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cdc2基因在多种人类肿瘤细胞中的表达及意义 被引量:3
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作者 李波 阙祥勇 +1 位作者 李意 李新志 《广东医学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第14期2035-2037,共3页
目的通过检测人表皮细胞Hacat和不同组织来源的6种肿瘤细胞的增殖能力以及cdc2基因在这些细胞中的表达情况,探讨cdc2基因与肿瘤发生、发展、增殖能力之间的关系。方法体外培养人表皮细胞Hacat和不同组织来源的6种肿瘤细胞(宫颈癌细胞Ca... 目的通过检测人表皮细胞Hacat和不同组织来源的6种肿瘤细胞的增殖能力以及cdc2基因在这些细胞中的表达情况,探讨cdc2基因与肿瘤发生、发展、增殖能力之间的关系。方法体外培养人表皮细胞Hacat和不同组织来源的6种肿瘤细胞(宫颈癌细胞Caski、神经胶质瘤细胞U87、肝癌细胞Hepg2、膀胱癌细胞T24、骨肉瘤细胞MG63、肺癌细胞A549)。采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)法和免疫印迹(Western blot)法测定细胞中cdc2在mRNA和蛋白质水平的表达情况;采用四甲基偶氮唑(MTT)法检测细胞增殖速度。结果 cdc2基因在Hacat中表达较低,在Caski、U87、Hepg2、T24、MG63和A549中表达较高。MTT法显示:Hepg2、U87、T24、A549、MG63增殖能力较强,Caski次之,Hacat最差。结论 cdc2基因可能参与了肿瘤的发生过程,并与肿瘤的增殖有关。 展开更多
关键词 cdc2基因 肿瘤 增殖 细胞周期调控
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p34^(cdc2)和cyclin B1在宫颈癌中的表达及临床意义 被引量:3
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作者 赵旻 伍欣星 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2008年第11期959-963,共5页
目的:研究细胞周期蛋白p34cdc2和cyclin B1在宫颈癌组织中的表达水平,并探讨它们的表达与宫颈癌患者临床病理资料之间的相关性。方法:采用实时荧光定量PCR(real-time fluorogentic quantitative PCR,RFQ-PCR)法和Western印迹法,对62例... 目的:研究细胞周期蛋白p34cdc2和cyclin B1在宫颈癌组织中的表达水平,并探讨它们的表达与宫颈癌患者临床病理资料之间的相关性。方法:采用实时荧光定量PCR(real-time fluorogentic quantitative PCR,RFQ-PCR)法和Western印迹法,对62例原发性宫颈癌和15例对照宫颈组织进行检测,定量分析p34cdc2和cyclin B1的mRNA和蛋白质的表达水平。结果:在宫颈癌组织中p34cdc2和cyclin B1的mRNA和蛋白质表达水平明显高于对照宫颈组织(P=0.004,P=0.013和P=0.016,P=0.029),而且主要表现为过表达。p34cdc2和cyclin B1之间存在显著性正相关,mRNA和蛋白质表达的相关系数分别为0.527(P=0.001)和0.432(P=0.022)。p34cdc2和cyclin B1的mRNA表达与宫颈癌淋巴结转移之间存在密切关系(P=0.02,P=0.001),但与患者的年龄、临床分期、病理类型和分化程度无关(P>0.05)。结论:p34cdc2和cyclin B1是宫颈癌中的重要调控分子,可促发癌细胞克服细胞周期G2/M期控节制点进入M期,促进肿瘤的发生与发展。p34cdc2和cyclin B1的高表达可能成为研究宫颈癌发生机制和淋巴转移的新的分子标志。 展开更多
关键词 宫颈肿瘤 基因表达 淋巴转移 基因 P34^cdc2 基因 CYCLIN B1
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栗酒裂殖酵母CDC2基因克隆及淡水舟形藻表达载体构建 被引量:1
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作者 刘玉 朱万鹏 +4 位作者 王莹莹 姬妍茹 张洪升 邓军 刘宇峰 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期108-112,共5页
