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狐脑炎犬肾传代细胞弱毒苗的研制和应用 被引量：6
1
作者 聂金珍 吴威 +4 位作者 程世鹏 郑海发 牛景华 苗丽 吴玉林 《毛皮动物饲养》 CAS 1990年第4期11-14,共4页
采用A 72细胞复壮CAV—2弱毒、CK细胞培养病毒的方法,成功地研制出狐脑炎犬肾传代细胞弱毒苗。经安全试验、效力试验、免疫期试验等证明,该苗不仅制造工艺简单、纯度高、安全可靠,而且免疫原性好、免疫期长,能有效地预防狐脑炎。
关键词 狐 脑炎 犬肾传代细胞 弱毒苗
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狐阴道加德纳氏菌共同抗原蛋白免疫活性的研究
2
作者 闫新华 阎喜军 +1 位作者 王长凤 赵传芳 《特产研究》 1999年第1期23-25,共3页
对狐阴道加德纳氏菌三个血清型的共同抗原蛋白进行免疫印迹试验，结果证实，４条共同抗原蛋白带中，只有７４．１Ｋ蛋白Ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｌｏｔ呈现阳性反应，从凝胶中提纯７４．１ＫＤ蛋白免疫小鼠，免疫后３５ｄ采血分离血清，以Ｄ... 对狐阴道加德纳氏菌三个血清型的共同抗原蛋白进行免疫印迹试验，结果证实，４条共同抗原蛋白带中，只有７４．１Ｋ蛋白Ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｌｏｔ呈现阳性反应，从凝胶中提纯７４．１ＫＤ蛋白免疫小鼠，免疫后３５ｄ采血分离血清，以ＤＯＴ－ＥＬＩＳＡ进行检测，血清抗体呈现阳性反应，证实７４．１Ｋ蛋白能产生免疫应答。 展开更多
关键词 狐 阴道加德纳氏菌 共同抗原蛋白 WESTERN-BLOT
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Daxx过表达对氧化应激诱导的肝肿瘤细胞凋亡的影响(英文) 被引量：4
3
作者 庹勤慧 熊国祚 +2 位作者 朱炳阳 曹建国 廖端芳 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2008年第11期1270-1275,共6页
死亡结构域相关蛋白Daxx可以敏化多种肿瘤细胞的凋亡过程,但对于肝肿瘤细胞株HepG2的影响未见报道.为了研究Daxx增加肝HepG2细胞对药物敏感性的影响及机制,为开发药物新的药理作用提供理论依据,分别转染pEGFP-C1和pEGFP-C1-Daxx这两个... 死亡结构域相关蛋白Daxx可以敏化多种肿瘤细胞的凋亡过程,但对于肝肿瘤细胞株HepG2的影响未见报道.为了研究Daxx增加肝HepG2细胞对药物敏感性的影响及机制,为开发药物新的药理作用提供理论依据,分别转染pEGFP-C1和pEGFP-C1-Daxx这两个载体到HepG2细胞.实验分组如下:(1)正常对照组(未转染细胞组);(2)pEGFP-C1空载体转染组(HepG2/GFP细胞);(3)pEGFP-C1-Daxx表达载体转染组(HepG2/GFP-Daxx细胞).筛选稳定细胞株,用逆转录聚合酶链反应检测mRNA的表达;用过氧化氢孵育24h诱导细胞凋亡,采用MTT法和流式细胞术检测细胞凋亡率,Western blot检测蛋白质的表达.经G418筛选稳定的细胞运用RT-PCR技术分析其mRNA,结果显示,转染绿色荧光蛋白Daxx表达载体的细胞Daxx的mRNA明显上调;用荧光显微镜观察到Daxx蛋白主要定位于细胞核.用过氧化氢诱导HepG2细胞凋亡,观察到过氧化氢呈浓度依赖性地抑制HepG2细胞活性.正常对照细胞、HepG2/GFP、HepG2/GFP-Daxx 3组细胞的IC50值分别是0.72、0.76、0.49mmol/L.并且运用流式细胞仪检测到HepG2/GFP-Daxx组细胞凋亡率明显高于转染空载体质粒组与未转染组((42.9±8.42)vs(27.3±6.38)or(28.5±4.71)).提示HepG2/GFP-Daxx细胞对过氧化氢的反应性较未转染细胞和HepG2/GFP敏感.还运用Western-blot检测到活化的caspase3在Daxx转染组细胞表达最强,达到(204.66±19.68)%,而未转染和HepG2/GFP组细胞分别是(100±3.1)%、(107.39±20.1)%,进一步说明了Daxx可以增加HepG2细胞对于过氧化氢的敏感性.同时,观察到过氧化氢处理24h后,Daxx转染组细胞磷酸化的JNK表达明显高于空载体转染组和未转染细胞组.上述结果表明:a.Daxx可以增加肝HepG2细胞对过氧化氢诱导的细胞凋亡敏感性;b.Daxx蛋白敏化过氧化氢诱导的HepG2细胞凋亡可能与协同增加JNK活性有关. 展开更多
