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苦参碱通过调控miR-125b-5p/STAT3途径抑制人脐静脉内皮细胞增殖
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作者 王杏 朱慧明 +2 位作者 马欢 王超 张会欣 《中国免疫学杂志》 北大核心 2025年第3期556-560,共5页
目的:研究苦参碱对TNF-α诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖的影响,探讨其机制是否与调控miR-125b-5p和STAT3表达有关。方法:TNF-α诱导建立HUVEC增殖模型,苦参碱作用后,实时荧光定量PCR检测miR-125b-5p水平,实时荧光定量PCR和免疫印... 目的:研究苦参碱对TNF-α诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖的影响,探讨其机制是否与调控miR-125b-5p和STAT3表达有关。方法:TNF-α诱导建立HUVEC增殖模型,苦参碱作用后,实时荧光定量PCR检测miR-125b-5p水平,实时荧光定量PCR和免疫印迹法检测增殖细胞核抗原(PCNA)、细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、基质金属蛋白酶2(MMP2)、MMP9、STAT3水平。双荧光素酶报告基因实验验证miR-125b-5p与STAT3的靶向关系。结果:苦参碱能抑制TNF-α诱导的HUVEC增殖(P<0.05),降低PCNA、CyclinD1、MMP2、MMP9、STAT3表达(P<0.05),提高miR-125b-5p表达(P<0.05);miR-125b-5p过表达可降低细胞增殖、PCNA、CyclinD1、MMP2、MMP9表达(P<0.05);miR-125b-5p在HUVEC中靶向负调控STAT3表达,抑制miR-125b-5p表达可逆转苦参碱对TNF-α诱导的细胞增殖及PCNA、CyclinD1、MMP2、MMP9、STAT3表达的影响。结论:苦参碱可抑制TNF-α诱导的HUVEC增殖,与调控miR-125b-5p/STAT3途径有关。 展开更多
关键词 苦参碱 人脐静脉内皮细胞 增殖 miR-125b-5p STAT3
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TUG1对氧糖剥夺/复氧损伤后人脐静脉内皮细胞生物学行为的影响
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作者 李斐 张新元 +2 位作者 江洪祥 张惠凯 陈谦学 《医学研究杂志》 2025年第1期31-36,共6页
目的 探讨牛磺酸上调基因1(taurine-upregulated gene 1,TUG1)对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell,HUVEC)在氧糖剥夺/复氧(oxygen-glucose deprivation/reoxygenation,OGD/R)损伤后凋亡、增殖、迁移等生物学功... 目的 探讨牛磺酸上调基因1(taurine-upregulated gene 1,TUG1)对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell,HUVEC)在氧糖剥夺/复氧(oxygen-glucose deprivation/reoxygenation,OGD/R)损伤后凋亡、增殖、迁移等生物学功能的影响。方法 OGD/R处理HUVEC建立OGD/R损伤的细胞模型,分别转染沉默TUG1的小干扰RNA(small interfering RNA-TUG1,si-TUG1,si-TUG1)及其空白对照(si-NC),将细胞分为对照组,OGD/R组、OGD/R+si-NC组和OGD/R+si-TUG1组,PCR检测细胞TUG1的表达水平,流式细胞术检测各组细胞凋亡,CCK-8实验检测细胞增殖,划痕实验检测细胞迁移,免疫荧光检测细胞中CD31表达,Western blot法检测细胞中核增殖抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)蛋白的表达。结果 PCR结果显示,OGD/R组细胞中TUG1的表达水平显著高于对照组(P<0.05);转染si-TUG1可显著降低HUVEC中TUG1的表达水平(P<0.05);si-TUG1组HUVEC的凋亡率显著低于si-NC组(P<0.05);si-TUG1组HUVEC的增殖、迁移、CD31免疫荧光强度以及PCNA蛋白表达水平均高于si-NC组(P<0.05)。结论 降低TUG1的表达则可显著减少OGD/R条件下HUVEC的凋亡,增加其增殖、迁移、成管能力和细胞活性。 展开更多
关键词 牛磺酸上调基因1 人脐静脉内皮细胞 凋亡 增殖 迁移
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Neuritin对鸡胚尿囊膜及人脐静脉内皮细胞血管生成作用的影响
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作者 梁富华 张云华 +4 位作者 杨萱 侯艳萌 吕贵珍 唐文洁 杨丽 《实用医学杂志》 北大核心 2025年第2期170-177,共8页
目的 探究神经营养因子Neuritin过表达对鸡胚尿囊膜(CAM)和人脐静脉内皮细胞(HUVECs)血管生成作用的影响,为治疗血管生成性疾病提供新方向。方法 选择新鲜黄皮种蛋30枚建立CAM模型,采用随机数字表法分为3组:阳性对照组(bFGF)、阴性对照... 目的 探究神经营养因子Neuritin过表达对鸡胚尿囊膜(CAM)和人脐静脉内皮细胞(HUVECs)血管生成作用的影响,为治疗血管生成性疾病提供新方向。方法 选择新鲜黄皮种蛋30枚建立CAM模型,采用随机数字表法分为3组:阳性对照组(bFGF)、阴性对照组(NS)和实验组(Neuritin),每组10枚。阳性对照组载入2 500 U/mL的bFGF,实验组载入10μg/mL的Neuritin蛋白,阴性对照组载入NS,各组载入量均为10μL且所有CAM的培养温度、相对湿度及孵育时间相同,记录孵育72 h后各组CAM的血管分支、数目及大小。选择健康孕妇的新鲜脐带制作原代HUVECs,将其分为3组:转染重组质粒组(HUVEC-neu组)、转染空载体组(HUVEC-3.1组)和未转染组(HUVEC组)。HUVEC-neu组的原代HUVECs经重组质粒Neuritin转染,HUVEC-3.1组经空载体质粒转染,HUVEC组不给予特殊处理,3组均接受相同的传代培养方案。Western blot检测Neuritin在HUVEC-3.1组与HUVEC-neu组的蛋白表达水平。CCK-8实验、细胞划痕实验、Transwell实验和管型形成实验检测HUVEC-3.1组和HUVEC-neu组的细胞增殖、迁移和管型形成能力。结果 (1)实验组的CAM血管分支点数及微小血管数较阴性对照组明显增加(P <0.01),但两组的大、中血管数差异无统计学意义(P> 0.05);(2)HUVEC-neu组中Neuritin在HUVECs成功过表达。(3)与HUVEC-3.1组相比,HUVEC-neu组的细胞增殖活力下降(P <0.05),但其迁移、管型形成能力明显增强(P <0.01)。结论 Neuritin过表达可促进血管生成,通过影响细胞增殖、迁移和管型形成能力参与新生血管的调控。 展开更多
