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两步盐析联合双水相萃取提取纯化蓝藻中藻蓝蛋白 被引量：9
1
作者 张发宇 赵冰冰 +2 位作者 陈裕 袁梦媛 汪家权 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2015年第22期6-10,共5页
以巢湖新鲜蓝藻为处理对象,采取冻融破壁的方式获取藻蓝蛋白的粗提液,采取两步盐析联合双水相萃取的方法提取纯化藻蓝蛋白。运用0.618法选点实验研究了两步盐析中(NH4)2SO4饱和度对提取纯化影响,构建了聚乙二醇(polyethylene glycol,PEG... 以巢湖新鲜蓝藻为处理对象,采取冻融破壁的方式获取藻蓝蛋白的粗提液,采取两步盐析联合双水相萃取的方法提取纯化藻蓝蛋白。运用0.618法选点实验研究了两步盐析中(NH4)2SO4饱和度对提取纯化影响,构建了聚乙二醇(polyethylene glycol,PEG)-(NH4)2SO4的双水相体系,综合考虑PEG相对分子质量、PEG质量分数、(NH4)2SO4质量分数、p H值和藻蓝蛋白质量浓度对提取纯化藻蓝蛋白的影响。结果表明:室温25℃条件下,一步盐析时(NH4)2SO4的最佳饱和度为21%,二步盐析时(NH4)2SO4的最佳饱和度为30%。两步盐析后得到的藻蓝蛋白构建成PEG-(NH4)2SO4的双水相体系后,当PEG相对分子质量1 000、PEG 1 000质量分数10%、(NH4)2SO4质量分数25%时,藻蓝蛋白的纯度可达3.45。 展开更多
关键词 两步盐析 双水相萃取 提取纯化 藻蓝蛋白
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分段盐析联合两步柱层析纯化巢湖蓝藻藻蓝蛋白 被引量：3
2
作者 苏雨 张发宇 +2 位作者 余金卫 汪家权 许子牧 《安徽农业大学学报》 CAS CSCD 2018年第3期487-491,共5页
以巢湖打捞的新鲜蓝藻藻泥为处理对象,利用冻融破壁的方式获得藻蓝蛋白(phycocyanin,PC)粗提液。采取两步盐析初步纯化粗提液获得PC,再用纤维素(Cellufine A-500)阴离子交换树脂中度纯化PC,最后用羟基磷灰石(HA)柱高度纯化PC。结果表明... 以巢湖打捞的新鲜蓝藻藻泥为处理对象,利用冻融破壁的方式获得藻蓝蛋白(phycocyanin,PC)粗提液。采取两步盐析初步纯化粗提液获得PC,再用纤维素(Cellufine A-500)阴离子交换树脂中度纯化PC,最后用羟基磷灰石(HA)柱高度纯化PC。结果表明,在室温25℃下,两步盐析(NH_4)_2SO_4的最佳摩尔浓度分别为1.0mol·L^(-1)和1.8 mol·L^(-1),PC纯度(A_(620)/A_(280))达到2.168,PC回收率可达37.5%。再经Cellufine A-500和HA两步柱层析纯化,PC纯度(A_(620)/A_(280))分别达到3.211和4.133,回收率分别为20.3%和7.2%,纯度达到试剂级纯度要求。 展开更多
关键词 藻蓝蛋白 两步盐析 阴离子交换 羟基磷灰石
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粉末活性炭联合盐析法纯化藻蓝蛋白的研究 被引量：1
3
作者 盛晶梦 张发宇 +1 位作者 袁梦媛 汪家权 《合肥工业大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2017年第2期242-247,共6页
文章以巢湖新鲜蓝藻藻泥为处理材料,采取粉末活性炭联合盐析的方法提取纯化藻蓝蛋白。综合考虑粉末活性炭种类、粒径、添加量、处理时间、pH值及硫酸铵浓度等影响因素,通过一系列单因素试验研究了不同活性炭处理条件以及两步盐析中硫酸... 文章以巢湖新鲜蓝藻藻泥为处理材料,采取粉末活性炭联合盐析的方法提取纯化藻蓝蛋白。综合考虑粉末活性炭种类、粒径、添加量、处理时间、pH值及硫酸铵浓度等影响因素,通过一系列单因素试验研究了不同活性炭处理条件以及两步盐析中硫酸铵的浓度对藻蓝蛋白提纯的影响,对藻蓝蛋白的提纯条件进行了优化。结果表明:在粉末活性炭种类为煤质,粒径为400~500目,添加量为100g/L,静置时间为10min,pH值为7.0,两步盐析(NH_4)_2SO_4的浓度分别为1mol/L和2mol/L时,粉末活性炭联合盐析法提纯藻蓝蛋白的效果最好,藻蓝蛋白的纯度可达3.16,回收率为45%。 展开更多