关键词 DAXX HEPG2细胞 细胞凋亡 过氧化氢
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鹿流行性出血病与蓝舌病在琼脂扩散试验中交叉反应的初步研究
4
作者 李晓成 《动物检疫》 1990年第5期3-7,共5页
鹿流行性出血病(Epizootic Haemorhagic Disease of deer——EHD)病毒与蓝舌病病毒(Bluetongue virus—BTV)在病聋学分类上同属于呼肠孤病毒科环状病毒属。这两种病均以昆虫为传播媒介,病的发生具有明显的季节性和地区性,感染家养及野... 鹿流行性出血病(Epizootic Haemorhagic Disease of deer——EHD)病毒与蓝舌病病毒(Bluetongue virus—BTV)在病聋学分类上同属于呼肠孤病毒科环状病毒属。这两种病均以昆虫为传播媒介,病的发生具有明显的季节性和地区性,感染家养及野生的反刍动物,有时为带毒的隐性感染。在诊断上常用血清学和病毒学方法。 展开更多
关键词 鹿 流行性出血病 蓝舌病 琼脂扩散
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HBcAg和HBsAg前S1表位肽融合蛋白的表达研究
5
作者 孙红光 闫东梅 +1 位作者 杜柏榕 朱迅 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期57-62,共6页
构建、表达并纯化了HBcAg与HBsAg前S1表位肽融合蛋白BTcs1,为开发新型HBV治疗和预防性疫苗提供实验依据。利用DNA重组技术,构建了HBcAg与HBsAg前S1表位肽融合蛋白原核表达质粒pBTcs1,在大肠杆菌(HB101)中进行表达,用蔗糖密度梯度超速离... 构建、表达并纯化了HBcAg与HBsAg前S1表位肽融合蛋白BTcs1,为开发新型HBV治疗和预防性疫苗提供实验依据。利用DNA重组技术,构建了HBcAg与HBsAg前S1表位肽融合蛋白原核表达质粒pBTcs1,在大肠杆菌(HB101)中进行表达,用蔗糖密度梯度超速离心对表达产物BTcs1进行纯化,用SDSPAGE、SEC、Westernblot和电镜进行鉴定。结果表明成功构建了HBcAg与HBsAg前S1表位肽融合蛋白原核表达质粒pBTcs1,BTcs1的表达量为20～25mg/L,DOTBLOT结果显示BTcs1主要分布在30%～50%蔗糖介质中,SDSPAGE和SEC结果显示蛋白纯度>95%,Westernblot结果显示BTcs1可以与抗HBcAg抗体和抗HBsAg前S1抗体特异杂交,显色条带在约28kDa处,电镜分析表明BTcs1可以自主组装成病毒样颗粒(VLP),直径约为30～34nm。为进一步探讨BTcs1的功能及应用奠定了基础。 展开更多
关键词 乙肝病毒核心抗原(HBcAg) 前S1表位 融合蛋白 表达
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表面展示共表达HA-DCpep蛋白乳酸菌的构建
6
作者 杨锐 曾飞雪 +2 位作者 高航 龚佳豪 姜延龙 《兽医导刊》 2018年第8期212-214,共3页
为了构建HA-DCpep融合基因重组乳酸菌并检测其表达产物的反应原性,本实验采用pGe-HA2质粒为模板,以PCR方法将HA基因DCpep融合,将得到的融合产物进行双酶切,与pSIP409-pgsA’XbaI和HindIII双酶切产物链接,得到质粒pSIP409-pgsA’-HA-DCp... 为了构建HA-DCpep融合基因重组乳酸菌并检测其表达产物的反应原性,本实验采用pGe-HA2质粒为模板,以PCR方法将HA基因DCpep融合,将得到的融合产物进行双酶切,与pSIP409-pgsA’XbaI和HindIII双酶切产物链接,得到质粒pSIP409-pgsA’-HA-DCpep,再经过电转使其到植物乳杆菌NC8中,经Western-blot检测目的蛋白表达情况.结果：构建的NC8-pSIP-409-pgsA’-HA2-DCpep重组蛋白表达成功,而且具有反应原性,为禽流感病毒口服疫苗的研制奠定基础. 展开更多
关键词 HA-Dcpep NC8-pSIP-409-pgsA’-HA2-DCpep HA2 植物乳杆菌 新功能型乳酸菌 禽流感疫苗
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幼狐接种牛痘—狂犬病毒联苗免疫的研究
7
作者 Beoc.,BM 林伟 《国外特种经济动植物》 1989年第3期9-10,共2页
关键词 狐 幼狐 接种 狂犬病毒联苗 免疫
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