RP-HPLC法同时测定蒙药复方协日嘎-4中栀子苷、京尼平-1-O-β-D-龙胆二糖苷、西红花苷-1、西红花苷-3的含量 被引量：7

1

作者 冀云涛 朱小玲 +3 位作者 李斌鑫 白凤 高建华 董玉 《内蒙古大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2016年第6期604-608,共5页

建立同时测定蒙药复方协日嘎-4药材中栀子苷、京尼平-1-O-β-D-龙胆二糖苷、西红花苷-1、西红花苷-3的高效液相色谱含量测定方法:采用反相高效液相色谱法,色谱柱为Elite C18(4.6mm×250mm,5μm),以乙腈(A)-0.1%磷酸水溶液(B)为流动... 建立同时测定蒙药复方协日嘎-4药材中栀子苷、京尼平-1-O-β-D-龙胆二糖苷、西红花苷-1、西红花苷-3的高效液相色谱含量测定方法:采用反相高效液相色谱法,色谱柱为Elite C18(4.6mm×250mm,5μm),以乙腈(A)-0.1%磷酸水溶液(B)为流动相,流速1.0mL·min^(-1),检测波长分别为238nm、238nm、380nm、380nm,柱温20℃,进样量20μL.本方法可使京尼平-1-O-β-D-龙胆二糖苷、栀子苷、西红花苷-1、西红花苷-3有效分离,在检测范围内线性良好,精密度、稳定性和重复性良好,平均加样回收率分别为100.16%(RSD=0.69%),99.19%(RSD=1.29%),100.59%(RSD=0.80%),99.06%(RSD=1.02%),(n=6).经方法学验证,该方法可同时准确、简便、快速的测定蒙药复方协日嘎-4中栀子苷、京尼平-1-O-β-D-龙胆二糖苷、西红花苷-1、西红花苷-3的含量,可以作为蒙药复方协日嘎-4的质量控制方法. 展开更多

关键词 高效液相色谱法 协日嘎-4 栀子苷 京尼平-1-O-β-D-龙胆二糖苷 西红花苷-1 西红花苷-3

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藏花素对H_2O_2诱导PC12细胞Bcl-2、Bax和Caspase-3的影响 被引量：5

2

作者 崔勇 王艳杰 +3 位作者 赵丹玉 正山征洋 李刚 柳春 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期411-415,共5页

本文通过观察藏花素对H2O2诱导的PC12细胞的保护作用和对Bcl-2、Bax和Caspase-3的影响,探讨藏花素对阿尔茨海默病细胞模型保护作用的机制。MTT法及LDH活性测定观察藏花素对PC12细胞模型的影响,RT-PCR检测Bcl-2、Bax和Caspase-3 mRNA表... 本文通过观察藏花素对H2O2诱导的PC12细胞的保护作用和对Bcl-2、Bax和Caspase-3的影响,探讨藏花素对阿尔茨海默病细胞模型保护作用的机制。MTT法及LDH活性测定观察藏花素对PC12细胞模型的影响,RT-PCR检测Bcl-2、Bax和Caspase-3 mRNA表达水平,Western blot检测Bcl-2、Bax和Caspase-3的蛋白表达。藏花素预保护浓度在0.625μM和5μM之间,细胞存活率随着藏花素浓度的升高而升高;藏花素组和VE组与模型组相比,Bcl-2 mRNA和蛋白表达增加(P<0.05),Bax和Caspase-3 mRNA和蛋白表达降低(P<0.05)。研究结果表明:藏花素可能是通过上调Bcl-2的表达,从而介导PC12细胞发挥抗氧化和细胞凋亡的生物学功能。 展开更多

关键词 藏花素 氧化应激 凋亡 BCL-2 CASPASE-3

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藏花素通过PI3K/Akt信号途径对阿尔茨海默病细胞模型海马神经元凋亡及P-CREB表达水平的影响 被引量：8

