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曲古霉素A预处理的hUC-MSCs移植对小鼠脑损伤的神经修复作用 被引量:2
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作者 程康 马珊珊 +7 位作者 程田 邢衢 黄团结 石振庆 张涛 刘雯雯 许玲 关方霞 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2017年第4期385-388,共4页
目的:探讨30 nmol/L曲古霉素A(TSA)预处理的人脐带间充质干细胞(h UC-MSCs)移植对脑损伤(TBI)小鼠的神经修复和促进作用。方法:利用颅脑打击器和立体定位仪制作中度脑损伤小鼠模型,并将造模成功的27只小鼠随机分为Veh组、MSCs组和TSA+M... 目的:探讨30 nmol/L曲古霉素A(TSA)预处理的人脐带间充质干细胞(h UC-MSCs)移植对脑损伤(TBI)小鼠的神经修复和促进作用。方法:利用颅脑打击器和立体定位仪制作中度脑损伤小鼠模型,并将造模成功的27只小鼠随机分为Veh组、MSCs组和TSA+MSCs组;术后3天,PI染色评估各组小鼠脑损伤周围的细胞坏死情况,术后第1、2、3、7、14、21和28天,采用神经功能缺损程度评分(NDS评分)和糖水偏好实验评估小鼠神经运动感觉和抑郁情况;术后第28天采用qRT-PCR检测组蛋白去乙酰化酶1(HDAC1)和神经元特异性相关基因(DCX、MAP2)的表达。结果:与Veh组相比,MSCs组和TSA+MSCs组小鼠脑损伤周围的坏死细胞数明显减少,其中TSA+MSCs组降低更为明显(P<0.001)。术后第1天,各组小鼠的NDS评分差异无统计学意义;从术后第3天开始,TSA+MSCs组小鼠NDS评分低于MSCs组和Veh组(P<0.001);术后第28天,与其他两组相比,TSA+MSCs组小鼠蔗糖偏嗜度增强、HDAC1表达量降低,MAP2、DCX的表达量增加(P<0.001)。结论:TSA预处理能够有效促进h UC-MSCs移植对TBI小鼠的神经修复。 展开更多
关键词 曲古霉素A 人脐带间充质干细胞 移植 脑损伤 神经修复
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体外合成修饰mRNA可转染hUC-MSCs 被引量:1
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作者 王小莉 李大哲 +1 位作者 胡培 李东升 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2013年第10期1229-1234,共6页
目的探讨体外合成修饰的mRNA能否稳定高效的转入人脐带间充质干细胞(hUC-MSC)中,为利用mRNA诱导分化hUC-MSC进行细胞治疗奠定基础。方法体外构建合成mRNA的模板并合成eGFP的修饰mRNA,将其转入hUC-MSCs,流式检测转染效率、最佳转染剂量及... 目的探讨体外合成修饰的mRNA能否稳定高效的转入人脐带间充质干细胞(hUC-MSC)中,为利用mRNA诱导分化hUC-MSC进行细胞治疗奠定基础。方法体外构建合成mRNA的模板并合成eGFP的修饰mRNA,将其转入hUC-MSCs,流式检测转染效率、最佳转染剂量及mRNA在细胞中的半衰期。相同方法合成hPdx1修饰mRNA转染hUC-MSCs,免疫荧光检测转染效果。结果体外合成的eGFP修饰mRNA可高效转入hUC-MSCs,最佳转染剂量为1.5μg/mL,转染后翻译的蛋白在细胞中可稳定存在3 d。hPdx1的修饰mRNA也可稳定地导入hUC-MSCs。结论体外合成的修饰mRNA稳定性好,可进入细胞并翻译成蛋白。 展开更多
关键词 修饰mRNA huc-msc 转染效率
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MG53蛋白联合hUC-MSCs移植对阿尔兹海默病小鼠行为和情绪失调的改善作用 被引量:2
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作者 周馨魁 马珊珊 +7 位作者 黄团结 李喆 崔渊博 王亚苹 刘腾飞 周建康 杨波 关方霞 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2019年第6期793-797,共5页
目的:研究MG53蛋白联合人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)移植对阿尔茨海默病(AD)小鼠行为和情绪失调的改善作用。方法:将3月龄AD小鼠随机分为APP+组、MG53组、hUC-MSCs组和联合组,每组8只。APP+组小鼠尾静脉注射0.1 mL生理盐水,hUC-MSCs组... 目的:研究MG53蛋白联合人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)移植对阿尔茨海默病(AD)小鼠行为和情绪失调的改善作用。方法:将3月龄AD小鼠随机分为APP+组、MG53组、hUC-MSCs组和联合组,每组8只。APP+组小鼠尾静脉注射0.1 mL生理盐水,hUC-MSCs组同法注射0.1 mL细胞密度为1×10^7个/mL的hUC-MSCs悬液,MG53组按3 mg/kg注射0.1 mL rhMG53,联合组小鼠尾静脉注射含hUC-MSCs和rhMG53的混合液,1次/d,连续3 d。治疗3 d后,DHE染色法检测小鼠(n=3)脑内ROS含量;治疗后第26-28天,采用旷场实验、新事物识别实验和新奇抑制喂养实验(n=4)评价小鼠的记忆、认知能力和抑郁情绪;治疗后第29天,进行脑组织尼氏染色(n=4),硫磺素S染色法检测Aβ斑块面积(n=4),Western blot法检测Nrf2通路相关蛋白Nrf2、NQO1和Keap-1的表达(n=1)。结果:MG53和hUC-MSCs移植单独应用均可增加AD小鼠脑内尼氏小体数量,降低ROS含量,减小Aβ斑块面积,改善小鼠的学习记忆能力和焦虑情绪(P均<0.05)。二者联用有协同增效的作用(P均<0.05)。MG53和hUC-MSCs移植可以促进AD小鼠脑组织中Nrf2、NQO1蛋白的表达,降低Keap-1蛋白的表达。结论:MG53蛋白联合hUC-MSCs移植可以激活Nrf2通路,在一定程度上改善AD小鼠的行为能力。 展开更多
