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磷灰石的核磁共振研究--(Ⅰ)^19F的NMR谱学特征 被引量:1
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作者 刘羽 许涛 王少怀 《矿物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期291-294,共4页
对固相反应合成的氟羟磷灰石固溶体系列进行了19FMAS NMR分析,结果表明:当F含量较低时,只出现一个化学位移δ为-105.5的NMR峰,而当F相对含量超过(OH)的相对含量时,在δ为-103附近出现一个新的微弱肩状共振峰。随F含量增大,该峰相对强度... 对固相反应合成的氟羟磷灰石固溶体系列进行了19FMAS NMR分析,结果表明:当F含量较低时,只出现一个化学位移δ为-105.5的NMR峰,而当F相对含量超过(OH)的相对含量时,在δ为-103附近出现一个新的微弱肩状共振峰。随F含量增大,该峰相对强度逐渐增大,说明在高F含量的FHap结构中出现了两种化学环境下的F核。根据上述19F NMR峰的数量和位置,可以推断磷灰石中F—OH的相对含量和成键状态。 展开更多
关键词 氟羟磷灰石 ^^19f MAS NMR 化学位移
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基于液相色谱-质谱联用及^19F核磁成像技术测定一种新型氟类化合物
2
作者 何芳菲 黄平升 +2 位作者 王婷 王东亮 王昱青 《分析仪器》 CAS 2020年第3期71-75,共5页
(2-甲基丙烯酸乙酯)-N-(3,3,3-三氟丙基)-N-甲基甘氨酸(CBF3)是本团队新合成的一种19F核磁成像基团。本研究结合液相色谱-质谱联用方法对低浓度样品检测灵敏度高的特点,建立了CBF3液相色谱-质谱联用检测标准曲线,并进行了低、中、高3个... (2-甲基丙烯酸乙酯)-N-(3,3,3-三氟丙基)-N-甲基甘氨酸(CBF3)是本团队新合成的一种19F核磁成像基团。本研究结合液相色谱-质谱联用方法对低浓度样品检测灵敏度高的特点,建立了CBF3液相色谱-质谱联用检测标准曲线,并进行了低、中、高3个浓度组CBF3的提取回收率和精密度等方法验证。结果表明采用液相色谱-质谱联用方法检测CBF3在浓度范围10μg/L^1000μg/L内线性关系良好,相关系数(R)大于0.995,方法定量限为10μg/L;日内精密度和日间精密度(RSD)、提取回收率均符合生物样品的分析要求。为研究CBF3在活体内的代谢情况,在小鼠给药后不同时间点,采用液相色谱-质谱联用方法进行血清CBF3浓度的定量分析,分析结果显示给药45min后血清CBF3浓度迅速下降;同时我们还采用19F核磁成像技术检测小鼠肝脏、肾脏和膀胱组织中的CBF3信号,并证明该化合物一部分可通过肝脏代谢,绝大部分经过肾脏代谢,随尿液形成蓄积在膀胱中,最终通过尿液排出体外的代谢途径。 展开更多
关键词 (2-甲基丙烯酸乙酯)-N-(3 3 3-三氟丙基)-N-甲基甘氨酸 液相色谱-质谱联用技术 19f核磁共振成像技术 定量分析
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^(19)F qNMR法测定盐酸氟西汀常规固体口服制剂的含量
3
作者 李增鑫 周晓力 +1 位作者 刘万卉 尹利辉 《中国新药杂志》 北大核心 2025年第1期89-93,共5页
目的:建立^(19)F核磁共振定量法(^(19)F quantitative nuclear magnetic resonance,^(19)F qNMR)测定盐酸氟西汀常规固体口服制剂的含量。方法:以4-氟肉桂酸为内标,二甲基亚砜为溶剂,采用Bruker AvanceⅢHD 500 MHz核磁共振波谱仪,脉冲... 目的:建立^(19)F核磁共振定量法(^(19)F quantitative nuclear magnetic resonance,^(19)F qNMR)测定盐酸氟西汀常规固体口服制剂的含量。方法:以4-氟肉桂酸为内标,二甲基亚砜为溶剂,采用Bruker AvanceⅢHD 500 MHz核磁共振波谱仪,脉冲序列zgfhigqn.2,恒温25℃采集^(19)F核磁共振谱(^(19)F NMR),弛豫时间(D1)为10 s,测定盐酸氟西汀多种常规固体口服制剂的绝对含量。结果:以盐酸氟西汀δ-60 ppm处的信号及4-氟肉桂酸δ-110.44 ppm处的信号作为定量信号;平行配制6份供试品溶液,重复性RSD均<2.0%;以样品峰面积对其质量绘制标准曲线,盐酸氟西汀的线性范围为2.5~7.5 mg,相关系数为0.999 6;回收率结果均在98%~102%之间;60 h稳定性及精密度RSD均<1.2%。^(19)F qNMR定量结果与HPLC含量测定结果基本保持一致。结论:经方法学验证,^(19)F qNMR法可用于测定盐酸氟西汀常规固体口服制剂的绝对含量。 展开更多
