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黑曲霉葡萄糖氧化酶基因的原核表达及其蛋白产物的Western-blot分析 被引量:5
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作者 安玉麟 孙瑞芬 +2 位作者 张鹤龄 郭树春 闫素丽 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2009年第4期84-87,共4页
为进一步研究黑曲酶中国株3.758葡萄糖氧化酶(GOD)在大肠杆菌中的表达水平和条件,将黑曲霉中国株3.758的葡萄糖氧化酶(GOD)基因定向克隆于原核表达载体pET-11a上,构建了融合表达的重组质粒pET/GO,转化E.coliBL21(DE3)plysS,用IPTG诱导,... 为进一步研究黑曲酶中国株3.758葡萄糖氧化酶(GOD)在大肠杆菌中的表达水平和条件,将黑曲霉中国株3.758的葡萄糖氧化酶(GOD)基因定向克隆于原核表达载体pET-11a上,构建了融合表达的重组质粒pET/GO,转化E.coliBL21(DE3)plysS,用IPTG诱导,超声波粉碎细菌细胞,SDS-PAGE电泳检测,GOD基因获得了表达,表达的融合蛋白相对分子质量为66.5 kDa。用市售葡萄糖氧化酶免疫家兔获得抗血清,酶联法(ELISA)测定其效价为106,West-ern-blot分析证明表达的融合蛋白与兔抗GOD血清有较强的特异性,为黑曲霉3.758葡萄糖氧化酶(GOD)抗体的制备奠定了基础。 展开更多
关键词 黑曲霉3.758 葡萄糖氧化酶基因 融合表达 抗血清 ELISA western-blot
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赤点石斑鱼诺达病毒的纯化及其衣壳蛋白的Western-blot分析 被引量:9
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作者 黄剑南 林蠡 +2 位作者 翁少萍 冯娟 何建国 《南方水产》 2005年第5期33-36,共4页
采用差速离心,蔗糖(10%~40%,W/V)密度梯度离心和氯化铯(30%~40%,W/W)等密度梯度离心法,对赤点石斑鱼诺达病毒大亚湾株(RGCN)进行了纯化,测定计算其浮密度为1.3102~1.3243g·cm-3。通过Westernblot法检测到的病毒的结构蛋白的分... 采用差速离心,蔗糖(10%~40%,W/V)密度梯度离心和氯化铯(30%~40%,W/W)等密度梯度离心法,对赤点石斑鱼诺达病毒大亚湾株(RGCN)进行了纯化,测定计算其浮密度为1.3102~1.3243g·cm-3。通过Westernblot法检测到的病毒的结构蛋白的分子量为37和31kDa,而以31kDa的蛋白为主。 展开更多
关键词 赤点石斑鱼诺达病毒 衣壳蛋白 纯化 western-blot分析
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Western-blot法测定重组人纽表位肽12的抗原特异性 被引量:1
3
作者 邓灵福 祁超 +2 位作者 李文新 冯玉文 王莹莹 《华中师范大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 2006年第1期79-81,共3页
利用Western-blot法测定重组人纽表位肽12的抗原特异性,结果显示目标蛋白有明显的显色带.本方法灵敏、准确、简单,适用于重组人纽表位肽12抗原特异性检测.
