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血清Tim-3、Galectin-9对重度创伤性脑损伤患者并发急性呼吸窘迫综合征的预测价值
1
作者 曹建良 吴钊 +2 位作者 张唐娟 兰超 田琦 《中华神经外科疾病研究杂志》 CAS 2025年第1期48-52,共5页
目的探讨血清T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子-3(Tim-3)、半乳糖凝集素-9(Galectin-9)对重度创伤性脑损伤(TBI)患者并发急性呼吸窘迫综合征(ARDS)的预测价值。方法选取2020年1月至2023年12月郑州大学第一附属医院收治的180例重度TBI患者作为... 目的探讨血清T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子-3(Tim-3)、半乳糖凝集素-9(Galectin-9)对重度创伤性脑损伤(TBI)患者并发急性呼吸窘迫综合征(ARDS)的预测价值。方法选取2020年1月至2023年12月郑州大学第一附属医院收治的180例重度TBI患者作为研究对象,根据受伤后1周内是否发生ARDS分为ARDS组(n=62)和非ARDS组(n=118)。比较两组患者血清Tim-3、Galectin-9水平;采用受试者工作特性(ROC)曲线评估血清Tim-3、Galectin-9对重度TBI患者并发ARDS的预测价值;采用二分类Logistic逐步回归分析探讨重度TBI患者并发ARDS的影响因素。结果ARDS组血清Tim-3、Galectin-9水平高于非ARDS组(P<0.05)。血清Tim-3、Galectin-9及二者联合预测重度TBI患者并发ARDS的曲线下面积(AUC)(95%CI)分别为0.786(0.716-0.855)、0.735(0.652-0.818)、0.835(0.775-0.895),截断值分别为264.24 ng/mL、8.06 ng/mL,特异度分别为0.831、0.788、0.763,灵敏度分别为0.613、0.626、0.742。ARDS组年龄≥60岁、合并休克、机械通气时间≥5d、ICU住院时间≥14d所占的比例均大于非ARDS组,入院时格拉斯哥昏迷量表(GCS)评分、氧合指数(OI)低于非ARDS组,降钙素原(PCT)水平高于非ARDS组(P<0.05)。入院时GCS评分低(OR=0.727,95%CI:0.543-0.973)、OI低(OR=0.957,95%CI:0.932-0.983)、合并休克(OR=9.259,95%CI:3.183-26.937)、Tim-3水平升高(OR=7.110,95%CI:2.738-18.468)、Galectin-9水平升高(OR=7.063,95%CI:2.736-18.230)是重度TBI患者并发ARDS的独立危险因素(P<0.05)。结论血清Tim-3、Galectin-9水平升高与重度TBI患者并发ARDS密切相关,两指标可作为预测重度TBI患者并发ARDS的生物标记物。 展开更多
关键词 t细胞免疫球蛋白黏蛋白分子-3 半乳糖凝集素-9 创伤性脑损伤 急性呼吸窘迫综合征
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T细胞免疫球蛋白-3及人精氨酸酶1在炎症性肠病中的表达情况及表达意义分析
2
作者 董学涛 刘艳迪 +1 位作者 李慕然 张乐丹 《黑龙江医药》 2025年第1期196-199,共4页
目的:探讨T细胞免疫球蛋白-3(Tim-3)和人精氨酸酶1(Arg-1)在炎症性肠病(IBD)患者结肠黏膜和外周血单个核细胞(PBMC)中的表达情况及其意义的整理分析。方法:收集在2021年1月—2022年12月期间于天津市人民医院诊断治疗的43例克罗恩病(CD)... 目的:探讨T细胞免疫球蛋白-3(Tim-3)和人精氨酸酶1(Arg-1)在炎症性肠病(IBD)患者结肠黏膜和外周血单个核细胞(PBMC)中的表达情况及其意义的整理分析。方法:收集在2021年1月—2022年12月期间于天津市人民医院诊断治疗的43例克罗恩病(CD)患者、37例溃疡性结肠炎(UC)患者和30例身体体检健康人员的详细资料以及上述人员内镜结肠黏膜标本和PBMC标本,选用免疫组化、流式细胞术分别检测结肠黏膜和PBMC中Tim-3表达;选择酶联免疫吸附(ELISA)法检测血清Arg-1水平;分析Tim-3和Arg-1与IBD临床特征的关系,并绘制受试者(ROC)工作曲线分析血清Tim-3、Arg-1诊断IBD的效能。结果:CD组和UC组患者黏膜组织和外周血标本Tim-3、Arg-1表达均显著高于健康对照组(P<0.05);Tim-3和Arg-1阳性率在UC组、CD组患者不同炎性活性度、严重程度及病变部位中有统计学上差异(P<0.05);ROC结果显示,外周血Tim-3、Arg-1水平单独及联合诊断IBD的AUC分别为0.839、0.885、0.943,95%CI分别为0.766~0.912、0.823~0.948、0.899~0.987,截断值为65.40%、3.28μg/mL,联合诊断的AUC高于单独诊断(P<0.05)。结论:IBD患者结肠黏膜组织和PBMC标本中Tim-3和Arg-1可能参与IBD肠黏膜免疫应答,因此可作为反映IBD疾病活动度的指标之一。 展开更多
关键词 炎症性肠病 克罗恩病 溃疡性结肠炎 t细胞免疫球蛋白-3 精氨酸酶-1
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黄芪甲苷可缓解MC3T3-E1细胞氧化应激损伤并促进成骨 被引量：1
3
作者 张加豪 李嘉程 +3 位作者 温明韬 郭艳波 骆帝 李刚 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2025年第17期3529-3536,共8页