关键词 盐酸氟西汀 4-氟肉桂酸 绝对含量测定 ^^(19)f NMR法 多种固体制剂
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^(19)F-NMR进展
4
作者 李燕 李临生 +2 位作者 兰云军 张建华 张春兰 《光谱实验室》 CAS CSCD 2007年第3期490-495,共6页
19F-NMR技术由于其化学位移范围大、不易出现峰重叠及灵敏度高等优点,自上个世纪50年代出现以来,在分析光学异构体、生命科学等研究中有其特殊意义。在体内核磁共振技术中,19F-NMR与其他方法相比,在不损伤样品的条件下,就可进行实时定... 19F-NMR技术由于其化学位移范围大、不易出现峰重叠及灵敏度高等优点,自上个世纪50年代出现以来,在分析光学异构体、生命科学等研究中有其特殊意义。在体内核磁共振技术中,19F-NMR与其他方法相比,在不损伤样品的条件下,就可进行实时定量监测。近30年,引人氟代指示剂进行体内19F-NMR的研究,含氟生物活性物质以及含氟材料的研究受到很大的重视,19F-NMR技术及其应用发展起来。从近10年的情况来看,含氟生物活性物质的研究以及在医药、农药和具有优异性能的含氟材料的研究应用受到很大的重视,这是近期19F-NMR研究发展的一个主要特点。 展开更多
关键词 ^^19f—NMR ^体内^19f—NMR技术 氟代指示剂 含氟材料
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极高温度下^(19)F(p,α)^(16)O与^(19)F(p,γ)^(20)Ne两反应道分支比的计算
5
作者 叶子飘 戴长江 《湖南大学学报(自然科学版)》 EI CAS CSCD 北大核心 2004年第3期105-107,共3页
用WKB方法计算在极高温度(非共振情况)下19F(p,α)16O与19F(p,γ)20Ne两反应道分支比.在CNO循环中,这两个核反应反应速度的快慢直接影响着16O和20Ne的含量,进而影响着17F和18F中微子的流量.计算表明,在(2~3)×107K温度范围内其分... 用WKB方法计算在极高温度(非共振情况)下19F(p,α)16O与19F(p,γ)20Ne两反应道分支比.在CNO循环中,这两个核反应反应速度的快慢直接影响着16O和20Ne的含量,进而影响着17F和18F中微子的流量.计算表明,在(2~3)×107K温度范围内其分支比值R约为1.189×103.这表明在CNO循环中,核反应19F(p,γ)20Ne可以忽略. 展开更多
关键词 ^^19f ^α)^16O ^^19f ^γ)^20Ne 分支比R 极高温度 WKB方法
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^(19)F-NMR研究镍系催化丁二烯聚合中氟的存在状态 被引量:8
6
作者 陈滇宝 连家学 +3 位作者 于永良 张玉冰 仲崇祺 唐学明 《高分子学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1991年第4期482-488,共7页
Ziegler-Natta型Ni(naph)_2-Al(i-Bu)_3-BF_3OEt_2(简称Ni-Al-B)催化体系在丁二烯(Bd)聚合过程中,活性中心络合物上氟的状态和数量控制着单体配位、引发、增长和链转移等步骤。文献[1—6]曾指出该体系显高催化活性的Al/B(mol比)范围在0.... Ziegler-Natta型Ni(naph)_2-Al(i-Bu)_3-BF_3OEt_2(简称Ni-Al-B)催化体系在丁二烯(Bd)聚合过程中,活性中心络合物上氟的状态和数量控制着单体配位、引发、增长和链转移等步骤。文献[1—6]曾指出该体系显高催化活性的Al/B(mol比)范围在0.5—1.0之间,即F/Al=6—3.Al/B>1或F/Al<3时,聚合活性显著降低。最近,我们采用了添加酸、醇、酚和酯类等方法来改进体系中B组分的分散及氟的反应性,Al/B显著拓宽为0.3—3,氟的利用率得到提高。在此基础上,本文将讨论用^(19) 展开更多