关键词 MG53蛋白 人脐带间充质干细胞 Nrf2通路 阿尔兹海默病 小鼠
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hUC-MSCs移植联合肾脑复元汤干预对MCAO大鼠及HGF表达的影响 被引量:1
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作者 邹婷 胡国恒 +2 位作者 刘侃 王瑾茜 王小菊 《中国中医急症》 2020年第4期596-599,共4页
目的通过观察肾脑复元汤及hUC-MSCs对大鼠缺血侧脑组织肝细胞生长因子(HGF)表达的影响,从细胞增殖的角度探讨肾脑复元汤及hUC-MSCs的神经保护作用机制。方法采用大脑中动脉线栓法建立大鼠局灶性脑缺血(MCAO)模型,将SD大鼠随机分成假手... 目的通过观察肾脑复元汤及hUC-MSCs对大鼠缺血侧脑组织肝细胞生长因子(HGF)表达的影响,从细胞增殖的角度探讨肾脑复元汤及hUC-MSCs的神经保护作用机制。方法采用大脑中动脉线栓法建立大鼠局灶性脑缺血(MCAO)模型,将SD大鼠随机分成假手术组、模型组、中药(肾脑复元汤)组、干细胞(hUCMSCs)组、联合组5组,每组又分为3、7、14 d 3个时间点,每个时间点5只大鼠,给予不同的灌胃给药及hUCMSCs移植处理,分别于处理后3、7、14 d后次日处死,对大鼠进行神经肌肉功能缺损评分,采用HE染色法观察大鼠海马区细胞形态变化,Western blotting法观察缺血侧脑组织HGF的表达。结果1)灌胃给药3 d后hUCMSCs移植神经功能缺损评分减少,联合组神经功能缺损评分明显减少(P<0.05);灌胃给药及干细胞移植7、14 d后,灌胃给药及hUC-MSCs移植均能够使神经功能缺损评分减少;2)模型组各时间点大鼠海马CA1区及DG区神经元出现异常变化,且有许多神经细胞出现变性坏死。中药组、干细胞组各时间点CA1区和DG区神经元介于模型组与假手术组之间,联合组与假手术组随着用药时间的延长,神经元相似度越接近;3)灌胃给药3 d后,干细胞组HGF表达与模型组比较差异具有统计学意义(P<0.05),联合组比较有显著统计学意义(P<0.01);灌胃给药及干细胞移植7、14 d后大鼠血清HGF的表达增高差异有统计学意义,二者联合效果更佳。结论肾脑复元汤、hUC-MSCs均能促进HGF的表达,肾脑复元汤主要在恢复期发挥作用,hUC-MSCs各期均能促进HGF的表达,二者联合效果更佳,这可能是促进神经功能恢复的机制之一。 展开更多
关键词 脑缺血 肾脑复元汤 huc-mscs HGF 大鼠
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HDAC1基因沉默的hUC-MSCs移植对创伤性脑损伤小鼠的神经保护作用 被引量:1
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作者 许玲 邢衢 +8 位作者 马珊珊 程田 杨璐 黄团结 程康 刘雯雯 刘艳霞 李鹏 关方霞 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2017年第6期697-701,共5页
目的:观察组蛋白去乙酰化酶1(HDAC1)基因沉默的人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)静脉移植对创伤性脑损伤小鼠神经功能恢复的影响。方法:80只健康成年C57BL/6小鼠,利用立体定位仪和颅脑打击器制作中度脑损伤模型,分为Sham组、Vehicle组、hUC... 目的:观察组蛋白去乙酰化酶1(HDAC1)基因沉默的人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)静脉移植对创伤性脑损伤小鼠神经功能恢复的影响。方法:80只健康成年C57BL/6小鼠,利用立体定位仪和颅脑打击器制作中度脑损伤模型,分为Sham组、Vehicle组、hUC-MSCs移植组和联合组(n=20)。移植后第1、3、7、14、21和28天,采用改良神经功能损伤评分系统评价小鼠神经功能恢复情况;通过Morris水迷宫实验、挂线实验、新物体识别实验评价小鼠长期运动及认知功能。结晶紫染色评估小鼠的脑损伤体积和观察海马CA3区神经元形态学改变;湿重法检测脑含水量;伊文斯蓝染色检测血脑屏障的开放程度。结果:与Vehicle组相比,hUC-MSCs移植组和联合组小鼠神经功能损伤评分降低,水迷宫实验中逃避潜伏期增加、穿越平台次数及在平台象限停留时间增加,挂线时间和辨别指数增加,其中联合组各指标均有明显改善(P<0.05)。与hUC-MSCs移植组相比,联合组小鼠脑损伤体积减少、脑含水量降低、血脑屏障开放程度减轻(P<0.05),且海马CA3区神经元丢失减少。结论:HDAC1基因沉默的hU-MSCs移植对创伤性脑损伤小鼠有较好的神经保护作用。 展开更多
关键词 HDAC1 基因沉默 huc-msc 创伤性脑损伤 小鼠 神经保护