关键词 血管生成 NEURITIN 鸡胚尿囊膜 人脐静脉血管内皮细胞
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CXXC5对高糖环境下人脐静脉内皮细胞功能的影响研究
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作者 陈雨彤 马周吉 +3 位作者 黄何艳 吴相依 邵帅 谭谦 《中国美容医学》 2025年第1期6-9,共4页
目的:研究CXXC5对高糖环境下人脐静脉内皮细胞功能的影响及其机制。方法:采用慢病毒转染技术敲低人脐静脉内皮细胞(Human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)中CXXC5的表达,通过划痕实验和Western blot分析CXXC5对HUVEC迁移和分... 目的:研究CXXC5对高糖环境下人脐静脉内皮细胞功能的影响及其机制。方法:采用慢病毒转染技术敲低人脐静脉内皮细胞(Human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)中CXXC5的表达,通过划痕实验和Western blot分析CXXC5对HUVEC迁移和分化能力的影响,以及Wnt/β-catenin信号通路在其中的作用。结果:慢病毒转染敲低CXXC5延缓高糖诱导下HUVEC的迁移并阻碍血管内皮分化,Wnt/β-catenin信号通路抑制剂可以增强这一阻断作用。结论:敲低CXXC5在高糖环境下可显著降低HUVEC的迁移、分化功能,Wnt/β-catenin信号通路在这一过程中发挥着重要作用。 展开更多
关键词 高糖 CXXC5 人脐静脉内皮细胞 CD31 WNT/Β-CATENIN信号通路
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新疆药桑叶提取物对人脐静脉内皮细胞成血管作用的实验研究
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作者 魏怡 吴泽钰 +1 位作者 邓冉 赵今 《牙体牙髓牙周病学杂志》 2025年第2期70-77,共8页
目的:探讨新疆药桑叶提取物对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)的成血管作用,为其在牙周组织再生领域的潜在应用提供理论依据。方法:离体培养HUVECs,制备新疆药桑叶提取物,CCK-8法检测不同浓度新疆药桑叶提取物对HUVECs增殖活性的影响,筛选出促... 目的:探讨新疆药桑叶提取物对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)的成血管作用,为其在牙周组织再生领域的潜在应用提供理论依据。方法:离体培养HUVECs,制备新疆药桑叶提取物,CCK-8法检测不同浓度新疆药桑叶提取物对HUVECs增殖活性的影响,筛选出促进HUVECs细胞术的适宜浓度范围,分为空白对照组、药物组(62.5、125和250μg/mL桑叶提取物溶液)。采用流式细胞检测各组细胞凋亡率和活性氧表达水平;划痕实验和Transwell实验检测细胞迁移能力;小管形成实验检测细胞体外成管能力;RT-PCR检测细胞VEGF、bFGF、CD31、CD34 mRNA表达水平;免疫荧光染色检测细胞VEGF表达。结果:在62.5、125和250μg/mL桑叶提取物浓度下对细胞活力显著增强,差异有统计学意义(P<0.001)。与空白组比较,各浓度桑叶提取物对细胞凋亡无明显影响(P>0.05),各药物组细胞活性氧含量减少,相对水平迁移率、垂直迁移率、体外小管形成总长度、VEGF、bFGF、CD31、CD34 mRNA和VEGF蛋白表达均显著增强,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:新疆药桑叶提取物可以促进HUVECs的增殖、迁移及体外小管形成,上调血管形成相关基因表达,减少氧化应激反应,进而促进HUVECs的血管生成能力,对其促进牙周组织再生具有潜在作用。 展开更多
关键词 新疆药桑叶 人脐静脉内皮细胞 成血管作用 牙周组织再生
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SUZ12通过调控肝癌细胞及人脐静脉内皮细胞的血管生成发挥抑癌作用
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作者 何淦清 舒鑫妮 +6 位作者 胡晖 侯明君 曾观海 魏达强 王坤元 杨辉 聂玉强 《广州医药》 2025年第1期71-76,88,共7页
目的 探讨多梳蛋白SUZ12对肝细胞肝癌(HCC)细胞增殖、血管生成拟态形成和人脐静脉内皮细胞(HUVECs)血管生成的影响。方法 分别利用MTT比色法及体外血管生成实验检测SUZ12表达水平改变对HCC细胞SMMC-7721、Hep3B增殖、血管生成拟态形成和... 目的 探讨多梳蛋白SUZ12对肝细胞肝癌(HCC)细胞增殖、血管生成拟态形成和人脐静脉内皮细胞(HUVECs)血管生成的影响。方法 分别利用MTT比色法及体外血管生成实验检测SUZ12表达水平改变对HCC细胞SMMC-7721、Hep3B增殖、血管生成拟态形成和HUVECs血管生成的影响。结果 MTT结果显示,在HCC细胞中分别敲低或过表达SUZ12均对HCC细胞的增殖能力无明显影响。将SUZ12低表达HCC细胞与HUVECs共培养后,HCC细胞的血管生成拟态管样结构形成增多。此外,将SUZ12敲低组HCC细胞的培养上清用于培养HUVECs后,HUVECs的血管生成拟态管样结构形成也明显增多。结论 SUZ12对HCC细胞的增殖无影响,其在HCC中可抑制HCC细胞和HUVECs的血管生成拟态管样结构形成。上述结果提示SUZ12可能通过调控HCC细胞及HUVECs的血管生成发挥抑癌作用。 展开更多