关键词 western-blot SDS-PAGE 抗原特异性
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Western-blot综合性实验在分子诊断学教学中的实施 被引量:2
4
作者 李江滨 谭荧飞 李育超 《科技创新导报》 2012年第36期142-142,共1页
对Western-blot综合性实验在分子诊断学教学中的实施情况进行探讨,并分析其教学中存在的问题及提出解决对策,为有关院校开设Western-blot实验教学提供参考。
关键词 western-blot 综合性实验 教学
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叶用莴苣幼苗幼叶总蛋白SDS-PAGE和Western-blot方法的优化 被引量:3
5
作者 李洋 韩莹琰 +1 位作者 范双喜 陈曙红 《中国农学通报》 CSCD 2012年第31期153-156,共4页
为建立一套适合叶用莴苣(Lactuca sativeL.)热激蛋白研究的SDS-PAGE和Western-blot方法。以叶用莴苣W7为材料,采用改进的TCA/Acetone法提取叶片蛋白,比较了2种电压下SDS凝胶分离蛋白质的效果,使用4℃保存2周的抗体稀释液,并且得到了较... 为建立一套适合叶用莴苣(Lactuca sativeL.)热激蛋白研究的SDS-PAGE和Western-blot方法。以叶用莴苣W7为材料,采用改进的TCA/Acetone法提取叶片蛋白,比较了2种电压下SDS凝胶分离蛋白质的效果,使用4℃保存2周的抗体稀释液,并且得到了较清晰的热激蛋白70和内参蛋白Rubisco条带,初步确定了叶用莴苣叶片热激蛋白的western-blot实验条件。 展开更多
关键词 叶用莴苣 热激蛋白 western-blot
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麻疯树外植体愈伤组织中毒蛋白的Western-blot鉴定 被引量:8
6
作者 戎芳 王胜华 +5 位作者 赵小光 郭亮 魏琴 唐琳 徐莺 陈放 《四川大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期206-209,共4页
The proteins from endosperm, root, stem, leaf, leafstalk of Jatropha curcas L. and their calli were hybridized to the seed toxin protein (curcin) of Jatropha curcas L. by western blot. The result showed that the curci... The proteins from endosperm, root, stem, leaf, leafstalk of Jatropha curcas L. and their calli were hybridized to the seed toxin protein (curcin) of Jatropha curcas L. by western blot. The result showed that the curcin was specifically expressed in the endosperm and its calli, while it was not detected in root, stem, leaf, and leafstalk of Jatropha curcas L. and their calli . This study indicated that calli induced from endosperm can be used to produce curcin. 展开更多
关键词 毒蛋白 愈伤组织 外植体 麻疯树 树种 种子 抗病虫能力 中毒 体动 抗癌药物
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果梅CCoAOMT蛋白Western-blot体系建立与优化
7
作者 张勇 侍婷 +1 位作者 吴欣欣 高志红 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期977-982,共6页