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hUC-MSCs来源外泌体联合肾脑复元汤激活Wnt3a/β-catenin通路减轻NSCs损伤的研究 被引量:2
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作者 李旭敏 商燕 +1 位作者 谢丽华 胡国恒 《中医药信息》 2023年第5期12-20,共9页
目的:探讨人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)来源的外泌体联合肾脑复元汤减轻氧葡萄糖剥夺/复氧(OGD/R)诱导的神经干细胞(NSCs)损伤的作用机制。方法:组织块法分离培养SD乳鼠的NSCs;免疫荧光鉴定NSCs标记物Nestin的表达;流式细胞术鉴定hUC-M... 目的:探讨人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)来源的外泌体联合肾脑复元汤减轻氧葡萄糖剥夺/复氧(OGD/R)诱导的神经干细胞(NSCs)损伤的作用机制。方法:组织块法分离培养SD乳鼠的NSCs;免疫荧光鉴定NSCs标记物Nestin的表达;流式细胞术鉴定hUC-MSCs,分离外泌体,透射电镜观察;采用OGD/R构建NSCs损伤模型;CCK8法、EdU法和流式细胞术用于评估NSCs的增殖和凋亡;qRT-PCR、蛋白质印迹法和免疫细胞化学法分析Wnt3a/β-catenin通路相关基因的表达。结果:本研究成功分离得到并鉴定了NSCs和hUC-MSCs,以及hUC-MSCs来源的外泌体。OGD/R诱导NSCs细胞活力和增殖率下降,促进细胞凋亡,抑制Wnt3a、β-catenin、Cyclin D1和TCF4基因和蛋白表达。与OGD/R模型组比较,肾脑复元汤、外泌体,以及二者联用显著增加NSCs的细胞活力和增殖率,抑制凋亡,促进Cyclin D1、β-catenin、Wnt3a和TCF4基因和蛋白的表达。结论:hUC-MSCs来源外泌体联合肾脑复元汤通过促进NSCs细胞增殖减轻OGD/R诱导的NSCs细胞损伤,可能与Wnt3a/β-catenin通路活化有关。 展开更多
关键词 肾脑复元汤 人脐带间充质干细胞(huc-mscs) 外泌体 氧葡萄糖剥夺/复氧(OGD/R) WNT3A β-catenin
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hUC-MSC在成神经分化过程中的趋化迁移研究 被引量:1
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作者 李晨 卞凯鹏 +5 位作者 熊英 张丽娟 匡梦岚 王岚 王恒 许键炜 《癫痫与神经电生理学杂志》 2021年第1期25-31,共7页
目的探究人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,hUC-MSC)向神经样细胞的分化,并对其分化的神经样细胞的趋化作用进行研究。方法检测hUC-MSC细胞表面的标记;无血清的诱导培养基[含2%二甲基亚砜(DMSO)和200μm... 目的探究人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,hUC-MSC)向神经样细胞的分化,并对其分化的神经样细胞的趋化作用进行研究。方法检测hUC-MSC细胞表面的标记;无血清的诱导培养基[含2%二甲基亚砜(DMSO)和200μmol/L丁羟基茴香醚(BHA)]诱导其向神经细胞分化,并进行神经细胞特异性标志物神经上皮干细胞蛋白(nestin)和神经元特异性烯醇化酶(NSE)的免疫荧光染色检测,并对分化的成神经诱导过程中的形态变化进行鉴定。此外,不同分化状态的hUC-MSC,在加入500μL含有20 ng/mL浓度的基质细胞衍生因子(stromal Cell-derived Factor-1α,SDF-1α)的不含血清的L-DMEM培养基,利用倒置相差显微镜下拍照,统计迁移至室膜下方的细胞数。结果成功分离出hUC-MSC,行流式细胞仪检测结果显示MSC:CD71+、CD29+,而CD34-、CD45-符合MSC的生物学特征。对不同诱导时间的hUC-MSC免疫荧光结果的统计学分析,nestin的表达呈现出先增高后降低的趋势,NSE在诱导期和维持前期均为阴性,在整个过程中末期才开始表达,到维持48 h时有62.5%的细胞表达,维持72 h时有76.5%的细胞表达。不同成神经分化状态的hUC-MSC迁移能力不同,诱导30 h,细胞向SDF-1α的趋化迁移能力达到最强。结论hUC-MSC具有易分离并扩增培养的生物特性,能诱导分化成为成神经细胞,并且具有一定的迁移能力,该研究能为中枢神经系统细胞的移植提供理论基础。 展开更多
关键词 人脐带间充质干细胞(huc-msc) 成神经细胞 诱导分化 荧光检测 趋化迁移
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重组人MG53蛋白激活Akt/GSK-3β通路降低LPS诱导的hUC-MSCs氧化损伤 被引量:2
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作者 王亚苹 张振坤 +6 位作者 李喆 刘腾飞 黄团结 周馨魁 麻建杰 关方霞 马珊珊 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2019年第4期522-526,共5页
