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替格瑞洛通过akt/AMPK/eNOS信号通路调节AMI后小鼠血管新生及其机制研究 被引量:1
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作者 何尤夫 刘微 +3 位作者 刘德斌 李玲 向仕菊 姚奇 《贵州医药》 CAS 2024年第4期507-513,519,F0003,共9页
目的 探究替格瑞洛通过akt/AMPK/eNOS通路调节腺苷浓度,进而促进急性心肌梗死(AMI)后血管新生的作用,并探讨其潜在机制。方法 采用冠脉结扎法建立AMI的小鼠模型,使用替格瑞洛灌胃处理建立实验组,通过akt抑制剂Perifosine、AMPK抑制剂Dor... 目的 探究替格瑞洛通过akt/AMPK/eNOS通路调节腺苷浓度,进而促进急性心肌梗死(AMI)后血管新生的作用,并探讨其潜在机制。方法 采用冠脉结扎法建立AMI的小鼠模型,使用替格瑞洛灌胃处理建立实验组,通过akt抑制剂Perifosine、AMPK抑制剂Dorsomorphin和腺苷受体抑制剂MRS1523建立对应蛋白抑制的模型,采用HE染色、Masson染色评估心肌损害情况,采用免疫组化、rt-PCR、Western blot检测VEGF蛋白水平和mRNA水平表达情况,采用酶标法检测AMI小鼠体内腺苷表达情况,随后采用Western blot检测akt/AMPK/eNOS通路蛋白及其磷酸化形式的表达情况。结果 替格瑞洛可明显上调p-akt/akt和p-eNOS/eNOS比值,下降p-AMPK/AMPK比值,并增加AMI后小鼠体内腺苷水平,进而促进心肌梗死后局部心肌细胞内VEGF蛋白水平和mRNA水平表达。结论 替格瑞洛可通过活化akt/AMPK/eNOS系统来调节AMI后小鼠体内腺苷浓度,进而促进局部心肌细胞内VEGF蛋白水平和mRNA水平表达。 展开更多
关键词 替格瑞洛 急性心肌梗死 腺苷 血管新生 akt/AMPK/enos通路
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湿润烧伤膏对老年烧伤整形术后患者创面愈合及PI3K/Akt/eNOS通路的影响
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作者 郑祥兵 阴俊 +4 位作者 叶凌霄 陈诚 胡涛涛 邹勇 刘兵 《分子诊断与治疗杂志》 2024年第10期1965-1969,共5页
目的分析湿润烧伤膏对老年烧伤整形术后患者创面愈合及PI3K/Akt/eNOS通路的影响。方法分析2022年3月到2023年7月在宜宾市第二人民医院就诊的116例老年烧伤整形术后患者,按照随机数字法分为干预组(n=58)和对照组(n=58),两组患者均采用生... 目的分析湿润烧伤膏对老年烧伤整形术后患者创面愈合及PI3K/Akt/eNOS通路的影响。方法分析2022年3月到2023年7月在宜宾市第二人民医院就诊的116例老年烧伤整形术后患者,按照随机数字法分为干预组(n=58)和对照组(n=58),两组患者均采用生理盐水进行创面清洗,对照组在生理盐水清创的基础上给予凡士林油纱治疗,干预组在对照组的基础上加用湿润烧伤膏治疗。采用酶联免疫吸附法检测EGF、bFGF水平,并采用免疫印迹法检测PI3K、Akt、eNOS蛋白表达水平,比较两组患者临床疗效、创面愈合(创面愈合时间、创面愈合率、肉芽生长面积),并比较两组治疗前后疼痛指数(VAS评分)、肉芽组织PI3K/Akt/eNOS通路(PI3K、Akt、eNOS)蛋白水平表达和EGF、bFGF水平。结果干预组的临床疗效、创面愈合率、肉芽生长面积均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);而创面愈合时间少于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组患者肉芽组织PI3K、Akt、eNOS蛋白、EGF、bFGF的水平均比治疗前升高,且干预组高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组患者的VAS评分均低于治疗前,且干预组低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论湿润烧伤膏对老年烧伤整形术后患者的创面愈合效果较好,且能有效缓解疼痛,提高EGF、bFGF水平,可能是与调节PI3K/Akt/eNOS通路有关。 展开更多
关键词 湿润烧伤膏 老年烧伤 创面愈合 PI3K/Akt/enos通路
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强心汤通过调控eNOS/cGMP/PKG通路改善线粒体功能障碍治疗慢性心力衰竭
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作者 毛美玲 卢健棋 +6 位作者 谢丽钰 石炜琦 何晓羚 张蕴力 杨敏 罗文宽 周家谭 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期809-812,共4页
目的通过建立慢性心力衰竭大鼠模型及给药干预,探讨强心汤保护心脏以治疗CHF潜在分子机制。方法将54只SPF级SD大鼠随机分为对照组、模型组、强心汤低、中、高剂量组、沙库巴曲缬沙坦组,每组9只。除对照组外余各组大鼠均采用结扎冠状动... 目的通过建立慢性心力衰竭大鼠模型及给药干预,探讨强心汤保护心脏以治疗CHF潜在分子机制。方法将54只SPF级SD大鼠随机分为对照组、模型组、强心汤低、中、高剂量组、沙库巴曲缬沙坦组,每组9只。除对照组外余各组大鼠均采用结扎冠状动脉左前降支方法建立慢性心力衰竭模型。造模成功后第2天开始给予各组大鼠生理盐水及低、中、高剂量的强心汤和沙库巴曲缬沙坦灌胃2ml,连续28d。干预结束后,采用HE染色观察大鼠左心室组织病理学变化;Masson三色染色观察心肌组织纤维化情况;分别用Elisa、生化方法检测大鼠NT-proBNP、cGMP、NO浓度;免疫荧光法检测p-eNOs在大鼠血管内皮定位表达情况;蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测各组大鼠eNOs、p-eNOs、PKG1、p-PKG蛋白表达情况。