[目的]本文旨在建立一套适合于果梅(Prunus mume)Western-blot的蛋白质提取和技术体系。[方法]以果梅品种‘小绿萼’花芽为试验材料,以咖啡酰辅酶A-O-甲基转移酶(CCo AOMT)为目标蛋白,分别采用Tris-HCl法和SDS上样缓冲液直接提取法,比较... [目的]本文旨在建立一套适合于果梅(Prunus mume)Western-blot的蛋白质提取和技术体系。[方法]以果梅品种‘小绿萼’花芽为试验材料,以咖啡酰辅酶A-O-甲基转移酶(CCo AOMT)为目标蛋白,分别采用Tris-HCl法和SDS上样缓冲液直接提取法,比较2种提取方法的优劣,并通过设置不同的蛋白上样量(20、30、40、50及60μg)、转膜时间(40、60及90 min)、一抗稀释比例(1∶500、1∶1 000、1∶2 000及1∶5 000)以及一抗孵育时间(室温1 h、室温2 h及4℃过夜)等组合,研究适合果梅花芽CCo AOMT蛋白Western-blot的最佳体系。[结果]成功建立了快速、灵敏、特异的Western-blot体系,确定了果梅花芽CCoAOMT蛋白的Western-blot试验条件。SDS上样缓冲液直接提取法提取蛋白快速、高效,最佳条件为以蛋白上样量30μg、转膜1 h、一抗稀释比例1∶1 000以及一抗孵育2 h。[结论]本试验建立了简单、快速和重复性好的SDS上样缓冲液直接提取法以及优化的上样量、转膜时间和抗体浓度等Western-blot体系,为梅等木本植物开展Western-blot研究提供依据。 展开更多
关键词 果梅 花芽 蛋白提取 咖啡酰辅酶A-O-甲基转移酶(CCoAOMT) western-blot
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豆状带绦虫抗原的SDS-PAGE及Western-blot分析 被引量:1
8
作者 张倩 李作磊 +5 位作者 尚清炎 范希萍 苟惠天 韩进欢 韩乐乐 孙晓林 《甘肃农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期11-14,20,共5页
为筛选豆状囊尾蚴的特异性抗原,采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和免疫印迹(Western-blot)技术对自然感染的豆状带绦虫成虫、幼虫的头节、囊壁可溶性抗原及囊液抗原进行了分析.结果表明:从豆状带绦虫不同发育阶... 为筛选豆状囊尾蚴的特异性抗原,采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和免疫印迹(Western-blot)技术对自然感染的豆状带绦虫成虫、幼虫的头节、囊壁可溶性抗原及囊液抗原进行了分析.结果表明:从豆状带绦虫不同发育阶段的虫体中分离出5~12条主要蛋白区带,分子质量为25~114 ku.以第7周自然感染家兔血清对7种虫体抗原进行的Western-blot分析显示,7种虫体抗原在42、57、63 ku处均能被兔抗豆状囊尾蚴血清识别.以家兔阳性血清中提取出来的 IgG免疫球蛋白对 7种虫体抗原进行的 Western-blot分析显示,7种虫体抗原在63 ku处均能被兔抗豆状囊尾蚴血清识别.说明63 ku蛋白带可作为预防兔豆状囊尾蚴病的候选疫苗抗原.试验初步阐明了豆状带绦虫 7种不同抗原的部分生化特性,为对该抗原的进一步深入研究奠定了基础. 展开更多
关键词 十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳 免疫印迹 豆状带绦虫 抗原
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旋毛虫成虫可溶性抗原SDS-PAGE及Western-blot分析 被引量:1
9
作者 申丽洁 申元英 朱声华 《大理医学院学报》 2000年第1期7-8,共2页
目的 :初步分析旋毛虫成虫可溶性抗原的蛋白组份及免疫原性。方法 :采用SDS -PAGE和氨银染色对该抗原进行蛋白组份的分析 ,采用Westerm -blot分析该抗原的免疫原性。结果 :SDS -PAGE可显示40条多肽 ,其中主带8条 ;抗血清可特异性地识别1... 目的 :初步分析旋毛虫成虫可溶性抗原的蛋白组份及免疫原性。方法 :采用SDS -PAGE和氨银染色对该抗原进行蛋白组份的分析 ,采用Westerm -blot分析该抗原的免疫原性。结果 :SDS -PAGE可显示40条多肽 ,其中主带8条 ;抗血清可特异性地识别16条多肽抗原 ,其中有3条主带。结论 :实验结果表明旋毛虫成虫可溶性抗原的蛋白组份及抗原性均较复杂。 展开更多