目的:探讨重组人MG53蛋白对人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)氧化损伤的保护作用及分子机制。方法:实验分为对照组(CON组,不处理)、LPS组(加入200mg/LLPS)、MG53组(加入30mg/L重组人MG53蛋白)和MG53+LPS组(同时加入重组人MG53蛋白和LPS),48... 目的:探讨重组人MG53蛋白对人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)氧化损伤的保护作用及分子机制。方法:实验分为对照组(CON组,不处理)、LPS组(加入200mg/LLPS)、MG53组(加入30mg/L重组人MG53蛋白)和MG53+LPS组(同时加入重组人MG53蛋白和LPS),48h后,采用CCK-8法检测细胞活力,AO-EB染色检测细胞凋亡,JC-1染色评价线粒体膜电位变化,DCFH-DA荧光探针法检测细胞内活性氧(ROS)水平,酶标法检测丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性和过氧化氢酶(CAT)活性,Westernblot法检测磷酸化Akt和GSK-3β蛋白的表达。结果:与LPS组相比,MG53+LPS组细胞存活率升高,凋亡率和线粒体膜电位降低,细胞内ROS和MDA含量降低,SOD和CAT活性升高,同时磷酸化Akt和磷酸化GSK-3β的表达升高(P<0.05)。结论:重组人MG53蛋白可能通过激活Akt/GSK-3β信号通路,保护hUC-MSCs免受LPS诱导的氧化损伤。 展开更多
关键词 重组人MG53 脂多糖 脐带间充质干细胞 氧化损伤
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IL-1β通过激活ERK1/2信号通路抑制人脐带间充质干细胞CD200表达抑制巨噬细胞M2极化
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作者 朱永朝 李莉 +5 位作者 王拯 谭希鹏 陶金 丁璐 董辉 叶鹏 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期193-198,共6页
目的探究白细胞介素1β(IL-1β)调控人脐带间充质干细胞CD200表达及其对巨噬细胞极化的影响及作用机制。方法无血清培养基分离培养获得人脐带间充质干细胞(hUC-MSC),形态学观察及流式细胞术检测CD73、CD90、CD105、CD14、CD34、CD45、... 目的探究白细胞介素1β(IL-1β)调控人脐带间充质干细胞CD200表达及其对巨噬细胞极化的影响及作用机制。方法无血清培养基分离培养获得人脐带间充质干细胞(hUC-MSC),形态学观察及流式细胞术检测CD73、CD90、CD105、CD14、CD34、CD45、人类白细胞抗原DR(HLA-DR)的表达,确定间充质干细胞属性;20 ng/mL IL-1β处理hUC-MSC 24 h,流式细胞术检测CD200阳性细胞率,实时定量PCR和Western blot法检测CD200 mRNA和蛋白表达水平;佛波酯(PMA)诱导THP-1巨噬细胞活化,并与IL-1β处理感染CD200过表达慢病毒的hUC-MSC共培养,流式细胞术检测CD11c和CD206阳性细胞比例;IL-1β联合细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)特异性抑制剂PD98059处理hUC-MSC,Western blot法检测细胞丝裂原激活蛋白激酶(MAPK)信号分子与CD200的表达。结果IL-1β显著下调hUC-MSC CD200蛋白表达与CD200阳性细胞率;过表达CD200显著上调hUC-MSC CD200表达,且CD200过表达hUC-MSC提高巨噬细胞CD206阳性细胞比率;IL-1β激活hUC-MSC的ERK1/2信号通路,PD98059上调IL-1β处理后hUC-MSC中CD200的蛋白表达。结论IL-1β通过激活ERK1/2信号通路抑制CD200的表达,进而抑制hUC-MSC对巨噬细胞向M2型极化的促进作用。 展开更多
关键词 白细胞介素1β(IL-1β) 人脐带间充质干细胞(huc-msc) CD200 巨噬细胞极化 细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)
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人脐带间充质干细胞制备工艺研究 被引量:1
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作者 毕薇薇 刘建雷 +2 位作者 余俊健 张雨璐 曾赤佳 《长春工业大学学报》 CAS 2024年第2期182-192,共11页
建立人脐带间充质干细胞标准化的制备工艺。比较不同培养基、消化液及消化时间处理人脐带间充质干细胞的增殖水平、表型、分化功能;设计不同细胞接种密度及汇合度进行培养,观察细胞生长状态并计算细胞倍增时间。人脐带间充质干细胞在MSC... 建立人脐带间充质干细胞标准化的制备工艺。比较不同培养基、消化液及消化时间处理人脐带间充质干细胞的增殖水平、表型、分化功能;设计不同细胞接种密度及汇合度进行培养,观察细胞生长状态并计算细胞倍增时间。人脐带间充质干细胞在MSC-T4培养基中,CTS消化酶消化3 min表现出更佳的增殖水平、间充质干细胞表型、成骨、成脂的能力;10000 cells/cm^(2)和8000 cells/cm^(2)的细胞接种密度分别是最合适的人脐带间充质干细胞复苏接种密度和传代接种密度;90%~95%汇合度为人脐带间充质干细胞传代最佳汇合度。 展开更多
关键词 人脐带间充质干细胞 制备工艺 培养基 消化液 接种密度
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高糖驯化对脐带间充质干细胞抗高糖能力的影响