背景:氧化应激是导致骨质疏松症的主要原因之一,减少氧化应激水平与增加抗氧化防御是治疗骨质疏松症的重要研究方向。研究证实黄芪甲苷具有抗骨质疏松作用,但其作用机制尚不明确。目的:探讨黄芪甲苷对氧化应激条件下MC3T3-E1细胞成骨的... 背景:氧化应激是导致骨质疏松症的主要原因之一,减少氧化应激水平与增加抗氧化防御是治疗骨质疏松症的重要研究方向。研究证实黄芪甲苷具有抗骨质疏松作用,但其作用机制尚不明确。目的:探讨黄芪甲苷对氧化应激条件下MC3T3-E1细胞成骨的作用。方法:将MC3T3-E1细胞分4组培养:对照组加入完全培养基,模型组加入含过氧化氢的完全培养基干预24 h后更换为完全培养基,黄芪甲苷组加入含过氧化氢、黄芪甲苷的完全培养基干预24 h后更换为含黄芪甲苷的完全培养基,抑制剂组加入含过氧化氢、黄芪甲苷、细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinases,ERK)抑制剂的完全培养基干预24 h后更换为含黄芪甲苷、ERK抑制剂的完全培养基。过氧化氢干预48 h后,通过丙二醛含量检测黄芪甲苷对MC3T3-E1细胞氧化应激的缓解作用;过氧化氢干预48 h后进行成骨诱导培养,通过碱性磷酸酶染色、茜素红染色验证MC3T3-E1细胞成骨及矿化能力,通过RT-qPCR检测成骨相关基因的表达,Western blot检测成骨相关蛋白及ERK/腺苷酸激活蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)信号通路蛋白的表达。结果与结论:(1)模型组细胞内碱性磷酸酶含量与矿化结节形成均少于对照组(P<0.05),黄芪甲苷组细胞内碱性磷酸酶含量与矿化结节形成均多于模型组(P<0.05)。(2)与对照组比较,模型组细胞内丙二醛含量增加(P<0.05),骨钙素、RUNX2、Ⅰ型胶原蛋白的mRNA与蛋白表达均降低(P<0.05),AMPK mRNA与p-AMPK蛋白表达升高(P<0.05);与模型组比较,黄芪甲苷组细胞内丙二醛含量减少(P<0.05),骨钙素、RUNX2、Ⅰ型胶原蛋白的mRNA与蛋白表达均升高(P<0.05),ERK1/2、AMPK mRNA表达升高(P<0.05),p-AMPK、p-ERK1/2蛋白表达均升高(P<0.05);ERK抑制剂可部分抑制黄芪甲苷的上述作用。(3)结果表明,黄芪甲苷可通过激活ERK/AMPK信号通路促进氧化应激条件下MC3T3-E1细胞的成骨分化。 展开更多
关键词 黄芪甲苷 骨质疏松症 MC3t3-E1细胞 氧化应激 ERK/AMPK信号通路 成骨 工程化骨材料
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环状RNA mmu_circ_0000818在地塞米松导致的MC3T3-E1细胞凋亡中的作用及机制
4
作者 杨慧霞 丁宁 +5 位作者 马润秋 李桂忠 郝银菊 马胜超 姜怡邓 白志刚 《实用医学杂志》 北大核心 2025年第4期478-489,共12页
目的筛选激素性股骨头坏死(steroid-induced osteonecrosis of femoral head,SONFH)成骨细胞中差异表达的凋亡相关环状RNA(circular RNA,circRNA),并研究其对成骨细胞凋亡的作用及机制。方法(1)培养小鼠MC3T3-E1细胞,分为Control组和dex... 目的筛选激素性股骨头坏死(steroid-induced osteonecrosis of femoral head,SONFH)成骨细胞中差异表达的凋亡相关环状RNA(circular RNA,circRNA),并研究其对成骨细胞凋亡的作用及机制。方法(1)培养小鼠MC3T3-E1细胞,分为Control组和dexamethasone(DEX)组;(2)采用Western blot检测各组细胞BCL2-Associated X的蛋白质(Bax)和B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)蛋白的表达,TUNEL染色和流式细胞术检测细胞凋亡情况;(3)提取正常和DEX处理的MC3T3-E1细胞RNA,进行RNA测序,筛选出差异表达的circRNAs,并通过GO和KEGG分析其功能;(4)筛选出差异表达的mmu_circ_0000818并进行细胞水平验证以及UCSC Genome Browser Gateway和circbase网站分析mmu_circ_0000818在染色体的位置和保守性;(5)构建mmu_circ_0000818过表达质粒及小干扰RNA(siRNA)并转染细胞,流式细胞术检测各组MC3T3-E1细胞凋亡情况。结果(1)与Control组相比,DEX组MC3T3-E1细胞凋亡升高(P<0.01);(2)根据log2foldchange(≥2)和P值(P<0.05)筛选差异表达的circRNAs,与Control组相比,DEX组中共有234个表达差异的circRNAs,其中上调的138个,下调的96个。差异表达circRNAs的靶基因利用GO和KEGG进行富集分析,Apoptosis(凋亡)和PI3K-Akt signaling pathway(磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B信号通路)差异最显著。(3)qRT-PCR结果显示,与Control组相比,DEX组MC3T3-E1细胞中mmu_circ_0000818表达明显升高(P<0.01),UCSC Genome Browser Gateway和circbase分析发现mmu_circ_0000818主要位于17:78712463-78715086,由Crim1基因第6~7外显子环化形成并且在不同物种间具有高的保守性。(4)流式细胞术结果提示抑制mmu_circ_0000818可改善DEX引起的MC3T3-E1细胞凋亡,过表达则促进其凋亡。结论mmu_circ_0000818在DEX处理的MC3T3-E1细胞中显著增高,降低其可抑制DEX引起的细胞凋亡。 展开更多
关键词 环状RNA mmu_circ_0000818 地塞米松 MC3t3-E1细胞 RNA测序 凋亡
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红景天苷促进MC3T3-E1细胞成骨分化能力的体外实验
5
作者 刘朝辉 韩晓谦 +2 位作者 段昕 郭鹏达 张云涛 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2025年第2期231-237,共7页
