目的探讨川陈皮素(Nob)通过调节受体相互作用蛋白激酶(RIP)1-RIP3-下游底物混合谱系激酶结构域样假激酶(MLKL)通路介导的坏死性凋亡减轻慢性肾衰竭(CRF)大鼠肾纤维化的作用机制。方法将大鼠随机分为对照组、CRF组、Nob组、RIP1特异性抑...目的探讨川陈皮素(Nob)通过调节受体相互作用蛋白激酶(RIP)1-RIP3-下游底物混合谱系激酶结构域样假激酶(MLKL)通路介导的坏死性凋亡减轻慢性肾衰竭(CRF)大鼠肾纤维化的作用机制。方法将大鼠随机分为对照组、CRF组、Nob组、RIP1特异性抑制剂-坏死素(Nec)-1组、RIP3特异性抑制剂(GSK872)组。采用5/6肾切除术构建大鼠CRF模型,全自动生化分析仪检测24 h尿蛋白(UTP)、血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)水平,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β、IL-6水平,苏木素-伊红(HE)染色和Masson染色观察肾脏组织病理和纤维化情况,免疫组化观察Ⅰ型胶原(Col-Ⅰ)、RIP1表达,Western印迹检测肾脏组织各蛋白表达。结果相比于对照组,CRF组精神和食欲不振,肾脏组织出现肾小管间质损伤、嘌呤结晶、胶原沉积,24 h UTP、Scr、BUN、TNF-α、IL-1β、IL-6水平、胶原容积分数(CVF)、α-平肌肌动蛋白(SMA)、Col-Ⅰ、Col-Ⅲ、RIP1、RIP3、p-MLKL/MLKL表达明显升高(P<0.05);相比于CRF组,Nob组、Nec-1组、GSK872组精神、饮食状况好转,肾小管间质损伤减轻,嘌呤结晶、胶原沉积减少,24 h UTP、Scr、BUN、TNF-α、IL-1β、IL-6水平、CVF、α-SMA、Col-Ⅰ、Col-Ⅲ、RIP1、RIP3、p-MLKL/MLKL表达明显降低,其中Nob组改善最为显著(P<0.05)。结论Nob能改善CRF大鼠肾纤维化,其作用机制可能与抑制RIP1-RIP3-MLKL通路介导的坏死性凋亡有关。展开更多
文摘目的探讨川陈皮素(Nob)通过调节受体相互作用蛋白激酶(RIP)1-RIP3-下游底物混合谱系激酶结构域样假激酶(MLKL)通路介导的坏死性凋亡减轻慢性肾衰竭(CRF)大鼠肾纤维化的作用机制。方法将大鼠随机分为对照组、CRF组、Nob组、RIP1特异性抑制剂-坏死素(Nec)-1组、RIP3特异性抑制剂(GSK872)组。采用5/6肾切除术构建大鼠CRF模型,全自动生化分析仪检测24 h尿蛋白(UTP)、血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)水平,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β、IL-6水平,苏木素-伊红(HE)染色和Masson染色观察肾脏组织病理和纤维化情况,免疫组化观察Ⅰ型胶原(Col-Ⅰ)、RIP1表达,Western印迹检测肾脏组织各蛋白表达。结果相比于对照组,CRF组精神和食欲不振,肾脏组织出现肾小管间质损伤、嘌呤结晶、胶原沉积,24 h UTP、Scr、BUN、TNF-α、IL-1β、IL-6水平、胶原容积分数(CVF)、α-平肌肌动蛋白(SMA)、Col-Ⅰ、Col-Ⅲ、RIP1、RIP3、p-MLKL/MLKL表达明显升高(P<0.05);相比于CRF组,Nob组、Nec-1组、GSK872组精神、饮食状况好转,肾小管间质损伤减轻,嘌呤结晶、胶原沉积减少,24 h UTP、Scr、BUN、TNF-α、IL-1β、IL-6水平、CVF、α-SMA、Col-Ⅰ、Col-Ⅲ、RIP1、RIP3、p-MLKL/MLKL表达明显降低,其中Nob组改善最为显著(P<0.05)。结论Nob能改善CRF大鼠肾纤维化,其作用机制可能与抑制RIP1-RIP3-MLKL通路介导的坏死性凋亡有关。
文摘坏死性凋亡(Necroptosis)在炎症性、免疫性和神经退行性等疾病的发病机制中起着重要作用,参与了慢性肾脏病(CKD)的发生发展,但其明确的分子机制还没有被完全阐明。热休克蛋白90 (HSP90)作为一种重要的分子伴侣,底物蛋白种类繁多,广泛参与诸多生命活动,在维持细胞内蛋白质稳态方面起到关键的调节作用。随着研究的深入,研究者发现坏死性凋亡途径中的核心组成部分受体相互作用蛋白1 (RIP1)、受体相互作用蛋白3(RIP3)和混合谱系激酶结构域样蛋白(MLKL)均受到热休克蛋白90的调控。而天然产物Kongensin A (KA)是一种热休克蛋白90抑制剂,热休克蛋白90受到抑制后进而阻断了坏死性凋亡途径。进一步研究坏死性凋亡途径及其对慢性肾脏病的影响,必将为慢性肾脏病的防治提供新的靶点。