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作者 刘春香 张天琦 张怡 《生命科学研究》 CAS 2024年第4期305-311,319,共8页
为了探究高糖驯化后,人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stemcell,hUC-MSC)对高糖环境的抵抗能力,为糖尿病治疗提供高适应性细胞及方法,利用梯度糖浓度培养基驯化hUC-MSC至P5代,获得高糖驯化细胞(high glucose accli... 为了探究高糖驯化后,人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stemcell,hUC-MSC)对高糖环境的抵抗能力,为糖尿病治疗提供高适应性细胞及方法,利用梯度糖浓度培养基驯化hUC-MSC至P5代,获得高糖驯化细胞(high glucose acclimated cell,HGAC);利用1.0 g/L葡萄糖完全培养基培养hUC-MSC至P5代,获得低糖培养细胞(lowglucose cell,LGC);取1.0×10^(6)个融合度80%~90%的LGC,用4.5 g/L葡萄糖完全培养基培养48 h,获得高糖培养细胞(high glucose cell,HGC)。取同代次LGC、HGAC及HGC进行细胞大小及增殖情况检测,同时通过流式细胞术检测细胞表型;利用黄嘌呤氧化酶法和硫代巴比妥酸比色法测定细胞内超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性和丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量;采用qRT-PCR方法、Western-blot方法检测细胞抗衰老及抗氧化基因表达水平。结果显示,HGAC显著小于HGC(P<0.05),且增殖更快;HGAC的CD73、CD90及CD105表达率均在95%以上,而CD34和CD45的表达率均小于2%;与HGC相比,HGAC的SOD活性显著升高(P<0.05),MDA含量显著降低(P<0.05),同时,抗衰老基因p21及抗氧化基因Nrf2、HO-1、NQO1的表达水平显著升高(P<0.05)。上述结果表明,高糖驯化可增加hUC-MSC活性,使之抵抗高糖环境。 展开更多
关键词 人脐带间充质干细胞(huc-msc) 高糖驯化细胞(HGAC) 高糖驯化 高糖环境 细胞衰老
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大黄素甲醚对脑损伤大鼠bcl-2、bax表达变化的影响 被引量:7
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作者 李长栋 荔志云 +2 位作者 季玮 孙建军 杨永林 《中华神经外科疾病研究杂志》 CAS 2015年第3期200-203,共4页
目的:观察观察大黄素甲醚对创伤性脑损伤大鼠人脐带间充质干细胞( HUC-MSCs)移植术后凋亡基因bcl-2、bax的表达。方法将40只2~3个月龄,体重200~250 g清洁级Wistat大鼠随机分为对照组(10只)、颅脑外伤组( TBI 10只)、脐带间... 目的:观察观察大黄素甲醚对创伤性脑损伤大鼠人脐带间充质干细胞( HUC-MSCs)移植术后凋亡基因bcl-2、bax的表达。方法将40只2~3个月龄,体重200~250 g清洁级Wistat大鼠随机分为对照组(10只)、颅脑外伤组( TBI 10只)、脐带间充质干细胞移植组( HUC-MSCs 10只)、脐带间充质干细胞移植( HUC-MSCs)+大黄素甲醚组(10只)。在脐带间充质干细胞( HUC-MSCs)移植后7 d、14 d和21 d,模型各组取脑组织用于检测。实时定量聚合酶链式反应( PCR)技术检测凋亡因子bcl-2和bax的表达。结果损伤大鼠bcl-2基因的表达显著,bax基因的表达减弱,脐带间充质干细胞( HUC-MSCs)移植+大黄素甲醚组上述表达更为显著。结论大黄素甲醚可通过降低凋亡基因bax表达而发挥神经细胞的保护作用。 展开更多
关键词 人脐带间充质干细胞 移植 创伤性颅脑损伤 大黄素甲醚 B淋巴细胞瘤-2基因 BAX基因
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人脐带间充质干细胞对阿尔茨海默病模型小鼠学习记忆能力的影响 被引量:4
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作者 马刘红 程欣 +1 位作者 徐建兵 罗焕敏 《广东医学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第10期1366-1369,共4页
