猪EGFL6基因生物信息学分析 被引量：7

1

作者 孙彩霞 李明 +2 位作者 乔瑞敏 韩雪蕾 李新建 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期16-23,共8页

为了解猪EGFL6基因基本特性,克隆该基因CDS区,运用生物信息学方法预测分析其氨基酸理化性质、同源性、蛋白功能及二三级结构等。结果表明,猪EGFL6基因CDS区全长1 665 bp,编码554个氨基酸,与人、马、小鼠、绵羊等氨基酸相似性均在75%以上... 为了解猪EGFL6基因基本特性,克隆该基因CDS区,运用生物信息学方法预测分析其氨基酸理化性质、同源性、蛋白功能及二三级结构等。结果表明,猪EGFL6基因CDS区全长1 665 bp,编码554个氨基酸,与人、马、小鼠、绵羊等氨基酸相似性均在75%以上,亲缘关系较近,该蛋白具有亲水性和不稳定性,是分泌蛋白,有12个潜在磷酸化位点,5个保守结构域,无跨膜结构区,无规则卷曲是二三级结构中最主要结构元件。该研究为进一步揭示猪EGFL6基因功能奠定基础。 展开更多

关键词 egfl6 生物信息学 猪

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人源性EGFL6的重组表达及多克隆抗体制备研究 被引量：6

2

作者 杨晶 王金胜 +4 位作者 张辉挺 王宏 宋其芳 黄建芳 邓宁 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期517-521,526,共6页

目的研究发现人源性类表皮生长因子域EGFL6可促进组织血管新生并在肿瘤组织细胞中表达上调,预示其与肿瘤发生发展密切相关,本研究通过对EGFL6基因克隆,表达和纯化并制备其多克隆抗体,为深入研究EGFL6相关功能奠定基础。方法用实时荧光定... 目的研究发现人源性类表皮生长因子域EGFL6可促进组织血管新生并在肿瘤组织细胞中表达上调,预示其与肿瘤发生发展密切相关,本研究通过对EGFL6基因克隆,表达和纯化并制备其多克隆抗体,为深入研究EGFL6相关功能奠定基础。方法用实时荧光定量PCR方法检测肿瘤及正常组织细胞系中EGFL6基因表达水平,并扩增EGFL6基因片段,采用基因重组技术构建EGFL6原核表达载体,经诱导表达后利用镍离子柱亲和纯化EGFL6重组蛋白,免疫昆明小鼠制备抗EGFL6多克隆抗体,ELISA、Western blot方法检测抗体灵敏度和特异性。结果 RT-PCR检测发现EGFL6在肿瘤细胞系A375及SKOV3中高表达。成功构建表达载体pET32a(+)-EGFL6,实现可溶性EGFL6蛋白的诱导表达,纯化和抗体制备。SDS-PAGE和Western blot证实,重组EGFL6蛋白质与预期结果一致,抗血清能够特异地识别重组片段蛋白,重组全长蛋白及细胞系中天然EGFL6蛋白。结论 qRT-PCR检测得知EGFL6在肿瘤细胞系A375及SKOV3中表达量较高,并成功实现了EGFL6的重组表达,抗体制备及初步应用研究。 展开更多

关键词 肿瘤细胞 egfl6 实时荧光定量RT—PCR 重组表达 多克隆抗体

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重组人EGFL6在HEK293细胞中的瞬时表达 被引量：4

3

作者 亢中奎 张晋霞 +4 位作者 姜浩武 王宏 宋其芳 黄建芳 邓宁 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第9期170-176,共7页

旨在通过构建EGFL6的真核表达载体,在HEK293T细胞中进行表达,并利用HEK293T细胞表达的EGFL6条件培养基,探讨EGFL6对人黑色素瘤A375细胞和人卵巢癌SKOV3细胞增殖的影响。利用PCR方法亚克隆得到的EGFL6基因片段及EGFP基因片段,用重叠PCR... 旨在通过构建EGFL6的真核表达载体,在HEK293T细胞中进行表达,并利用HEK293T细胞表达的EGFL6条件培养基,探讨EGFL6对人黑色素瘤A375细胞和人卵巢癌SKOV3细胞增殖的影响。利用PCR方法亚克隆得到的EGFL6基因片段及EGFP基因片段,用重叠PCR方法构建成EGFP-EGFL6融合基因片段,并分别将测序正确的EGFP-EGFL6融合基因片段及EGFP基因片段构建到真核表达载体pAAV中。表达载体质粒去内毒素纯化后,瞬时转染HEK293T细胞进行表达,荧光定位分析和Western blot检测EGFL6的表达。CCK-8试验分析含EGFP-EGFL6融合蛋白的HEK293T条件培养基对A375细胞和SKOV3细胞的增殖能力的影响。结果显示,酶切鉴定pAAV-EGFP-EGFL6和pAAV-EGFP两个重组表达载体均构建成功;EGFP荧光定位及Western blot结果均显示EGFP-EGFL6在HEK293T细胞中成功表达;增殖抑制试验结果显示EGFL6促进了A375和SKOV3细胞的增殖,对肿瘤细胞的促增殖率分别达到(37.79±14.05)%和(30.53±6.31)%。成功地将EGFP应用于EGFL6真核表达载体的构建与表达,结果表明人EGFL6促进了A375和SKOV3细胞的增殖。 展开更多