关键词 粉末活性炭 两步盐析 提取纯化 藻蓝蛋白
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巢湖蓝藻藻蓝蛋白纯化过程中紫外-可见吸收光谱特征分析 被引量：7
4
作者 张发宇 余金卫 +4 位作者 张浏 盛晶梦 袁梦媛 鲁轶男 汪家权 《光谱学与光谱分析》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2017年第3期806-810,共5页
以巢湖新鲜蓝藻为处理对象,采用冻融破壁方法获得藻蓝蛋白粗提液,采用两步盐析结合两步柱层析的方法纯化藻蓝蛋白粗提液,以最终获得试剂级藻蓝蛋白。分别将纯化过程中各阶段得到的藻蓝蛋白溶液和杂质液进行紫外-可见光谱扫描。经光谱扫... 以巢湖新鲜蓝藻为处理对象,采用冻融破壁方法获得藻蓝蛋白粗提液,采用两步盐析结合两步柱层析的方法纯化藻蓝蛋白粗提液,以最终获得试剂级藻蓝蛋白。分别将纯化过程中各阶段得到的藻蓝蛋白溶液和杂质液进行紫外-可见光谱扫描。经光谱扫描发现:藻蓝蛋白溶液经一步盐析、二步盐析、一步柱层析和二步柱层析的四步纯化实验过程中,在250~300 nm吸收谱带中,吸收峰从260 nm红移至280 nm;在500~700 nm吸收谱带中,吸收峰从617 nm红移至620 nm,并表现为最大特征吸收峰。对四步纯化工艺过程中分别得到的不同杂质液同样进行250~700 nm全波段光谱扫描,分析判断得出:一步盐析杂质液成分主要含有杂蛋白和部分藻蓝蛋白;二步盐析的杂质液中主要成分为核酸和维生素类物质;一步柱层析分离的先出组分主要成分为藻红蛋白;二步柱层析分离的后出组分主要成分为别藻蓝蛋白。经四步纯化工艺后,最终得到了纯度大于4以上的试剂级藻蓝蛋白。由此可见,两步盐析的工艺主要作用在于去除杂蛋白、核酸和维生素类物质;两步柱层析工艺主要作用在于分离出和藻蓝蛋白性质接近的藻红蛋白和别藻蓝蛋白。 展开更多
关键词 两步盐析 双水相萃取 吸收光谱 藻蓝蛋白
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巢湖蓝藻藻蓝蛋白稳定性的实验研究 被引量：3
5
作者 鲁轶男 张发宇 +1 位作者 胡淑恒 汪家权 《合肥工业大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2017年第11期1557-1562,共6页
文章以巢湖新鲜蓝藻藻泥为实验原料,冻融3次后提取获得藻蓝蛋白粗提液,经过两步盐析纯化得到藻蓝蛋白溶液。实验重点研究了温度、pH值、冻融次数及添加剂等因素对两步盐析后藻蓝蛋白溶液稳定性的影响,确定了藻蓝蛋白溶液保存的较优条件... 文章以巢湖新鲜蓝藻藻泥为实验原料,冻融3次后提取获得藻蓝蛋白粗提液,经过两步盐析纯化得到藻蓝蛋白溶液。实验重点研究了温度、pH值、冻融次数及添加剂等因素对两步盐析后藻蓝蛋白溶液稳定性的影响,确定了藻蓝蛋白溶液保存的较优条件。结果表明:低温、pH值为中性条件有利于藻蓝蛋白溶液的保存;糖类、防腐剂、抗氧化剂、金属离子的添加也会影响藻蓝蛋白稳定性。 展开更多
关键词 两步盐析 纯化 藻蓝蛋白
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高纯度别藻蓝蛋白提取纯化及光谱特征分析 被引量：3
6
作者 单小娥 张发宇 +1 位作者 余金卫 汪家权 《生物化工》 2018年第3期37-39,共3页
采用硫酸铵分级粗提纯结合羟基磷灰石柱层析法,提取纯化钝项螺旋藻(Spirulinaplatensis)中的别藻蓝蛋白(APC),并对相关工艺条件进行了探讨。结果表明:采用1.6 mol/L、2.2 mol/L硫酸铵分级粗提纯效果最佳,两步盐析后APC纯度由0.34上升到1... 采用硫酸铵分级粗提纯结合羟基磷灰石柱层析法,提取纯化钝项螺旋藻(Spirulinaplatensis)中的别藻蓝蛋白(APC),并对相关工艺条件进行了探讨。结果表明:采用1.6 mol/L、2.2 mol/L硫酸铵分级粗提纯效果最佳,两步盐析后APC纯度由0.34上升到1.24。粗提液经两步硫酸铵分级粗提纯后,连续两次过羟基磷灰石层析柱,所获得的APC纯度最高达4.64,回收率达11.25%。通过紫外-可见光谱特征分析,随着纯化工艺的进展,纯化液的吸收峰逐步从620nm移至652nm,显示出APC典型的吸收峰特性。 展开更多
关键词 螺旋藻 别藻蓝蛋白 两步盐析 柱层析 吸收光谱
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