结果与对照组比较,Elisa和生化检测结果显示大鼠血清NT-proBNP、cGMP、NO浓度水平明显升高;定位于血管内皮的p-eNOs蛋白荧光强度显著减弱;左心室梗死区p-eNOs、p-PKG蛋白表达下调(P<0.05),eNOs、PKG1蛋白比较差异均无统计学意义。与模型组比较,给药组大鼠LVEDd、LVEDs均降低,LVEF均升高(P<0.05);血清NT-proBNP、cGMP、NO浓度水平均降低;左心室梗死区p-eNOs、p-PKG蛋白表达上调(P<0.05),eNOs、PKG1蛋白比较差异均无统计学意义。HE和Masson染色结果表明,与对照组相比,模型组大鼠心肌组织结构改变,心肌横纹模糊,心肌细胞排列紊乱、变性坏死且心肌组织呈蓝色的胶原纤维、粘液沉积增多;左心室心肌组织的病理损伤有所改善,尤其是强心汤中、高剂量和沙库巴曲缬沙坦组改善明显,横纹肌清晰,心肌细胞排列整齐有序,细胞坏死减少且蓝色的胶原纤维、粘液沉积减少,心肌纤维化情况明显减少。结论强心汤可能通过调控eNOS/cGMP/PKG通路及改善心肌组织病理表现,最终发挥减轻心肌组织纤维化和改善心功能治疗慢性心力衰竭的作用。 展开更多
关键词 慢性心力衰竭 强心汤 enos CGMP PKG 线粒体
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基于CRISPR/Cas9技术建立Lepr与eNos双基因敲除的糖尿病肾病小鼠模型
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作者 赵苗妙 李明嘉 +3 位作者 李小亚 段蕊 张静宜 杨金奎 《首都医科大学学报》 CAS 北大核心 2024年第3期392-398,共7页
目的基于CRISPR/Cas9基因编辑技术建立瘦素受体基因(leptin receptor,Lepr)与血管内皮一氧化氮合酶基因(endothelial nitric oxide synthase,eNos)双基因敲除(double-knockout,DKO)小鼠模型,构建晚期糖尿病肾病小鼠模型。方法根据eNos... 目的基于CRISPR/Cas9基因编辑技术建立瘦素受体基因(leptin receptor,Lepr)与血管内皮一氧化氮合酶基因(endothelial nitric oxide synthase,eNos)双基因敲除(double-knockout,DKO)小鼠模型,构建晚期糖尿病肾病小鼠模型。方法根据eNos基因制备对应的gRNA,将CRISPR-Cas9体系显微注射于C57BL/Ks(BKS)背景小鼠的受精卵内。将受精卵转移至有假孕状态雌性小鼠的输卵管内部。幼鼠出生后经聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)鉴定及测序分析分选出为eNos^(+/-)基因型的F0代阳性小鼠,获得BKS背景下的Lepr基因杂合小鼠,即基因型为Lepr^(db/m)的Lepr-F0代杂合子小鼠。将eNos-F0与Lepr-F0代小鼠杂交,获得eNos^(+/-)/Lepr^(db/m)双杂合F1代小鼠,将双杂合F1代小鼠进一步交配,筛选得到Lepr与eNos双基因敲除小鼠。采用PCR法鉴定小鼠基因型,按基因鉴定结果分为野生型(wild-type,WT)组与DKO组小鼠。监测各组小鼠体质量、血糖与饮水进食量;采用酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测小鼠尿白蛋白与尿肌酐水平,并计算尿白蛋白排泄率;苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)与过碘酸六胺银(periodic acid-silver metheramine,PASM)染色检查各组小鼠肾组织病理改变。结果PCR检测结果显示,成功构建lepr^(db/db)/eNos^(-/-)DKO小鼠。与同窝对照组相比,DKO小鼠的体质量、血糖水平与饮水进食量均显著高于同窝对照小鼠。DKO小鼠的尿白蛋白与尿白蛋白排泄率显著高于WT小鼠。病理学结果显示,DKO小鼠的肾小球体积明显增大,系膜基质增生明显。结论基于CRISPR/Cas9基因编辑技术可成功构建lepr^(db/db)/eNos^(-/-)DKO小鼠,DKO小鼠可反映糖尿病肾病的典型表现,为深入研究糖尿病肾病的作用机制提供动物模型。 展开更多
关键词 基因敲除 CRISPR/Cas9技术 糖尿病肾病 enos Lepr
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“起痿3号”联合西地那非对糖尿病勃起功能障碍大鼠阴茎海绵体组织Rho激酶活性及AKT/eNOS通路的影响研究
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作者 赵伟 李琳 +3 位作者 张莉 张晓庆 李东旭 夏靖 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 2024年第12期1128-1134,共7页
目的:探讨“起痿3号”联合西地那非对糖尿病勃起功能障碍(DED)大鼠阴茎海绵体组织Rho激酶活性及AKT/eNOS通路的影响。方法:用链脲佐菌素溶液腹腔注射SD雄性大鼠,成功造模糖尿病大鼠。饲养8周后,大鼠颈部注射阿扑吗啡,制备DED大鼠模型。... 目的:探讨“起痿3号”联合西地那非对糖尿病勃起功能障碍(DED)大鼠阴茎海绵体组织Rho激酶活性及AKT/eNOS通路的影响。方法:用链脲佐菌素溶液腹腔注射SD雄性大鼠,成功造模糖尿病大鼠。饲养8周后,大鼠颈部注射阿扑吗啡,制备DED大鼠模型。将24只造模成功的大鼠随机分为模型对照组(MC组)、西地那非组[5 mg/(kg·d)](S组)、“起痿3号”低剂量[10 g/(kg·d)]+西地那非组[5 mg/(kg·d)](LQ+S组)及“起痿3号”高剂量[20 g/(kg·d)]+西地那非组[5 mg/(kg·d)](HQ+S组),每组6只,另配置6只空白对照组大鼠(BC组),BC组和MC组给予等量生理盐水,余组大鼠连续给药6周。颈部注射阿扑吗啡观察5组大鼠的勃起次数,通过Western印迹检测大鼠阴茎海绵体组织Rho激酶活性及p-AKT、eNOS的蛋白表达水平。