关键词 多梳蛋白SUZ12 肝细胞肝癌 人脐静脉内皮细胞 血管生成
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黄芩苷纳米药物对过氧化氢诱导的人脐静脉血管内皮细胞衰老的改善作用
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作者 莫欣荷 万有琼 +3 位作者 汪巳卜 马琴 张俊 陈英 《中国药科大学学报》 北大核心 2025年第1期110-118,共9页
为了探讨负载黄芩苷(BAI)的交联硫辛酸纳米胶囊(BAI@cLANCs)对过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导的人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)衰老的影响,采用MTT法考察BAI@cLANCs的HUVECs毒性;MTT法、细胞核染色法、SA-β-gal染色法确定H_(2)O_(2)诱导HUVEC... 为了探讨负载黄芩苷(BAI)的交联硫辛酸纳米胶囊(BAI@cLANCs)对过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导的人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)衰老的影响,采用MTT法考察BAI@cLANCs的HUVECs毒性;MTT法、细胞核染色法、SA-β-gal染色法确定H_(2)O_(2)诱导HUVECs衰老的最佳浓度;荧光显微镜成像法、流式细胞术评估BAI@cLANCs的细胞摄取效果;SA-β-gal染色法测定细胞衰老比例,荧光显微镜成像法、多功能酶标仪检测衰老细胞中活性氧(ROS)水平,脂质氧化检测试剂盒检测细胞内丙二醛(MDA)含量,碘化丙啶单染流式细胞术分析细胞周期。结果显示:BAI@cLANCs(以BAI的浓度进行定量)在2.80~112 mmol/L范围内对HUVECs生长无显著影响;H_(2)O_(2)诱导HUVECs衰老的最佳条件为200μmol/L、25 min;cLANCs作为药物递送载体能显著增强BAI在HUVECs上的摄取效率;与正常组相比,H_(2)O_(2)模型组细胞活力下降,SA-β-gal染色阳性率增高,ROS、MDA含量增多,细胞阻滞于S期,进入G_(2)/M期的细胞减少;与H_(2)O_(2)模型组相比,BAI组、cLANCs组、BAI+cLANCs组、BAI@cLANCs组细胞活力升高,SA-β-gal染色阳性率降低,ROS、MDA含量减少,S期细胞百分比降低,进入G_(2)/M期的细胞增加,其中BAI@cLANCs组抗衰老效果最佳。研究结果表明,BAI与cLANCs均具有抗衰老活性,以cLANCs作为药物载体来负载BAI制成的BAI@cLANCs存在联合抗衰老的优势,可有效延缓H_(2)O_(2)诱导的HUVECs衰老。 展开更多
关键词 黄芩苷 交联硫辛酸纳米胶囊 过氧化氢 人脐静脉血管内皮细胞 抗衰老
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雷帕霉素上调人脐静脉内皮细胞自噬活性抑制细胞增殖 被引量:1
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作者 王雅雯 程亚楠 +2 位作者 杨宾 苏碧昊 徐普 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2024年第4期605-610,共6页
目的探讨人脐静脉内皮细胞(HUVECs)自噬激活对细胞增殖的影响。方法使用雷帕霉素(Rapa)处理HUVECs,Western blot法检测微管相关蛋白1轻链3(LC3)、Beclin 1和unc-51样激酶1(ULK1)的表达,透射电镜(TEM)检测自噬小体,丹酰尸胺染色(MDC)检... 目的探讨人脐静脉内皮细胞(HUVECs)自噬激活对细胞增殖的影响。方法使用雷帕霉素(Rapa)处理HUVECs,Western blot法检测微管相关蛋白1轻链3(LC3)、Beclin 1和unc-51样激酶1(ULK1)的表达,透射电镜(TEM)检测自噬小体,丹酰尸胺染色(MDC)检测自噬荧光;CCK-8法和EdU法检测自噬激活对细胞增殖的影响;血管形成实验检测成管能力。结果Rapa处理后,与对照组相比,LC3、Beclin 1和ULK1表达增强,实验组绿色自噬荧光表达强于对照组,TEM可见自噬小体;CCK-8和EdU结果显示,与对照组相比,实验组细胞自噬活化后细胞增殖能力减弱,成管能力降低。结论在一定时间内,Rapa上调HUVECs自噬活性抑制细胞增殖。 展开更多
关键词 雷帕霉素 人脐静脉内皮细胞 自噬 自噬活性 自噬蛋白 细胞增殖
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miR-145-5p在原发性高血压患者血清中的表达及其对人脐静脉内皮细胞增殖和凋亡的影响
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作者 田朝霞 李卫萍 +2 位作者 赵娜 李红梅 王全义 《医学研究与战创伤救治》 CAS 北大核心 2024年第5期504-508,共5页
目的探究miR-145-5p在原发性高血压(EH)患者血清中的表达及对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖和凋亡的影响。方法以2019年1月至2022年3月于山西医科大学汾阳学院就诊的160例EH患者及160例同期体检正常者为研究对象,RT-qPCR检测EH患者及同... 目的探究miR-145-5p在原发性高血压(EH)患者血清中的表达及对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖和凋亡的影响。方法以2019年1月至2022年3月于山西医科大学汾阳学院就诊的160例EH患者及160例同期体检正常者为研究对象,RT-qPCR检测EH患者及同期体检正常者血清中的miR-145-5p表达水平。