利用试剂盒提取栗酒裂殖酵母的总DNA,以其为模板进行PCR克隆CDC2基因,再将pBI121载体质粒和CDC2基因进行BamH I和SmaI双酶切,电泳分离和检测,最后连接目的片段构建重组载体pBI121-CDC2。克隆得到长度约为1.2 kb的CDC2基因片段与NCBI网... 利用试剂盒提取栗酒裂殖酵母的总DNA,以其为模板进行PCR克隆CDC2基因,再将pBI121载体质粒和CDC2基因进行BamH I和SmaI双酶切,电泳分离和检测,最后连接目的片段构建重组载体pBI121-CDC2。克隆得到长度约为1.2 kb的CDC2基因片段与NCBI网站所公开的CDC2基因序列最大同源性达98%,所构建载体经酶切和PCR验证构建成功,并且在淡水舟形藻中得到表达,表明成功构建栗酒裂殖酵母CDC2基因的淡水舟形藻表达载体。 展开更多
关键词 栗酒裂殖酵母 cdc2基因 克隆 淡水舟形藻 表达载体 构建
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雌核发育二倍体鲫鲤及其他倍性鱼cdc2基因cDNA全序列克隆及表达 被引量:1
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作者 陶敏 刘少军 +4 位作者 钟欢 周毅 宋灿 张纯 刘筠 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期1-8,共8页
为研究雌核发育二倍体鲫鲤产生二倍体卵子的分子机制,实验采用PCR和cDNA末端快速分离法,克隆获得了雌核发育二倍体鲫鲤第三代(G3)、二倍体红鲫、三倍体湘云鲫和四倍体鲫鲤的细胞周期相关基因——cdc2基因cDNA全序列。结果显示,4种不同... 为研究雌核发育二倍体鲫鲤产生二倍体卵子的分子机制,实验采用PCR和cDNA末端快速分离法,克隆获得了雌核发育二倍体鲫鲤第三代(G3)、二倍体红鲫、三倍体湘云鲫和四倍体鲫鲤的细胞周期相关基因——cdc2基因cDNA全序列。结果显示,4种不同倍性鱼cdc2基因均编码含有302个氨基酸蛋白,而且编码的蛋白都含有与其他CDK激酶相当保守的序列PSTAVRE;同源性分析发现,4种鱼cdc2基因编码的氨基酸序列之间的相似度大于97.6%,说明Cdc2蛋白在这4种不同倍性鱼中具有高度保守性。采用实时荧光定量PCR(real-timePCR)对cdc2基因在G3、二倍体红鲫、三倍体湘云鲫及四倍体鲫鲤早期卵巢中的表达进行分析,结果发现,G3cdc2基因比普通二倍体红鲫和三倍体湘云鲫表达要高,比四倍体鲫鲤的表达水平低。该研究从分子水平证明了G3早期性腺中存在着大量的多倍体卵原细胞。同时,研究表明,cdc2基因在雌核发育二倍体鲫鲤早期卵巢的高表达暗示着G3多次进入S期却不经历M期导致二倍体配子的产生。 展开更多
关键词 雌核发育二倍体鲫鲤 cdc2基因 早期卵巢 二倍体卵子 细胞周期
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玉米(Zea mays L.)cdc2基因的染色体原位杂交物理定位 被引量:1
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作者 任南 宋运淳 +1 位作者 毕学知 刘立华 《武汉大学学报(自然科学版)》 CSCD 1996年第6期740-746,共7页
首次报道了玉米低拷贝cdc2基因非放射性标记的探针染色体原位杂交的物理定位.供试探针为玉米,p34cdc2的cDNA克隆cdc2ZmA,片段长度仅为1.3kb.原位杂交检测结果表明,该基因位置在第4染色体及第9染色体... 首次报道了玉米低拷贝cdc2基因非放射性标记的探针染色体原位杂交的物理定位.供试探针为玉米,p34cdc2的cDNA克隆cdc2ZmA,片段长度仅为1.3kb.原位杂交检测结果表明,该基因位置在第4染色体及第9染色体长臂,同时在第8染色体长臂亦有杂交信号检出.3处信号检出位置距着丝粒距离和长臂长度百分比分别为54.79±2.516,87.94±1.537和25.86±0.856在第4、9和8染色体上信号检出率分别为24.6%,12.3%和6.6%. 展开更多
关键词 玉米 cdc2基因 染色体 原位杂交 物理定位
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Cdc2基因敲低逆转录病毒载体设计与构建方法 被引量:1
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作者 程序曲 王金鹏 +3 位作者 黄强 王爱东 董军 兰青 《中国微侵袭神经外科杂志》 CAS 2005年第6期256-259,共4页