关键词 旋毛虫 旋毛虫抗原 免疫印迹试验 SDS-PAGE
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Western-blot方法分析人甲状腺及其肿瘤组织中bFGFs
10
作者 陈慧敏 李尧华 +1 位作者 刘玉和 陈奕桦 《吉林医学院学报》 1998年第1期13-14,共2页
目的:研究人甲状腺瘤的发生分期bFGFs基因异常表达的关系。方法:采用Western-blot方法对人甲状腺及其肿瘤组织来源的bFGFs进行分析研究。结果:人正常甲状腺组织来源的bFGFs分子量为17KD和18KD,... 目的:研究人甲状腺瘤的发生分期bFGFs基因异常表达的关系。方法:采用Western-blot方法对人甲状腺及其肿瘤组织来源的bFGFs进行分析研究。结果:人正常甲状腺组织来源的bFGFs分子量为17KD和18KD,而人甲状腺肿瘤组织来源的bFGFs为14KD、17KD和18KD。结论:14KDbFGFs的出现提示人甲状腺肿瘤的发生和发展可能与bFGFs的基因异常表达有关。 展开更多
关键词 western-blot 甲状腺肿瘤 bFGFs
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茶树叶片类脱水素蛋白的Western-blot分析 被引量:3
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作者 舒锡婷 欧阳娜 +2 位作者 江昌俊 邓威威 李叶云 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第12期2448-2454,共7页
为了解茶树脱水素种类与功能,采用Western-blot技术,研究了不同季节及越冬过程中茶树叶片脱水素蛋白家族的表达模式。结果显示:(1)茶树叶片总蛋白提取采用酚-甲醇/醋酸铵沉淀法,用时短、蛋白浓度高、SDSPAGE电泳条带清晰,背景干净,... 为了解茶树脱水素种类与功能,采用Western-blot技术,研究了不同季节及越冬过程中茶树叶片脱水素蛋白家族的表达模式。结果显示:(1)茶树叶片总蛋白提取采用酚-甲醇/醋酸铵沉淀法,用时短、蛋白浓度高、SDSPAGE电泳条带清晰,背景干净,满足茶树Western-blot技术要求。(2)在不同季节及越冬期中发现14~95kD共9种不同分子量的茶树类脱水素蛋白,其中95、65、48、37、34和14kD等6种蛋白表达量较为稳定,季节与越冬期变化不明显;58kD脱水素仅在冬季表达,越冬期不断上升,2月份增加到最高,表达丰度高;28kD脱水素蛋白在冬季表达量高,越冬期与茶树抗寒力变化规律一致;21kD脱水素在夏季和越冬期后期有较高的表达。研究表明,这3种脱水素可能在茶树抗逆中起着重要作用。 展开更多
关键词 茶树 脱水素 蛋白质提取 蛋白质印迹法
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广州地区献血者人类嗜T淋巴细胞病毒流行情况调查
12
作者 李玉笑 戎霞 +3 位作者 何博 杜荣松 单振刚 廖峭 《中国输血杂志》 2025年第2期222-226,243,共6页
目的 了解广州地区献血者人类嗜T淋巴细胞病毒流行情况,为本地区采供血工作提供科学依据。方法 对广州地区2016年3月—2021年12月2 116 951名献血者采用ELISA法进行抗-HTLV初筛检测,初筛检测呈反应性者再用蛋白印迹法(WB)做确证检测。... 目的 了解广州地区献血者人类嗜T淋巴细胞病毒流行情况,为本地区采供血工作提供科学依据。方法 对广州地区2016年3月—2021年12月2 116 951名献血者采用ELISA法进行抗-HTLV初筛检测,初筛检测呈反应性者再用蛋白印迹法(WB)做确证检测。定性资料用SPSS19软件对数据进行统计学分析;用Joinpoint软件对2016—2021年HTLV确证试验总阳性率进行趋势分析,根据ACP(ananual percent change)来判断趋势变化是否有统计学差异。结果 2016年3月—2021年12月广州地区献血者抗-HTLV ELISA初筛总不合格率为0.019 7%(416/2 116 951),WB确诊阳性率为0.001 1%(23/2 116 951);主城6区个人献血者HTLV确证总阳性率(0.002 12%,19/895 301)比团体献血者(0.000 32%,3/951 947)高(P<0.05);主城6区HTLV确证总阳性率(0.001 19%)与非主城3区(0.000 37%)无差异(P>0.05),主城6区及广州地区(包括主城6区和非主城3区)HTLV感染的流行趋势无显著性上升或下降。结论 广州地区献血人群HTLV保持低水平流行趋势。 展开更多