结果:与BC组比较,所有造模后的大鼠血糖均升高,体质量降低,提示造模成功。与MC组对比,S组、LQ+S组及HQ+S组大鼠模型的勃起次数显著增多,差异具有统计学意义(P<0.05)。HQ+S组大鼠勃起次数多于S组大鼠勃起次数,差异具有统计学意义(P<0.05)。与BC组对比,MC组大鼠阴茎海绵体中的Rho-GTP激酶活性表达水平显著提高(P<0.05);HQ+S组大鼠阴茎海绵体中的Rho-GTP激酶活性表达水平显著低于S组(P<0.05)。各组大鼠阴茎海绵体中的p-AKT蛋白表达水平无明显差异(P>0.05)。与MC组对比,BC组、HQ+S组大鼠阴茎海绵体中的eNOS蛋白表达水平显著升高(P<0.05);HQ+S组大鼠阴茎海绵体中的eNOS蛋白表达水平显著高于LQ+S组与S组(P<0.05)。结论:高剂量“起痿3号”联合西地那非能够改善DED大鼠勃起功能,其机制可能与通过抑制Rho-GTP激酶活性和增加e-NOS通路蛋白表达以释放更多NO有关。 展开更多
关键词 糖尿病勃起功能障碍 “起痿3号” RHO激酶 AKT通路 enos通路
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中药复方速回初压肽通过PI3K/Akt/eNOS通路对SHR大鼠内皮功能障碍的影响
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作者 高亚迪 黄泽浩 +4 位作者 徐红俊 杨广 陶俊 安胜军 赵薇 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期1374-1378,共5页
目的 探讨中药复方速回初压肽通过PI3K/Akt/eNOS信号通路对高血压大鼠的胸主动脉血管内皮的保护作用。方法 将35只15周龄的雄性SHR大鼠随机分为5组:模型组、速回初压肽低、中、高剂量组、培哚普利组,每组7只;以7只同龄的Wistar大鼠作为... 目的 探讨中药复方速回初压肽通过PI3K/Akt/eNOS信号通路对高血压大鼠的胸主动脉血管内皮的保护作用。方法 将35只15周龄的雄性SHR大鼠随机分为5组:模型组、速回初压肽低、中、高剂量组、培哚普利组,每组7只;以7只同龄的Wistar大鼠作为正常组。无创血压检测系统检测给药前和给药后各组大鼠尾动脉收缩压和舒张压;超声心动图检测各组大鼠的心脏结构的变化;HE染色观察各组大鼠的胸主动脉病理变化;ELISA检测各组大鼠血清中的AngⅡ、ET-1和NO;Western Blot检测各组大鼠胸主动脉的PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt、eNOS、p-eNOS蛋白表达。结果 给药8周后,速回初压肽低、中、高剂量组,培哚普利组大鼠收缩压和舒张压均低于模型组(P<0.05)。超声心动图结果显示,与模型组相比,速回初压肽中、高剂量组,培哚普利组的收缩末期左心室内径(LVIDs)、舒张末期左心室内径(LVIDd)、舒张末期左心室前壁的厚度(LVAWd)和舒张末期左心室后壁厚度(LVPWd)均显著降低(P<0.05)。HE结果显示,与模型组相比,速回初压肽中、高剂量组和培哚普利组大鼠的肿胀的内皮细胞得到改善,血管内皮趋于平滑。ELISA结果表明,与模型组比,速回初压肽中、高剂量组和培哚普利组血清中的NO含量显著升高(P<0.05),Ang II、ET-1含量均显著降低(P<0.05)。Western Blot结果表明,与模型组相比,速回初压肽中、高剂量组和培哚普利组的大鼠胸主动脉中的p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、p-eNOS/eNOS的蛋白表达水平显著上升。结论 中药复方速回初压肽可能通过影响PI3K/Akt/eNOS信号通路促进NO的释放,降低Ang II、ET-1的水平,改善SHR大鼠的内皮功能障碍,对SHR大鼠的血压具有显著的干预作用。 展开更多
关键词 SHR 内皮损伤 PI3K/Akt/enos信号通路 中药复方提取物 速回初压肽
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Potential of eNose Technology for Monitoring Biological CO_(2) Conversion Processes
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作者 Muhammad Awais Syed Muhammad Zaigham Abbas Naqvi +5 位作者 Sami Ullah Khan MIjaz Khan Sherzod Abdullaev Junfeng Wu Wei Zhang Jiandong Hu 《Transactions of Tianjin University》 EI CAS 2024年第5期381-394,共14页
Electronic nose(eNose) is a modern bioelectronic sensor for monitoring biological processes that convert CO_(2) into valueadded products, such as products formed during photosynthesis and microbial fermentation. eNose... Electronic nose(eNose) is a modern bioelectronic sensor for monitoring biological processes that convert CO_(2) into valueadded products, such as products formed during photosynthesis and microbial fermentation. eNose technology uses an array of sensors to detect and quantify gases, including CO_(2), in the air. This study briefly