3

作者 杨艳 杨爱明 +2 位作者 孙俊 张征 白翔 《中西医结合心脑血管病杂志》 2020年第23期3954-3958,共5页

目的研究藏花素通过磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号途径对阿尔茨海默病(AD)细胞模型海马神经元凋亡及磷酸化环磷酸腺苷(cAMP)反应序列结合蛋白(P-CREB)表达水平的影响。方法原代培养大鼠海马神经元,倒置显微镜观察细胞正常... 目的研究藏花素通过磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号途径对阿尔茨海默病(AD)细胞模型海马神经元凋亡及磷酸化环磷酸腺苷(cAMP)反应序列结合蛋白(P-CREB)表达水平的影响。方法原代培养大鼠海马神经元,倒置显微镜观察细胞正常生长。海马神经元被分为正常组、藏花素组,其中藏花素组细胞用Aβ25~35孵育制备成AD细胞模型,并加入不同终浓度的藏花素(0μmol、1μmol、3μmol、10μmol),正常组直接加入等体积空白溶剂。采用MTT法检测神经元存活分数,采用TUNEL染色检测海马神经元凋亡情况,蛋白质印迹法(Western Blot)检测PI3K/Akt信号途径相关蛋白(PI3K、Akt、Bcl-2和Bax)以及P-CREB表达水平,荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)检测PI3K/Akt信号途径相关蛋白mRNA表达水平。结果藏花素组神经元存活分数低于正常组,凋亡细胞数高于正常组,其中经过Aβ25~35处理后,随着藏花素浓度的增加,神经元存活分数增加,凋亡细胞数降低(P<0.05)。藏花素各剂量组PI3K、AKT、Bcl-2、P-CREB蛋白以及mRNA表达水平低于正常组,而Bax蛋白以及mRNA高于正常组,其中经过Aβ25~35处理后,随着藏花素浓度的增加,PI3K、Akt、Bcl-2、P-CREB蛋白以及mRNA表达水平均增加,而Bax蛋白以及mRNA表达水平降低(P<0.05)。结论藏花素可通过调控PI3K/Akt信号途径以及促进P-CREB表达,从而发挥海马神经元保护作用,抑制细胞凋亡。 展开更多

关键词 阿尔茨海默病 环磷酸腺苷反应序列结合蛋白 藏花素 海马神经元 磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B 实验研究

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西红花苷对培养的牛内皮细胞内钙的调节作用 被引量：12

4

作者 绪广林 钱之玉 任萱 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期445-447,共3页

目的 观察西红花苷对不同刺激因子5-羟色胺（5-HT）、组胺（His）、过氧化氢（H2O2）所致内皮细胞内钙升高的影响。方法 采用Fluo-3/AM荧光染色剂负载细胞,在激光共聚焦扫描显微镜上测定培养的单个牛内皮细胞内游离钙的浓度。结果 在含... 目的 观察西红花苷对不同刺激因子5-羟色胺（5-HT）、组胺（His）、过氧化氢（H2O2）所致内皮细胞内钙升高的影响。方法 采用Fluo-3/AM荧光染色剂负载细胞,在激光共聚焦扫描显微镜上测定培养的单个牛内皮细胞内游离钙的浓度。结果 在含钙的Hank’s液中,5-经色胺、组胺、过氧化氢能明显升高静息状态的细胞内钙,增幅分别为280％、320％、285％。西红花苷1、10μmol/L对5-羟色胺、组胺、过氧化氢引起的钙增高有显著的抑制作用,并呈一定的剂量依赖性。0.1μmol/L西红花苷对细胞内钙升高无显著影响。结论 西红花苷抗动脉粥样硬化、高血压及炎症作用可能与其内皮细胞保护作用有关。 展开更多

关键词 西红花苷 Fluo-3/AM 激光共聚焦扫描显微镜 内皮细胞 细胞内钙 心血管病

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西红花苷对牛主动脉平滑肌细胞内钙离子浓度的影响(英文) 被引量：9

