目的 探究驱动蛋白家族成员2A(kinesin family member 2A,KIF2A)对肝癌细胞5-FU耐药的作用及其作用机制。方法 采用浓度梯度递增联合大剂量间断冲击的方法诱导肝癌细胞BEL7402对5-FU耐药,以构建耐药株BEL7402/5-FU。采用慢病毒技术构建K...目的 探究驱动蛋白家族成员2A(kinesin family member 2A,KIF2A)对肝癌细胞5-FU耐药的作用及其作用机制。方法 采用浓度梯度递增联合大剂量间断冲击的方法诱导肝癌细胞BEL7402对5-FU耐药,以构建耐药株BEL7402/5-FU。采用慢病毒技术构建KIF2A沉默的BEL7402/5-FU细胞。用Notch1/Hes1信号通路激动剂丙戊酸(valproic acid,VPA)对KIF2A沉默的BEL7402/5-FU细胞进行干预。用CCK-8实验、蛋白印迹法、免疫荧光、流式细胞术检测细胞活性、细胞凋亡率、KIF2A、cleaved-caspase-3、Notch1和Hes1的蛋白表达。结果 BEL7402/5-FU细胞具有强5-FU耐药性,其IC_(50)为344.2μmol/L,是BEL7402细胞的92倍(IC_(50)=3.730μmol/L)。与BEL7402细胞比较,BEL7402/5-FU细胞中KIF2A蛋白表达明显增加(P<0.001);与si-NC组比较,si-KIF2A组BEL7402/5-FU细胞活性明显下降(P<0.001)、凋亡率和cleaved-caspase-3蛋白表达明显增加(P<0.001),另外Notch1和Hes1蛋白表达明显减少(P<0.001);与si-NC+5-FU组比较,si-KIF2A+5-FU组BEL7402/5-FU细胞活性显著下降(P<0.001)、凋亡率显著增加(P<0.001);与si-KIF2A+5-FU组比较,si-KIF2A+5-FU+VPA组BEL7402/5-FU细胞活性明显提高(P<0.001)、凋亡率显著降低(P<0.001)、Notch1和Hes1蛋白表达量显著增加(P<0.001)。结论 KIF2A的沉默通过抑制Notch1/Hes1信号通路活性减弱BEL7402/5-FU细胞对5-FU的化疗耐药性。展开更多
采用简单的一步溶剂热法合成了In_(2)O_(3)立方体,并利用X-射线衍射(X-ray diffraction,XRD)、扫描电子显微镜(Scanning electron microscopy,SEM)、透射电子显微镜(Transmission electron microscopy,TEM)、X射线光电子能谱(X-ray phot...采用简单的一步溶剂热法合成了In_(2)O_(3)立方体,并利用X-射线衍射(X-ray diffraction,XRD)、扫描电子显微镜(Scanning electron microscopy,SEM)、透射电子显微镜(Transmission electron microscopy,TEM)、X射线光电子能谱(X-ray photoelectron spectra,XPS)和N2吸附-脱附技术对该In_(2)O_(3)立方体的结构及形貌进行了表征。制备的In_(2)O_(3)立方体尺寸范围在1~5μm。将In_(2)O_(3)立方体制成传感器,测试其对甲苯、丙酮、氯苯、苯、乙醇、二甲苯、甲醇、异丙醇和二氧化氮(NO_(2))气体的气敏性能。结果表明,在最佳工作温度92℃时,In_(2)O_(3)传感器对NO_(2)有良好的气体选择性及灵敏度,对10×10^(-6) NO_(2)气体的响应值为187.7,最低检出限为0.6×10^(-6)。基于In_(2)O_(3)立方体的传感器具有良好的稳定性、重现性和抗湿性,有望实现在实际的复杂环境中对痕量NO_(2)气体的低温检测。展开更多
文摘目的 探究驱动蛋白家族成员2A(kinesin family member 2A,KIF2A)对肝癌细胞5-FU耐药的作用及其作用机制。方法 采用浓度梯度递增联合大剂量间断冲击的方法诱导肝癌细胞BEL7402对5-FU耐药,以构建耐药株BEL7402/5-FU。采用慢病毒技术构建KIF2A沉默的BEL7402/5-FU细胞。用Notch1/Hes1信号通路激动剂丙戊酸(valproic acid,VPA)对KIF2A沉默的BEL7402/5-FU细胞进行干预。用CCK-8实验、蛋白印迹法、免疫荧光、流式细胞术检测细胞活性、细胞凋亡率、KIF2A、cleaved-caspase-3、Notch1和Hes1的蛋白表达。结果 BEL7402/5-FU细胞具有强5-FU耐药性,其IC_(50)为344.2μmol/L,是BEL7402细胞的92倍(IC_(50)=3.730μmol/L)。与BEL7402细胞比较,BEL7402/5-FU细胞中KIF2A蛋白表达明显增加(P<0.001);与si-NC组比较,si-KIF2A组BEL7402/5-FU细胞活性明显下降(P<0.001)、凋亡率和cleaved-caspase-3蛋白表达明显增加(P<0.001),另外Notch1和Hes1蛋白表达明显减少(P<0.001);与si-NC+5-FU组比较,si-KIF2A+5-FU组BEL7402/5-FU细胞活性显著下降(P<0.001)、凋亡率显著增加(P<0.001);与si-KIF2A+5-FU组比较,si-KIF2A+5-FU+VPA组BEL7402/5-FU细胞活性明显提高(P<0.001)、凋亡率显著降低(P<0.001)、Notch1和Hes1蛋白表达量显著增加(P<0.001)。结论 KIF2A的沉默通过抑制Notch1/Hes1信号通路活性减弱BEL7402/5-FU细胞对5-FU的化疗耐药性。
文摘采用简单的一步溶剂热法合成了In_(2)O_(3)立方体,并利用X-射线衍射(X-ray diffraction,XRD)、扫描电子显微镜(Scanning electron microscopy,SEM)、透射电子显微镜(Transmission electron microscopy,TEM)、X射线光电子能谱(X-ray photoelectron spectra,XPS)和N2吸附-脱附技术对该In_(2)O_(3)立方体的结构及形貌进行了表征。制备的In_(2)O_(3)立方体尺寸范围在1~5μm。将In_(2)O_(3)立方体制成传感器,测试其对甲苯、丙酮、氯苯、苯、乙醇、二甲苯、甲醇、异丙醇和二氧化氮(NO_(2))气体的气敏性能。结果表明,在最佳工作温度92℃时,In_(2)O_(3)传感器对NO_(2)有良好的气体选择性及灵敏度,对10×10^(-6) NO_(2)气体的响应值为187.7,最低检出限为0.6×10^(-6)。基于In_(2)O_(3)立方体的传感器具有良好的稳定性、重现性和抗湿性,有望实现在实际的复杂环境中对痕量NO_(2)气体的低温检测。