目的探讨哺乳动物ste20样激酶1(mammalian sterile20-like 1,MST1)基因的miRNAs对肝脏内脂质堆积的影响。方法利用高脂诱导非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)模型小鼠与低脂对照组小鼠的肝脏及脂肪组织进行miRNAsequence分析,选取表达上调的miR...目的探讨哺乳动物ste20样激酶1(mammalian sterile20-like 1,MST1)基因的miRNAs对肝脏内脂质堆积的影响。方法利用高脂诱导非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)模型小鼠与低脂对照组小鼠的肝脏及脂肪组织进行miRNAsequence分析,选取表达上调的miRNAs,通过数据库miRDB、starBase筛选出可能靶向MST1靶基因3’UTR区的miRNAs进行研究,利用Western blot及双荧光素酶报告基因实验检测miRNAs对MST1的靶向效应。并在NAFLD细胞模型内进行MST1过表达或干扰,进一步验证miRNAs对MST1的表达调控作用。结果 Western blot实验显示得到mmu miR 149-5p和mmu miR 499-5p抑制鼠MST1基因蛋白水平的表达,Luciferases实验证明mmu miR 149-5p和mmu miR 499-5p靶向MST1能够增加AML-12细胞内的脂质堆积。结论mmu miR 149-5p、mmu miR 499-5p能够调控小鼠肝脏MST1表达并影响肝脏内脂质堆积。展开更多
目的:探讨XMU-MP-1(Xiamen University-inhibitor of mammalian sterile 20-like kinase protein 1)对氧糖剥夺(OGD)损伤后小胶质细胞M1/M2极化平衡的调节作用。方法采用OGD法诱导BV2细胞损伤。实验分为6组:对照组、模型组、MST1/2 siRN...目的:探讨XMU-MP-1(Xiamen University-inhibitor of mammalian sterile 20-like kinase protein 1)对氧糖剥夺(OGD)损伤后小胶质细胞M1/M2极化平衡的调节作用。方法采用OGD法诱导BV2细胞损伤。实验分为6组:对照组、模型组、MST1/2 siRNA组和低、中、高剂量实验组(分别给予1.25、5.0和20.0μg·mL^(-1) XMU-MP-1)。采用MTT法测细胞活力,ELISA测细胞上清液中TNF-α、IL-6和IL-1β表达,qRT-PCR测M1和M2标志物的mRNA表达,流式细胞术测CD206表达,蛋白印迹法测MST1、LATS1和YAP蛋白表达。结果与模型组相比,XMU-MP-1抑制BV2细胞增殖,显著降低TNF-α、IL-6和IL-1β的表达水平,下调MCP-1、IL-6、TNF-α和i NOS mRNA的表达,上调CD206、IL-10、TGF-β、IL-10和YM1 mRNA表达,降低MST1和LAST 1蛋白表达,上调YAP和CD206表达。结论XMU-MP-1通过调控MST1/2的磷酸化,调节OGD损伤后的BV2细胞M1/M2极化平衡,为神经炎症靶点药物研发提供理论基础。展开更多
文摘心血管病的发病人数持续增加,有关其中各类疾病的发病机制尚未完全阐明,哺乳动物不育20样激酶1(mammalian sterile 20-like kinase 1,MST-1)作为体内一种普遍表达的丝氨酸/苏氨酸激酶,主要参与细胞增殖和凋亡的调控[1]。新的研究显示,MST-1的激活也参与了心肌病、心脏氧化应激等心血管病理过程。本文就MST-1在心血管疾病中发挥的作用及机制进行概述。一、哺乳动物不育20样激酶1的结构及其功能1.哺乳动物不育20样激酶1的结构MST-1普遍存在于细胞胞质,氨基端存在有功能域,在羧基末端包含有一个抑制域。已经发现的上游激活因子包括酪氨酸激酶c-Abl、Ras关联域家族蛋白(ras association domain family protein,Rassf)、Src激酶、甘油醛-3-磷酸脱氢酶(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPDH)和热休克蛋白70(heat shock protein 70,Hsp70)等。
文摘目的探讨哺乳动物ste20样激酶1(mammalian sterile20-like 1,MST1)基因的miRNAs对肝脏内脂质堆积的影响。方法利用高脂诱导非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)模型小鼠与低脂对照组小鼠的肝脏及脂肪组织进行miRNAsequence分析,选取表达上调的miRNAs,通过数据库miRDB、starBase筛选出可能靶向MST1靶基因3’UTR区的miRNAs进行研究,利用Western blot及双荧光素酶报告基因实验检测miRNAs对MST1的靶向效应。并在NAFLD细胞模型内进行MST1过表达或干扰,进一步验证miRNAs对MST1的表达调控作用。结果 Western blot实验显示得到mmu miR 149-5p和mmu miR 499-5p抑制鼠MST1基因蛋白水平的表达,Luciferases实验证明mmu miR 149-5p和mmu miR 499-5p靶向MST1能够增加AML-12细胞内的脂质堆积。结论mmu miR 149-5p、mmu miR 499-5p能够调控小鼠肝脏MST1表达并影响肝脏内脂质堆积。
文摘目的:探讨XMU-MP-1(Xiamen University-inhibitor of mammalian sterile 20-like kinase protein 1)对氧糖剥夺(OGD)损伤后小胶质细胞M1/M2极化平衡的调节作用。方法采用OGD法诱导BV2细胞损伤。实验分为6组:对照组、模型组、MST1/2 siRNA组和低、中、高剂量实验组(分别给予1.25、5.0和20.0μg·mL^(-1) XMU-MP-1)。采用MTT法测细胞活力,ELISA测细胞上清液中TNF-α、IL-6和IL-1β表达,qRT-PCR测M1和M2标志物的mRNA表达,流式细胞术测CD206表达,蛋白印迹法测MST1、LATS1和YAP蛋白表达。结果与模型组相比,XMU-MP-1抑制BV2细胞增殖,显著降低TNF-α、IL-6和IL-1β的表达水平,下调MCP-1、IL-6、TNF-α和i NOS mRNA的表达,上调CD206、IL-10、TGF-β、IL-10和YM1 mRNA表达,降低MST1和LAST 1蛋白表达,上调YAP和CD206表达。结论XMU-MP-1通过调控MST1/2的磷酸化,调节OGD损伤后的BV2细胞M1/M2极化平衡,为神经炎症靶点药物研发提供理论基础。