关键词 egfl6 瞬时表达 HEK293T 肿瘤细胞

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EGFL7和PTEN在人脑胶质瘤中的表达 被引量：6

4

作者 薛伟明 王占祥 +4 位作者 马永会 钟山 陈佩琼 谭国伟 叶永造 《中华神经外科疾病研究杂志》 CAS 2011年第6期489-493,共5页

目的探讨表皮生长因子样结构7基因(EGFL7)、第10号染色体同源丢失性磷酸酶-张力蛋白基因(PTEN)在脑胶质瘤中的表达和相互关系。方法应用免疫组化方法检测56例脑胶质瘤和8例脑外伤内减压脑组织中EGFL7和PTEN的表达。结果 EGFL7蛋白在脑... 目的探讨表皮生长因子样结构7基因(EGFL7)、第10号染色体同源丢失性磷酸酶-张力蛋白基因(PTEN)在脑胶质瘤中的表达和相互关系。方法应用免疫组化方法检测56例脑胶质瘤和8例脑外伤内减压脑组织中EGFL7和PTEN的表达。结果 EGFL7蛋白在脑胶质瘤组织和正常脑组织中的阳性表达率差异有显著统计学意义(P<0.01);高度恶性胶质瘤组阳性表达率明显高于低度恶性胶质瘤组(P<0.01)。PTEN蛋白在脑胶质瘤组织和正常脑组织中的阳性表达率差异有显著统计学意义(P<0.01);随着胶质瘤恶性程度的增加,PTEN蛋白的表达相应降低(P<0.01)。EGFL7与PTEN在各级胶质瘤组织的表达呈负相关(r=-0.382,P<0.01)。结论 EGFL7基因可能直接参与了胶质瘤的发生、侵袭过程;PTEN基因突变或丢失、灭活导致PTEN蛋白表达的缺失或减弱在胶质瘤的发生、侵袭发展过程中起重要作用;EGFL7表达与PTEN表达具有明显的负相关性,EGFL7高表达与PTEN表达下降在胶质瘤的浸润发展过程起协同作用。 展开更多

关键词 胶质瘤 egfl7 PTEN 免疫组织化学

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EGFL7的重组表达及其抗体制备和初步应用 被引量：1

5

作者 李峰 刘艳红 +2 位作者 谢平丽 李跃辉 李官成 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期117-121,共5页

目的:新近研究发现EGFL7蛋白与肝癌密切相关。本研究对基因egfl7进行克隆、表达并制备多克隆抗体,为进一步研究其功能奠定基础。方法:通过RT-PCR方法,从人肝癌细胞系HepG2细胞中扩增egfl7目的片段,利用基因重组技术构建pET21a(+)-TRX-EG... 目的:新近研究发现EGFL7蛋白与肝癌密切相关。本研究对基因egfl7进行克隆、表达并制备多克隆抗体,为进一步研究其功能奠定基础。方法:通过RT-PCR方法,从人肝癌细胞系HepG2细胞中扩增egfl7目的片段,利用基因重组技术构建pET21a(+)-TRX-EGFL7原核表达载体,用IPTG诱导其在大肠杆菌BL21(DE3)中表达。His-tag磁珠纯化试剂盒纯化重组蛋白EGFL7,SDS-PAGE鉴定。将纯化的重组蛋白免疫BALB/c小鼠制备多克隆抗体,采用ELISA、Western blot方法检测抗体的灵敏度和特异性,并测定临床血清标本中EGFL7蛋白水平。结果:成功地构建了原核表达质粒pET21a(+)-TRX-EG-FL7。并在大肠杆菌BL21(DE3)内得以高效表达,且以包涵体的形式存在。SDS-PAGE和Western blot证实,重组EGFL7蛋白质与预期结果一致,抗血清能够特异地识别重组蛋白和血清蛋白质。结论:成功制备了EGFL7蛋白质和多克隆抗体,能用于后续研究。 展开更多