introduces the concept of eNose technology and potential applications thereof in monitoring CO_(2) conversion processes. It also provides background information on biological CO_(2) conversion processes. Furthermore, the working principles of eNose technology vis-à-vis gas detection are discussed along with its advantages and limitations versus traditional monitoring methods. This study also provides case studies that have used this technology for monitoring biological CO_(2) conversion processes. eNose-predicted measurements were observed to be completely aligned with biological parameters for R~2 values of 0.864, 0.808, 0.802, and 0.948. We test eNose technology in a variety of biological settings, such as algae farms or bioreactors, to determine its effectiveness in monitoring CO_(2) conversion processes. We also explore the potential benefits of employing this technology vis-à-vis monitoring biological CO_(2) conversion processes, such as increased reaction efficiency and reduced costs versus traditional monitoring methods. Moreover, future directions and challenges of using this technology in CO_(2) capture and conversion have been discussed. Overall, we believe this study would contribute to developing new and innovative methods for monitoring biological CO_(2) conversion processes and mitigating climate change. 展开更多
关键词 Electronic nose(enose) CO_(2) conversion Biological monitoring Gas detection Bioelectronic nose
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人胚胎干细胞衍生的神经干细胞微囊泡通过调节AKT/eNOS信号通路促进坐骨神经损伤大鼠坐骨神经再生和修复
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作者 乔富浩 梁成 《颈腰痛杂志》 2024年第5期793-799,共7页
目的探讨人胚胎干细胞衍生的神经干细胞微囊泡(hESC-NSC-MVs)通过调节蛋白激酶B(AKT)/内皮型一氧化氮合酶(eNOS)信号通路促进坐骨神经损伤(SNI)大鼠坐骨神经再生和修复的作用。方法取SD大鼠随机分为假手术组、模型组、hESC-NSC组、hESC-... 目的探讨人胚胎干细胞衍生的神经干细胞微囊泡(hESC-NSC-MVs)通过调节蛋白激酶B(AKT)/内皮型一氧化氮合酶(eNOS)信号通路促进坐骨神经损伤(SNI)大鼠坐骨神经再生和修复的作用。方法取SD大鼠随机分为假手术组、模型组、hESC-NSC组、hESC-NSC-MVs组、hESC-NSC-MVs+CCT128930(AKT抑制剂)组,每组10只,模型组和实验干预组大鼠建立SNI模型,以hESC-NSC、hESC-NSC-MVs和CCT128930分组干预后,以坐骨神经功能指数(SFI)评测各组大鼠坐骨神经功能;检测各组大鼠坐骨神经传导速度、支配的腓肠肌恢复情况(以腓肠肌湿重比、肌纤维横截面积评测);透射电子显微镜(TEM)检测各组大鼠坐骨神经超微结构;试剂盒测定各组大鼠血清与坐骨神经eNOS和一氧化氮(NO)水平;免疫印迹实验检测各组大鼠坐骨神经AKT/eNOS信号通路相关蛋白表达。结果假手术组相比,模型组大鼠坐骨神经超微结构发生显著损伤,SFI、坐骨神经传导速度、腓肠肌湿重比、肌纤维横截面积、eNOS和NO水平、p-AKT/AKT与eNOS蛋白表达显著降低(P<0.05);与模型组相比,hESC-NSC组、hESC-NSC-MVs组大鼠坐骨神经超微结构损伤均减轻,SFI、坐骨神经传导速度、腓肠肌湿重比、肌纤维横截面积、eNOS和NO水平、p-AKT/AKT与eNOS蛋白表达均升高,且hESC-NSC-MVs对SNI大鼠上述各指标的作用更强(P<0.05);与hESC-NSC-MVs组相比,hESC-NSC-MVs+CCT128930组大鼠坐骨神经超微结构损伤加重,SFI、坐骨神经传导速度、腓肠肌湿重比、肌纤维横截面积、eNOS和NO水平、p-AKT/AKT与eNOS蛋白表达降低(P<0.05)。结论hESC-NSC-MVs可通过激活AKT/eNOS信号通路而减轻SNI大鼠坐骨神经超微结构及功能损伤,促使坐骨神经再生和修复,并改善其坐骨神经功能。 展开更多
关键词 神经干细胞 微囊泡 AKT/enos 坐骨神经损伤 神经再生
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人静脉移植物eNOS和P-eNOS的表达
