改良的兔角膜碱烧伤模型制备方法:将10mm直径环钻轻置于角膜中央,向环钻中央加入NaO H溶液,1min后去环钻迅速冲洗兔眼,随机分三组(空白对照、AEC混悬液滴眼液治疗组、结膜下注射治疗组),于术后每周行裂隙灯显微镜及荧光素钠染色观察角膜情况。第28d摘除眼球并固定行HE染色,免疫组织化学法检测角膜VEGF、mcp-1的表达。结果:CCK-8法示AEC混悬液作用后的CEC增殖活性增强(P<0.05);免疫细胞化学法显示PCNA阳性表达增强(P<0.05);划痕试验示AEC干预后CEC迁移加快。动物实验表明,滴眼液组和结膜下注射组的角膜恢复时间明显缩短,CNV面积均少于对照组(P<0.05),滴眼液组和结膜下注射组之间差异无统计学意义(P>0.05);HE染色示治疗组角膜组织炎症细胞浸润更少,组织排列更规则;免疫组化显示组织中VEGF、mcp-1表达更低(P<0.05),而滴眼液组和结膜下注射组之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论:AEC混悬液促进CEC增殖和迁移,影响CEC生物学行为变化。经AEC混悬液点眼及结膜下注射治疗兔眼碱烧伤后角膜修复加快,且两种方法抑制炎症反应及CNV形成,有望成为治疗急性角膜碱烧伤的新方法。 展开更多
关键词 羊膜上皮细胞混悬液 兔角膜上皮细胞 角膜 烧伤 治疗
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兔角膜缘上皮细胞在体外壳聚糖共混膜上的培养及生物学鉴定 被引量:5
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作者 丁勇 徐锦堂 +4 位作者 陈建苏 陈剑 吴春云 张志雄 周长忍 《暨南大学学报(自然科学与医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期205-209,共5页
目的:探讨壳聚糖-胶原-硫酸软骨素共混膜作为兔角膜缘上皮细胞体外培养载体的可行性。方法:采用消化培养法,用特殊培养液在壳聚糖-胶原-硫酸软骨素共混膜上培养兔角膜缘上皮细胞,第7d应用免疫组化方法对培养细胞作生物学鉴别并在扫描电... 目的:探讨壳聚糖-胶原-硫酸软骨素共混膜作为兔角膜缘上皮细胞体外培养载体的可行性。方法:采用消化培养法,用特殊培养液在壳聚糖-胶原-硫酸软骨素共混膜上培养兔角膜缘上皮细胞,第7d应用免疫组化方法对培养细胞作生物学鉴别并在扫描电子显微镜下观察细胞形态。结果:上皮细胞AE1/AE5单克隆抗体免疫组化阳性,培养第7d的上皮细胞有多种细胞形态,细胞胞体饱满,相互通过突起连接,表面可见微绒毛。结论:兔角膜缘上皮细胞可在壳聚糖-胶原-硫酸软骨素共混膜上生长,并具有分裂增殖能力。 展开更多
关键词 壳聚糖共混膜 角膜上皮细胞 体外培养 生物学鉴别
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内皮素的角膜上皮再生促进作用
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作者 李平 《国外医学情报》 1995年第9期17-17,共1页
内皮素(Endothelin)是由柳泽等人在猪动脉内皮细胞培养上清液中发现的具有较强血管收缩作用的肽。根据其后的研究已明确内皮素包括内皮素-1、内皮素-2、内皮素-3三种亚型。最近发现此种肽不仅具有血管收缩作用,还有多种生理作用。本文... 内皮素(Endothelin)是由柳泽等人在猪动脉内皮细胞培养上清液中发现的具有较强血管收缩作用的肽。根据其后的研究已明确内皮素包括内皮素-1、内皮素-2、内皮素-3三种亚型。最近发现此种肽不仅具有血管收缩作用,还有多种生理作用。本文将就内皮素的促角膜上皮细胞增殖作用及在泪液中的生理学意义加以论述。 展开更多
关键词 内皮素 兔角膜上皮细胞 血管收缩作用 生理作用 增殖作用 泪液 上清液 内皮细胞培养 角膜上皮缺损 研究人员
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化妆品及原料眼刺激性STE法评价 被引量:2
10
作者 石莹 阮鸿洁 +2 位作者 张宏伟 王超 宋瑞霞 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期745-748,共4页
目的探讨兔角膜上皮细胞体外短时暴露试验方法(STE)用于化妆品原料及化妆品产品动物眼刺激试验替代的可行性及其适用范围。方法选择经济合作与发展组织(OECD)数据库中能涵盖无刺激性到重度眼刺激性的18种代表性化学物质以及20种市售化... 目的探讨兔角膜上皮细胞体外短时暴露试验方法(STE)用于化妆品原料及化妆品产品动物眼刺激试验替代的可行性及其适用范围。方法选择经济合作与发展组织(OECD)数据库中能涵盖无刺激性到重度眼刺激性的18种代表性化学物质以及20种市售化妆品产品,同时进行STE试验和兔眼刺激试验,通过Kappa分析比较2种试验方法结果的一致性。结果对于化妆品原料,经Kappa一致性检验,k=0.826,2种试验结果几乎完全一致(0.81~1.00)。对于化妆品产品,经Kappa一致性检验,k=0.370,2种方法分级结果一致性一般(0.21~0.40)。对于清洁类产品,经Kappa一致性检验,k=–0.333,2种方法分级结果一致性极低(<0.20),对于护肤类产品,k=0.796,2种方法的分级结果有高度的一致性(0.61~0.80)。结论STE试验适合于预测化妆品原料眼刺激性的分级标识。对于化妆品产品来说,面膜、眼霜和护发素等护肤类产品,预测效果好;清洁类产品和染发剂,假阳性率高,不太适用。 展开更多
关键词 眼刺激性 兔角膜上皮细胞 体外短时暴露试验 眼刺激试验
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