关键词 人类嗜T淋巴细胞病毒 献血者 ELISA 蛋白印迹法 趋势分析
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不同方法检测非先天性梅毒患儿体内梅毒抗体衰减规律的应用评价
13
作者 徐敬轩 彭文红 +6 位作者 王佳丽 钱云芳 赵仙华 冷柠 杨勇 储磊 谢而付 《临床检验杂志》 2025年第2期88-91,共4页
目的探讨不同检测方法在监测非先天性梅毒患儿体内梅毒特异性抗体衰减规律中的应用价值。方法纳入80例非先天性梅毒患儿,采集出生后血清标本,分别用电化学发光法(ECLIA)、免疫印迹法(WB)、梅毒螺旋体颗粒凝集试验(TPPA)、酶联免疫吸附试... 目的探讨不同检测方法在监测非先天性梅毒患儿体内梅毒特异性抗体衰减规律中的应用价值。方法纳入80例非先天性梅毒患儿,采集出生后血清标本,分别用电化学发光法(ECLIA)、免疫印迹法(WB)、梅毒螺旋体颗粒凝集试验(TPPA)、酶联免疫吸附试验(ELISA)和甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)检测梅毒特异性抗体。每3个月随访1次,直至ELISA和TRUST结果转阴。结果ECLIA法显示,非先天性梅毒患儿体内梅毒特异性抗体水平在出生后2~3个月内可降至出生时的25%,且衰减速度与初始浓度无关。WB法提示,非先天性梅毒患儿出生时的特异性IgG条带与母体一致,其消退顺序依次为TPN47、TPN15、TPN45和TPN17。受方法学限制,ELISA法在高浓度抗体存在时,出生后前3个月吸光度变化不明显,但对低浓度抗体的检出灵敏度高。以ELISA阳性为参考,比较ECLI、TPPA和WB方法的检出率:出生时分别为100%、100%和90%,3月龄时为100%、100%和75%,6月龄时为100%、46%和15%,9月龄时为83%、33%和0%。TRUST阳性率在出生时为17.5%,3月龄随访时均转阴。结论梅毒特异性IgG抗体可完全传递给胎儿,并在出生后按一定规律消退。综合分析4种方法的检测结果,ECLIA法动态检测可在随访3个月时提前判断非先天性梅毒风险或终止随访,WB法早于TPPA法提示阴转,而ELISA法需随访时间最长。 展开更多
关键词 妊娠梅毒 甲苯胺红不加热血清试验 酶联免疫吸附试验 电化学发光法 免疫印迹法
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过敏性疾病患者特异性免疫球蛋白E分布特征的分析
14
作者 赵鑫 叶蕊琪 +1 位作者 强雪芹 杨玉洁 《临床医药实践》 2025年第2期117-121,共5页
目的:探讨过敏性疾病患者过敏原特异性免疫球蛋白E(sIgE)水平对过敏性疾病的诊断、治疗及预防的意义。方法:采用回顾性设计,利用帝肯TECAN全自动蛋白印迹仪和浩欧博过敏原sIgE抗体检测试剂盒,对2020年1月-2021年12月就诊的3260例具有过... 目的:探讨过敏性疾病患者过敏原特异性免疫球蛋白E(sIgE)水平对过敏性疾病的诊断、治疗及预防的意义。方法:采用回顾性设计,利用帝肯TECAN全自动蛋白印迹仪和浩欧博过敏原sIgE抗体检测试剂盒,对2020年1月-2021年12月就诊的3260例具有过敏症状患者的总免疫球蛋白E(IgE)和sIgE进行定量检测。结果:随着年龄的增长,不同性别人群总IgE阳性率均呈先上升后下降的趋势。男性和女性在婴儿、儿童和青年三个年龄段的总IgE阳性率比较,差异有统计学意义(P<0.05)。男性在青年时期(19~<36岁)的总IgE阳性率(66.87%)最高;女性在儿童时期(5~<12岁)的总IgE阳性率(71.96%)最高。尘螨/粉螨、屋尘和猫毛皮屑/狗毛皮屑是常见的吸入性过敏原,牛奶、牛肉/羊肉和蛋清/蛋黄则是常见的食入性过敏原。在不同年龄段中,除婴儿(<1岁)外,吸入性过敏原的阳性率普遍高于食入性过敏原。在不同性别比较中,吸入性过敏原阳性率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。女性食入性过敏原(芒果/菠萝/苹果/桃子/草莓)的阳性率显著高于男性(P>0.05)。食入性和吸入性过敏等级低中度患者占比较高,过敏等级越高的患者占比越少。过敏原致敏数量分析显示,大部分患者对1种或2种过敏物质呈阳性反应。结论:过敏性疾病患者中过敏原sIgE在不同性别不同年龄段中的分布存在差异,过敏原检测能够为过敏性疾病的预防、诊断和治疗提供依据,有助于实现更精准的个体化医疗。 展开更多