5

作者 何书英 钱之玉 唐富天 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第10期778-781,共4页

目的 研究西红花苷对血管平滑肌细胞内钙离子浓度的影响。方法 以Fluo-3/AM作为Ca2+荧光探针,采用激光扫描共聚焦显微镜观察牛主动脉平滑肌细胞内钙离子浓度的变化。结果无论细胞外有无钙离子,西红花苷(1×10～8,1×10～7,1... 目的 研究西红花苷对血管平滑肌细胞内钙离子浓度的影响。方法 以Fluo-3/AM作为Ca2+荧光探针,采用激光扫描共聚焦显微镜观察牛主动脉平滑肌细胞内钙离子浓度的变化。结果无论细胞外有无钙离子,西红花苷(1×10～8,1×10～7,1×10～6mol·L-1)均能明显抑制1×10～2mol·L-1H2O2引起的细胞内钙离子浓度的升高,其抑制率含钙条件下分别为34.1％,57.1％和74.3％(P<0.01),无钙条件下分别为26.2％,32.1％和50.0％(P<0.01);在胞外无钙的条件下,西红花苷(1×10-8,1×10～7,1×10-6mol·L-1)能抑制70 mmol·L-1 CHCl3导致雷洛丁敏感钙池的释放,其抑制率分别为27.8％,27.8％和50.0％(P<0.01)。结论 西红花苷能抑制胞外钙离子的内流及内质网上钙离子的释放。 展开更多

关键词 西红花苷 激光共聚焦显微镜 平滑肌细胞 Fluo-3/AM 钙离子

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藏红花素对急性心肌梗死大鼠心肌组织损伤和细胞凋亡的影响及机制 被引量：3

6

作者 胡亚丽 庞茜茜 +2 位作者 杨杰 刘云宁 刘克勤 《广东药科大学学报》 CAS 2022年第2期38-44,共7页

目的探索藏红花素(crocin)对急性心肌梗死大鼠心肌组织损伤和细胞凋亡的影响及作用机制。方法40只SD大鼠随机分为假手术(Sham)组、急性心肌梗死(AMI)组、AMI+crocin组、右美托咪定(Dex)组,每组各10只。三苯基氯化四氮唑(TTC)染色计算各... 目的探索藏红花素(crocin)对急性心肌梗死大鼠心肌组织损伤和细胞凋亡的影响及作用机制。方法40只SD大鼠随机分为假手术(Sham)组、急性心肌梗死(AMI)组、AMI+crocin组、右美托咪定(Dex)组,每组各10只。三苯基氯化四氮唑(TTC)染色计算各组大鼠心肌梗死面积;超声心动图获得胸骨旁长轴切面M型记录,计算左室射血分数(LVEF)和左室缩短分数(LVFS);TUNEL染色检测心肌组织凋亡;酶联免疫吸附法(ELISA)检测各组大鼠血清中乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)和Caspase-3活性;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测组织miR-146a-5p表达。设置H9c2细胞为对照组(control)、缺氧组(hypoxia)、hypoxia+crocin组、hypoxia+crocin+inhibitor组和Dex组,qRT-PCR检测细胞miR-146a-5p表达;流式细胞术和TUNEL染色检测细胞凋亡;蛋白印迹法(WB)检测Cleaved caspase-3表达;试剂盒检测大鼠细胞上清液CK和LDH活性。结果与Sham组比较,AMI组大鼠心室壁薄,心室舒缩行为异常,心肌梗死面积明显增大,LVEF、LVFS和相对miR-146a-5p表达明显下降,细胞凋亡率、CK、LDH和Caspase-3水平明显升高(P<0.05);与AMI组相比,AMI+crocin组和Dex组大鼠心肌组织增厚,心肌舒缩较正常,心肌梗死面积明显减小,LVEF、LVFS和相对miR-146a-5p表达均明显上升,细胞凋亡率、CK、LDH和Caspase-3水平明显下降(P<0.05)。与control组相比,hypoxia组细胞相对miR-146a-5p表达明显降低,细胞凋亡率、Cleaved caspase-3表达、LDH和CK水平明显上升(P<0.05);与hypoxia组相比,hypoxia+crocin组和Dex组细胞miR-146a-5p相对表达水平明显上升,细胞凋亡率、Cleaved caspase-3表达、LDH和CK水平明显下降(P<0.05)。与hypoxia+crocin组细胞相比,hypoxia+crocin+inhibitor组上述氧化应激指标明显上升(P<0.05)。结论藏红花素可能通过上调miR-146a-5p减轻急性心肌梗死大鼠的心肌组织损伤和细胞凋亡。 展开更多