关键词 肝细胞癌 蛋白质表达 egfl7 多克隆抗体

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膀胱尿路上皮癌组织中EGFL7蛋白的表达及微血管密度的意义 被引量：2

6

作者 刘学锋 张峰 +1 位作者 詹运洪 吴斌 《现代肿瘤医学》 CAS 2016年第21期3422-3424,共3页

目的:研究膀胱尿路上皮癌组织中EGFL7蛋白的表达及微血管密度(microvessel density,MVD),探讨EGFL7及MVD与膀胱尿路上皮癌生物学特征的内在联系。方法:应用免疫组化SP法,对63例膀胱尿路上皮癌组织及10例正常人膀胱组织中的EGFL7蛋白进... 目的:研究膀胱尿路上皮癌组织中EGFL7蛋白的表达及微血管密度(microvessel density,MVD),探讨EGFL7及MVD与膀胱尿路上皮癌生物学特征的内在联系。方法:应用免疫组化SP法,对63例膀胱尿路上皮癌组织及10例正常人膀胱组织中的EGFL7蛋白进行检测,同时应用八因子抗体对膀胱尿路上皮癌组织中微血管进行染色,结合Meta-Morph显微荧光图像分析系统测定并分析63例膀胱尿路上皮癌中微血管密度(MVD)及其与EGFL7和膀胱尿路上皮癌的病理分期、临床分级之间的关系。结果:EGFL7在正常膀胱组织均呈阴性表达,40例膀胱尿路上皮癌EGFL7蛋白表达阳性,阳性率为63%(P<0.05)。EGFL7蛋白的表达在膀胱尿路上皮癌不同肿瘤组织学分级、临床分期组间比较差异具有统计学意义(P<0.05)。MVD值在膀胱尿路上皮癌组织中不同病理分级、临床分期组间有显著性差异(P<0.05)。结论:EGFL7和MVD在膀胱尿路上皮癌组织中表达与肿瘤病理分级及临床分期密切相关,在膀胱尿路上皮癌浸润转移过程中起重要作用。 展开更多

关键词 膀胱尿路上皮癌 egfl7蛋白 微血管密度 免疫组织化学

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EGFL7在原发性非小细胞肺癌中的表达研究 被引量：3

7

作者 马云帆 吴敏良 +1 位作者 韩育宁 陆相杨 《宁夏医科大学学报》 2013年第4期431-433,F0003,共4页

目的探讨类表皮生长因子域-7(EGFL7)蛋白在原发性非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达情况。方法采用PV二步免疫组织化学方法观察EGFL7蛋白在85例原发性NSCLC组织和25例肺良性病变组织中的表达。结果 EGFL7蛋白在NSCLC癌组织的表达高于其在肺... 目的探讨类表皮生长因子域-7(EGFL7)蛋白在原发性非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达情况。方法采用PV二步免疫组织化学方法观察EGFL7蛋白在85例原发性NSCLC组织和25例肺良性病变组织中的表达。结果 EGFL7蛋白在NSCLC癌组织的表达高于其在肺良性病变组织中的表达(P<0.05);EGFL7蛋白的表达水平与NSCLC的淋巴结转移相关(P<0.05)。结论 EGFL7可以作为预测NSCLC发生、转移的一种有价值的分子标志物。 展开更多

关键词 非小细胞肺癌 egfl7 免疫组化

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EGFL7蛋白和上皮性钙黏附蛋白在膀胱尿路上皮癌中的表达及临床意义 被引量：1