体外培养HUVEC,将之分为对照组、miR-145-5p mimic组、mimic-NC组、miR-145-5p inhibitor及inhibitor-NC组,CCK-8法检测各组HUVEC增殖情况;AnnexinV-FITC/PI双染法检测各组HUVEC凋亡情况;Western blot检测各组HUVEC增殖、凋亡相关蛋白[增殖细胞核抗原(PCNA)、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、B细胞淋巴瘤/白血病基因-2相关X蛋白(Bax)、半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶-3(Caspase-3)]表达情况。结果miR-145-5p在EH患者血清中的表达水平明显低于体检正常者(P<0.05);与对照组、mimic-NC组比较,miR-145-5p mimic组HUVEC细胞增殖率及PCNA、Cyclin D1蛋白表达均增加,早期凋亡率、晚期凋亡率及Bax、Caspase-3蛋白表达均减少(P<0.05);与对照组、inhibitor-NC组比较,miR-145-5p inhibitor组HUVEC细胞增殖率及PCNA、Cyclin D1蛋白表达均减少(P<0.05),早期凋亡率、晚期凋亡率及Bax、Caspase-3蛋白表达均增加(P<0.05)。结论miR-145-5p在EH患者血清中呈低表达,过表达miR-145-5p可促进HUVEC增殖并抑制其凋亡。 展开更多
关键词 miR-145-5p 原发性高血压 人脐静脉内皮细胞 增殖 凋亡
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利伐沙班对氧化型低密度脂蛋白诱导的人脐静脉内皮细胞功能的影响
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作者 袁媛 刘迟 +4 位作者 李光慧 张晓丹 王利苹 黄仲义 王斌 《中国药业》 CAS 2024年第7期31-36,共6页
目的探讨利伐沙班(RIV)对氧化型低密度脂蛋白(Ox-LDL)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)功能损伤的影响。方法根据干预措施,将实验分为空白对照组(A组,常规培养液),Ox-LDL组(B组,100μg/mL Ox-LDL的培养液),Ox-LDL+RIV125组(C1组,100μg/mL... 目的探讨利伐沙班(RIV)对氧化型低密度脂蛋白(Ox-LDL)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)功能损伤的影响。方法根据干预措施,将实验分为空白对照组(A组,常规培养液),Ox-LDL组(B组,100μg/mL Ox-LDL的培养液),Ox-LDL+RIV125组(C1组,100μg/mL Ox-LDL和125 ng/mL RIV的培养液),Ox-LDL+RIV250组(C2组,100μg/mL Ox-LDL和250 ng/mL RIV的培养液)和Ox-LDL+RIV500组(C3组,100μg/mL Ox-LDL和500 ng/mLRIV的培养液),各组细胞均处理48 h。采用CCK-8法检测各组细胞存活率的变化,采用流式细胞术检测细胞凋亡情况,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,采用免疫印迹(Western blot)法检测细胞核因子-κB(NF-κB)和尿激酶型纤溶酶原激活因子受体(uPAR)蛋白表达水平。结果与B组比较,C1组、C2组、C3组细胞存活率显著升高(P<0.05),细胞凋亡率和uPAR表达水平均显著降低(P<0.05);C3组IL-1β,TNF-α,IL-6水平和p-NF-κB p65表达水平显著降低(P<0.05)。结论RIV能显著恢复细胞活力、减少细胞凋亡和由Ox-LDL引起的炎性反应,可能通过NF-κB和uPAR的调节而发挥作用。 展开更多
关键词 利伐沙班 人脐静脉内皮细胞 氧化型低密度脂蛋白 尿激酶型纤溶酶原激活因子受体 核因子-ΚB
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高糖诱导下人脐静脉内皮细胞形态、增殖活性及钙黏蛋白表达变化
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作者 王霞 韩居才 +1 位作者 刘凯歌 何腾飞 《山东医药》 CAS 2024年第16期38-41,共4页
目的探讨不同糖浓度状态下人脐静脉内皮细胞(HUVECs)形态、增殖活性及VE-钙黏蛋白(VE-cadherin)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)表达变化。方法将HUVECs分为正常对照组(葡萄糖浓度5.5 mmol/L)、甘露醇组(葡萄糖浓度5.... 目的探讨不同糖浓度状态下人脐静脉内皮细胞(HUVECs)形态、增殖活性及VE-钙黏蛋白(VE-cadherin)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)表达变化。方法将HUVECs分为正常对照组(葡萄糖浓度5.5 mmol/L)、甘露醇组(葡萄糖浓度5.5 mmol/L+甘露醇浓度24.5 mmol/L)、高糖组(葡萄糖浓度分别为11.1、22.2、33.3 mmol/L),分别培养24、48、72 h,以显微镜观察细胞形态,用CCK-8法检测各组细胞增殖情况,Western blotting法检测各组HUVECs VE-cadherin、E-cadherin、N-cadherin表达。结果培养72 h,正常对照组细胞形态呈类圆形,高糖组、甘露醇组细胞形态由圆形、椭圆形逐渐到条索状,细胞数量减少、细胞间隙较前增加。培养24h,高糖组细胞增殖率高于正常对照组;随糖浓度升高,高糖组细胞增殖率呈现先升高后降低趋势。培养48、72h,高糖组细胞增殖率低于正常对照组;随着糖浓度升高,高糖组细胞增殖率逐渐降低。以上各组细胞增殖率比较均有统计学差异(P均<0.05)。培养24、72 h,与正常对照组比较,高糖组HUVECsN-cadherin、VE-cadherin、E-cadherin蛋白表达明显升高(P均<0.05);且随着葡萄糖浓度升高,高糖组细胞N-cadherin、VE-cadherin、E-caderin蛋白表达呈现先升高后降低的趋势。结论在高糖条件下,HUVECs发生形态转变,增殖率下降,且伴有细胞钙黏蛋白N-cadherin、VE-cadherin、E-cadherin表达变化。 展开更多
关键词 糖尿病微血管病变 人脐静脉内皮细胞 高糖 钙黏蛋白 上皮间充质转化 黏附分子
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甘草苷调节丙酮酸激酶M2改善过氧化氢诱导的人脐静脉内皮细胞功能障碍