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作者 伍校琼 蔡维君 +2 位作者 罗学港 童建斌 黄菊芳 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第8期1021-1023,共3页
目的检测人静脉移植物中eNOS的表达及其活性。方法应用免疫荧光组织化学技术对30个静脉移植物再狭窄标本中eNOS的表达进行了检测,用抗磷酸化的eNOS抗体(P-eNOS)检测eNOS的活性。用激光共聚焦显微镜拍片,图片用Silicon Graphics Octane... 目的检测人静脉移植物中eNOS的表达及其活性。方法应用免疫荧光组织化学技术对30个静脉移植物再狭窄标本中eNOS的表达进行了检测,用抗磷酸化的eNOS抗体(P-eNOS)检测eNOS的活性。用激光共聚焦显微镜拍片,图片用Silicon Graphics Octane进行处理。结果在正常静脉血管中,eNOS在内皮细胞不表达;在病变静脉血管,在内膜增生早期,eNOS在管腔面内皮细胞的表达明显上调,在外膜小血管的表达也增加,随着内膜增生的不断发展,eNOS在管腔面内皮细胞的表达明显下降,外膜小血管逐渐从外膜向中膜延伸。免疫双重染色证实eNOS和p-eNOS的表达共同定位于内皮细胞。结论eNOS在静脉移植物中的表达模式提示其可能参与了中膜毛细血管的生成以及新内膜的形成。 展开更多
关键词 enos P-enos 静脉移植物 共聚焦免疫荧光术
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纳他卡林激活内皮细胞ATP敏感性钾通道SUR2B/Kir6.1亚型对eNOS磷酸化的调节作用 被引量:4
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作者 沈薇 汪海 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期229-232,共4页
目的 纳他卡林可选择性激活ATP敏感性钾通道(Katp)SUR2B/Kir6.1亚型,引起胞内ca2+’浓度升高,一氧化氮合酶(eNOS)活性增强,NO释放增加。eNOS活性与eNOS磷酸化密切相关,研究表明eNOS-Serll77、eNOS-Ser635、eNOS-Set615磷酸... 目的 纳他卡林可选择性激活ATP敏感性钾通道(Katp)SUR2B/Kir6.1亚型,引起胞内ca2+’浓度升高,一氧化氮合酶(eNOS)活性增强,NO释放增加。eNOS活性与eNOS磷酸化密切相关,研究表明eNOS-Serll77、eNOS-Ser635、eNOS-Set615磷酸化增强eNOS活性,eNOS-Thr495、eNOS-Serl16磷酸化抑制eNOS活性。本文研究纳他卡林激活Km对eNOS各磷酸化位点的影响,以此认识纳他卡林增强eNOS活性的作用特点。方法在培养的内皮细胞上给予(1)10^-9-10^-9mol·L^-1不同浓度的纳他卡林孵育5min,(2)预孵育0.01-1μmol·L。格列苯脲30min,给予1肛mol·L^-1纳他卡林孵育5rain,提取细胞总蛋白,用Western blot法检测eNOS-Serl177、eNOS-Ser635、eNOS-Set615、eNOS-Thr495、eNOS.Serll6磷酸化的变化。结果纳他卡林可浓度依赖性的升高eNOS.Serll77、eNOS,Ser635的磷酸化及eNOS.Thr495的去磷酸化,而对eNOS-Ser615和eNOS-Serl16磷酸化无影响。此作用可被K。特异性阻断剂格列苯脲拮抗。结论纳他卡林通过激活内皮细胞Katp,调节eNOS-Serll77、eNOS.Ser635的磷酸化及eNOS-Thr495的去磷酸化,但不影响eNOS-Ser615和eNOS-Serl16磷酸化,从而增强eNOS活性。 展开更多
关键词 纳他卡林 KATP SUR2B Kir6 1 enos磷酸化 enos 活性 EA hy926细胞
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PI3K/Akt/eNOS信号通路在葛根素抑制ox-LDL诱导的血管内皮细胞组织因子表达中的作用 被引量:16
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作者 邓华菲 李坚 +5 位作者 周琴 谭玉林 谢明 张天杰 韩瑛 张文龙 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第7期1214-1218,共5页
目的:探讨磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/内皮型一氧化氮合酶(PI3K/Akt/eNOS)信号通路在葛根素(puerarin)抑制氧化型低密度脂蛋白(oxidized low-density lipoprotein,ox-LDL)诱导的血管内皮细胞组织因子(tissue factor,TF)表达中的作用。... 目的:探讨磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/内皮型一氧化氮合酶(PI3K/Akt/eNOS)信号通路在葛根素(puerarin)抑制氧化型低密度脂蛋白(oxidized low-density lipoprotein,ox-LDL)诱导的血管内皮细胞组织因子(tissue factor,TF)表达中的作用。方法:实时荧光定量PCR检测TF的mRNA表达,Western blot检测TF和Akt的蛋白表达,硝酸盐还原酶法检测一氧化氮(nitric oxide,NO)含量。结果:与对照组相比,ox-LDL孵育内皮细胞后,内皮细胞TF的mRNA和蛋白表达升高,Akt蛋白磷酸化水平降低,细胞内NO产生减少;而葛根素预孵育内皮细胞1 h后,再用ox-LDL孵育,内皮细胞TF mRNA和蛋白表达下降,Akt蛋白磷酸化升高,细胞内NO产生增多;PI3K抑制剂LY294002和葛根素共同预孵育内皮细胞1 h后,再用ox-LDL孵育,内皮细胞TF的mRNA和蛋白表达升高,Akt蛋白磷酸化降低,细胞内NO产生减少;eNOS抑制剂NG-硝基-L-精氨酸甲酯(L-NAME)和葛根素共同预孵育内皮细胞,也明显阻断葛根素对ox-LDL诱导的内皮细胞TF mRNA和蛋白表达、细胞Akt蛋白磷酸化和细胞内NO产生的作用。结论:葛根素可通过上调PI3K/Akt/eNOS信号通路抑制ox-LDL诱导的人脐静脉内皮细胞TF mRNA和蛋白表达。 展开更多