8

作者 刘学锋 孙明 +1 位作者 詹运洪 吴斌 《现代肿瘤医学》 CAS 2015年第7期968-971,共4页

目的:探讨EGFL7蛋白及上皮性钙黏附蛋白(E-cadherin)在膀胱尿路上皮癌中的表达和临床意义。方法:应用免疫组化SP法检测63例膀胱尿路上皮癌组织及10例正常人膀胱组织中EGFL7蛋白及Ecadherin蛋白的表达。结果:63例膀胱尿路上皮癌中40例EG... 目的:探讨EGFL7蛋白及上皮性钙黏附蛋白(E-cadherin)在膀胱尿路上皮癌中的表达和临床意义。方法:应用免疫组化SP法检测63例膀胱尿路上皮癌组织及10例正常人膀胱组织中EGFL7蛋白及Ecadherin蛋白的表达。结果:63例膀胱尿路上皮癌中40例EGFL7蛋白表达阳性,阳性率为63%;E-cadherin蛋白25例阳性表达,阳性率为40%。膀胱尿路上皮癌和正常膀胱组织中EGFL7蛋白、E-cadherin蛋白的表达均有显著性差异(P<0.05)。EGFL7蛋白和E-cadherin蛋白的表达在膀胱尿路上皮癌不同肿瘤组织学分级、临床分期组间比较差异具有统计学意义(P<0.05)。EGFL7蛋白和E-cadherin蛋白在膀胱尿路上皮癌中表达呈负相关。结论:膀胱尿路上皮癌中EGFL7蛋白及E-cadherin蛋白的表达与肿瘤的进展密切相关,是判断其生物学行为,预测转移趋势极具价值的指标。 展开更多

关键词 膀胱尿路上皮癌 egfl7蛋白 钙黏附蛋白 免疫组织化学

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沉默EGFL6基因表达抑制卵巢癌细胞增殖、迁移、侵袭和上皮间质转化 被引量：2

9

作者 杨夏楠 赵丹丹 +2 位作者 司晗 杨平娟 樊冬梅 《河南大学学报（医学版）》 CAS 2022年第2期117-122,148,共7页

目的:探讨表皮生长因子样结构域蛋白6(EGFL6)在卵巢癌中的表达及其对卵巢癌细胞增殖、迁移、侵袭和上皮间质转化(Epithal-Mesenchymal Transition,EMT)的影响。方法:实验分为si-NC组和si-EGFL6组,将si-EGFL6使用Lipofectamine2000转染... 目的:探讨表皮生长因子样结构域蛋白6(EGFL6)在卵巢癌中的表达及其对卵巢癌细胞增殖、迁移、侵袭和上皮间质转化(Epithal-Mesenchymal Transition,EMT)的影响。方法:实验分为si-NC组和si-EGFL6组,将si-EGFL6使用Lipofectamine2000转染至卵巢癌SK-OV-3和OV-90细胞。使用在线工具GEPIA和KM-plotter分析EGFL6在卵巢癌中的表达水平及其与预后的关系。CCK-8实验检测SK-OV-3和OV-90细胞的增殖,划痕愈合实验和Transwell实验分别检测SK-OV-3和OV-90细胞的迁移和侵袭能力,q RT-PCR实验检测SK-OV-3和OV-90细胞中EGFL6的表达水平,Westernblot检测EGFL6及EMT相关基因E-cadherin、Vimentin和N-cadherin的蛋白表达水平。结果:EGFL6在卵巢癌高表达,和卵巢癌的不良预后相关,具有临床诊断意义。沉默EGFL6表达后,SK-OV-3和OV-90卵巢癌细胞增殖能力受到明显抑制(P<0.01),迁移和侵袭能力降低(P<0.01),EMT相关蛋白Vimentin和N-cadherin蛋白的表达降低,E-cadherin蛋白的表达升高。结论:沉默EGFL6能够抑制卵巢癌细胞增殖、迁移、侵袭和上皮间质转化。 展开更多

关键词 egfl6 卵巢癌 EMT 迁移 侵袭

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流式细胞术检测EGFL7在肺癌不同细胞株中的表达差异 被引量：1

10

作者 孙艳芹 刘建强 甘思远 《当代医学》 2011年第12期40-41,共2页

目的探讨不同类型肺癌细胞株中EGFL7(类表皮生长因子域7)蛋白的表达差异,为进一步研究EGFL7在肺癌发病机制中的作用奠定基础。方法选取三种常用的细胞株A549(肺癌腺)、H446(小细胞肺癌)和H69(小细胞肺癌),采用流式细胞仪检测它们的EGFL... 目的探讨不同类型肺癌细胞株中EGFL7(类表皮生长因子域7)蛋白的表达差异,为进一步研究EGFL7在肺癌发病机制中的作用奠定基础。方法选取三种常用的细胞株A549(肺癌腺)、H446(小细胞肺癌)和H69(小细胞肺癌),采用流式细胞仪检测它们的EGFL7的表达,并比较三者之间的差异是否具有统计学意义。结果流式细胞仪检测结果显示,EGFL7在肺腺癌细胞株A549细胞内的表达(18.17%)明显低于小细胞肺癌细胞株H446(31.20%)和H69(34.33%)细胞内的表达(P<0.01),两种小细胞肺癌细胞株H446和H69细胞内的表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论 EGFL7可能在小细胞肺癌的发病机制中发挥重要作用。 展开更多