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作者 张艳 孙菡阳 +1 位作者 廖小婷 曾彬 《微循环学杂志》 2024年第4期19-23,31,共6页
目的:探讨甘草苷(LIQ)调节丙酮酸激酶M2(PKM2)对过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)功能障碍的影响。方法:使用H_(2)O_(2)诱导HUVECs损伤模型,将细胞分为对照组(常规培养的HUVECs)、H_(2)O_(2)组(400μmol/L H_(2)O_(2... 目的:探讨甘草苷(LIQ)调节丙酮酸激酶M2(PKM2)对过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)功能障碍的影响。方法:使用H_(2)O_(2)诱导HUVECs损伤模型,将细胞分为对照组(常规培养的HUVECs)、H_(2)O_(2)组(400μmol/L H_(2)O_(2)诱导的HUVECs模型)、H_(2)O_(2)+LIQ组(400μmol/L H_(2)O_(2)+1μmol/L LIQ)、H_(2)O_(2)+LIQ+紫草素(PKM2抑制剂)组(400μmol/L H_(2)O_(2)+1μmol/L LIQ+1μmol/L紫草素)。使用qRT-PCR检测PKM2 mRNA水平,荧光探针检测活性氧(ROS)水平,Western Blotting检测Nrf2、HO-1、PKM2、p-PKM2、Bcl-2、Bax及TNF-α、IL-1β蛋白表达变化。结果:与H_(2)O_(2)组相比,LIQ干预显著上调PKM2 mRNA水平、PKM2及p-PKM2的蛋白水平,抑制了ROS水平及TNF-α、IL-1β蛋白表达水平,Bcl-2/Bax比例显著增加。与H_(2)O_(2)+LIQ组相比,使用紫草素显著逆转了上述指标变化趋势(P<0.01)。结论:LIQ可上调PKM2表达,改善H_(2)O_(2)诱导的HUVECs细胞功能障碍。 展开更多
关键词 甘草苷 PKM2 人脐静脉内皮细胞 氧化应激
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山药总蛋白对高糖诱导的人脐静脉内皮细胞氧化应激的保护作用及机制研究 被引量:1
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作者 姜蕾蕾 冯佳宝 +5 位作者 刘颖 金辰蓉 刘美辰 王思明 赵大庆 于士婷 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2024年第11期307-315,共9页
探究山药总蛋白对高浓度D-葡萄糖(High concentrations of D-glucose,HG)诱导的人脐静脉内皮细胞(Human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)氧化应激损伤的保护作用及其机制。利用50 mmol/L HG建立HUVECs损伤模型。将HUVECs随机... 探究山药总蛋白对高浓度D-葡萄糖(High concentrations of D-glucose,HG)诱导的人脐静脉内皮细胞(Human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)氧化应激损伤的保护作用及其机制。利用50 mmol/L HG建立HUVECs损伤模型。将HUVECs随机分为对照组、模型组、山药总蛋白低剂量组(0.5 mg/mL)以及山药总蛋白高剂量组(1 mg/mL),评估山药总蛋白对HG处理的HUVECs的细胞活力、细胞形态及血管生成能力的影响;检测细胞中活性氧(Reactive oxygen species,ROS)的水平和超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)、过氧化氢酶(Catalase,CAT)的活力;以及培养基上清液中一氧化氮(Nitric oxide,NO)、8-羟基脱氧鸟苷(8-Hydroxy deoxyguanosine,8-OHdG)、丙二醛(Malondialdehyde,MDA)、白介素-1β(Interleukin-1β,IL-1β)、白介素-6(Interleukin-6,IL-6)的水平;测定B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、硫氧还蛋白相互作用蛋白(Txnip)、NOD样受体蛋白3(NLRP3)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶剪切体-1(Cleaved caspase-1)和IL-1β蛋白的表达水平。结果显示,山药总蛋白能显著提高HG处理后的HUVECs的细胞活力(P<0.01),改善细胞凋亡形态,并显著升高SOD和CAT的活力(P<0.05或P<0.01)以及凋亡相关蛋白(Bcl-2/Bax)的比值、血管形成能力、NO分泌量。此外,山药总蛋白还显著降低了HUVECs的ROS、MDA、8-OHdG、IL-1β和IL-6的水平(P<0.05或P<0.01)及炎症相关蛋白(Txnip、NLRP3、cleaved Caspase-1、IL-1β)的表达水平(P<0.05或P<0.01),并且上述指标的变化均呈现明显的浓度依赖性。本研究结果表明,山药总蛋白可能通过抑制Txnip/NLRP3信号通路从而保护HUVECs拮抗HG诱导的氧化应激,恢复HUVECs内的氧化平衡,进一步减轻细胞的炎症反应。 展开更多
关键词 山药总蛋白 人脐静脉内皮细胞 氧化应激 炎症反应 Txnip/NLRP3 信号通路
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基于人脐静脉内皮细胞的OGD/R模型研究当归-川芎药对中7个活性成分对VEGF-PI3K-AKT/NF-κB信号通路的影响 被引量:1
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作者 纪秋如 泥文娟 +6 位作者 王晓艳 张书琦 吴娅丽 牛璐 李琨 李伟霞 唐进法 《世界科学技术-中医药现代化》 CSCD 北大核心 2024年第3期691-703,共13页