关键词 葛根素 氧化型低密度脂蛋白 组织因子 PI3K/Akt/enos信号通路 血管内皮细胞
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大鼠急性肺损伤时iNOS mRNA和eNOS mRNA表达的时相变化 被引量:9
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作者 余追 许友芝 +4 位作者 周晓阳 欧阳静萍 涂淑珍 陈志桥 陈静 《武汉大学学报(医学版)》 CAS 2003年第1期24-27,共4页
目的 :观察内毒素性急性肺损伤时肺组织中一氧化氮 (NO)和一氧化氮合酶mRNA的时相变化 ,并探讨其相互关系。方法 :用内毒素 (LPS)复制急性肺损伤模型 ,分别测定 0 .5 ,1,2 ,3,4h各组肺组织NO和丙二醛 (MDA)的含量 ;用原位杂交方法检测... 目的 :观察内毒素性急性肺损伤时肺组织中一氧化氮 (NO)和一氧化氮合酶mRNA的时相变化 ,并探讨其相互关系。方法 :用内毒素 (LPS)复制急性肺损伤模型 ,分别测定 0 .5 ,1,2 ,3,4h各组肺组织NO和丙二醛 (MDA)的含量 ;用原位杂交方法检测各组大鼠肺组织中诱导型一氧化氮合酶mRNA(iNOSmRNA)和内皮型一氧化氮合酶mRNA(eNOSmRNA)的表达水平。结果 :大鼠给予LPS后 ,①肺组织MDA含量随时间延长而逐渐增加 ,不同时点的均值互有差异 (P <0 .0 5 ) ,并且均显著高于正常对照组 (P <0 .0 5 ) ;②各时点肺组织NO含量和iNOSmRNA表达量均显著大于正常对照组 (P <0 .0 5 ) ,并且均在 2h时达到高峰 ,以后呈下降趋势。二者的变化呈显著正相关 (P <0 .0 1) ;③ 2h前 (含 2h)肺组织MDA含量随iNOSmRNA表达增加所致的NO产量增多而增加 ,2h后二者变化趋势相反 ;④各时点肺组织eNOSmRNA表达量与正常对照组比差异均无显著性。结论 :内毒素性急性肺损伤时 ,肺组织iNOSmRNA大量表达 ,导致内源性NO爆发式产生 ,从而介导肺损伤。NO产量在静注内毒素后 2h达到高峰 ,以后呈下降趋势。 展开更多
关键词 大鼠 急性肺损伤 INOS MRNA enos 时相变化 急性呼吸窘迫综合征
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枸杞多糖通过调控PI3K/Akt/eNOS信号通路对去卵巢大鼠心肌产生抗氧化作用 被引量:15
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作者 于宁 杨芳 +3 位作者 冷雪 张妮 王俊岩 宋囡 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期1370-1375,共6页
目的:观察枸杞多糖对去卵巢大鼠心肌PI3K/Akt/e NOS信号通路的影响。方法:将30只SD雌性大鼠随机分为假手术组、去卵巢组、补佳乐组、枸杞多糖高剂量组及枸杞多糖低剂量组,ELISA法比较各组血清雌激素、LDH及CK水平,检测心肌H_2S含量及氧... 目的:观察枸杞多糖对去卵巢大鼠心肌PI3K/Akt/e NOS信号通路的影响。方法:将30只SD雌性大鼠随机分为假手术组、去卵巢组、补佳乐组、枸杞多糖高剂量组及枸杞多糖低剂量组,ELISA法比较各组血清雌激素、LDH及CK水平,检测心肌H_2S含量及氧化应激损伤相关指标,HE染色观察各组心肌的形态变化,Western blot法检测各组大鼠心肌e NOS蛋白及PI3K/Akt通路蛋白的表达。结果:与假手术组相比,去卵巢组大鼠血清雌二醇水平降低,心肌H_2S含量和GSH-Px活性下降,心肌e NOS蛋白及PI3K/Akt通路蛋白的表达均有所降低,心肌ROS活性和MDA含量升高(P<0.05),心肌细胞排列紊乱,细胞间隙增大,血清LDH和CK活性均增多;与去卵巢组比较,枸杞多糖高剂量组大鼠血清雌二醇含量增加(P<0.05),心肌H_2S含量、GSH-Px活性、e NOS蛋白及Akt磷酸化水平均提高,心肌ROS活性和MDA含量下降(P<0.05),血清LDH和CK活性均降低,并且改善大鼠心肌形态的变化。结论:枸杞多糖可以通过调控PI3K/Akt/e NOS通路改善去卵巢大鼠心脏变化防治绝经后心血管病变。 展开更多
关键词 枸杞多糖 去卵巢大鼠 心血管疾病 PI3K/Akt/enos信号通路
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小鼠皮肤切创愈合过程中iNOS和eNOS表达的免疫组织化学研究 被引量:7
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作者 赵锐 官大威 +6 位作者 路斌 韩阳 侯震寰 吴旭 张国华 李如波 胡更奕 《法医学杂志》 CAS CSCD 2005年第3期161-164,F0003,共5页
目的观察小鼠皮肤切创愈合过程中,iNOS和eNOS在损伤区及损伤周边区内的表达及其变化规律。方法小鼠背部制作全层切创,应用免疫组织化学技术观察伤后切创组织中iNOS和eNOS的表达,并和无切创的小鼠作为对照。结果损伤区及损伤周边区细胞,... 目的观察小鼠皮肤切创愈合过程中,iNOS和eNOS在损伤区及损伤周边区内的表达及其变化规律。方法小鼠背部制作全层切创,应用免疫组织化学技术观察伤后切创组织中iNOS和eNOS的表达,并和无切创的小鼠作为对照。结果损伤区及损伤周边区细胞,伤后3h的损伤皮肤组织中可见少量的多型核细胞表达iNOS和eNOS,伤后6~24h,大部分浸润的中性粒细胞和单核细胞为iNOS和eNOS阳性。随着时间的延长,iNOS和eNOS阳性细胞以单核细胞和成纤维细胞为主。伤后3hiNOS的阳性细胞比率较低,6h~1d持续性增加并于1d达到最高峰,3~7d维持在一个相对稳定的水平直至伤后10d再次达高峰,10~14d开始下降。eNOS的阳性细胞率在伤后1~3h表达较低,6h~3d持续性增高,并在3d达到最高峰,在其后的5d内保持稳定表达,之后开始下降。而且损伤区及损伤周边区、特别是肉芽组织内的新生血管可见iNOS和eNOS不同强度的表达。结论小鼠皮肤切创愈合过程中,iNOS和eNOS在损伤周边区内多型核细胞、单核细胞和成纤维细胞中表达,其时序性变化可望用于皮肤损伤时间的推断。 展开更多