关键词 流式细胞术 egfl7 肺癌

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EGFL7通过FAK信号促进舌鳞状细胞癌侵袭迁移的研究 被引量：1

11

作者 林志立 梁建平 +1 位作者 黄磊 白植宝 《岭南现代临床外科》 2016年第6期660-663,共4页

目的探讨EGFL7对舌鳞状细胞癌侵袭、转移能力的调控作用。方法通过q PCR验证舌鳞状细胞癌与癌旁正常组织以及舌癌细胞中EGFL7的表达水平差异,以舌鳞状细胞癌细胞株SCC-9为实验样品,通过脂质体介导,将EGFL7-si R转染至SCC-9细胞,降低EGFL... 目的探讨EGFL7对舌鳞状细胞癌侵袭、转移能力的调控作用。方法通过q PCR验证舌鳞状细胞癌与癌旁正常组织以及舌癌细胞中EGFL7的表达水平差异,以舌鳞状细胞癌细胞株SCC-9为实验样品,通过脂质体介导,将EGFL7-si R转染至SCC-9细胞,降低EGFL7的表达水平。采用荧光实时定量RT-PCR检测转染前、后SCC-9中EGFL7的表达变化,通过Transwell实验检测细胞侵袭、迁移能力的改变,Western印迹检测EGFL7的下游信号分子FAK的表达变化。结果转染EGFL7-si R后的SCC-9中EGFL7的表达明显下调(P<0.001)。SCC-9细胞的侵袭迁移能力显著降低(P<0.001)。Western印迹检测结果显示,在舌鳞状细胞癌细胞株SCC-9中降低EGFL7的表达水平后FAK磷酸化水平降低,而FAK的表达水平不变。结论 EGFL7的表达水平变化与舌鳞癌的侵袭转移能力密切相关;EGFL7可能通过调控其下游信号通路基因FAK磷酸化水平而发挥作用。 展开更多

关键词 egfl7 p-FAK 舌鳞状细胞癌 侵袭 转移

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复合EGFL7去细胞神经支架在周围神经损伤修复过程中的动物实验研究 被引量：1

12

作者 殷超 郝增涛 +2 位作者 王继宏 王小龙 霍志奇 《实用手外科杂志》 2023年第2期237-239,共3页

目的通过构建复合EGFL7植入物的去细胞神经支架移植修复大鼠坐骨神经损伤缺损模型,从而探究EGFL7在周围神经修复过程中促进血管化和神经恢复的作用。方法手术切取日本大耳白兔双侧胫神经,截成1.0 cm长的节段,制备去细胞神经支架。将制... 目的通过构建复合EGFL7植入物的去细胞神经支架移植修复大鼠坐骨神经损伤缺损模型,从而探究EGFL7在周围神经修复过程中促进血管化和神经恢复的作用。方法手术切取日本大耳白兔双侧胫神经,截成1.0 cm长的节段,制备去细胞神经支架。将制备好的外源性EGFL7的去细胞神经支架复合物植入大鼠坐骨神经损伤模型,于术后4周取标本行神经电生理检测、组织取材投射电镜形态学观察等来评价神经修复效果。结果添加外源性EGFL7模型组与不添加EGFL7的模型组相比再生的有髓神经纤维数量多、形态规则、直径粗、髓鞘厚、髓鞘不折叠或崩解、髓鞘发育良好;坐骨神经测得的诱发电位曲线波幅高、潜伏期短、神经传导速度快。结论EGFL7在周围神经修复过程中可起到促进血管化和神经功能恢复的作用。 展开更多

关键词 egfl7 外周神经损伤 去细胞神经支架 血管化

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探讨EGFL7在非小细胞肺癌中的表达及意义 被引量：3

13

作者 沈笑春 倪崇俊 黄建安 《农垦医学》 2020年第1期36-39,共4页

目的:研究表皮生长因子样结构域7(epidermal growth factor-like protein 7,EGFL7)在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中的表达及临床意义。方法:NSCLC患者93例,其中可切除组52例、不可切除组41例;健康志愿者组30例入组... 目的:研究表皮生长因子样结构域7(epidermal growth factor-like protein 7,EGFL7)在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中的表达及临床意义。方法:NSCLC患者93例,其中可切除组52例、不可切除组41例;健康志愿者组30例入组。酶联免疫吸附试验检测各组患者循环EGFL7的表达,免疫组化法检测手术组肿瘤样本中EGFL7的表达,并对EGFL7的表达进行生物信息学分析。结果:NSCLC患者循环EGFL7含量较健康志愿者显著升高,其中不可切除组表达量显著高于可切除组;NSCLC肿瘤样本中EGFL7的表达较癌旁正常组织升高明显,且与患者肿瘤TNM分期密切相关;生物信息学分析提示EGFL7在NSCLC中显著高表达。结论:EGFL7可能参与了NSCLC的恶性生物学行为。 展开更多