背景:骨缺损可直接影响牙齿种植的成功率及种植体的长期稳定性。研究显示红景天苷可促进成骨细胞增殖、分化,但对于其成骨分化相关通路具体研究不多。目的:体外细胞实验研究红景天苷对MC3T3-E1细胞增殖和分化的影响,并探究其对相关基因... 背景:骨缺损可直接影响牙齿种植的成功率及种植体的长期稳定性。研究显示红景天苷可促进成骨细胞增殖、分化,但对于其成骨分化相关通路具体研究不多。目的:体外细胞实验研究红景天苷对MC3T3-E1细胞增殖和分化的影响,并探究其对相关基因和蛋白表达的影响。方法:采用CCK-8实验和碱性磷酸酶实验筛选红景天苷(0.5,1,5,10,50μmol/L)促进MC3T3-E1细胞增殖和分化的最佳浓度。实验分为4组:对照组、红景天苷组、红景天苷+LY294002组、LY294002组,分别用成骨诱导液、含10μmol/L红景天苷、10μmol/L红景天苷+10μmol/L LY294002、10μmol/L LY294002的成骨诱导液进行培养,观察红景天苷及PI3K/Akt信号通路抑制剂LY294002对成骨相关基因和蛋白表达的影响。结果与结论:①CCK-8实验和碱性磷酸酶实验显示:红景天苷促进MC3T3-E1细胞增殖的作用在10μmol/L时最显著;②与对照组相比,红景天苷可以促进矿化、促进细胞黏附、减少细胞死亡,提高Runx-2、骨钙素、骨桥蛋白的mRNA表达(P<0.01),提高Runx-2和p-Akt蛋白表达(P<0.01);而添加PI3K/Akt信号通路抑制剂LY294002则可逆转以上结果;③结果表明,红景天苷能促进MC3T3-E1细胞矿化,并能促进成骨相关基因、蛋白的表达,这可能与PI3K/Akt信号通路的激活有关。 展开更多
关键词 红景天苷 MC3t3-E1细胞 细胞分化 成骨 矿化 LY294002 PI3K/AKt信号通路
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基于METTL14-m^(6)A-FOXO3A信号通路介导的细胞自噬探讨补肾强督方抑制炎症治疗强直性脊柱炎的机制研究
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作者 吴琳 李松倍 +2 位作者 苏晓庆 韩天然 李泽光 《海南医科大学学报》 北大核心 2025年第2期94-101,共8页
目的:观察补肾强督方对T淋巴细胞METTL14-m^(6)A-FOXO3A信号通路介导的细胞自噬的影响,从而明确其抑制炎症、治疗强制性脊柱炎的分子机制。方法:使用Jurkat细胞,采用抗CD3联合抗CD28抗体诱导24 h构建细胞模型,并给予补肾强督方含药血清... 目的:观察补肾强督方对T淋巴细胞METTL14-m^(6)A-FOXO3A信号通路介导的细胞自噬的影响,从而明确其抑制炎症、治疗强制性脊柱炎的分子机制。方法:使用Jurkat细胞,采用抗CD3联合抗CD28抗体诱导24 h构建细胞模型,并给予补肾强督方含药血清和METTL14重组蛋白进行干预。采用ELISA法检测炎症因子(IL-23和IL-17A)和氧化应激指标的水平,流式细胞术检测ROS水平,Western blot法检测自噬相关蛋白、METTL14和FOXO3A的表达,RT-qPCR检测METTL14和FOXO3A的表达,斑点杂交实验检测FOXO3A的m^(6)A甲基化水平。结果:与模型组比较,补肾强督方显著降低Jurkat细胞上清中IL-23、IL-17A和MDA的含量与ROS的水平,增加SOD和GSH-Px的活性,差异均具有统计学意义(P<0.01)。此外,补肾强督方能显著上调Jurkat细胞中Beclin-1、FOXO3A和METTL14蛋白和基因的表达和增加LC3Ⅱ/LC3Ⅰ的比值,下调p62蛋白的表达,与模型组比较差异均具有统计学意义(P<0.01)。在此基础之上,与模型组比较,补肾强督方能显著上调Jurkat细胞FOXO3A的m^(6)A甲基化水平,差异均具有统计学意义(P<0.01)。结论:补肾强督方通过METTL14介导的FOXO3A的m^(6)A甲基化修饰促进T细胞自噬,从而达到治疗强直性脊柱炎的作用。 展开更多
关键词 补肾强督方 t淋巴细胞 MEttL14 FOXO3A m^(6)A甲基化修饰
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3D Vane序列结合膈肌导航技术在肝脏TIWI中应用的可行性探讨
7
作者 穆晶 袁颖 《中国CT和MRI杂志》 2025年第1期109-111,共3页
目的 对比分析常规肝脏T1WI快速成像屏气检查3D mDixon序列与应用膈肌导航技术在自由呼吸下采集的3D Vane序列的图像质量,探讨膈肌导航技术结合3D Vane序列自由呼吸下扫描肝脏T1WI检查中的可行性。方法 选取2023年3月至10月期间的70名肝... 目的 对比分析常规肝脏T1WI快速成像屏气检查3D mDixon序列与应用膈肌导航技术在自由呼吸下采集的3D Vane序列的图像质量,探讨膈肌导航技术结合3D Vane序列自由呼吸下扫描肝脏T1WI检查中的可行性。方法 选取2023年3月至10月期间的70名肝脏MR扫描患者,根据患者屏气情况分成A组(≥18s)、B组(<18秒),两组均采用常规3D m Dixon序列进行屏气扫描与膈肌导航技术结合3D Vane序列自由呼吸扫描。由2名具有多年诊断经验的医师采用双盲法对图像的肝脏边缘锐利度、肝脏血管清晰度、脂肪抑制效果及图像伪影四个方面对图像质量进行主观评分,并在肝门水平层面选取肝脏右叶、竖脊肌及背景区域划定感兴趣区(RDI),测量两组图像肝脏及竖脊肌的信号强度(signal,SI)及图像背景噪声值(standard deviation,SD),并且计算图像的信噪比(signal to noise,SNR)及对比噪声比(contrast to noise ratio,CNR)。使用配对样本t检验和WilCoxon检验对两组肝脏图像信噪比、对比噪声比及两组图像主观评分进行统计学分析。结果实验A组的3D Vane序列与3D mDixon序列的SNR、CNR及主观评分差异均无统计学意义(均P>0.05)。实验B组3D Vane序列的SNR为35.84±9.10,高于3D mDixon序列,差异有统计学意义(P<0.05),实验B组3D Vane序列图像主观评分均高于3D mDixon序列,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 膈肌导航技术结合3D Vane序列可用于腹部T1WI中扫描。对于屏气欠佳或无法屏气配合的患者可在自由呼吸下扫描,获得到满足诊断要求的影像。 展开更多
关键词 膈肌导航技术 3D VANE 自由呼吸 肝脏t1WI
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自身免疫性肝炎患者肝组织与外周血T细胞免疫球蛋白及黏蛋白结构域分子3、细胞因子信号转导抑制因子3表达及临床意义