目的设计和构建cdc2基因敲低的表达siRNA的逆转录病毒重组载体。方法利用在线软件siRNASelectionProgram和siDirect设计干扰cdc2基因靶序列,合成回文DNA序列,退火后克隆至线性化pSUPER质粒载体,重组质粒载体扩增、抽提后行双酶切电泳鉴... 目的设计和构建cdc2基因敲低的表达siRNA的逆转录病毒重组载体。方法利用在线软件siRNASelectionProgram和siDirect设计干扰cdc2基因靶序列,合成回文DNA序列,退火后克隆至线性化pSUPER质粒载体,重组质粒载体扩增、抽提后行双酶切电泳鉴定和测序分析,再转染phoenix细胞,产生逆转录病毒,并利用NIH3T3细胞测定病毒滴度。结果pSUPER表达siRNA重组质粒载体经双酶切电泳鉴定和DNA测序分析,证实插入的60bp序列与原序列一致,位置正确。pSUPER.retro-C1、pSUPER.retro-C2病毒滴度值分别为4.25×105CFU/ml和6.00×105CFU/ml。结论cdc2基因表达siRNA逆转录病毒重组载体构建成功,可为研究胶质瘤分子病因学提供有用工具。 展开更多
关键词 RNA干扰 基因 cdc2蛋白激酶 逆转录病毒载体 基因沉默 神经胶质瘤
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A Coarse Estimation of Cell Size Region from a Mesoscopic Stochastic Cell Cycle Model
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作者 易鸣 贾亚 +2 位作者 刘泉 朱春莲 杨利建 《Chinese Physics Letters》 SCIE CAS CSCD 2007年第7期1829-1832,共4页
Based on a deterministic cell cycle model of fission yeast, the effects of the finite cell size on the cell cycle regulation in wee1- cdc25△ double mutant type are numerically studied by using of the chemical Langevi... Based on a deterministic cell cycle model of fission yeast, the effects of the finite cell size on the cell cycle regulation in wee1- cdc25△ double mutant type are numerically studied by using of the chemical Langevin equations. It is found that at a certain region of cell size, our numerical results from the chemical Langevin equations are in good qualitative agreement with the experimental observations. The two resettings to the G2 phase from early stages of mitosis can be induced under the moderate cell size. The quantized cycle times can be observed during such a cell size region. Therefore, a coarse estimation of cell size is obtained from the mesoscopic stochastic cell cycle model. 展开更多
关键词 FISSION YEAST gene-EXPRESSION DIVISION CYCLE SYSTEM-SIZE NOISE RHYTHMS TIME cdc2
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CDC2敲低治疗人脑胶质瘤的实验研究 被引量:2
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作者 陈骅 黄强 +3 位作者 董军 翟德忠 王爱东 兰青 《中华神经外科杂志》 CSCD 北大核心 2008年第9期663-666,共4页