目的探讨当归-川芎药对中7个活性成分(绿原酸、阿魏酸、咖啡酸、丁烯基苯酞、洋川芎内酯H、洋川芎内酯A、藁本内酯)对VEGF-PI3K-AKT/NF-κB信号通路关键蛋白及其上下游血管活性物质、黏附因子和炎症因子的调控作用。方法构建人脐静脉内... 目的探讨当归-川芎药对中7个活性成分(绿原酸、阿魏酸、咖啡酸、丁烯基苯酞、洋川芎内酯H、洋川芎内酯A、藁本内酯)对VEGF-PI3K-AKT/NF-κB信号通路关键蛋白及其上下游血管活性物质、黏附因子和炎症因子的调控作用。方法构建人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的氧糖剥夺/复氧(OGD/R)模型,采用细胞增殖试剂盒(CCK-8法)检测细胞活力,探索7个成分的最佳造模时间;通过检测乳酸脱氢酶(LDH)释放探索最佳给药浓度;采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测7个成分对VEGF、VCAM-1、PAI-1、NF-κB、IL-1和IL-6表达的影响;采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测7个成分对VEGF-PI3K-AKT/NF-κB信号通路关键蛋白mRNA表达的影响。结果HUVEC氧糖剥夺6 h再复氧为最佳造模时间。高剂量绿原酸组、阿魏酸组、洋川芎内酯H组,低、中剂量丁烯基苯酞组,中、高剂量洋川芎内酯A、藁本内酯组显著降低LDH漏出率(P<0.05,P<0.01);绿原酸、阿魏酸、洋川芎内酯H部分剂量组细胞中VEGF、ICAM-1、VCAM-1的表达显著降低,绿原酸、阿魏酸、洋川芎内酯H、藁本内酯部分剂量组细胞NF-κB的表达显著下降,绿原酸、咖啡酸、丁烯基苯酞、洋川芎内酯H、洋川芎内酯A部分剂量组细胞中IL-6的表达显著增加,绿原酸、阿魏酸、洋川芎内酯A部分剂量组细胞IL-1表达显著减少,阿魏酸、洋川芎内酯H部分剂量组细胞中PAI-1的表达量显著下降(P<0.05,P<0.01);绿原酸、阿魏酸、咖啡酸、丁烯基苯酞和洋川芎内酯A部分剂量组细胞中ERK、VEGF、NF-κB、VEGFR2和MMP9的mRNA相对表达量显著下调,洋川芎内酯H和洋川芎内酯A部分剂量组细胞中AKT的mRNA相对表达量均显著上调(P<0.05,P<0.01)。结论当归-川芎中的药效成分可能通过抑制黏附因子、炎症因子和VEGF-PI3K-AKT/NF-κB信号通路关键蛋白mRNA的表达,从而发挥抗缺血性中风的作用。 展开更多
关键词 当归-川芎药对 人脐静脉内皮细胞 药效成分 缺糖缺氧/复氧 VEGF-PI3K-AKT/NF-κB信号通路
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普萘洛尔对人脐静脉内皮细胞生物学行为及SOX18、MMP-7、VEGFA表达的影响 被引量:1
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作者 周佩 谢思琴 +1 位作者 钟礼立 丁小芳 《中国当代儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第10期1115-1121,共7页
目的探讨普萘洛尔对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell,HUVEC)增殖、凋亡、迁移及成管能力,以及对性别决定区Y框18(sex determining region Y-box 18,SOX18)、基质金属蛋白酶-7(matrix metalloproteinase-7,MMP-7... 目的探讨普萘洛尔对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell,HUVEC)增殖、凋亡、迁移及成管能力,以及对性别决定区Y框18(sex determining region Y-box 18,SOX18)、基质金属蛋白酶-7(matrix metalloproteinase-7,MMP-7)和血管内皮生长因子A(vascular endothelial growth factor A,VEGFA)表达的影响。方法以不同浓度的普萘洛尔处理HUVEC,采用CCK-8法检测细胞活力,选出最佳浓度及时间。实验分为对照组,普萘洛尔不同浓度(50、100、150μmol/L)组,采用流式细胞术、细胞划痕实验和成管实验观察HUVEC凋亡、迁移和管腔形成情况,Western blot和实时荧光定量PCR法检测SOX18、MMP-7、VEGFA蛋白及mRNA表达水平。结果与对照组相比,普萘洛尔不同浓度组细胞凋亡率升高(P<0.05),且随药物浓度增加显著升高(P<0.05);普萘洛尔不同浓度组伤口愈合率降低,成管节点数和成管总长度减少,SOX18、MMP-7、VEGFA蛋白及mRNA表达下调(P<0.05)。结论普萘洛尔可抑制HUVEC的增殖、迁移、成管能力并促进细胞凋亡,降低SOX18、MMP-7和VEGFA表达水平。 展开更多
关键词 普萘洛尔 婴幼儿血管瘤 性别决定区Y框18 基质金属蛋白酶-7 血管内皮生长因子A 人脐静脉内皮细胞
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环状RNA hsa-circ-0001360在同型半胱氨酸诱导人脐静脉内皮细胞凋亡中的作用
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作者 况园军 于素美 +7 位作者 钟颖怡 章旭红 马胜超 杨安宁 郝银菊 熊建团 焦运 姜怡邓 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2024年第25期4060-4064,共5页
背景:同型半胱氨酸水平上升会诱导人脐静脉内皮细胞发生凋亡,但机制尚不清楚。目的:探讨hsa-circ-0001360在同型半胱氨酸诱导人脐静脉内皮细胞发生凋亡中的作用。方法:体外培养人脐静脉内皮细胞,将其分为对照组、同型半胱氨酸组、干扰... 背景:同型半胱氨酸水平上升会诱导人脐静脉内皮细胞发生凋亡,但机制尚不清楚。目的:探讨hsa-circ-0001360在同型半胱氨酸诱导人脐静脉内皮细胞发生凋亡中的作用。方法:体外培养人脐静脉内皮细胞,将其分为对照组、同型半胱氨酸组、干扰对照组、干扰对照+同型半胱氨酸组、干扰hsa-circ-0001360组、干扰hsa-circ-0001360+同型半胱氨酸组、过表达对照组、过表达对照+同型半胱氨酸组、过表达hsa-circ-0001360组和过表达hsa-circ-0001360+同型半胱氨酸组,同型半胱氨酸的干预浓度均为100μmol/L。