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作者 张静妮 张莹 岳虹 《陕西医学杂志》 2025年第3期404-407,423,共5页
目的:探究自身免疫性肝炎患者肝组织与外周血T细胞免疫球蛋白及黏蛋白结构域分子3(Tim-3)、细胞因子信号转导抑制因子3(SOCS3)表达及诊断价值。方法:选取自身免疫性肝炎患者83例为自身免疫性肝炎组,选取体检健康者86例为对照组。采用免... 目的:探究自身免疫性肝炎患者肝组织与外周血T细胞免疫球蛋白及黏蛋白结构域分子3(Tim-3)、细胞因子信号转导抑制因子3(SOCS3)表达及诊断价值。方法:选取自身免疫性肝炎患者83例为自身免疫性肝炎组,选取体检健康者86例为对照组。采用免疫组化染色和酶联免疫吸附法检测肝组织及外周血Tim-3、SOCS3表达。采用全自动生化分析仪检测自身免疫相关的炎症因子白细胞介素-2(IL-2)、IL-6、IL-21以及趋化因子C-C Motif趋化因子配体2(CCL2)、C-X-C Motif趋化因子配体9(CXCL9)、趋化因子C-C-基元受体6(CCR6)表达。采用Pearson相关性分析Tim-3、SOCS3表达与炎症因子和趋化因子的相关性。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析Tim-3、SOCS3表达水平对自身免疫性肝炎的诊断价值。结果:免疫组化染色结果显示,自身免疫性肝炎组Tim-3、SOCS3阳性表达率高于对照组(均P<0.05)。与对照组比较,自身免疫性肝炎组炎症因子(IL-2、IL-6、IL-21)、趋化因子(CCL2、CXCL9、CCR6)以及Tim-3和SOCS3水平显著升高(均P<0.05)。Pearson相关性分析显示,Tim-3、SOCS3与炎症因子IL-2、IL-6、IL-21及趋化因子CCL2、CXCL9、CCR6呈正相关(均P<0.05)。ROC曲线分析显示,Tim-3、SOCS3联合检测对自身免疫性肝炎的诊断价值优于各自单独检测(均P<0.05)。结论:Tim-3、SOCS3在自身免疫性肝炎患者肝组织及外周血中均呈高表达,两者联合检测对自身免疫性肝炎具有良好的诊断价值。 展开更多
关键词 自身免疫性肝炎 t细胞免疫球蛋白及黏蛋白结构域分子3 细胞因子信号转导抑制因子3 炎症因子 趋化因子
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白叶1号发酵茶复配养生茶调节3T3-L1细胞脂质代谢的作用
9
作者 朱天乐 盛思杰 +4 位作者 徐铃琳 吴媛媛 刘仲华 王凯茜 屠幼英 《中国茶叶》 2025年第1期50-57,共8页
随着肥胖问题的日益突出,调节血脂、预防肥胖成了人们的关注焦点,通过健康饮食方法解决该问题是最简单可行的途径。试验采用白叶1号发酵茶配伍枸杞、山楂制成养生茶,就其对小鼠3T3-L1前脂肪细胞的调脂效果和作用机理进行了研究。将3T3-L... 随着肥胖问题的日益突出,调节血脂、预防肥胖成了人们的关注焦点,通过健康饮食方法解决该问题是最简单可行的途径。试验采用白叶1号发酵茶配伍枸杞、山楂制成养生茶,就其对小鼠3T3-L1前脂肪细胞的调脂效果和作用机理进行了研究。将3T3-L1细胞诱导为成熟脂肪细胞后,通过测定油红O染色面积、脂肪和甘油三酯(TG)含量来判断养生茶对脂质形成的抑制作用。结果显示,在200~500μg/mL范围内,随着养生茶质量浓度的升高,3T3-L1前脂肪细胞的油红O染色面积下降,表明养生茶具有降脂功效。当茶样质量浓度为300、400、500μg/mL时,与模型组相比,细胞脂肪含量分别降低了22.64、23.17、30.63个百分点,降脂效果优于阳性药物辛伐他丁。此外,养生茶可以显著减少细胞中的TG含量,具有剂量依赖效应。当养生茶质量浓度为500μg/mL时,细胞内TG含量最低,与模型组相比降低了89.33%。通过茶饮代谢物与3T3-L1细胞脂肪指标的相关性分析发现,该养生茶中多种成分与3T3-L1细胞的脂质代谢物呈强相关关系。本研究可为开发具有降脂功能的新式茶饮产品提供科学依据。 展开更多
关键词 发酵白化茶 枸杞 山楂 3t3-L1前脂肪细胞 调节脂肪代谢 功效成分
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基于TGF-β/RORγt/FoxP3通路探讨扶正透邪方对铜绿假单胞菌肺炎大鼠肺损伤的影响
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作者 李奕璇 刘清泉 +2 位作者 孔令博 张迪 晏军 《中国中医药信息杂志》 2025年第3期98-104,共7页
目的观察扶正透邪方对铜绿假单胞菌肺炎(PAP)大鼠肺损伤的影响并探讨其可能的作用机制。方法将36只SD大鼠按随机数字表法分为空白组、模型组、哌拉西林组和扶正透邪方低、中、高剂量组,每组6只,除空白组外,各组气管滴注3×10~9 CFU... 目的观察扶正透邪方对铜绿假单胞菌肺炎(PAP)大鼠肺损伤的影响并探讨其可能的作用机制。方法将36只SD大鼠按随机数字表法分为空白组、模型组、哌拉西林组和扶正透邪方低、中、高剂量组,每组6只,除空白组外,各组气管滴注3×10~9 CFU/mL铜绿假单胞菌悬液0.1 mL,空白组滴注等量无菌生理盐水。造模后24 h,扶正透邪方低、中、高剂量组分别予0.43、0.86、1.73 g/mL扶正透邪方药液1.6 mL灌胃,空白组、模型组予等体积蒸馏水灌胃,哌拉西林组予0.11 g/mL哌拉西林钠他唑巴坦钠溶液0.53 mL腹腔注射,均每日1次,连续3 d。HE染色观察肺组织形态,进行肺损伤评分并测量支气管壁厚度,流式细胞术检测外周血Th17/Treg比例,ELISA检测血清维甲酸相关核孤儿受体γt(RORγt)、叉头框蛋白P3(FoxP3)、转化生长因子-β(TGF-β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-6、IL-10含量,RT-qPCR检测肺组织RORγt、FoxP3及炎症因子mRNA表达,Western blot检测肺组织RORγt、FoxP3及炎症因子蛋白表达。