目的观察人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,hUC-MSCs)对化学损伤(D-半乳糖+氯化铝)及海马物理损伤的拟阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)模型小鼠学习记忆能力的影响。方法 90只昆明小鼠采用D-... 目的观察人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,hUC-MSCs)对化学损伤(D-半乳糖+氯化铝)及海马物理损伤的拟阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)模型小鼠学习记忆能力的影响。方法 90只昆明小鼠采用D-半乳糖120 mg/(kg.d)、氯化铝20 mg/(kg.d)共同诱导10周以及海马物理损伤的方法分别复制出2种不同的拟AD小鼠模型。实验分为5组:化学损伤模型对照组、物理损伤模型对照组、化学损伤+hUC-MSCs治疗组、物理损伤+hUC-MSCs治疗组,另设一个空白对照组。hUC-MSCs移植治疗一段时间后,用Morris水迷宫和跳台仪分别检测小鼠学习记忆能力。结果与化学损伤模型对照组比较,化学损伤+hUC-MSCs治疗组小鼠水迷宫逃避潜伏期显著缩短(P<0.05),跨越平台次数显著增加(P<0.05);跳台错误次数显著减少(P<0.05),潜伏期显著延长(P<0.05)。但物理损伤+hUC-MSCs治疗组与对应的模型对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论侧脑室注射hUC-MSCs对化学性损伤拟AD小鼠学习记忆能力有改善作用。 展开更多
关键词 人脐带间充质干细胞 阿尔茨海默病 小鼠 学习记忆
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尼克酰胺对人脐带间充质干细胞的保护效应 被引量:3
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作者 杨晓蕾 陈智聪 +3 位作者 廖继东 谷景义 于波 刘革修 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第10期1756-1761,共6页
目的:探讨尼克酰胺(nicotinic acid amide,NAA)减轻人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,h UC-MSCs)输注损伤的效应。方法:空白对照组为0.3 m L生理盐水、MSC组为0.3 m L 1×106CFSE标记的h UC-MSCs,MS... 目的:探讨尼克酰胺(nicotinic acid amide,NAA)减轻人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,h UC-MSCs)输注损伤的效应。方法:空白对照组为0.3 m L生理盐水、MSC组为0.3 m L 1×106CFSE标记的h UC-MSCs,MSC+NAA组为0.3 m L 10 mmol/L NAA处理24 h的1×106CFSE标记的h UC-MSCs,分别与2.7 m L正常人全血混匀,注入改良Chandler Loop内,在37℃下,20 m L/min循环1 h,检测循环前后血小板、白细胞、h UC-MSCs和C3a的变化。结果:血小板消耗率空白对照组为(29.96±10.88)%、MSC组为(77.76±19.29)%、MSC+NAA组为(50.13±18.10)%;白细胞消耗率空白对照组为(37.82±13.81)%、MSC组为(64.57±17.08)%、MSC+NAA组为(41.52±17.26)%,MSC组和MSC+NAA组与空白对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。MSC+NAA组的h UC-MSCs存活率较MSC组高(P<0.05)。空白对照、MSC和MSC+NAA组的C3a含量分别为(206.27±58.10)μg/L、(230.47±39.61)μg/L和(208.37±40.66)μg/L。结论:h UC-MSCs与正常人全血在改良Chandler Loop内共循环1 h可模拟血液介导即刻炎症反应(instant blood-mediated inflammatory reaction,IBMIR),大量损耗MSCs和血液成分,导致C3a上升。NAA可抑制IBMIR、降低血液成分的损耗、提高h UC-MSCs的存活率,提示NAA能减轻MSCs的输注损伤。 展开更多
关键词 人脐带间充质干细胞 血液介导即刻炎症反应 Chandler LOOP 尼克酰胺
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人脐带间充质干细胞低温冻存后生物学鉴定 被引量:4
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作者 李素萍 王震 +4 位作者 吕蓉 王超 邢昕 郭晓婕 刘忠 《临床输血与检验》 CAS 2012年第4期289-294,共6页
目的观察人脐带间充质干细胞(HUC-MSCs)经低温冻存复苏后的生物学特性,验证其是否仍具有间充质干细胞的基本特征。方法用胶原酶和胰蛋白酶消化脐带,分离诱导获得HUC-MSCs,传代培养,取第3代细胞加入冷冻保护剂(10%DMSO+40%FBS+50%DMEM/F... 目的观察人脐带间充质干细胞(HUC-MSCs)经低温冻存复苏后的生物学特性,验证其是否仍具有间充质干细胞的基本特征。方法用胶原酶和胰蛋白酶消化脐带,分离诱导获得HUC-MSCs,传代培养,取第3代细胞加入冷冻保护剂(10%DMSO+40%FBS+50%DMEM/F12)后将其冻存于-80℃冰箱过夜,再转入液氮气相中保存1个月后复苏。采用倒置显微镜观察复苏后贴壁生长细胞的形态;台盼蓝拒染法比较冻存前后细胞活力;MTT法测定HUC-MSCs的增殖活性,比较冻存前后HUC-MSCs增殖活性的差异;流式细胞仪检测HUC-MSCs经冻存复苏后表面抗原的表达情况;复苏后HUC-MSCs进行成骨诱导分化培养,检验其是否仍具有多向分化潜能。结果 HUC-MSCs经低温保存复苏后,细胞仍保持贴壁生长等外形特征,复苏后HUC-MSCs存活率为91.17%;增殖活性与未冻存细胞比较,差异无统计学意义;细胞表面高表达CD105、CD73、CD71、CD90、CD29、CD44、CD13抗原,低表达或不表达CD34、CD133、CD45、CD14,HLA-DR、CD86、CD83、CD80、CD1α;复苏后HUC-MSCs具有向成骨细胞诱导分化能力,细胞经茜素红、ALP和Von-Kossa′s染色呈阳性反应。结论经冻存复苏后的HUC-MSCs保持了间充质干细胞的基本形态,其表型满足间充质干细胞的基本要求,仍具有向成骨细胞分化的潜能。 展开更多