干预细胞72 h后,应用Western blot检测凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2和Caspase-3的表达;流式细胞仪检测细胞的凋亡率;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测hsa-circ-0001360的表达水平。结果与结论:①与对照组相比,同型半胱氨酸组人脐静脉内皮细胞中Caspase-3和Bax的表达明显升高(P<0.01),Bcl-2的表达明显降低(P<0.01),细胞凋亡率明显增高(P<0.01);②与对照组相比,同型半胱氨酸组人脐静脉内皮细胞中hsa-circ-0001360的表达明显升高(P<0.01);③hsa-circ-0001360在人脐静脉内皮细胞的细胞质中表达显著高于细胞核(P<0.01);④与干扰对照组或干扰对照+同型半胱氨酸组相比,干扰hsa-circ-0001360组和干扰hsa-circ-0001360+同型半胱氨酸组人脐静脉内皮细胞中Caspase-3、Bax的表达明显降低(P<0.01),Bcl-2的表达明显升高(P<0.01),细胞凋亡率明显降低(P<0.01);⑤与过表达对照组或过表达对照+同型半胱氨酸组相比,过表达hsa-circ-0001360组和过表达hsa-circ-0001360+同型半胱氨酸组人脐静脉内皮细胞中Caspase-3、Bax的表达明显升高(P<0.01),Bcl-2的表达明显降低(P<0.01),细胞凋亡率明显升高(P<0.01);⑥以上结果表明,hsa-circ-0001360可以促进同型半胱氨酸诱导人脐静脉内皮细胞发生凋亡。 展开更多
关键词 同型半胱氨酸 hsa-circ-0001360 人脐静脉内皮细胞 细胞凋亡 环状RNA
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丹参酮ⅡA磺酸钠对尿毒症毒素作用下人脐静脉内皮细胞功能的影响
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作者 王立华 贾岚 +3 位作者 陈海燕 杨波 王喆 毕学青 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期364-370,共7页
目的:探讨丹参酮ⅡA磺酸钠(STS)对尿毒症毒素作用下人脐静脉内皮细胞(hUVECs)功能的影响,并阐明其作用机制。方法:将hUVECs进行传代培养并分为空白对照组、尿毒症毒素刺激组、尿毒症毒素+STS组和尿毒症毒素+STS+细胞外信号调节激酶(ERK... 目的:探讨丹参酮ⅡA磺酸钠(STS)对尿毒症毒素作用下人脐静脉内皮细胞(hUVECs)功能的影响,并阐明其作用机制。方法:将hUVECs进行传代培养并分为空白对照组、尿毒症毒素刺激组、尿毒症毒素+STS组和尿毒症毒素+STS+细胞外信号调节激酶(ERK)抑制剂组,其中后2组中STS的浓度为10 mg·L^(-1);先给予各组剪切力刺激,剪切力大小为12 dyn·cm^(-2);采用CCK-8法测定各组细胞增殖活性,Western blotting法检测各组细胞中ERK、核因子κB(NF-κB)和Ⅰ型胶原蛋白表达水平,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测细胞中ERK、NF-κB和Ⅰ型胶原mRNA表达情况;原位末端转移酶标记技术(TUNEL)法检测各组细胞凋亡率。结果:CCK-8法检测,在剪切力作用后,尿毒症毒素刺激组和尿毒症毒素+STS+ERK抑制剂组细胞增殖活性低于尿毒症毒素+STS组(P<0.01)。Western blotting法检测,与尿毒症毒素组比较,尿毒症毒素+STS组细胞中ERK、NF-κB和Ⅰ型胶原蛋白表达水平升高(P<0.01);抑制ERK信号通路后,与空白对照组、尿毒症毒素组和尿毒症毒素+STS组比较,尿毒症毒素+STS+ERK抑制剂组细胞中ERK、NF-κB和Ⅰ型胶原蛋白表达水平明显降低(P<0.01)。RT-qPCR法检测,与尿毒症毒素组比较,尿毒症毒素+STS组细胞中ERK、NF-κB和Ⅰ型胶原mRNA表达水平升高(P<0.01);抑制ERK通路后,与空白对照组、尿毒症毒素组和尿毒症毒素+STS组比较,尿毒症毒素+STS+ERK抑制剂组细胞中ERK、NF-κB和Ⅰ型胶原mRNA表达水平明显降低(P<0.01)。TUNEL法检测,尿毒症毒素+STS组的细胞凋亡率小于尿毒症毒素刺激组和尿毒症毒素+STS+ERK抑制剂组(P<0.05)。结论:一定浓度STS能通过ERK信号通路调节NF-κB和Ⅰ型胶原mRNA及蛋白表达来改善尿毒症毒素作用下的内皮细胞增殖,减少细胞凋亡。 展开更多
关键词 血液透析 静脉内瘘 人脐静脉内皮细胞 尿毒症 丹参酮ⅡA磺酸钠
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邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯致人脐静脉内皮细胞氧化损伤及白藜芦醇的修复作用
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作者 王子璇 刘伟 +5 位作者 蔺博涵 李涛 杨琴 虞绮雯 朱伟 孙晓春 《江苏大学学报(医学版)》 CAS 2024年第1期37-43,共7页
目的:探究邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(di-2-ethylhexyl phthalate,DEHP)诱导的人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)的氧化损伤,以及白藜芦醇对该损伤的修复作用。方法:通过CCK8实验筛选DEHP的损伤浓度和... 目的:探究邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(di-2-ethylhexyl phthalate,DEHP)诱导的人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)的氧化损伤,以及白藜芦醇对该损伤的修复作用。方法:通过CCK8实验筛选DEHP的损伤浓度和白藜芦醇的修复浓度;化学分光光度比色法检测HUVEC丙二醛和超氧化物歧化酶(SOD)的不同表达情况;活性氧荧光探针检测不同处理组HUVEC内活性氧水平;JC-1试剂盒检测不同组HUVEC线粒体膜电位;CCK8实验、Transwell实验、划痕愈合实验观察HUVEC增殖、迁移能力;细胞流式实验、蛋白质印迹实验观察HUVEC的凋亡情况和凋亡相关蛋白的表达。结果:80μmol/L DEHP作用HUVEC 24 h后,细胞增殖能力明显降低(P<0.01),40μmol/L白藜芦醇对细胞无明显毒性;损伤组细胞的丙二醛水平和SOD活性较对照组均明显上升(P均<0.01),修复组丙二醛水平和SOD活性较损伤组均明显下降(P均<0.05);损伤组细胞的活性氧表达较对照组明显上升(P<0.01),修复组较损伤组明显下降(P<0.01);损伤组细胞的线粒体膜电位较对照组明显下降(P<0.01),修复组较损伤组明显上升(P<0.01);损伤组细胞的增殖、迁移、成管能力较对照组明显下降(P均<0.05),修复组较损伤组明显上升(P均<0.05);损伤组细胞的凋亡水平较对照组明显上升(P<0.05),修复组较损伤组明显下降(P<0.05)。结论:DEHP能够通过氧化应激途径抑制HUVEC的增殖、迁移和成管能力,并诱导其凋亡,而白藜芦醇可以有效修复该种损伤。 展开更多