结果与空白组比较,模型组大鼠肺组织可见大量炎性细胞浸润,伴支气管管壁增生肥厚、肺泡扩张、肺间质水肿,肺损伤评分和支气管壁厚度明显增加(P<0.01),外周血Th17比例升高(P<0.01),Treg比例降低(P<0.01),Th17/Treg比值升高(P<0.05),血清RORγt、TNF-α、TGF-β、IL-6含量显著升高(P<0.01),FoxP3、IL-10含量显著下降(P<0.01),肺组织RORγt、TNF-α、TGF-β、IL-6 mRNA和蛋白表达显著升高(P<0.01),FoxP3、IL-10 mRNA和蛋白表达显著降低(P<0.01);与模型组比较,各给药组大鼠肺泡相对完整、结构较清晰,炎性细胞浸润、肺间质水肿充血减轻,肺损伤评分和支气管壁厚度减少(P<0.05,P<0.01),扶正透邪方高剂量组和哌拉西林组外周血Th17比例降低(P<0.05),Treg细胞比例升高(P<0.05),Th17/Treg比值降低(P<0.05),扶正透邪方中、高剂量组和哌拉西林组大鼠血清RORγt、TNF-α、TGF-β、IL-6含量显著降低(P<0.05,P<0.01),FoxP3、IL-10含量显著升高(P<0.05,P<0.01),肺组织RORγt、TNF-α、TGF-β、IL-6mRNA和蛋白表达显著下降(P<0.05,P<0.01),FoxP3、IL-10基因和蛋白表达显著升高(P<0.05,P<0.01)。结论扶正透邪方可减轻PAP大鼠肺部炎症,降低促炎因子水平、升高抑炎因子水平,其机制可能是通过TGF-β/RORγt/FoxP3通路调节免疫平衡。 展开更多
关键词 扶正透邪方 铜绿假单胞菌肺炎 tGF-β/RORγt/FoxP3 大鼠
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枸杞多糖对3T3-L1前脂肪细胞成脂分化的影响
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作者 王晓娟 杨晨晨 +3 位作者 齐玮瑜 姜宇宸 李相辰 张莉 《中兽医医药杂志》 2025年第1期26-31,共6页
枸杞多糖(L.barbarum polysaccharides,LBP)具有抗氧化、降血糖、降血脂、免疫调节等多种功效,然而枸杞多糖在细胞水平上对脂肪细胞分化过程的影响及具体的作用机制,目前尚无深入研究。本研究旨在初步探讨枸杞多糖在3T3-L1前脂肪细胞分... 枸杞多糖(L.barbarum polysaccharides,LBP)具有抗氧化、降血糖、降血脂、免疫调节等多种功效,然而枸杞多糖在细胞水平上对脂肪细胞分化过程的影响及具体的作用机制,目前尚无深入研究。本研究旨在初步探讨枸杞多糖在3T3-L1前脂肪细胞分化中的作用及其机制。试验采用“经典鸡尾酒法”诱导3T3-L1前脂肪细胞,在细胞接触抑制后2 d(分化第0天),加入诱导剂及不同浓度的枸杞多糖(100µg/mL、200µg/mL、400µg/mL)处理细胞,对照组则不加入药物,分化至第12天时,通过油红O染色分析3T3-L1细胞脂肪积累情况,并采用生化法检测3T3-L1细胞中甘油三酯(TG)的含量;采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)、脂肪酸合成酶(FAS)及激素敏感性脂肪酶(HSL)蛋白的表达水平。结果表明,不同浓度的枸杞多糖均能够显著降低3T3-L1细胞中脂滴与甘油三酯的含量(P<0.05),极显著下调PPARγ和FAS蛋白的表达水平(P<0.01),极显著上调HSL蛋白的表达水平(P<0.01)。结果提示,枸杞多糖能够有效抑制3T3-L1前脂肪细胞的分化,减少脂肪细胞的生成和脂质积累,其潜在机制可能与抑制PPARγ相关通路的蛋白表达密切相关。 展开更多
关键词 枸杞多糖 3t3-L1前脂肪细胞 分化 过氧化物酶体增殖物激活受体Γ 脂肪酸合成酶 激素敏感性脂肪酶
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活血荣络方调控RORγt/Foxp3平衡改善大鼠脑梗死的保护机制
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作者 苏啟后 彭俊杰 +1 位作者 周德生 杜晓霞 《中国中医急症》 2025年第3期416-420,424,共6页
目的观察活血荣络方对大鼠脑梗死后脑组织中维甲酸相关孤儿受体γt(RORγt)、叉头状转录因子P3(Foxp3)表达的影响,阐明活血荣络方改善脑梗死的保护机制。方法将24只成年雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、活血荣络方组、依达拉奉组,... 目的观察活血荣络方对大鼠脑梗死后脑组织中维甲酸相关孤儿受体γt(RORγt)、叉头状转录因子P3(Foxp3)表达的影响,阐明活血荣络方改善脑梗死的保护机制。方法将24只成年雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、活血荣络方组、依达拉奉组,每组6只。模型组、活血荣络方组、依达拉奉组采用线栓法制备MCAO/R模型。药物干预7 d后,对大鼠进行神经功能缺损评分,HE染色观察各组大鼠海马组织病理形态结构的变化;ELISA法检测大鼠脑组织中白细胞介素-17(IL-17)、转化生长因子-β1(TGF-β1)的含量;Western blotting法、免疫荧光法检测大鼠脑组织中RORγt、Foxp3的表达水平。结果模型组促炎因子IL-17水平增高,抑炎因子TGF-β1水平降低,表明造模后脑组织炎症加重。与模型组相比,活血荣络方组和依达拉奉组炎症因子IL-17水平均有不同程度下降,抑炎因子TGF-β1水平均有不同程度上升,提示活血荣络方、依达拉奉右莰醇能抑制炎症因子的活化,降低炎症因子的水平。Western blotting法、免疫荧光法分别检测MCAO/R大鼠脑组织中RORγt和Foxp3蛋白的表达水平和相对荧光强度。与正常组相比,模型组RORγt蛋白表达量明显升高,Foxp3蛋白表达量均明显下降;与模型组相比,活血荣络方组和依达拉奉组RORγt蛋白表达水平均有不同程度下降,Foxp3蛋白表达量均不同程度升高。结论活血荣络方的神经保护机制可能是通过调控脑梗死后脑组织中RORγt和Foxp3的表达,促进RORγt/Foxp3平衡,调节免疫微环境,间接促进Th17/Treg细胞平衡,减轻炎症反应,从而改善大鼠脑梗死后的神经损伤。 展开更多
关键词 脑梗死 活血荣络方 维甲酸相关孤儿受体γt 叉头状转录因子P3 免疫
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柔肝化纤颗粒调控NF-κB/STAT3信号通路抗肝纤维化小鼠的机制研究