关键词 镍系 催化 聚丁二烯 ^^19f NMR
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Enantiodifferentiation of chiral diols and diphenols via recognition-enabled chromatographic^(19)F NMR
7
作者 Yilin Zeng Wenjing Bao +1 位作者 Guangxing Gu Yanchuan Zhao 《Magnetic Resonance Letters》 2024年第4期34-42,共9页
A novel and efficient method for distinguishing between chiral diols and diphenols has been established through the use of^(19)F NMR spectroscopy.Central to this system's efficacy is a chiral amine,strategically m... A novel and efficient method for distinguishing between chiral diols and diphenols has been established through the use of^(19)F NMR spectroscopy.Central to this system's efficacy is a chiral amine,strategically modified with a CF_(3)group.This amine reacts in-situ with 2-formylphenylboronic acid to create a chiral^(19)F-labeled probe.This probe demonstrates discriminatory capabilities by interacting with hydroxy-containing analytes to form boronic esters.These esters produce distinct^(19)F NMR signals that vary according to their stereoconfiguration,facilitating accurate chiral differentiation.The method's resolution capacity was demonstrated by successfully identifying 12 distinct chiral analytes(six pairs of enantiomers)in complex mixtures,highlighting its extensive potential in diverse chiral analysis applications. 展开更多
关键词 ^^(19)f NMR Multi-component analysis Chiral discrimination Enantiocomposition
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^19FNMR鉴定复杂体系中的含氟表面活性剂 被引量:3
8
作者 仇镇武 柳亚玲 +4 位作者 李正全 叶汝汉 朱黎明 陈泳 潘文龙 《分析试验室》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期549-553,共5页
建立了有机氟化物的核磁共振谱图集,通过系统地研究各类有机氟化物,根据典型例子分类总结各标准氟谱图中信号峰化学位移与耦合常数的变化规律,针对含氟表面活性剂建立19F NMR分析方法。采用该方法鉴定5种企业复杂体系样品中含氟表面活... 建立了有机氟化物的核磁共振谱图集,通过系统地研究各类有机氟化物,根据典型例子分类总结各标准氟谱图中信号峰化学位移与耦合常数的变化规律,针对含氟表面活性剂建立19F NMR分析方法。采用该方法鉴定5种企业复杂体系样品中含氟表面活性剂的成分,确认了各含氟表面活性剂19F NMR谱峰的归属。结果表明,19F NMR测试适用于复杂体系中含氟表面活性剂的快速鉴定。 展开更多