关键词 非小细胞肺癌 egfl7

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人EGFL7基因RNA干扰慢病毒载体的构建及其在人喉癌细胞中的表达

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作者 张革化 常利红 +3 位作者 叶进 庄士民 王凯 黎景佳 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期1864-1869,共6页

目的:构建人表皮生长因子样结构域7(epidermal growth factor-like domain 7,EGFL7)基因RNA干扰(RNA interference,RNAi)慢病毒表达载体,并建立稳定干扰EGFL7基因表达的喉癌细胞亚系,为研究EGFL7蛋白在喉癌发生发展中的功能奠定基础。方... 目的:构建人表皮生长因子样结构域7(epidermal growth factor-like domain 7,EGFL7)基因RNA干扰(RNA interference,RNAi)慢病毒表达载体,并建立稳定干扰EGFL7基因表达的喉癌细胞亚系,为研究EGFL7蛋白在喉癌发生发展中的功能奠定基础。方法:针对人EGFL7基因序列,设计特异性RNAi靶序列,与pcDNA6.2-GW/EmGFP-miR线性载体定向连接,得到的阳性重组子再与pLenti6.3-MCS/V5-DEST慢病毒载体进行重组,获得真核表达慢病毒干扰载体。在POLOdelivererTM3000介导下将慢病毒包装质粒和EGFL7基因重组慢病毒载体导入293T细胞包装病毒,测定病毒滴度,感染人喉癌细胞HEp-2,杀稻瘟菌素筛选获得稳定干扰EGFL7基因的细胞亚系。结果:成功构建EGFL7 pLenti6.3-EGFL7-miR真核表达慢病毒干扰载体并获得相应慢病毒,经测定病毒滴度为5×1011TU/L,实时荧光定量PCR证实pLenti6.3-EGFL7-miR慢病毒载体对喉癌细胞HEp-2 EGFL7基因的沉默效率为97%。结论:成功构建人EGFL7基因特异性的慢病毒干扰载体,并获得EGFL7基因稳定干扰的喉癌细胞亚系。 展开更多

关键词 egfl7蛋白 RNA干扰 喉肿瘤 慢病毒

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非小细胞肺癌Egfl7表达与肿瘤转移及预后的关系 被引量：2

15

作者 刘凤娟 张春玲 《齐鲁医学杂志》 2012年第2期104-106,共3页

目的了解类表皮生长因子域7(Egfl7)在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及其意义。方法应用免疫组织化学法和RT-PCR方法,检测NSCLC标本40例、癌旁肺组织15例、正常肺组织20例中Egfl7蛋白和mRNA的表达水平,结合临床随访资料分析Egfl7蛋白的表... 目的了解类表皮生长因子域7(Egfl7)在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及其意义。方法应用免疫组织化学法和RT-PCR方法,检测NSCLC标本40例、癌旁肺组织15例、正常肺组织20例中Egfl7蛋白和mRNA的表达水平,结合临床随访资料分析Egfl7蛋白的表达水平与NSCLC预后的关系。结果 NSCLC组织中Egfl7蛋白和mRNA表达水平明显高于正常肺组织,差异有统计学意义(χ2=5.96;F=91.22,q=7.49～18.86,P<0.05)。Egfl7表达水平与肺癌淋巴结转移密切相关(χ2=5.172,P<0.05)。Egfl7蛋白高表达病人预后明显差于低表达组(P=0.048)。结论 Egfl7可作为评估NSCLC转移及预后的一个有价值的标志物,并有可能成为潜在的治疗靶点。 展开更多

关键词 egfl7 癌 非小细胞肺 免疫组织化学 肿瘤转移 预后

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人EGFL7真核表达载体的构建及稳定转染EA.hy926细胞系的建立 被引量：1

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作者 丁悦 黄为民 唐丽君 《现代医学与健康研究电子杂志》 2022年第23期1-4,共4页