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作者 葛阳 岳晓蕾 +2 位作者 张冰玉 吴长亮 王振常 《时珍国医国药》 北大核心 2025年第3期401-407,共7页
目的观察柔肝化纤颗粒(RGHXG)对肝纤维化小鼠模型的治疗作用,探索柔肝化纤颗粒抗纤维化的作用机制。方法将60只C57BL/6J雄性小鼠随机分成空白对照组、肝纤维化模型组、阳性对照组(秋水仙碱0.1 g·kg^(-1))、柔肝化纤颗粒低(2 mg/kg... 目的观察柔肝化纤颗粒(RGHXG)对肝纤维化小鼠模型的治疗作用,探索柔肝化纤颗粒抗纤维化的作用机制。方法将60只C57BL/6J雄性小鼠随机分成空白对照组、肝纤维化模型组、阳性对照组(秋水仙碱0.1 g·kg^(-1))、柔肝化纤颗粒低(2 mg/kg)、中(4 mg/kg)、高剂量(8 mg/kg)组,每组10只,除空白对照组,余各组均构建肝纤维化模型。采用苏木素-伊红(HE)染色、马松(Masson)染色观察肝组织病理变化;微板法测定AST、ALT含量;ELISA法检测IL-17、IL-21、IL-22水平;免疫组化检测α-SMA、Collagen I的阳性表达率;RT-qPCR和Western blot检测NF-κB、STAT3、RORγt mRNA转录及蛋白表达水平。结果与肝纤维化模型组相比,柔肝化纤颗粒各剂量组和阳性对照组可改善小鼠肝小叶结构紊乱、胶原纤维沉积及炎症细胞浸润现象,减少ALT、AST、IL-17、IL-21和IL-22含量(P均<0.05),降低α-SMA、Collagen I阳性表达率(P均<0.05),均明显降低NF-κB、STAT3、RORγt mRNA转录水平及蛋白表达(P均<0.05)。结论柔肝化纤颗粒可能通过抑制NF-κB/STAT3信号通路激活,减少炎症、纤维化介质的释放,进而对肝纤维化小鼠发挥抗炎保肝作用。 展开更多
关键词 核因子-ΚB 信号转导与转录激活因子3 甲酸相关孤核受体γt 柔肝化纤颗粒 肝纤维化
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自身免疫性肝炎患者肝组织中CD3^(+)CD4^(-)CD8^(-)双阴性T细胞的免疫学表型研究
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作者 张华扬 李奕康 +3 位作者 钱其炜 王绮夏 尤征瑞 马雄 《国际消化病杂志》 2025年第1期38-43,共6页
目的探究CD3^(+)CD4^(-)CD8^(-)双阴性T(DN T)细胞在自身免疫性肝炎(AIH)患者肝组织中的免疫学表型及功能。方法选择2021年9月至2022年12月于上海交通大学医学院附属仁济医院接受肝移植手术的6例AIH患者作为研究对象(设为AIH组),获取术... 目的探究CD3^(+)CD4^(-)CD8^(-)双阴性T(DN T)细胞在自身免疫性肝炎(AIH)患者肝组织中的免疫学表型及功能。方法选择2021年9月至2022年12月于上海交通大学医学院附属仁济医院接受肝移植手术的6例AIH患者作为研究对象(设为AIH组),获取术中肝组织标本;另选取6位健康肝移植捐赠者的肝组织标本设为对照组。采用激光共聚焦技术和流式细胞术探究2组肝组织中DN T细胞的频率及免疫学特性。结果AIH组肝内DN T细胞占CD3+T细胞的比例显著低于对照组[(10.35±6.89)%比(27.31±14.43)%],且DN T细胞中CD69阳性细胞占比显著高于对照组[(74.82±15.74)%比(55.45±10.29)%],差异均有统计学意义(P均<0.05)。AIH组肝内DN T细胞中CCR5、CD69和颗粒酶B(Gz-B)阳性细胞占比均显著低于CD8+T细胞[(8.43±4.88)%比(45.58±17.55)%、(7.54±4.66)%比(37.07±11.18)%、(6.15±4.36)%比(38.85±23.69)%],差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论AIH患者的肝内DN T细胞频率和杀伤能力均降低,这可能与患者肝组织内的免疫微环境紊乱有关。 展开更多
关键词 CD3^(+)CD4^(-)CD8^(-)双阴性t细胞 自身免疫性肝炎 免疫
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基于3T1R并联机构的酒盒底座清废机构设计及运动学分析
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作者 李嘉欣 李瑞琴 +2 位作者 宁峰平 李航 张磊 《机械设计与制造工程》 2025年第2期13-18,共6页
人机协同酒盒生产线中有多道人工作业工序,针对其中的酒盒底座清废工序,在分析人工执行动作的基础上提出了一种3-RRPaR/RSS三移一转并联机构,以实现该工位的自动化。基于螺旋理论分析得出该机构具有3T1R自由度;利用空间坐标变换法建立... 人机协同酒盒生产线中有多道人工作业工序,针对其中的酒盒底座清废工序,在分析人工执行动作的基础上提出了一种3-RRPaR/RSS三移一转并联机构,以实现该工位的自动化。基于螺旋理论分析得出该机构具有3T1R自由度;利用空间坐标变换法建立位置方程,求出位置逆解;采用边界数值搜索法求解出机构的工作空间,工作空间光滑连续且无空腔。应用结果表明,该并联机构可以满足酒盒底座清废作业需求,提高了酒盒生产线自动化水平。 展开更多
关键词 酒盒底座 清废 3t1R并联机构 运动学分析
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丹益活血汤加减对产科抗磷脂综合征相关复发性流产患者血清Tim-3、Gal-9、RAGE水平的影响
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作者 钱雅婷 周雪 朱轶庆 《陕西中医》 CAS 2025年第1期38-41,共4页