关键词 含氟表面活性剂 ^^19fNMR 化学位移 耦合常数
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^(19)F磁共振成像引导的化学动力学/饥饿/化疗协同治疗纳米探针构建及应用
9
作者 刘晓彤 马景晶 胡高飞 《化学试剂》 CAS 2024年第2期28-38,共11页
利用油胺和赖氨酸铜共修饰的聚琥珀酰亚胺两亲高分子(PSI_(Lys-Cu-Lys/OAm)),实现对全氟冠醚(PFCE,作为氟源)、阿霉素(DOX)的自组装包封,并进一步通过聚赖氨酸(PLL)调节表面静电作用负载葡萄糖氧化酶(GOx),获得DOX/F@PSI_(Lys-Cu-Lys/OA... 利用油胺和赖氨酸铜共修饰的聚琥珀酰亚胺两亲高分子(PSI_(Lys-Cu-Lys/OAm)),实现对全氟冠醚(PFCE,作为氟源)、阿霉素(DOX)的自组装包封,并进一步通过聚赖氨酸(PLL)调节表面静电作用负载葡萄糖氧化酶(GOx),获得DOX/F@PSI_(Lys-Cu-Lys/OAm)@PLL-GOx(DFPPG)多功能纳米探针,成功将^(19)F磁共振成像(MRI)引导的化学动力学(CDT)/饥饿(ST)/化疗(CT)联合治疗整合于一个纳米平台。体外及活体实验结果表明,探针基于类GOx酶活性有效地催化消耗细胞内葡萄糖转化为H_(2)O_(2)和葡萄糖酸,不仅可以“饿死”肿瘤,而且原位自供应H_(2)O_(2)及酸性增强进一步促进了Cu介导的类芬顿反应,增强了CDT。与此同时,探针在肿瘤微酸性环境下响应性释放DOX,解决了化疗药物的生物利用率低问题且降低了探针对正常组织的毒副作用,优异的^(19)FMRI实现了探针(药物)代谢过程的示踪。 展开更多
关键词 多功能纳米探针 ^^(19)f磁共振成像 化学动力学/饥饿/化疗联合治疗 肿瘤
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氟化物衍生-^(19)F-核磁共振法检测水样中氰化物 被引量:3
10
作者 李腾 黄桂兰 +2 位作者 袁铃 周世坤 张何 《理化检验(化学分册)》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期443-448,共6页
取69.8mg·L^(-1)氰化钠溶液0.50mL,用0.25mol·L^(-1)氢氧化钠溶液调节其酸度至pH 12,减压蒸发至干。加入二甲基亚砜(DMSO)0.5mL溶解残渣,随后加入2,2,2-三氟苯乙酮(TFAP)10μL和乙酸酐20μL,室温下反应45min,使氰根衍生为1-氰... 取69.8mg·L^(-1)氰化钠溶液0.50mL,用0.25mol·L^(-1)氢氧化钠溶液调节其酸度至pH 12,减压蒸发至干。加入二甲基亚砜(DMSO)0.5mL溶解残渣,随后加入2,2,2-三氟苯乙酮(TFAP)10μL和乙酸酐20μL,室温下反应45min,使氰根衍生为1-氰基-2,2,2-三氟^(-1)-乙酸苯乙酯(CTPA)。取0.30mL上述溶液,加入7.78mmol·L^(-1)乙酸^(-3)-氟苄酯-氘代三氯甲烷(CDCl3)溶液0.2mL为内标,按仪器工作条件进行^(19)F-核磁共振(NMR)分析。试验表明该衍生方法的检出限为0.7mg·L^(-1)。方法不受其他干扰离子(如CO_3^(2-)、B_4O_7^(2-)、Cl^-、SO_4^(2-)等)的影响,具有良好的专属性。选用3种不同水源的水样(自来水、河水、纯水)按所提出方法衍生化并测定,三者的回收率依次为74.0%,74.0%,75.0%,并无大的差别,3种水样测定值的相对标准偏差(n=6)依次为2.1%,2.4%,3.0%。方法曾用于天津8·12爆炸区采集的水样中氰根的测定,获满意结果。 展开更多
关键词 ^^19f-NMR 氰化物 氟化物衍生 水样
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表面活性剂全氟庚酸和全氟辛酸的^(19)F NMR研究 被引量:11
11
作者 杜定准 《波谱学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期29-36,共8页