关键词 藏红花素 心肌梗死 细胞凋亡 miR-146a-5p 肌酸激酶 半胱氨酸天冬氡酸蛋白酶3

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藏红花素对大鼠视网膜缺血-再灌注损伤的保护作用 被引量：3

7

作者 常花蕾 朱娟 +1 位作者 于敬妮 田蕴霖 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2019年第7期630-634,共5页

目的观察大鼠视网膜缺血-再灌注损伤(retinal ischemia-reperfusion injury,RIRI)时藏红花素对视网膜细胞凋亡数目、凋亡相关蛋白Caspase-3表达的影响,探讨缺血再灌注时藏红花素对视网膜的保护作用机制。方法选取体质量200~250 g的健康... 目的观察大鼠视网膜缺血-再灌注损伤(retinal ischemia-reperfusion injury,RIRI)时藏红花素对视网膜细胞凋亡数目、凋亡相关蛋白Caspase-3表达的影响,探讨缺血再灌注时藏红花素对视网膜的保护作用机制。方法选取体质量200~250 g的健康雄性SD大鼠24只,随机分为4组:对照组、模型组、藏红花素低剂量组和藏红花素高剂量组,每组6只。藏红花素低剂量组、高剂量组分别于造模前3 d、30 min定时腹腔注射5 g·L-1藏红花素5 mg·kg-1、50 mg·kg-1。造模成功后24 h处死大鼠并摘取眼球。使用电镜观察各组大鼠视网膜细胞结构,TUNEL染色检测视网膜凋亡细胞数量,免疫组织化学染色法观察凋亡相关蛋白Caspase-3在视网膜中的表达。结果视网膜TUNEL染色发现,对照组视网膜组织中几乎未发现凋亡细胞的阳性表达,模型组视网膜神经节细胞层和内核层中发现大量棕黄色着色的细胞,其凋亡细胞数为(27.40±0.96)个,藏红花素低剂量组可见神经节细胞层、内核层凋亡细胞数较模型组减少,凋亡细胞数为(8.40±0.41)个,与模型组相比差异有统计学意义(P<0.01);藏红花素高剂量组凋亡细胞数较模型组和低剂量组明显减少,凋亡细胞数为(4.30±0.47)个,和藏红花素低剂量组相比差异有统计学意义(P<0.01)。对照组大鼠视网膜组织Caspase-3染色阴性,模型组视网膜神经节细胞层可见棕黄色颗粒位于细胞浆内,藏红花素低剂量组Caspase-3蛋白表达量与模型组类似,藏红花素高剂量组Caspase-3蛋白表达量与对照组类似。结论藏红花素能通过降低Caspase-3蛋白含量及凋亡细胞数,从而有效保护视网膜免受RIRI。 展开更多

关键词 藏红花素 凋亡 视网膜缺血-再灌注损伤 CASPASE-3

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藏红花素抑制谷氨酸盐诱导的视网膜神经节细胞凋亡 被引量：11

8

作者 吕伯昌 党晓洁 +3 位作者 许治国 霍福权 张婷 杨新光 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期445-452,共8页