目的:探讨丹益活血汤对产科抗磷脂综合征相关复发性流产(OAPS-RSA)患者血清黏蛋白域分子3(Tim-3)、半乳糖凝集素9(Gal-9)、晚期糖基化终末产物受体(RAGE)水平的影响。方法:选取128例OAPS-RSA患者,随机分为两组,对照组给予小剂量阿司匹林... 目的:探讨丹益活血汤对产科抗磷脂综合征相关复发性流产(OAPS-RSA)患者血清黏蛋白域分子3(Tim-3)、半乳糖凝集素9(Gal-9)、晚期糖基化终末产物受体(RAGE)水平的影响。方法:选取128例OAPS-RSA患者,随机分为两组,对照组给予小剂量阿司匹林(LDA)联合低分子量肝素(LMWH)治疗,试验组加服丹益活血汤治疗,每组64例。比较两组疗效、治疗前后的子宫内膜容受性(ER)、血栓前状态(PTS)、血清Tim-3、Gal-9、RAGE水平及妊娠结局。结果:试验组总有效率更高(90.63%与76.56%)(P<0.05)。治疗后,与对照组比较,试验组EMT、Tim-3、Gal-9、RAGE均显著升高(P<0.05),PI、RI、FDP、D-D均显著降低(P<0.05)。试验组活产率高于对照组(P<0.05)。结论:丹益活血汤能够提升OAPS-RSA患者疗效,改善ER和PTS,升高血清Tim-3、Gal-9、RAGE水平,改善妊娠结局。 展开更多
关键词 子宫内膜容受性 复发性流产 丹益活血汤 产科抗磷脂综合征 黏蛋白域分子3 半乳糖凝集素9
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初级纤毛介导成骨前体细胞系MC3T3-E1传代衰老减低成骨分化能力
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作者 高丰 王纪亮 +3 位作者 王洪波 杨永胜 刘源 付苏 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2025年第18期3741-3746,共6页
背景:在大段骨缺损修复中,由于种子细胞传代等多种因素可引起成骨类细胞衰老,造成组织工程骨植入体内后成骨分化活性降低。近年来,初级纤毛介导细胞衰老的机制已被广泛研究,但“传代衰老-成骨活性减低”的初级纤毛相关机制尚未完全明了... 背景:在大段骨缺损修复中,由于种子细胞传代等多种因素可引起成骨类细胞衰老,造成组织工程骨植入体内后成骨分化活性降低。近年来,初级纤毛介导细胞衰老的机制已被广泛研究,但“传代衰老-成骨活性减低”的初级纤毛相关机制尚未完全明了。目的:探讨初级纤毛调控成骨性MC3T3-E1细胞传代衰老的可能机制。方法:成骨前体细胞系MC3T3-E1细胞传代至第10代(早期传代)及第40代(晚期传代),同时使用siRNA沉默IFT88阻碍初级纤毛生成,即将细胞分为第10代组、第40代组、第10代+siRNA IFT88-组、第40代+siRNA IFT88-组。各组细胞成骨诱导3 d,采用RT-PCR和Western blot检测衰老标志物CDKN2A(P16)的表达、成骨活性标志物骨形态发生蛋白2和碱性磷酸酶的表达、Hedgehog通路IHH的表达;茜素红染色和初级纤毛免疫荧光染色分析初级纤毛形态;对初级纤毛阳性率与IHH、骨形态发生蛋白2的表达进行Spearman相关性分析。结果与结论:①成骨诱导3 d,第40代组MC3T3-E1细胞的CDKN2A(P16)表达显著高于第10代组,而在siRNA IFT88-干预后差异消失;②第10代组的初级纤毛细胞阳性率高于第40代组,siRNA IFT88-则显著性抑制第10代与第40代细胞的初级纤毛表达;③第10代组MC3T3-E1细胞的碱性磷酸酶及骨形态发生蛋白2的转录活性和蛋白表达均高于第40代组,通过siRNA抑制初级纤毛表达后,上述差异减低或者消失;④初级纤毛细胞阳性率与IHH蛋白表达及骨形态发生蛋白2蛋白表达呈正相关。结果表明:初级纤毛介导了成骨性MC3T3-E1细胞的传代衰老,可调控成骨分化能力。 展开更多
关键词 MC3t3-E1细胞 初级纤毛 衰老 成骨分化 传代 骨形态发生蛋白2 HEDGEHOG通路 组织工程细胞
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调节性T细胞转录因子T-bet、GATA-3失衡表达与重症肺炎患儿病情程度及预后的关系
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作者 李佳 杨保昌 郑双双 《临床肺科杂志》 2025年第3期377-382,共6页
目的探究调节性T细胞转录因子T细胞表达的T盒(T-bet)、GATA结合蛋白3(GATA-3)失衡表达与重症肺炎患儿病情程度及预后的关系。方法选取2020年9月—2023年9月我院104例重症肺炎患儿为重症组,另以1∶1∶1比例选取104例普通肺炎患儿为轻症组... 目的探究调节性T细胞转录因子T细胞表达的T盒(T-bet)、GATA结合蛋白3(GATA-3)失衡表达与重症肺炎患儿病情程度及预后的关系。方法选取2020年9月—2023年9月我院104例重症肺炎患儿为重症组,另以1∶1∶1比例选取104例普通肺炎患儿为轻症组,104例健康体检儿童为对照组,检测调节性T细胞转录因子T-bet、GATA-3表达水平,采用急性生理与慢性健康状况评价Ⅱ(APACHEⅡ)、肺炎严重指数(PSI)评价病情,评估治疗后7 d疗效预后。比较三组T-bet、GATA-3表达水平及PSI、APACHEⅡ评分,比较三组血清Th1/Th2细胞因子含量[白介素-2(IL-2)、IL-4、IL-10、γ干扰素(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)],分析重症组T-bet、GATA-3与APACHEⅡ、PSI评分及血清Th1/Th2细胞因子的相关性,分析T-bet、GATA-3对重症肺炎患儿预后不良中的交互作用,比较重症组不同预后患儿T-bet、GATA-3,分析T-bet、GATA-3对患儿预后的预测价值。结果重症组T-bet mRNA、T-bet/GATA-3低于轻症组、对照组,GATA-3 mRNA、APACHEⅡ评分、PSI评分高于轻症组(P<0.05);重症组IL-2、IL-4、IL-10、IFN-γ、TNF-α均高于轻症组、对照组(P<0.05);APACHEⅡ、PSI评分与T-bet呈负相关,与GATA-3呈正相关(P<0.05),IL-2、IL-4、IL-10、IFN-γ、TNF-α与T-bet呈负相关,与GATA-3呈正相关(P<0.05);低T-bet mRNA与高GATA-3 mRNA二者同时存在时,交互作用OR为19.259,提示低T-bet mRNA与高GATA-3 mRNA在重症肺炎患儿预后不良中呈正向交互作用;19.259<4.078×11.556,提示低T-bet mRNA与高GATA-3 mRNA为次相乘模型。入院时、治疗3 d预后不良组患儿T-bet mRNA表达及T-bet/GATA-3均低于预后良好组,GATA-3 mRNA均高于预后良好组(P<0.05);入院时、治疗3 d T-bet/GATA-3预测的AUC分别为0.835(95%CI:0.750~0.901)、0.856(95%CI:0.774~0.917),大于T-bet mRNA、GATA-3 mRNA预测的AUC(P<0.05)。结论重症肺炎患儿调节性T细胞转录因子T-bet、GATA-3失衡表达与病情加重及预后有关,T-bet、GATA-3及T-bet/GATA-3检测对重症肺炎患儿预后有较高预测效能。 展开更多
