文摘目的建立小型猪牙周膜细胞的体外培养方法,研究其与三维支架材料的生物相容性,为牙齿再生和牙周组织工程研究提供依据。方法无菌条件下,拔除12月龄小型猪上颌尖牙,剥离牙根外牙周组织,用3g/LI型胶原酶和4g/L Dispase37℃消化1h,用70μm滤网收集细胞,1000r/min离心10min,培养液重新悬浮成单细胞悬液,α-MEM(α-modification of Eagle's medium)培养基培养。每天用倒置显微镜观察细胞生长情况,流式细胞仪检测抗Stro-1抗体的表达情况。取第3代牙周膜细胞接种于HA/TCP上,扫描电镜观察培养3天和5天后细胞在三维支架材料上的生长情况。结果原代培养的小型猪牙周膜细胞生长良好,呈多角形或梭性。流式细胞仪结果显示,分离培养的牙周膜细胞中有7·6%抗Stro-1抗体表达阳性。扫描电镜观察结果表明,牙周膜细胞在HA/TCP三维支架上生长良好。结论小型猪牙周膜细胞可被成功的分离培养,在三维支架材料HA/TCP上表现出良好的生长状态,有望为牙齿再生和牙周组织工程研究提供有用的细胞来源。