目的研究藏红花素通过影响Ca^(2+)内流对谷氨酸盐诱导的视网膜神经节细胞(RGCs)凋亡的影响及可能机制。方法分离大鼠RGCs,以0.1、1mmol/L的谷氨酸盐刺激RGCs 24、48h,建立RGCs凋亡模型,并用0.1、1.0、3.0μmol/L浓度梯度藏红花素分别处... 目的研究藏红花素通过影响Ca^(2+)内流对谷氨酸盐诱导的视网膜神经节细胞(RGCs)凋亡的影响及可能机制。方法分离大鼠RGCs,以0.1、1mmol/L的谷氨酸盐刺激RGCs 24、48h,建立RGCs凋亡模型,并用0.1、1.0、3.0μmol/L浓度梯度藏红花素分别处理。Annexin V-FITC/PI双标检测细胞凋亡率,Fluo-3/AM荧光标记Ca^(2+)检测胞内钙离子浓度,Western blot检测藏红花素对胞内钙离子介导的凋亡信号分子calpain和CaMKⅡ表达的影响。JC-1荧光染色和Western blot分别检测藏红花素对线粒体膜电位和线粒体凋亡相关信号分子Caspase-3、Caspase-9、Bcl-2/Bax表达的影响。结果 0.1mmol/L谷氨酸盐刺激24h,RGCs细胞凋亡率与对照组差异无统计学意义(P>0.05);而当刺激48h时,RGCs的凋亡率达到(43.050±2.616)%,差异有统计学意义(P<0.01)。高剂量谷氨酸盐(1mmol/L)刺激24、48h的RGCs凋亡率为(46.450±1.061)%和(45.500±3.253)%,较对照组均显著增加,差异有统计学意义(P<0.01)。用1mmol/L谷氨酸盐刺激RGCs 12h后加入0.1、1.0、3.0μmol/L藏红花素再处理12h,不同浓度藏红花素均可显著抑制细胞凋亡(P<0.01),且抑制效率具有剂量依赖性。另外,1.0μmol/L藏红花素组的谷氨酸盐诱导的胞外Ca^(2+)内流减少及钙依赖蛋白Calpain1和CaMKⅡ的表达减弱,线粒体膜电位增高,Caspase-3和Caspase-9的表达减少,Bcl-2/Bax表达上调。结论藏红花素抑制谷氨酸盐诱导的RGCs凋亡,其机制可能与阻止胞外Ca^(2+)内流,抑制钙依赖的凋亡信号通路和线粒体凋亡信号通路有关。 展开更多

关键词 藏红花素 谷氨酸盐 钙离子内流 视网膜神经节细胞 线粒体依赖性凋亡 Caspase-3 CASPASE-9 BCL-2/BAX

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西红花苷通过过氧化物酶体增殖物激活受体γ-半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3-聚腺苷酸二磷酸核糖基聚合酶通路保护大鼠心肌缺血再灌注损伤 被引量：3

9

作者 杨爱玲 张明国 +3 位作者 后梅 李云飞 苏蓉 林玲 《中华高血压杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第9期863-870,共8页