关键词 脐带间充质干细胞 低温保存 成骨分化
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肾脑复元汤联合人脐带间充质干细胞移植对MCAO大鼠神经功能恢复及VEGF表达的影响 被引量:4
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作者 胡国恒 侯小花 +2 位作者 李映辰 王小菊 邹婷 《中国中医急症》 2016年第1期4-7,共4页
目的探讨肾脑复元汤联合人脐带间充质干细胞(HUC-MSCs)移植对脑缺血损伤的神经保护机制。方法制作雄性SPF级Sprague Dawley大鼠大脑中动脉闭塞(MCAO)模型108只,随机分为3组,即模型组36只、干细胞组36只、联合组36只,各组再根据处死时间... 目的探讨肾脑复元汤联合人脐带间充质干细胞(HUC-MSCs)移植对脑缺血损伤的神经保护机制。方法制作雄性SPF级Sprague Dawley大鼠大脑中动脉闭塞(MCAO)模型108只,随机分为3组,即模型组36只、干细胞组36只、联合组36只,各组再根据处死时间分为3 d、7 d、14 d 3个亚组;观察各组大鼠神经功能缺损评分,以及用免疫组织化学染色以及Western blot法检测脑缺血边缘区血管内皮生长因子(VEGF)的表达。结果 1)干细胞组和联合组在第3天、7天、14天的神经功能缺损评分均低于同时段模型组(均P<0.01);联合组在第7、14天神经功能缺损均低于同时段干细胞组(P<0.05或P<0.01),联合组和干细胞组在第3天的神经功能缺损无明显差异(P>0.05);2)免疫组化法检测及Western blot法检测脑缺血边缘区VEGF的表达均提示:第3、7、14天干细胞组、联合组VEGF阳性表达均高于模型组(P<0.01),联合组在第7、14天VEGF阳性表达高于干细胞组(P<0.05),联合组和干细胞组在第3天VEGF的表达无差异(P>0.05)。结论肾脑复元汤联合人脐带间充质干细胞移植能显著改善MCAO大鼠神经功能损伤,促进脑功能的恢复。其发挥对脑的保护作用的机制可能是通过提高内源性VEGF的表达。 展开更多
关键词 肾脑复元汤 人脐带间充质干细胞 脑缺血再灌注损伤 血管内皮生长因子
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大黄素甲醚联合脐带间充质干细胞移植对创伤性脑损伤大鼠MMP-9和TIMP-1蛋白酶的影响 被引量:3
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作者 李长栋 荔志云 +2 位作者 白海 孙建军 赵强 《创伤外科杂志》 2013年第4期306-309,共4页
目的观察大黄素甲醚联合人脐带间充质干细胞(HUC-MSCs)移植对颅脑损伤大鼠脑组织MMP-9和TIMP-1蛋白酶的影响。方法将40只2-3月龄,体重200~250g,清洁级Wistat大鼠随机分为正常对照组(10只)、TBI组(10只)、HUC-MSCs移植组(10只)、HUC-MSC... 目的观察大黄素甲醚联合人脐带间充质干细胞(HUC-MSCs)移植对颅脑损伤大鼠脑组织MMP-9和TIMP-1蛋白酶的影响。方法将40只2-3月龄,体重200~250g,清洁级Wistat大鼠随机分为正常对照组(10只)、TBI组(10只)、HUC-MSCs移植组(10只)、HUC-MSCs移植+大黄素甲醚组(10只)。ELISA法检测基质金属蛋白-9(mat rix metalloproteinase-9,MMP-9)和金属蛋白酶组织抑制物-1(tissue inhibi-tor of metall oproteinase-1,TIMP-1)的表达。结果与模型组比较,HUC-MSCs移植组、HUC-MSCs移植+大黄素甲醚组大鼠脑组织中MMP-9表达减弱,TIMP-1表达增强。结论大黄素甲醚可使脑损伤大鼠微血管基底通透性降低,减轻脑水肿程度,并与HUC-MSCs有协同作用,其作用机制可能与增加TIMP-1表达以调节MMP-9平衡有关。 展开更多
关键词 颅脑损伤 人脐带间充质干细胞 大黄素甲醚 基质金属蛋白酶-9 金属蛋白酶组织抑制物-1 移植 大鼠
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长期传代人脐带间充质干细胞的特性及功能 被引量:1
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作者 黄丽洁 谢云青 +3 位作者 林晓为 陈玮 郑秋红 应敏刚 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期482-488,共7页