关键词 皮肤 损伤愈合 损伤时间推断 INOS enos 免疫组织化学
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电针对局灶脑缺血再灌注大鼠大脑皮质eNOS mRNA及蛋白、MMP-9蛋白表达的影响 被引量:10
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作者 卢桃利 罗勇 +4 位作者 孙宏毅 周承 秦文熠 李扬 蔡艳丽 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2012年第2期158-163,共6页
目的探讨电针对局灶脑缺血/再灌注大鼠脑内缺血皮质区eNOS mRNA及蛋白、MMP-9蛋白表达的影响。方法采用线栓法制备SD大鼠局灶脑缺血/再灌注模型。将SD大鼠随机分为假手术组、模型组、电针组。缺血2 h后把模型组和电针组分为再灌注1、3和... 目的探讨电针对局灶脑缺血/再灌注大鼠脑内缺血皮质区eNOS mRNA及蛋白、MMP-9蛋白表达的影响。方法采用线栓法制备SD大鼠局灶脑缺血/再灌注模型。将SD大鼠随机分为假手术组、模型组、电针组。缺血2 h后把模型组和电针组分为再灌注1、3和7 d 3个时间点。取双侧"合谷"穴(LI 4)为电针刺激穴位。免疫组化法检测eNOS蛋白的表达;反转录聚合酶链法检测eNOS mRNA的表达;Western blot法检测eNOS、MMP-9蛋白的表达。结果与假手术组比较,模型组、电针组各时间点大鼠缺血大脑皮质区eNOS蛋白及mRNA表达显著增加(P<0.01);与模型组比较,电针组各时间点eNOS蛋白及mRNA明显增加(P<0.01)。eNOS蛋白表达于再灌注3 d达高峰,假手术组表达为0.4291±0.0173,模型组再灌注3 d表达为0.7374±0.0252,电针组表达为0.8536±0.0212,各组比较有显著差异(P<0.01)。与假手术组比较,模型组、电针组各时间点大鼠缺血大脑皮质区MMP-9蛋白的表达显著增加(P<0.01);与模型组比较,电针组MMP-9蛋白的表达于再灌注1 d显著低于模型组(P<0.01),再灌注3、7 d电针组MMP-9蛋白的表达明显高于模型组(P<0.01)。结论电针可上调局灶脑缺血/再灌注大鼠缺血皮质区eNOS蛋白及mRNA、MMP-9蛋白的表达。 展开更多
关键词 电针 局灶脑缺血/再灌注 enos MMP-9 血管再生 “合谷”穴
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SIRT1/eNOS/NO通路在人参皂苷Rb1抗内皮细胞复制性衰老中的作用 被引量:11
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作者 周彬 余舒杰 +7 位作者 刘定辉 吴琳 王敏 柯世业 刘勇 郝宝顺 朱洁明 钱孝贤 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第10期1762-1768,共7页
目的:观察人参皂苷Rb1延缓人脐静脉内皮细胞(HUVECs)复制性衰老的作用,并探讨SIRT1/e NOS/NO通路在其中的作用机制。方法:建立原代HUVECs复制性衰老模型,根据细胞形态的变化、衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色阳性率和纤溶酶原激... 目的:观察人参皂苷Rb1延缓人脐静脉内皮细胞(HUVECs)复制性衰老的作用,并探讨SIRT1/e NOS/NO通路在其中的作用机制。方法:建立原代HUVECs复制性衰老模型,根据细胞形态的变化、衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色阳性率和纤溶酶原激活物抑制剂1(PAI-1)的表达水平评估HUVECs衰老情况;采用real-time PCR方法和Western blot法检测沉默SIRT1前后衰老细胞中e NOS和PAI-1的mRNA和蛋白表达,并检测细胞上清NO的含量。结果:累积细胞群体倍增水平(CPDL)为16的HUVECs可作为复制性衰老模型; 80μmol/L人参皂苷Rb1处理后衰老细胞内SIRT1和eNOS的mRNA及蛋白表达水平增加,NO含量增加(P <0. 05),而PAI-1的mRNA和蛋白表达水平下降(P <0. 05);沉默SIRT1后,衰老细胞内e NOS的mRNA及蛋白表达减少,PAI-1的mRNA及蛋白表达增加,NO含量减少(P <0. 05);与SIRT1沉默组比较,在沉默SIRT1基础上加用人参皂苷Rb1后,e NOS和PAI-1表达水平及NO的含量未见明显变化。结论:人参皂苷Rb1可通过调控SIRT1/e NOS/NO通路延缓HUVECs复制性衰老。 展开更多
关键词 人参皂苷RB1 SIRT1/enos/NO信号通路 人脐静脉内皮细胞 复制性衰老 纤溶酶原激活物抑制剂1
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葛根素对心肌梗死大鼠心肌HIF-1、eNOS、VEGF基因表达及血清NO浓度的影响 被引量:9
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作者 张三印 沈映君 +1 位作者 陈士林 陈新滋 《中药药理与临床》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期54-57,共4页