关键词 人脐静脉内皮细胞 邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯 白藜芦醇 氧化应激 凋亡 氧化损伤修复
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参元丹干预氧化三甲胺诱导人脐静脉内皮细胞损伤的机制研究
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作者 贾思涵 尚菊菊 +2 位作者 刘红旭 李思耐 李享 《中西医结合心脑血管病杂志》 2024年第17期3117-3121,共5页
目的:探讨参元丹对氧化三甲胺(TMAO)诱导人脐静脉内皮细胞(HUVEC)损伤的干预作用及机制。方法:建立TMAO诱导的HUVEC细胞损伤模型,将HUVEC分为正常对照组、模型组(300μmol/L TMAO)、参元丹低剂量组(300μmol/L TMAO+25μg/mL参元丹)、... 目的:探讨参元丹对氧化三甲胺(TMAO)诱导人脐静脉内皮细胞(HUVEC)损伤的干预作用及机制。方法:建立TMAO诱导的HUVEC细胞损伤模型,将HUVEC分为正常对照组、模型组(300μmol/L TMAO)、参元丹低剂量组(300μmol/L TMAO+25μg/mL参元丹)、参元丹中剂量组(300μmol/L TMAO+50μg/mL参元丹)、参元丹高剂量组(300μmol/L TMAO+100μg/mL参元丹)。分别检测各组细胞中活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)、白细胞介素(IL)-1β含量。结果:TMAO可诱导HUVEC发生氧化应激反应及炎症反应,参元丹可降低TMAO损伤细胞内ROS、MDA水平(P<0.05),同时抑制IL-1β的表达水平(P<0.05)。结论:参元丹可能通过抑制氧化应激反应及炎症反应,减轻TMAO诱导的内皮细胞损伤。 展开更多
关键词 人脐静脉内皮细胞 氧化应激 氧化三甲胺 参元丹 实验研究
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阿托伐他汀钙对人脐静脉内皮细胞增殖迁移的影响观察、关键靶基因及其相关lncRNA筛选
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作者 刘达彬 吴丽美 +2 位作者 刘雪辉 伍绍国 孙朝晖 《山东医药》 CAS 2024年第30期39-43,共5页
目的观察阿托伐他汀钙对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)细胞增殖及迁移的影响,筛选阿托伐他汀钙对HUVECs作用的关键基因和共相关长链非编码核糖核酸(lncRNA)。方法取对数生长期HUVECs细胞,分为一组、二组,一组、二组细胞分别加入5μmol/L的... 目的观察阿托伐他汀钙对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)细胞增殖及迁移的影响,筛选阿托伐他汀钙对HUVECs作用的关键基因和共相关长链非编码核糖核酸(lncRNA)。方法取对数生长期HUVECs细胞,分为一组、二组,一组、二组细胞分别加入5μmol/L的阿托伐他汀钙及等量PBS培养24 h。①阿托伐他汀钙对HUVECs细胞增殖及迁移的的影响观察。取两组细胞,使用流式细胞仪测算两组细胞周期、采用CCK-8法观察两组细胞增殖情况、采用划痕愈合实验观察两组细胞迁移情况。②阿托伐他汀钙对HUVECs作用的关键基因和共相关lncRNA筛选。取两组细胞,运用illumina平台检测两组细胞mRNA、lncRNA,使用R Studio软件中的limma包筛选|log2 Fold change|>1.5、校正P<0.05的差异表达mRNA和lncRNA,运用基因本体论(GO)、京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析法分析差异表达mRNA的生物学功能。通过STRING数据库分析差异表达mRNA的蛋白互作用,使用CytoNCA插件筛选介数中心性最高的前10位关键基因,筛选与关键基因Pearson相关性系数>0.99的共表达lncRNA。采用实时荧光定量PCR(qPCR)法检测两组关键基因及其共表达lncRNA。结果与二组相比,一组细胞周期GO/G1期比例高、细胞增殖抑制,培养24 h细胞迁移面积小(P均<0.05)。与二组相比,一组细胞有1510个差异表达mRNA、744个差异表达lncRNA;差异表达mRNA的生物学功能涉及294个GO集及27条KEGG通路;关键基因共10个,与其共表达的lncRNA有130个,包括AC017101.1、AC125257.1及AC004846.1等。与二组相比,一组细胞HSP90AA1、CDK4、CCND1、PLK1、PCNA相对表达量降低,AC017101.1、AC125257.1、AC004846.1、AL390719.1相对表达量升高(P均<0.05)。结论阿托伐他汀钙能阻滞HUVECs的细胞周期于GO/G1期、抑制细胞的增殖和迁移。阿托伐他汀钙对HUVECs作用的关键基因有HSP90AA1、CDK4及CCND1等10个,共相关lncRNA有AC017101.1、AC125257.1及AC004846.1等130个。阿托伐他汀钙可能通过促进AC017101.1、AC125257.1及AC004846.1等共相关lncRNA表达,下调HUVECs细胞中HSP90AA1、CDK4及CCND1等关键基因表达,阻滞HUVECs的细胞周期、抑制细胞增殖及迁移。 展开更多
关键词 阿托伐他汀钙 人脐静脉内皮细胞 信使核糖核酸 长链非编码核糖核酸 动脉粥样硬化
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