关键词 过敏性疾病 特异性免疫球蛋白E 性别差异 年龄分布 免疫印迹法
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自体黄韧带干预TGF-β1/Smad3信号通路抑制兔硬膜外纤维瘢痕形成的实验研究
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作者 王鹏 张德宝 +5 位作者 张杨 张海斌 时嘉 张少杰 李树文 吴一民 《中国临床解剖学杂志》 北大核心 2025年第1期69-75,共7页
目的通过对不同组别的兔分别行椎板切除术,对比其各组术后3、6周TGF-β1、Smad3蛋白表达量以及两者相应的mRNA表达水平,从而探讨自体黄韧带抑制腰椎术后硬膜外纤维瘢痕形成与TGF-β1/Smad3信号通路的关系。方法将于内蒙古医科大学实验... 目的通过对不同组别的兔分别行椎板切除术,对比其各组术后3、6周TGF-β1、Smad3蛋白表达量以及两者相应的mRNA表达水平,从而探讨自体黄韧带抑制腰椎术后硬膜外纤维瘢痕形成与TGF-β1/Smad3信号通路的关系。方法将于内蒙古医科大学实验动物中心购买的48只6~8月龄的日本大白兔,分为保留黄韧带组,自体脂肪回置组,不保留黄韧带组,对不同组别进行手术造模。术后对每组间的实验动物分别饲养3、6周后进行处死(3、6周各处死8只)。采用Western blot蛋白定量分析、RTPCR技术测定各组样本中的TGF-β1、Smad3蛋白含量及mRNA表达水平,并将以上数据分别进行组间比较,分析其差异性。结果①Western blot检测结果:3、6周保留组TGF-β1、Smad3蛋白表达量小于不保留组和脂肪组(P<0.05),不保留组和脂肪组之间并未发现明显差异。②RT-PCR结果显示:对于TGF-β1、Smad3两者的mRNA表达量而言,3、6周保留组明显小于不保留组和脂肪组(P<0.05),不保留组和脂肪组之间并未见明显差异。结论腰椎手术术后,会形成不同程度的硬膜外纤维瘢痕。若在术中保留自体黄韧带,可减少硬膜外成纤维细胞的形成,其机制与TGF-β1/Smad3信号通路有关。 展开更多
关键词 黄韧带 纤维瘢痕 TGF-β1/Smad3信号通路 Western blot RT-PCR技术
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微小RNA-874-3p通过靶向调控斑菲素蛋白3影响肺腺癌细胞生物学行为及机制
16
作者 陈帆 滕召虎 +6 位作者 房涛 任君旭 张静 李雪 王怡璇 林旭 吴靖芳 《解剖学报》 2025年第2期188-201,共14页
目的探讨微小RNA-874-3p(miR-874-3p)靶向调控斑菲素蛋白3(PKP3)对肺腺癌细胞恶性生物学行为的影响及作用机制。方法免疫组织化学法和免疫细胞化学法分别检测肺腺癌组织芯片与肺腺癌细胞系A549细胞PKP3的表达水平,并分析与肺腺癌患者临... 目的探讨微小RNA-874-3p(miR-874-3p)靶向调控斑菲素蛋白3(PKP3)对肺腺癌细胞恶性生物学行为的影响及作用机制。方法免疫组织化学法和免疫细胞化学法分别检测肺腺癌组织芯片与肺腺癌细胞系A549细胞PKP3的表达水平,并分析与肺腺癌患者临床病理特征之间的关系。细胞实验分A549细胞组(空白对照组)、miR-NC组(转染miR-NC)、miR-mimics组(转染miR-874-3p mimics)、sh-NC组(转染PKP3沉默质粒的对照组)、sh-PKP3组(转染PKP3沉默质粒)、miR+pcDNA-PKP3组(转染miR-874-3p mimics+pcDNA-PKP3,挽救组)、miR+pcDNA-NC组(转染miR-874-3p mimics+pcDNA-NC),分别对各组细胞的增殖、侵袭、迁移以及凋亡能力进行检测。用ENCORI数据库预测PKP3的上游基因,双荧光素酶实验检测miR-874-3p与PKP3靶向关系。Western blotting检测MAPK/mTOR通路相关蛋白。结果PKP3在肺腺癌组织中的表达水平明显高于癌旁组织,PKP3高表达与临床分期、肿瘤大小及淋巴结转移有关(P<0.05),A549细胞中PKP3表达水平显著增高,miR-874-3p表达降低(P<0.05)。