目的提供CDC2作为胶质瘤发生发展相关新分子的实验依据。方法构建针对目的基因的shRNA逆转录病毒表达载体;对体外培养的人脑胶质瘤细胞及其裸小鼠移植瘤进行转染,观察与目标基因相关的表型变化;荧光实时定量PCR检测mRNA表达,Wester... 目的提供CDC2作为胶质瘤发生发展相关新分子的实验依据。方法构建针对目的基因的shRNA逆转录病毒表达载体;对体外培养的人脑胶质瘤细胞及其裸小鼠移植瘤进行转染,观察与目标基因相关的表型变化;荧光实时定量PCR检测mRNA表达,Western印迹检测蛋白表达;流式细胞仪检测细胞周期和凋亡的变化。结果shRNA表达载体使人脑胶质瘤细胞株SHG44CDC2的mRNA、蛋白表达显著下调,同时出现了明显的细胞G2/M期阻滞,细胞生长抑制,凋亡增加。裸小鼠皮下移植瘤明显缩小;肿瘤颅内移植裸小鼠生存期明显延长。结论CDC2基因过表达是胶质瘤发生发展病因分子之一,敲低其表达可使肿瘤的恶性增殖得到控制。 展开更多
关键词 神经胶质瘤 cdc2 RNA干扰 基因治疗
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RNAi沉默cdc2基因对人卵巢癌顺铂耐药细胞株增殖与凋亡的影响
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作者 任婕 彭芝兰 +1 位作者 杨英捷 肖子文 《中国妇幼保健》 CAS 2015年第35期6271-6275,共5页
目的探讨利用RNAi沉默cdc2基因对人卵巢癌顺铂耐药细胞株A2780/DDP增殖、凋亡的影响,为卵巢癌顺铂耐药逆转提供一个可选择的靶点。方法针对cdc2基因的DNA设计具有特异性的SiRNA,经脂质体转染A2780/DDP,采用RT-PCR和免疫印迹法检测转染组... 目的探讨利用RNAi沉默cdc2基因对人卵巢癌顺铂耐药细胞株A2780/DDP增殖、凋亡的影响,为卵巢癌顺铂耐药逆转提供一个可选择的靶点。方法针对cdc2基因的DNA设计具有特异性的SiRNA,经脂质体转染A2780/DDP,采用RT-PCR和免疫印迹法检测转染组cdc2基因表达是否抑制。用MTT法测定A2780/DDP细胞生长曲线,流式细胞仪检测细胞凋亡率及细胞周期改变。结果构建cdc2-SiRNA表达载体能够有效抑制A2780/DDP中cdc2基因的表达,差异有统计学意义(P<0.05)。RNAi沉默cdc2基因可抑制A2780/DDP细胞增殖,促进细胞凋亡,G2/M期细胞比例明显增加,差异有统计学意义(P<0.05)。结论通过RNAi抑制cdc2基因的表达,可抑制A2780/DDP细胞增殖,促进A2780/DDP细胞凋亡,为研究卵巢癌顺铂耐药逆转奠定一定基础。 展开更多
关键词 人卵巢癌 RNA干扰 cdc2基因 顺铂耐药
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胶质瘤治疗的靶分子CDC2RNA干扰的体外实验研究 被引量:2
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作者 李骥腾 黄强 +3 位作者 陈骅 王爱东 董军 兰青 《中华神经医学杂志》 CAS CSCD 2008年第2期109-114,共6页
目的探讨抑制细胞周期依赖性激酶CDC2基因对人脑胶质瘤细胞生长的影响.并为其作为胶质瘤发生发展相关基因在胶质瘤治疗方面的应用价值提供实验依据。方法利用本实验室基因重组构建的CDC2shRNA逆转录病毒表达质粒对体外培养的人脑胶质... 目的探讨抑制细胞周期依赖性激酶CDC2基因对人脑胶质瘤细胞生长的影响.并为其作为胶质瘤发生发展相关基因在胶质瘤治疗方面的应用价值提供实验依据。方法利用本实验室基因重组构建的CDC2shRNA逆转录病毒表达质粒对体外培养的人脑胶质瘤细胞进行转染。倒置显微镜观察细胞形态和数量变化;RT-PCR及荧光实时定量PCR检测CDC2mRNA表达:Westemblot检测CDC2蛋白表达;流式细胞仪检测细胞周期和凋亡的变化;透射电子显微镜观察细胞超微结构。结果人脑胶质瘤细胞系U251在转染针对CDC2的shRNA逆转录病毒表达质粒48h后,贴壁生长的细胞逐渐漂浮,细胞生长受到抑制,CDC2mRNA下调均达98%以上.蛋白表达下调达92%以上,同时出现了明显的细胞G2/M期阻滞.细胞凋亡由0.57%上升到13.01%.并且超微结构受损明显。结论CDC2shRNA逆转录病毒表达质粒介导的RNA干扰能有效的抑制U251细胞的增殖.CDC2可作为胶质瘤基因治疗靶分子作进一步研究。 展开更多
关键词 神经胶质瘤 cdc2 RNA干扰 基因治疗
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