目的建构对人类表皮生长因子样结构域7(EGFL7)基因真核表达载体以及稳定性转染EA.hy926细胞系的科学评价体系。方法采用实时荧光定量聚合酶链式反应(PCR)方法获得EGFL7的开放阅读框(ORF),借助双酶切方式,使得EGFL7能够被克隆至真核表达... 目的建构对人类表皮生长因子样结构域7(EGFL7)基因真核表达载体以及稳定性转染EA.hy926细胞系的科学评价体系。方法采用实时荧光定量聚合酶链式反应(PCR)方法获得EGFL7的开放阅读框(ORF),借助双酶切方式,使得EGFL7能够被克隆至真核表达载体(pEGFP-N1)中并获取到已经重组好的质粒pEGFP-N1-EGFL7。在进一步接受测序和鉴定处理后,借助电转仪对EA.hy926细胞进行转染,然后通过G418筛查进而建构起稳定性转染EA.hy926细胞系。使用实时荧光定量PCR和免疫印迹法检测EGFL7基因及蛋白在EA.hy926细胞系中的表达。结果转染EGFL7的EA.hy926细胞的EGFL7基因和蛋白水平均明显高于对照质粒转染组和空白对照组(P<0.05)。结论成功建构人EGFL7真核表达载体并鉴定了EGFL7在EA.hy926细胞系中的过表达,为探讨EGFL7对早产儿支气管肺发育不良的影响奠定基础。 展开更多

关键词 egfl7 真核表达载体 稳定转染 EA.hy926细胞系

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慢病毒介导EGFL7沉默对肺癌A549细胞体外生物学行为的影响

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作者 沈笑春 黄建安 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期667-672,共6页

目的:通过慢病毒介导沉默表皮生长因子样结构域7基因(epidermal growth factor-like domain 7,EGFL7)在肺癌A549细胞的表达,探讨EGFL7对A549细胞的增殖、凋亡、侵袭和血管生成的影响。方法:利用慢病毒介导靶向EGFL7的shRNA(LV-RNAi)转染... 目的:通过慢病毒介导沉默表皮生长因子样结构域7基因(epidermal growth factor-like domain 7,EGFL7)在肺癌A549细胞的表达,探讨EGFL7对A549细胞的增殖、凋亡、侵袭和血管生成的影响。方法:利用慢病毒介导靶向EGFL7的shRNA(LV-RNAi)转染A549细胞,实验分三组:LV-RNAi组(转染LV-RNAi),LV-NC组(转染空病毒)和对照组(A549细胞)。Real-time PCR和Western blotting分别检测LV-RNAi感染对A549细胞EGFL7 mRNA和蛋白水平表达的影响,MTT法和流式细胞术分别检测沉默EGFL7对A549细胞增殖和凋亡的影响,Transwell侵袭实验和鸡胚绒毛尿囊膜(chick embryo chorioallantoic membrane,CAM)实验分别检测沉默EGFL7对A549细胞侵袭和血管生成能力的影响。结果:慢病毒稳定高效地转染A549细胞,LV-RNAi组细胞内EGFL7 mRNA[(0.18±0.03)vs(0.98±0.05)、(1.03±0.09),P<0.05]和蛋白表达较LVNC组和对照组显著降低。与LV-NC组及对照组相比,沉默EGFL7对LV-RNAi组A549细胞的增殖活力[感染120 h时:(0.73±0.22)vs(0.79±0.08)vs(0.81±0.11),P>0.05]与和凋亡率[感染120 h时:(1.92%±0.06)vs(2.11%±0.07)vs(1.85%±0.13),P>0.05]均无显著影响;同时,LV-RNAi组A549细胞侵袭入下室细胞数[(61.7±14.5)vs(272.8±21.5)、(286.6±40.0)/mm2,P<0.05]与血管生成指数[(31.7±4.1)vs(96.3±4.4)、(103.3±6.5),P<0.05]均显著减少。结论:沉默EGFL基因能够抑制A549细胞侵袭和血管生成能力,但不影响其增殖与凋亡。 展开更多

关键词 egfl7 肺癌 血管生成 侵袭 RNA干扰

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EGFL6对骨血管生成的调控机制研究进展

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作者 廖世杰 宋方茗 +2 位作者 陈凯 唐生平 徐家科 《广西医科大学学报》 CAS 2022年第3期345-350,共6页