目的探讨西红花苷通过过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)-半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspase-3)-聚腺苷酸二磷酸核糖基聚合酶(PARP)通路对心肌缺血再灌注(MIR)大鼠的保护作用。方法将72只大鼠随机分为假手术组、模型组、西红花苷低... 目的探讨西红花苷通过过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)-半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspase-3)-聚腺苷酸二磷酸核糖基聚合酶(PARP)通路对心肌缺血再灌注(MIR)大鼠的保护作用。方法将72只大鼠随机分为假手术组、模型组、西红花苷低、中、高剂量[20、40、80 mg/(kg·d),灌胃]组、西红花苷+PPARγ抑制剂T0070907组[西红花苷80 mg/(kg·d)+T00709071.5 mg/(kg·d)]。结扎冠状动脉前降支法构建MIR大鼠模型。建模成功后,测定大鼠血流动力学参数左心室舒张压(LVDP)、左心室舒张末压(LVEDP)、左心室内压最大上升和下降速率(±dp/dt_(max));试剂盒检测大鼠血清和心肌组织中乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、丙二醛水平;苏木精-伊红(HE)染色法检测大鼠心肌组织病理学变化;原位末端标记(TUNEL)法检测大鼠心肌细胞凋亡情况;蛋白免疫印迹(Western-blot)法检测大鼠心肌组织中PPARγ-caspase-3-PARP通路蛋白表达。结果假手术组大鼠心肌纤维排列整齐,间质无炎症细胞浸润;模型组大鼠心肌纤维排列紊乱,间质伴有大量炎症细胞浸润;与模型组比较,西红花苷低、中、高剂量组大鼠心肌组织病变得到改善,西红花苷中、高剂量组心肌纤维排列较整齐,存在少量炎症细胞浸润;与西红花苷高剂量组比较,西红花苷+T0070907组大鼠心肌组织病变严重。模型组大鼠血流动力学参数LVDP、+dp/dt_(max)、-dp/dt_(max)、PPARγ、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)表达较假手术组降低,LVEDP、血清和心肌组织中LDH[血清LDH(2762.74±317.69)比(1105.68±286.45)U/L,q=18.605,P<0.001;心肌组织LDH(4852.34±244.82)比(2456.84±315.63)U/mg,q=29.820,P<0.001]、CK-MB、丙二醛水平,心肌细胞凋亡数目、Bcl-2相关X基因(Bax)、活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Cleaved caspase-3)、活化的PARP(Cleaved PARP)蛋白表达较假手术组升高(P<0.05);与模型组比较,西红花苷低、中、高剂量组LVDP、+dp/dt_(max)、-dp/dt_(max)及PPARγ、Bcl-2蛋白表达升高,LVEDP、LDH、CK-MB、丙二醛水平、心肌细胞凋亡数目及Bax、Cleaved caspase-3、Cleaved PARP蛋白表达降低,且随着西红花苷剂量的增加,呈一定的剂量依赖性变化(P<0.05);T0070907可逆转西红花苷对心肌缺血再灌注大鼠的保护作用。结论西红花苷可能通过激活PPARγ-caspase-3-PARP通路预防MIR大鼠心肌损伤。 展开更多

关键词 西红花苷 过氧化物酶体增殖物激活受体Γ 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3 聚腺苷酸二磷酸核糖基聚合酶 心肌缺血再灌注 大鼠

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西红花抗抑郁和保肝作用机制研究进展 被引量：1

10

作者 王少贤 陈紫薇 +2 位作者 冯佩诗 邵云东 王平 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2024年第21期7530-7538,共9页

西红花Croci Stigma为鸢尾科番红花属植物的干燥柱头,其主要化学成分包括萜类、黄酮类、蒽醌类、多取代单苯环类、环己烷和环己烯衍生物、氨基酸及生物碱类、呋喃类等,具有活血化瘀、凉血解毒、解郁安神之效。近年来,西红花及其活性成... 西红花Croci Stigma为鸢尾科番红花属植物的干燥柱头,其主要化学成分包括萜类、黄酮类、蒽醌类、多取代单苯环类、环己烷和环己烯衍生物、氨基酸及生物碱类、呋喃类等,具有活血化瘀、凉血解毒、解郁安神之效。近年来,西红花及其活性成分在抑郁症和肝脏疾病治疗方面的应用较多,但其物质基础和作用机制尚缺乏系统的总结。通过对西红花及其活性成分的抗抑郁和保肝作用的药效物质基础及作用机制进行综述,为西红花治疗肝脏疾病和抑郁症的深入研究及临床进一步的开发利用提供科学的参考。 展开更多

关键词 西红花 抗抑郁 保肝作用 西红花苷 西红花酸 西红花醛 山柰酚-3-O-槐糖苷

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栀子提取物藏红花素对APP/PS1转基因小鼠认知功能的保护作用及其机制研究