过表达miR-874-3p使PKP3表达水平下降(P<0.05)。与对照组相比,过表达miR-874-3p与沉默PKP3均能抑制A549细胞克隆及侵袭能力,引起细胞周期阻滞,降低A549细胞中细胞周期蛋白依赖性激酶4(CDK4)、细胞周期蛋白(cyclin)D1、cyclin E1的表达水平(P<0.05),上调Bax蛋白及Caspase-3蛋白表达(P<0.05),增加细胞凋亡。过表达PKP3可以逆转过表达miR-874-3p产生的生物学行为。过表达miR-874-3p与沉默PKP3均显著降低P38 MAPK、mTOR磷酸化蛋白的表达水平。结论MiR-874-3p能够靶向负调控PKP3表达并通过MAPK/mTOR通路抑制A549细胞恶性生物学行为。 展开更多
关键词 微小RNA-874-3p 斑菲素蛋白3 肺腺癌 增殖 侵袭 免疫印迹法
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医学生物化学实验教学与思政教育融合探索
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作者 武丽涛 李梦瑶 +8 位作者 闫小飞 宁启兰 蒋小英 杨旭东 蓝茜 蒋晓刚 吴锋 雷莉 李冬民 《医学教育研究与实践》 2025年第1期81-86,101,共7页
基于免疫印迹(Western blotting)实验,探讨在医学生物化学实验教学中引入思想政治教育的重要性及其实践方法,旨在提高实验教学的思政水平,及时跟进思政教育融入高校实验课堂的实效性。Western blotting实验作为生物化学领域的重要实验技... 基于免疫印迹(Western blotting)实验,探讨在医学生物化学实验教学中引入思想政治教育的重要性及其实践方法,旨在提高实验教学的思政水平,及时跟进思政教育融入高校实验课堂的实效性。Western blotting实验作为生物化学领域的重要实验技术,不仅是培养学生实验技能的重要手段,也是教师进行思政教育的一项重要载体。在Western blotting实验中探索思政元素与教育教学的相互联系是目前较为新颖的一个教学实践角度,将科学实验与思想政治教育相结合,以培养学生在科学精神、合作精神、创新精神等方面的能力,以及社会责任感。将思想政治教育有效地融入科学实验中,培养学生的综合素质,促进创新型医学高素质人才的全面发展。 展开更多
关键词 免疫印记 实验教学 思政教育 科学精神 人才培养
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北京市丰台区1047例血清抗核抗体谱检测结果分析
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作者 孙孟洋 李敏 +1 位作者 景淑贤 于洪远 《黑龙江医学》 2025年第6期698-700,共3页
目的:回顾性分析北京市丰台区1 047例血清抗核抗体谱(ANAs)检测结果。方法:选取2023年9—11月北京航天总医院收治的1 047例患者作为研究对象,采用免疫印迹法对1 047例患者进行ANAs检测,对检测结果进行分析。结果:1 047例患者中ANAs阳性... 目的:回顾性分析北京市丰台区1 047例血清抗核抗体谱(ANAs)检测结果。方法:选取2023年9—11月北京航天总医院收治的1 047例患者作为研究对象,采用免疫印迹法对1 047例患者进行ANAs检测,对检测结果进行分析。结果:1 047例患者中ANAs阳性172例,样本总阳性率为16.43%。阳性率排名前5位的抗体分别是抗Ro-52抗体、抗U1-n RNP抗体、抗SS-A抗体、抗组蛋白抗体和抗Sm抗体。按性别分类,男性样本497例,其中阳性标本68例,阳性率为13.68%;女性样本550例,其中阳性标本104例,阳性率为18.91%。女性阳性率高于男性,差异有统计学意义(χ^(2)=5.195,P<0.05)。按年龄分类,≤40岁年龄组阳性标本30例,阳性率为2.87%;41~60岁年龄组阳性标本46例,阳性率为4.39%;>60岁年龄组阳性标本96例,阳性率为9.17%。结论:北京丰台区1 047例血清ANAs检测,女性阳性率高于男性,且随着年龄的增长,阳性率逐渐增高。 展开更多
关键词 抗核抗体谱 免疫印迹法 血清
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肝细胞癌中O-GlcNAc转移酶的表达水平与临床意义