骨骼的生长和修复重塑过程中血管因素至关重要。表皮生长因子样结构域6(epidermal growth factor-like domain 6,EGFL6)作为成骨细胞特异性分泌的促血管生成因子,可经由MAPK/ERK、Wnt/β-catenin、BMP/Smad信号通路及其他相关分子调控... 骨骼的生长和修复重塑过程中血管因素至关重要。表皮生长因子样结构域6(epidermal growth factor-like domain 6,EGFL6)作为成骨细胞特异性分泌的促血管生成因子,可经由MAPK/ERK、Wnt/β-catenin、BMP/Smad信号通路及其他相关分子调控骨血管的生成。本文就EGFL6调控骨血管生成的机制进行综述,以期为骨愈合受损、骨坏死等骨科临床难题提供新的治疗思路。 展开更多

关键词 egfl6 血管生成 血管内皮细胞 骨 成骨

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系统性红斑狼疮患者CD4^+T细胞miR-126及宿主基因EGFL7 DNA甲基化状态分析 被引量：3

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作者 梁云生 赵莎 +2 位作者 梁功平 赵明 陆前进 《中南大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2013年第8期793-797,共5页

目的:探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者CD4+T细胞miR-126宿主基因EGFL7的甲基化水平对miR-126表达的调控。方法:采用实时qPCR检测SLE患者CD4+T细胞miR-126及EGFL7 mRNA表达水平;亚硫酸氢钠基因组测序法检测EGFL7基因启动子区甲基化状态。结... 目的:探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者CD4+T细胞miR-126宿主基因EGFL7的甲基化水平对miR-126表达的调控。方法:采用实时qPCR检测SLE患者CD4+T细胞miR-126及EGFL7 mRNA表达水平;亚硫酸氢钠基因组测序法检测EGFL7基因启动子区甲基化状态。结果:miR-126及其宿主基因EGFL7在SLE患者CD4+T细胞表达上调(P<0.01),EGFL7 mRNA表达水平与miR-126的表达呈正相关(r=0.538,P=0.015)。miR-126是一个内含子miRNA,位于宿主基因EGFL7基因座第7个内含子中,其自身的基因序列中包含29个CpG位点。但该区域甲基化水平在SLE患者CD4+T细胞和正常对照组间差异无统计学意义(P=0.907)。而SLE患者CD4+T细胞中EGFL7基因启动子区甲基化水平显著降低(P<0.05)。结论:SLE患者CD4+T细胞miR-126宿主基因EGFL7启动子区甲基化状态调控宿主基因本身及其miR-126的表达。 展开更多

关键词 系统性红斑狼疮 MIR-126 egfl7 宿主基因 DNA甲基化

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斑点叉尾鮰EGFL9基因变异位点与生长性状的关联分析 被引量：1

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作者 张文平 张世勇 +6 位作者 刘洪岩 徐思琪 王明华 钟立强 边文冀 朱明 陈校辉 《福建农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期253-261,共9页

【目的】研究斑点叉尾鮰表皮生长因子样结构域蛋白EGFL9(Multiple epidermal growth factor-like domains protein 9)基因与其生长性状的相关性,为斑点叉尾鮰的分子标记辅助育种奠定基础。【方法】采用靶向基因测序技术对EGFL9基因进行... 【目的】研究斑点叉尾鮰表皮生长因子样结构域蛋白EGFL9(Multiple epidermal growth factor-like domains protein 9)基因与其生长性状的相关性,为斑点叉尾鮰的分子标记辅助育种奠定基础。【方法】采用靶向基因测序技术对EGFL9基因进行测序,与参考基因组比对后筛选变异位点,并将获得的变异位点与生长性状进行关联分析。【结果】在EGFL9上共发现27个多态位点,经过滤,获得22个有效突变位点,其中4个变异位点(g.142、g.573、g.3079、g.7409)对斑点叉尾鮰的生长性状具有显著影响,位点g.142、g.3079、g.7409位于内含子中,位点g.573位于第2外显子上;g.142位点的A/A型个体的平均体长显著高于A/G型个体(P<0.05);g.7409位点A/G型个体的平均体长显著高于G/G型、A/A型个体(P<0.05);g.3079位点C/C型个体的平均体质量和体长均显著高于A/A型个体(P<0.05);位于外显子上的InDel位点g.573使EGFL9基因编码蛋白减少了一个苏氨酸残基,对蛋白质三级结构产生较为明显的影响,该位点TACC/T型个体的平均体质量显著高于TACC/TACC型个体(P<0.05),平均体长显著高于TACC/TACC型与T/T型个体(P<0.05)。【结论】获得的4个斑点叉尾鮰生长相关标记(g.142、g.573、g.3079、g.7409)与其生长性状显著关联,可以应用于后续斑点叉尾鮰育种芯片开发和分子标记辅助育种。 展开更多

关键词 斑点叉尾鮰 egfl9 SNP 生长性状 关联分析

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