目的:探讨葛根素诱导血管生成的分子机制。方法:通过大鼠心肌梗死动物模型,运用分光光度法检测血清NO水平;RT-PCR的方法检测心肌HIF-1、VEGF、eNOS mRNA的表达。结果:葛根素120 mg/kg腹腔注射4周能不同程度增加心肌梗死大鼠缺血区域和... 目的:探讨葛根素诱导血管生成的分子机制。方法:通过大鼠心肌梗死动物模型,运用分光光度法检测血清NO水平;RT-PCR的方法检测心肌HIF-1、VEGF、eNOS mRNA的表达。结果:葛根素120 mg/kg腹腔注射4周能不同程度增加心肌梗死大鼠缺血区域和非缺血区域心肌VEGF mRNA、eNOS mRNA、HIF-1 mRNA的表达和血清NO的含量。结论:葛根素诱导血管生成作用的分子机制与其激活HIF-VEGF-AKT-eNOS-NO信号转导通路有关。 展开更多
关键词 葛根素 VEGF enos HIF-1 NO
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当归四逆汤有效成分组合对大鼠缺血再灌注模型中iNOS eNOS表达相关性的实验研究 被引量:6
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作者 钱国强 蔡川 +1 位作者 梁雪冰 赵国平 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期1039-1041,共3页
目的研究当归四逆汤有效成分单体组合对大鼠心肌缺血再灌注的保护作用及其机制。方法 SD大鼠体质量为250~300 g,分为正常组,缺血再灌注(IR,Ischemia-Reperfusion)组,缺血再灌注加药物(IR+药)组,缺血再灌注加药物加阻断剂(IR+药+L-NAME)... 目的研究当归四逆汤有效成分单体组合对大鼠心肌缺血再灌注的保护作用及其机制。方法 SD大鼠体质量为250~300 g,分为正常组,缺血再灌注(IR,Ischemia-Reperfusion)组,缺血再灌注加药物(IR+药)组,缺血再灌注加药物加阻断剂(IR+药+L-NAME)组,实时荧光定量PCR方法分析各组心肌组织iNOSmRNA,eNOS mRNA表达的变化,各组大鼠血清中CK-MB、NO的水平变化。结果药物组NO水平增高(P<0.01),CK-MB量下降(P<0.05),eNOS表达量升高(P<0.001),iNOS表达量下降(P<0.01)。结论当归四逆汤有效成分组合缺血预处理对心肌起到了保护作用,其机制与上调eNOS,下调iNOS表达,从而调节NO产生有关。 展开更多
关键词 阿魏酸 芍药苷 肉桂酸 甘草酸 INOS MRNA enos MRNA CK-MB NO
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eNOS:糖尿病内皮祖细胞功能失调的一个关键因素 被引量:8
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作者 邓亚萍 赵婷 +2 位作者 倪敏 谢和辉 沈甫明 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期901-903,共3页
糖尿病是由多种病因引起的,以慢性高血糖为特征的代谢紊乱综合征。糖尿病患者内皮祖细胞(EPCs)数目减少,动员、迁移、归巢、分化能力明显降低,这可能是引起糖尿病大血管并发症的主要原因之一。内皮型NO合酶(eNOS)是调节内皮祖细胞功能... 糖尿病是由多种病因引起的,以慢性高血糖为特征的代谢紊乱综合征。糖尿病患者内皮祖细胞(EPCs)数目减少,动员、迁移、归巢、分化能力明显降低,这可能是引起糖尿病大血管并发症的主要原因之一。内皮型NO合酶(eNOS)是调节内皮祖细胞功能的关键酶。该文就eNOS与糖尿病内皮祖细胞功能失调的相关性进行综述,为糖尿病治疗提供新的思路。 展开更多
关键词 糖尿病 内皮祖细胞 enos脱耦联 一氧化氮 氧化应激 四氢生物蝶呤
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中国人eNOS基因VNTR多态性的基因型与等位基因频率(英文) 被引量:5
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作者 路萍 吕星 +5 位作者 邢瑞云 孙琪云 韩莉 吴苏华 蓝红 郑晓飞 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2001年第12期1093-1097,共5页
一氧化氮合酶 (nitricoxidesynthase ,NOS)催化L 精氨酸的氧化反应生成L 瓜氨酸和一氧化氮 (nitricoxide,NO)。NO可通过cGMP依赖的信号传导途径介导平滑肌细胞舒张 ,是调节血管张力的重要信使分子。NO尚可抑制血小板凝集 ,对血栓形成起... 一氧化氮合酶 (nitricoxidesynthase ,NOS)催化L 精氨酸的氧化反应生成L 瓜氨酸和一氧化氮 (nitricoxide,NO)。NO可通过cGMP依赖的信号传导途径介导平滑肌细胞舒张 ,是调节血管张力的重要信使分子。NO尚可抑制血小板凝集 ,对血栓形成起重要调节作用。目前在哺乳动物中已发现细胞来源、表达方式和活性调节不同的 3种NOS同工酶 ,分别为神经元型NOS(neuronalNOS ,nNOS)、诱导型NOS(inducibleNOS ,iNOS)和内皮细胞型NOS(endothelialNOS ,eNOS)。人的eNOS基因位于第 7号染色体长臂 (7q36) ,全长约 2 1kb ,含有 2 6个外显子和 2 5个内含子。eNOS基因存在多个与心脑血管疾病相关的基因多态性位点。其中位于第 4内含子的一个以 2 7bp为核心的数目可变性串联重复序列(variablenumberoftandemrepeat,VNTR)多态性位点 ,已被证实与原发性高血压、心肌梗死和静脉血栓形成有关。目前在我国尚缺乏NOS基因多态性在正常人群中基因型及等位基因频率分布的统计资料。为此 ,我们从 31 6名健康中国人的基因组DNA检测了eNOS基因第 4内含子VNTR多态性的基因型和等位基因 ,鉴定出重复 6次、5次和 4次的 3种等位基因 ,以及 6/ 5杂合、5/ 5纯合、5/ 4杂合和 4 / 4纯合的 4种基因型。同时我们将正常中国人eNOS基因VNTR多态性的基因? 展开更多
关键词 一氧化氮合酶 基因多态性 VNTR enos 等位基因 基因频率 中国人
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