11

作者 杨诗 黄善科 +2 位作者 陈海平 吴德建 吴丹娜 《卒中与神经疾病》 2025年第1期14-21,共8页

目的探讨栀子提取物藏红花素(Crocin richments,GJ-4)对嵌合小鼠/人淀粉样前体蛋白和突变人早老蛋白1双转基因小鼠(APPswe/PSEN1dE9,APP/PS1)认知功能的保护作用及机制。方法90只健康雄性APP/PS1小鼠随机分为APP/PS1组、GJ-4低剂量组、G... 目的探讨栀子提取物藏红花素(Crocin richments,GJ-4)对嵌合小鼠/人淀粉样前体蛋白和突变人早老蛋白1双转基因小鼠(APPswe/PSEN1dE9,APP/PS1)认知功能的保护作用及机制。方法90只健康雄性APP/PS1小鼠随机分为APP/PS1组、GJ-4低剂量组、GJ-4中剂量组、GJ-4高剂量组、多奈哌齐组和美金刚组,每组各15只;8月龄时分别口服GJ-4(10、20和50 mg/kg)、多奈哌齐(5 mg/kg)和美金刚(5 mg/kg),连续12周。另选取15只野生型(Wild type,WT)小鼠作为对照(WT)组。采用Morris水迷宫法评价小鼠认知能力;尼氏(Nissl)染色检测海马组织病理结构;实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应(Quantitative real time polymerase chain reaction,qRT-PCR)法检测炎症细胞因子的释放水平;免疫荧光和免疫组化检测海马β-淀粉样多肽1-42(Amyloidβ1-42,Aβ1-42)和离子钙结合适配器分子1(Ionized calcium binding adapter molecule 1,Iba-1)表达水平;Western blot检测Aβ及磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(Phosphatidylinositol 3 kinase/Protein kinase B,PI3K/AKT)信号通路相关蛋白表达水平。结果Morris水迷宫显示,APP/PS1组小鼠较WT组逃逸潜伏期明显延长,平台跨越次数、探究物体时间和分辨指数显著降低(P<0.05);与APP/PS1组比较,多奈哌齐组、美金刚组和GJ-4(高、中、低剂量)组小鼠逃逸潜伏期均缩短,平台跨越次数、探究物体时间和分辨指数均升高(P<0.05)。Nissl染色显示,WT组小鼠海马结构完整,APP/PS1组小鼠海马神经元和尼氏体排列疏松,数量减少;多奈哌齐组、美金刚组和GJ-4(高、中、低剂量)组小鼠海马病理损伤得到改善;与WT组比较,APP/PS1组小鼠海马Aβ1-42荧光强度、磷酸化淀粉样前体蛋白(Phosphorylated amyloid precursor protein,p-APP)(T668)/APP和β-位淀粉样前体蛋白裂解酶1(Beta-site amyloid precursor protein cleaving enzyme 1,BACE1)蛋白表达、微管相关蛋白(Microtubule-associated protein,Tau)磷酸化水平、Iba-1阳性细胞数、TNF-α和IL-1β水平及p-PI3K/PI3K和p-AKT/AKT比值显著升高,胰岛素降解酶(Insulin degrading enzyme,IDE)蛋白表达和IL-4,IL-10水平明显降低(P<0.05);与APP/PS1组比较,仅有GJ-4高剂量组Aβ1-42荧光强度、p-APP(T668)/APP和BACE1蛋白表达、Tau磷酸化水平、Iba-1阳性细胞数、TNF-α和IL-1β水平及p-PI3K/PI3K和p-AKT/AKT比值显著降低,IDE蛋白表达和IL-4,IL-10水平明显升高(P<0.05)。结论GJ-4可通过Aβ,Tau和神经炎症等多个靶点来改善APP/PS1转基因小鼠的认知功能,其作用机制可能与PI3K/AKT通路激活有关。 展开更多

关键词 藏红花素 嵌合小鼠/人淀粉样前体蛋白和突变人早老蛋白1双转基因小鼠 认知功能 磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B通路

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