测定了全氟庚酸 (PFHA)和全氟辛酸 (PFOA)在三氟三氯乙烷或正戊醇溶液中的不同浓度的1 9FNMR化学位移并归属了谱图 .研究了活性剂浓度对化学位移影响的机理和对不同核的不同影响 .由化学位移δ值对浓度倒数作图 ,可求得活性剂的临界胶... 测定了全氟庚酸 (PFHA)和全氟辛酸 (PFOA)在三氟三氯乙烷或正戊醇溶液中的不同浓度的1 9FNMR化学位移并归属了谱图 .研究了活性剂浓度对化学位移影响的机理和对不同核的不同影响 .由化学位移δ值对浓度倒数作图 ,可求得活性剂的临界胶束浓度 (cmc) :全氟庚酸 :0 .0 1 95mol/L (戊醇溶剂 )和 0 .0 4 0 6mol/L(三氟三氯乙烷溶剂 ) ;全氟辛酸 :0 .0 5 4 7mol/L(戊醇溶剂 ) .用计算模拟法使δ对浓度倒数作图同实验数据作图相比较 ,可推测得全氟辛酸戊醇溶液的单体分子与胶束大分子的平衡常数为K =2 1 (mol/L) - (n - 1 ) 和胶束聚集数n =3.9. 展开更多
关键词 NMR 核磁共振 ^^19f化学位移 表面活性剂 全氟庚酸 全氟辛酸 临界胶束浓度
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^(19)F-NMR测定甲磺酸帕珠沙星样品中的氟 被引量:2
12
作者 黄娟娟 杨明生 《光谱实验室》 CAS CSCD 2006年第4期782-785,共4页
研究了19F-NMR技术测定甲磺酸帕珠沙星药物样品中氟的检测条件。优化了实验参数,选用三氟乙酸钠作为内标,重水与去离子水混合液作为溶剂的内标绝对法进行定量分析。测定了甲磺酸帕珠沙星药物样品中氟含量。实验表明,氟的加标回收率在99... 研究了19F-NMR技术测定甲磺酸帕珠沙星药物样品中氟的检测条件。优化了实验参数,选用三氟乙酸钠作为内标,重水与去离子水混合液作为溶剂的内标绝对法进行定量分析。测定了甲磺酸帕珠沙星药物样品中氟含量。实验表明,氟的加标回收率在99.2%—100.9%之间,标准偏差为0.00446%—0.0652%,相对标准偏差小于1.459%。 展开更多
关键词 ^^19f 核磁共振 甲磺酸帕珠沙星
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在不同温度下^(18)O(p,α)^(15)N与^(18)O(p,γ)^(19)F两反应道分支比的计算 被引量:2
13
作者 叶子飘 戴长江 《四川大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期704-708,共5页
作者计算了在不同温度 (非共振情况 )下18O(p ,α) 15N与18O (p ,γ) 19F两个反应道的分支比 .在 (2~ 3)× 10 7K温度范围内 ,其分支比R约为 1.33× 10 2 .这表明 ,在CNO循环中 ,核反应18O(p ,γ) 19F可以忽略 .CNO循环中的分... 作者计算了在不同温度 (非共振情况 )下18O(p ,α) 15N与18O (p ,γ) 19F两个反应道的分支比 .在 (2~ 3)× 10 7K温度范围内 ,其分支比R约为 1.33× 10 2 .这表明 ,在CNO循环中 ,核反应18O(p ,γ) 19F可以忽略 .CNO循环中的分支数也将由原来的 4个变成为 3个 。 展开更多
关键词 ^^18O(p ^a)^15N ^^18O(p ^γ)^19f 反应道 分支比 计算 CNO循环 太阳热融合核反应 分支数 太阳中微子
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85MeV^(19)F离子辐照InP正电子湮没研究
14
作者 王荣 徐勇军 +1 位作者 黄龙 朱升云 《原子能科学技术》 EI CAS CSCD 北大核心 2000年第3期259-261,共3页
用正电子湮没寿命技术研究了注量为 1 6× 10 16 cm- 2 的 85MeV 19F离子辐照InP产生的辐照效应。
关键词 ^^19f离子 辐照效应 正电子湮没 磷化铟 缺陷
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^(19)F-NMR定量检测1-氰基-2,2,2-三氟-1-乙酸苯乙酯的参数优化
15
作者 李腾 黄桂兰 +2 位作者 袁铃 周世坤 张何 《分析仪器》 CAS 2017年第2期68-73,共6页