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作者 罗雨盟 段思诺 +2 位作者 黎广 王晨杰 吴向未 《医药前沿》 2025年第6期49-51,共3页
目的分析氧连氮-乙酰葡萄糖胺(O-GlcNAc)转移酶(OGT)在肝细胞癌中的表达水平及其临床意义。方法选取2022年7月-2023年12月石河子大学第一附属医院肝胆外科20例肝细胞癌患者、20例肝硬化患者及20名健康体检者。采用蛋白质印迹法检测肝细... 目的分析氧连氮-乙酰葡萄糖胺(O-GlcNAc)转移酶(OGT)在肝细胞癌中的表达水平及其临床意义。方法选取2022年7月-2023年12月石河子大学第一附属医院肝胆外科20例肝细胞癌患者、20例肝硬化患者及20名健康体检者。采用蛋白质印迹法检测肝细胞癌与瘤旁组织中OGT表达水平,采用酶联免疫吸附法检测血清OGT表达水平,比较肝细胞癌患者肝细胞癌组织与癌旁组织OGT蛋白表达水平及肝细胞癌患者、肝硬化患者、健康体检者血清OGT水平。结果肝细胞癌组织OGT蛋白表达水平高于癌旁组织(P<0.05);肝细胞癌患者与肝硬化患者血清OGT水平均高于健康体检者(P<0.05);肝细胞癌及肝硬化患者血清OGT水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论肝细胞癌组织中OGT表达水平较高,检测OGT表达水平可指导临床诊断肝细胞癌,有望作为肝细胞癌的重要诊断靶点。 展开更多
关键词 肝细胞癌 氧连氮-乙酰葡萄糖胺转移酶 肝硬化 蛋白质印迹 酶联免疫吸附
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不同滋阴补肾法干预去势大鼠破骨通路的机制
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作者 黄小彬 葛继荣 +4 位作者 李生强 谢丽华 黄景文 何艳艳 薛立鹏 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2025年第6期1214-1219,共6页
背景:六味地黄丸以“三补三泻”为配伍特点,补泻兼施以滋阴补肾;左归丸以“阳中求阴”为配伍特点,以阳促阴补肾。二者同属于滋阴补肾法,其在证候和细胞分子水平等都发挥较好的疗效。目的:观察六味地黄丸和左归丸在骨代谢中的作用,探讨... 背景:六味地黄丸以“三补三泻”为配伍特点,补泻兼施以滋阴补肾;左归丸以“阳中求阴”为配伍特点,以阳促阴补肾。二者同属于滋阴补肾法,其在证候和细胞分子水平等都发挥较好的疗效。目的:观察六味地黄丸和左归丸在骨代谢中的作用,探讨其在破骨通路骨保护素(osteoprotegerin,OPG)/核因子κB受体活化因子配体(receptoractivatorofnuclearfactor-κBligand,RANKL)的作用机制。方法:将32只SD随机大鼠分为模型组、六味地黄丸组、左归丸组、假手术组,每组8只。除假手术组大鼠外,其余大鼠切除双侧卵巢制备骨质疏松模型。术后30 d开始六味地黄丸组大鼠灌胃六味地黄丸1.125 g/(kg·d);左归丸组大鼠灌胃左归丸2.25 g/(kg·d);假手术组和模型组灌胃生理盐水10 mL/(kg·d)。灌胃12周后,取大鼠胫骨检测骨密度,采用ELISA检测血清中雌激素E2、骨碱性磷酸酶、cAMP/cGMP水平,Westernblot法检测股骨中OPG/RANKL的表达情况。结果与结论:①与假手术组相比,模型组骨密度及雌激素E2、骨碱性磷酸酶水平降低(P<0.05),cAMP/cGMP水平升高(P<0.05)。②与模型组相比,六味地黄丸组和左归丸组骨密度显著提高(P<0.05);骨碱性磷酸酶均显著提高(P<0.05);左归丸组cAMP/cGMP水平明显降低(P<0.05)和上调OPG蛋白表达(P<0.05),六味地黄丸组上调OPG蛋白表达和下调RANKL蛋白表达均有作用(P<0.05);两组均不能显著提高雌激素E2水平(P>0.05)。③结果显示,“阳中求阴”的左归丸能够有效提高OPG表达,不能下调RANKL蛋白,而“三补三泻”的六味地黄丸能双向调节OPG和RANKL蛋白的表达,提示了六味地黄丸对抑制破骨功能方面可能比左归丸显著,此结论仍有待进一步的研究加以验证。 展开更多
关键词 绝经后骨质疏松症 肾阴虚证 六味地黄丸 左归丸 骨保护 OPG RANKL 蛋白印迹
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