关键词 重症肺炎 调节性t细胞转录因子 t-BEt GAtA-3 tH1/tH2 ROC曲线
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藏红花素水凝胶对软骨细胞与MC3T3-E1细胞的影响
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作者 尹航 宋奎 《中国组织工程研究》 北大核心 2025年第34期7293-7300,共8页
背景:研究发现,藏红花素可抑制骨关节炎软骨细胞的凋亡、减轻骨关节炎大鼠炎症反应,促进骨质疏松大鼠骨形成并抑制骨丢失,在软骨与骨损伤中具有巨大的应用潜力。目的:观察藏红花素水凝胶对软骨细胞、MC3T3-E1细胞的影响。方法:将不同浓... 背景:研究发现,藏红花素可抑制骨关节炎软骨细胞的凋亡、减轻骨关节炎大鼠炎症反应,促进骨质疏松大鼠骨形成并抑制骨丢失,在软骨与骨损伤中具有巨大的应用潜力。目的:观察藏红花素水凝胶对软骨细胞、MC3T3-E1细胞的影响。方法:将不同浓度(0,15,20,25 mmol/L)的藏红花素溶液分别加入氧化透明质酸-氧化硫酸软骨素-Ⅱ型胶原混合溶液中,采用席夫碱交联方式制备藏红花素水凝胶,随后制备4种水凝胶浸提液。将4种藏红花素水凝胶浸提液分别与人软骨细胞共培养,检测细胞糖胺聚糖合成,CCK-8法检测细胞增殖,Transwell小室实验检测细胞迁移,RT-qPCR检测细胞SOX9、Ⅱ型胶原、聚集蛋白聚糖mRNA表达。将4种藏红花素水凝胶浸提液分别与MC3T3-E1细胞共培养,CCK-8法检测细胞增殖,RT-qPCR检测成骨诱导分化后细胞RUNX2、Ⅰ型胶原、碱性磷酸酶、骨钙素mRNA表达,成骨诱导分化后的碱性磷酸酶活性与矿化结节形成。结果与结论:①CCK-8检测结果显示,15,20 mmol/L藏红花素水凝胶浸提液促进软骨细胞的增殖,25 mmol/L藏红花素水凝胶浸提液抑制软骨细胞的增殖。15,20,25 mmol/L藏红花素水凝胶浸提液均可促进软骨细胞的迁移,提升软骨细胞SOX9、Ⅱ型胶原、聚集蛋白聚糖mRNA表达与糖胺聚糖合成,并且呈现剂量依赖性。②15,20,25 mmol/L藏红花素水凝胶浸提液均可促进MC3T3-E1细胞的增殖,提高成骨诱导分化后细胞RUNX2、Ⅰ型胶原、碱性磷酸酶、骨钙素mRNA表达,并且具有剂量依赖性。15,20,25 mmol/L藏红花素水凝胶浸提液可提高成骨诱导分化后MC3T3-E1细胞碱性磷酸酶活性与矿化结节形成,其中以20 mmol/L藏红花素水凝胶浸提液的提高效果最显著。③结果表明,藏红花素水凝胶可促进软骨细胞的增殖、迁移及软骨细胞外基质的合成,促进MC3T3-E1细胞的增殖与成骨分化,其中20 mmol/L藏红花素水凝胶的综合效果较好。 展开更多
关键词 藏红花素 水凝胶 软骨细胞 MC3t3-E1细胞 细胞增殖 细胞迁移 细胞分化 工程化软骨材料
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蝙蝠蛾拟青霉菌丝体多糖-纳米硒的制备、结构表征及其对MC3T3-E1细胞增殖分化的影响
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作者 陈旭洁 梁慧嘉 +5 位作者 焦春伟 何春艳 陈少丹 陈秋颜 谢意珍 高雄 《食品工业科技》 北大核心 2025年第7期123-132,共10页
本研究制备了蝙蝠蛾拟青霉菌丝体多糖-纳米硒(selenium nanoparticles,SeNPs),并探索其在促进骨形成方面的潜力。通过透析、醇沉、除蛋白以及阴离子交换柱层析,从蝙蝠蛾拟青霉菌丝体水提取物中分离纯化得到多糖组分PHPW,采用苯酚硫酸法... 本研究制备了蝙蝠蛾拟青霉菌丝体多糖-纳米硒(selenium nanoparticles,SeNPs),并探索其在促进骨形成方面的潜力。通过透析、醇沉、除蛋白以及阴离子交换柱层析,从蝙蝠蛾拟青霉菌丝体水提取物中分离纯化得到多糖组分PHPW,采用苯酚硫酸法、高效凝胶渗透色谱法和高效阴离子交换色谱法分析PHPW的基本理化特性;以PHPW为模板,通过氧化还原法制备PHPW-SeNPs,采用纳米粒度仪、透射电子显微镜、X射线衍射仪、X射线光电子能谱仪、傅里叶变换红外光谱仪表征PHPW-SeNPs结构,并评价其稳定性;采用CCK-8法、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)检测试剂盒及实时定量PCR技术评价PHPW-SeNPs对MC3T3-E1细胞增殖分化的影响。结果表明,PHPW是一种以葡萄糖为主的中性多糖,其多糖含量和重均分子量分别为99.1%和29.4 kDa。利用200μg/mL PHPW制备获得的PHPW-SeNPs粒径最小且分散性好,呈现零价态、无定形、球状的结构,分析测定的元素中含有碳(63.1%)、氧(3.5%)和硒(33.4%),PHPW中的羟基可通过类似氢键作用稳定SeNPs。PHPW-SeNPs溶液在pH6~8、4℃避光条件下具有较好的稳定性。PHPW-SeNPs在1.25~20μmol/L浓度范围内,MC3T3-E1细胞增殖率呈剂量、时间依赖性提高,当浓度为20μmol/L时,MC3T3-E1细胞ALP活力增强至对照组的1.8倍,骨形态发生蛋白2(bone morphogenetic protein 2,BMP2)、RUNT相关转录因子2(Runt-related transcription factor 2,RUNX2)、osteorix(OSX)及ALP mRNA表达量分别上调至对照组的2.9、4.7、3.2和3.8倍。综上所述,以多糖组分PHPW为模板可成功制备稳定性较好的PHPW-SeNPs,其能够显著促进MC3T3-E1细胞增殖、分化,在预防骨质疏松方面具有良好的应用潜力,有望开发成促进骨健康的保健品。 展开更多
关键词 蝙蝠蛾拟青霉 菌丝体多糖 纳米硒 结构特性 MC3t3-E1 细胞 成骨分化 本文网刊:
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