建立了核磁共振氟谱法测定氰化物的氟化衍生化合物1-氰基-2,2,2-三氟-1-苯乙基乙酸酯(CTPA)含量的方法。以乙酸3-氟苄酯为内标,采用5mm Auto XBB探头,探头温度298.2K,考察了不同浓度化合物的定量条件;通过比较化合物样品定量峰与内标物... 建立了核磁共振氟谱法测定氰化物的氟化衍生化合物1-氰基-2,2,2-三氟-1-苯乙基乙酸酯(CTPA)含量的方法。以乙酸3-氟苄酯为内标,采用5mm Auto XBB探头,探头温度298.2K,考察了不同浓度化合物的定量条件;通过比较化合物样品定量峰与内标物质响应峰面积,计算化合物的含量。结果该化合物的19 F-NMR检测方法在0.5~50μg/mL具有良好的线性(r2=0.9966),该方法的定量限0.5μg/mL,检出限0.2μg/mL;同时考察了该化合物在不同浓度下的测量准确度。 展开更多
关键词 核磁共振 ^^19f-NMR 1-氰基-2 2 2-三氟-1-乙酸苯乙酯 定量 含量
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^(19)F NMR的特点 被引量:13
16
作者 李临生 李燕 +1 位作者 兰云军 张建华 《波谱学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期353-364,共12页
19F的磁旋比和相对灵敏度接近质子;^(19)F NMR化学位移范围可达δ1000,谱图分辨率高;^(19)F NMR对环境因素较氢谱远为敏感、复杂,可反映出化合物结构的细微差别.由于正常生物体内含氟成分很少,干扰小,因此在生物医学研究中引入氟代物进... 19F的磁旋比和相对灵敏度接近质子;^(19)F NMR化学位移范围可达δ1000,谱图分辨率高;^(19)F NMR对环境因素较氢谱远为敏感、复杂,可反映出化合物结构的细微差别.由于正常生物体内含氟成分很少,干扰小,因此在生物医学研究中引入氟代物进行^(19)F NMR研究有特殊意义.对氟化物的^(19)F NMR化学位移和偶合常数的范围也分类作了总结. 展开更多
关键词 ^^(19)f NMR 有机氟 氟化物 化学位移 偶合常数 生物医学
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^19F qNMR在含氟制剂含量测定中的应用 被引量:1
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作者 刘阳 袁松 +1 位作者 赵庄 何兰 《药物分析杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第9期1507-1510,共4页
目的:建立^(19)F核磁共振定量(qNMR)测定片剂中含氟药物含量的方法。方法:以4,4′-二氟二苯甲酮为内标,氘代DMSO为溶剂,采用反门控去耦的zgfhigqn.2脉冲序列,利用^(19)F qNMR测定卡格列净片中卡格列净含量。试验参数如下:谱宽SW=40×... 目的:建立^(19)F核磁共振定量(qNMR)测定片剂中含氟药物含量的方法。方法:以4,4′-二氟二苯甲酮为内标,氘代DMSO为溶剂,采用反门控去耦的zgfhigqn.2脉冲序列,利用^(19)F qNMR测定卡格列净片中卡格列净含量。试验参数如下:谱宽SW=40×10-6,射频中心频率O1P=-110×10-6,采样点数TD=128 k,采样时间AQ=3.5 s,弛豫延迟时间D1=20 s,扫描次数32次。结果:通过简单的过滤或离心处理后,使用^(19)F qNMR测得6片卡格列净片中卡格列净含量分别为98.2%、98.9%、101.0%、99.7%、99.2%,与HPLC外标法测定结果相近。结论:^(19)F qNMR可以用于含氟药物制剂中药品含量测定,这种技术前处理简单,检测速度快,不受辅料等干扰,可以用于含氟药物制剂含量的高通量测定。 展开更多
关键词 氟核磁共振定量 卡格列净 含量测定 质量控制
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SF_4分子^(19)F-NMR光谱的群论分析
18
作者 童金强 李再高 上官云凤 《荆州师专学报》 2000年第2期97-99,共3页
用群论的方法 ,从理论上对SF4分子的核磁共振光谱作出了合理的说明 ,结果表明SF4分子既不可能是Td构型 .也不可能是C3V 构型 。