目的:探讨传至10代(P10)的人脐带来源间充质干细胞(P10-hUC-MSC)的生物学特性及功能。方法:人脐带来源于厦门弘爱医院(伦理批号:HAXM-MEC-20201012-037-01),分离、收集、培养hUC-MSC并传代培养,收集P1-、P10-hUC-MSC,FCM检测hUC-MSC表型... 目的:探讨传至10代(P10)的人脐带来源间充质干细胞(P10-hUC-MSC)的生物学特性及功能。方法:人脐带来源于厦门弘爱医院(伦理批号:HAXM-MEC-20201012-037-01),分离、收集、培养hUC-MSC并传代培养,收集P1-、P10-hUC-MSC,FCM检测hUC-MSC表型,细胞衰老β-半乳糖苷酶染色法及FCM法检测终末期细胞衰老与凋亡情况,秋水仙碱处理检测细胞染色体稳定性,体外成脂、成骨诱导实验检测其多向分化能力,以不同比例与外周血单个核细胞(PBMC)混合培养后FCM检测T细胞亚群及表型变化。结果:成功分离和培养的P10-hUC-MSC与P1-hUC-MSC的表型相似,表现为CD45、CD34、HLA-DR表达阴性而CD105、CD90阳性率≥95%。终末期的P1-hUC-MSC和P10-hUC-MSC均表现出β-半乳糖苷酶表达阳性和早期凋亡特征,细胞染色体核型一致且保持稳定,未发生转化现象。P1-、P10-hUC-MSC在体外都可被诱导分化成脂肪、成骨细胞。P10-hUC-MSC与PBMC以1∶1混合培养7 d后,可显著上调CD4^(+)/CD8^(+)T细胞比值、CD4^(+)Treg细胞比例和PD-1表达(均P<0.01)。结论:长期传代的P10-hUC-MSC仍然保持其生物学特性和安全性,并具备多向分化能力及免疫调节能力,这为最大限度发挥hUC-MSC的临床放疗损伤修复与预防作用提供了前期实验依据和指导。 展开更多
关键词 人脐带来源间充质干细胞 长期传代 细胞特性 多向分化 免疫调节
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脐带间充质干细胞对胶质瘤细胞转移侵袭能力影响初探 被引量:1
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作者 刘高米洋 朱慧 +4 位作者 何洁 刘菊芬 阮光萍 李自安 潘兴华 《西南国防医药》 CAS 2016年第12期1398-1400,共3页
目的观察人源脐带间充质干细胞(HUCMSC)对胶质瘤细胞株U87转移、侵袭能力的影响。方法建立细胞共培养体系,CCK8法、transwell法和Matrigel法分别检测HUCMSC与U87非接触共培养后,U87增殖、转移、侵袭能力变化。结果体外细胞共培养体系中,... 目的观察人源脐带间充质干细胞(HUCMSC)对胶质瘤细胞株U87转移、侵袭能力的影响。方法建立细胞共培养体系,CCK8法、transwell法和Matrigel法分别检测HUCMSC与U87非接触共培养后,U87增殖、转移、侵袭能力变化。结果体外细胞共培养体系中,HUCMSC共培养U87组(实验组)比U87单独培养组(对照组)转移和侵袭能力都有显著提高(P<0.05),HUCMSC共培养对U87有促增殖作用。结论在体外共培养体系中,HUCMSC可能通过促进EMT转化而提高胶质瘤细胞株U87增殖、转移和侵袭潜能。因此,在HUCMSC的临床转化应用中,应该考虑其可能的促肿瘤作用。 展开更多
关键词 脐带 间充质干细胞 胶质瘤 转移 侵袭
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人源脐带间充质干细胞移植治疗大鼠佐剂骨关节炎的对照研究 被引量:2
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作者 蒋峰 杨孝兵 +2 位作者 张帆 寿旗扬 徐志国 《浙江医学》 CAS 2016年第9期603-606,610,I0003,共6页
目的探讨人源脐带间充质干细胞(hUc—MSCs)治疗大鼠佐剂骨关节炎(OA)的价值。方法将42只大鼠按抽签法分为7组,G组为正常对照组,其余6组进行右后肢膝关节注射0.1%碘乙酸0.1ml造模;A组造模后第6周处死(空白对照);B组造模后第6周注射0.9%... 目的探讨人源脐带间充质干细胞(hUc—MSCs)治疗大鼠佐剂骨关节炎(OA)的价值。方法将42只大鼠按抽签法分为7组,G组为正常对照组,其余6组进行右后肢膝关节注射0.1%碘乙酸0.1ml造模;A组造模后第6周处死(空白对照);B组造模后第6周注射0.9%氯化钠溶液,第10周处死;C组造模后第6、8周2次注射0.9%氯化钠溶液,第12周处死;D组造模后第6周1次关节腔注射hUc—MSCs,第10周处死;E组造模后第6、8周2次关节腔注射hUc—MSCs,第12周处死;F组造模后第6、8周2次尾静脉注射hUc—MSCs,第12周处死;各组大鼠造模前后和注射后测定关节肿胀度和疼痛评分;处死后取关节组织病理检查。结果 D、E组较B、C组的关节肿胀度均有减小,E组的消肿作用更显著;而F组的消肿作用不明显;D、E组关节疼痛评分较B、C组均有缓解,E组止痛作用更显著;F组的止痛作用与E组相当。Mankin关节软骨病理分级积分结果提示:D组与B组比较无统计学差异;F组低于C组;而E组低于F组。病理检查提示:A组造模后第6周关节组织病理检查类似于OA病理表现,无宿主与移植物的相互排斥反应发生;B组表现类似A组,C组关节病理破坏较B组重;D组滑膜重度增生侵入关节腔,炎症细胞浸润,其病理破坏较A组重,较C组轻,并且软骨染色较浅;E组滑膜增生和炎症较D组轻,软骨染色较D组更浅;F组关节病理表现与E组基本相仿;在饲养、造模、注射、观察的实验过程中,无明显局部或者全身的宿主与移植物相互排斥反应发生,未发现注射部位、关节感染、坏死等不良反应,无意外疾病和死亡发生。结论 2次关节腔注射和尾静脉注射hUc—MSCs均能较好缓解碘乙酸佐剂OA的疼痛,改善滑膜炎症修复软骨等作用,而且2次关节腔注射hUc—MSCs能更明显能消除关节肿胀,减轻滑膜炎症和软骨损害的病理改变;无明显的不良反应发生;hUc—MSCs治疗OA具有良好的有效性和安全性。 展开更多
关键词 人源脐带间充质干细胞 佐剂 骨关节炎 实验性 移植注射
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