关键词 点群 构型 ^^19f核磁共振 “平均化”效应 群论 Sf4
全文增补中
基于FGFR非对称二聚化模型的FGF19改构体的设计及活性评估
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作者 赵静 操宇 +1 位作者 周传仁 吴佳敏 《温州医科大学学报》 CAS 2024年第8期614-622,共9页
目的:探究以成纤维细胞生长因子受体(FGFR)非对称二聚化模型为结构基础设计成纤维细胞生长因子19(FGF19)的非促肿瘤型改构体,并对其增殖活性和代谢活性进行评估,使其成为治疗胆汁淤积症的候选药物之一。方法:利用pymol软件分析蛋白晶体... 目的:探究以成纤维细胞生长因子受体(FGFR)非对称二聚化模型为结构基础设计成纤维细胞生长因子19(FGF19)的非促肿瘤型改构体,并对其增殖活性和代谢活性进行评估,使其成为治疗胆汁淤积症的候选药物之一。方法:利用pymol软件分析蛋白晶体结构并设计FGF19改构体,将构建好的FGF19改构体(FGF19^(F159A))与FGF19野生型(FGF19^(WT))的质粒转化到大肠杆菌感受态细胞中,经过诱导表达、变性、复性获得正确构象的蛋白,经过镍柱亲和层析与分子排阻色谱方法纯化得到目的蛋白;通过蛋白邻位连接技术(PLA)对比FGF19^(WT)和FGF19^(F159A)诱导受体二聚化的程度;MTT实验检测细胞增殖活性;Western blot实验检测磷酸化成纤维细胞生长因子受体底物2(P-FRS2)、磷酸化细胞外调节蛋白激酶(P-ERK)、胆固醇7α-羟化酶(Cyp7A1)的蛋白表达水平;免疫组化法检测动物肝脏中促增殖指标Ki67和增殖细胞核抗原(PCNA)的蛋白表达水平;RT-qPCR法检测动物肝脏中肿瘤指标甲胎蛋白(AFP)、细胞周期蛋白A2(CCNA2)、表皮生长因子受体(EGFR)的相对mRNA水平;质谱法测定肝脏中胆酸(CA)、脱氧胆酸(DCA)、熊去氧胆酸(UDCA)、鹅去氧胆酸(CDCA)的含量;以db/db小鼠为模型,连续给药1个月,监测药物的慢性降糖效果,糖耐量实验检测其对糖耐量的改善能力。结果:以蛋白结构为基础成功构建了FGF19^(F159A),经过表达纯化得到了高纯度的目的蛋白;PLA结果显示,与FGF19^(WT)组相比,FGF19^(F159A)诱导受体二聚化的能力明显减弱(P<0.01);MTT实验显示,与FGF19^(WT)组相比,FGF19^(F159A)的促增殖活性明显减弱(P<0.05);Western blot实验表明,与FGF19^(WT)组相比,FGF19^(F159A)明显下调P-FRS2和P-ERK的蛋白表达水平(P<0.05);免疫组化结果显示,与FGF19^(WT)组相比,FGF19^(F159A)组Ki67和PCNA的蛋白表达水平显著降低(P<0.01);与FGF19^(WT)组相比,FGF19^(F159A)组AFP、CCNA2、EGFR的mRNA水平明显降低(P<0.01);与FGF19^(WT)组相比,FGF19^(F159A)组肝脏中Cyp7A1的蛋白表达水平,胆汁酸CA、DCA、UDCA、CDCA的含量差异无统计学意义(P>0.05);与FGF19^(WT)组相比,FGF19^(F159A)组的降糖能力和改善糖耐量的能力差异无统计学意义(P>0.05)。结论:基于FGFR非对称二聚化模型设计的FGF19改构体FGF19^(F159A)能够在极大减弱细胞增殖活性的同时保留其代谢活性,有望成为治疗胆汁淤积症的候选药物。 展开更多
关键词 ^fGf19^(f159A) ^fGf19^(WT) 非对称二聚化模型 胆汁酸 肿瘤活性
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^(13)C-^(19)F去耦在含氟有机化合物结构鉴定中的应用 被引量:1
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作者 李姣 姚巍 《浙江化工》 CAS 2013年第6期37-39,共3页
对含氟有机化合物开展13C-19F去耦实验,分析去耦效果,结合13C-19F去耦实验归属含氟有机化合物13C NMR化学位移。
关键词 13C-19f去耦 核磁共振 含氟有机化合物
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