猪流感病毒基因池中的新成员:新甲型H1N1流感病毒基因片段的存在及潜在威胁 被引量：5

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作者 高灵茜 崔梦一 樊晓晖 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期832-837,共6页

新甲型H1N1流感病毒(2009pandemic H1N1virus,pdm/09)于2009年在人群中暴发以后,迅速在全球范围内传播,引起了21世纪的第一次流感大流行。pdm/09是由人的流感病毒、禽流感和猪流感病毒(swine influenza virus,SIV)经过重配后形成的病毒... 新甲型H1N1流感病毒(2009pandemic H1N1virus,pdm/09)于2009年在人群中暴发以后,迅速在全球范围内传播,引起了21世纪的第一次流感大流行。pdm/09是由人的流感病毒、禽流感和猪流感病毒(swine influenza virus,SIV)经过重配后形成的病毒,它的基因片段已经进入了猪流感病毒当中并开始产生新的变异毒株,这些新的变异流感毒株在欧亚大陆、北美大陆及中国南部的各个地区被不断报道和发现,这表明猪源性pdm/09在人间流行后可返传给猪,成为猪流感病毒基因池中的固有组成,获得与SIV重组形成新的重配病毒的能力,并可能仍然具有感染人类的潜能。因此,必须关注新型重配病毒的进化:包括其在猪群中的生长适应、以及适应性感染人的进化过程。不仅如此,还必须加强对猪群及人群流感病毒的检测,了解重配病毒在人和猪两个种群中的进化过程。 展开更多

关键词 新甲型H1N1流感病毒 猪流感病毒基因池 基因重配病毒 跨种属传播

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新城疫病毒7793株对结肠癌小鼠肝转移的抑制效果及其可能的机制 被引量：5

2

作者 梁莹 周丹旎 +7 位作者 樊晓晖 宋德志 高灵茜 肖庆 黄盼柳 孙盼 张彬 赖振屏 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期630-634,共5页

目的:以脾脏保留法建立结肠癌小鼠肝转移模型,评价新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)7793株对小鼠结肠癌肝转移的抑制效果,并初步探讨NDV抑瘤的免疫激活机制。方法:经脾注入1×107/ml小鼠结肠癌细胞CT26的单细胞悬液0.1 ml,... 目的:以脾脏保留法建立结肠癌小鼠肝转移模型,评价新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)7793株对小鼠结肠癌肝转移的抑制效果,并初步探讨NDV抑瘤的免疫激活机制。方法:经脾注入1×107/ml小鼠结肠癌细胞CT26的单细胞悬液0.1 ml,建立结肠癌CT26小鼠肝脏转移瘤模型;建模小鼠随机分3组(每组20只):PBS阴性对照组、NDV7793给药组和5-FU给药组,于建模当天起连续5 d经腹腔分别注射PBS(0.1 ml/d)、NDV7793(512 HU/kg)和5-FU(20 mg/kg)。观察各组小鼠的生存状态,分析肝脏成瘤情况,计算抑瘤率和胸腺指数。ELISA法检测模型小鼠肝脏的IFN-γ水平。结果:成功构建小鼠结肠癌肝转移模型。NDV7793给药组小鼠未观察到明显的不良反应,生活状态好于PBS组和5-FU组。NDV7793组和5-FU组小鼠的肝转移瘤数量较PBS组均显著减少[(20.40±5.20)、(205.50±19.21)vs(265.30±35.73)个,均P<0.01],NDV7793组的抑瘤率明显高于5-FU组(75.4%vs 48.0%,P<0.05),NDV7793组小鼠的肝脏癌灶范围小,癌细胞以坏死或凋亡为主。NDV7793组和5-FU组小鼠的中位生存期明显长于PBS阴性对照组(30、22 vs 17 d,P<0.01)。NDV7793组小鼠肝脏IFN-γ的表达和胸腺指数均显著高于5-FU组和PBS组(均P<0.05)。结论:NDV7793株对结肠癌小鼠的肝转移具有较强的抑制效果,并可能通过上调肝脏的IFN-γ以及提升胸腺指数来抑制结肠癌的肝转移。 展开更多

关键词 新城疫病毒 免疫治疗 结肠癌 肝转移 小鼠 Γ干扰素

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新城疫病毒通过上调小鼠NK细胞TRAIL表达杀伤Novikoff小鼠肝癌细胞 被引量：6

3

作者 宋德志 梁莹 +4 位作者 樊晓晖 殷君 宫金伶 赖振屏 高灵茜 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期599-604,共6页

目的观察经腹腔注射的新城疫病毒(NDV)对小鼠脾脏NK细胞表达肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)及杀伤Novikoff小鼠肝癌细胞的影响,并探讨其与γ干扰素(IFN-γ)的关系。方法给予BALB/c小鼠和IFN-γR-/-B6.129S7小鼠腹腔注射NDV,12 h后... 目的观察经腹腔注射的新城疫病毒(NDV)对小鼠脾脏NK细胞表达肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)及杀伤Novikoff小鼠肝癌细胞的影响,并探讨其与γ干扰素(IFN-γ)的关系。方法给予BALB/c小鼠和IFN-γR-/-B6.129S7小鼠腹腔注射NDV,12 h后,用ELISA检测小鼠外周血IFN-γ浓度;分离小鼠脾脏NK细胞,用反转录PCR法检测NK细胞中TRAIL mRNA转录水平,Western blot法检测脾脏NK细胞中TRAIL蛋白水平,用乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测NK细胞对Novikoff肝癌细胞的杀伤作用。结果腹腔注射NDV可以提高BALB/c小鼠外周血IFN-γ浓度,上调小鼠脾脏NK细胞TRAIL mRNA和蛋白表达水平,增强小鼠脾脏NK细胞体外条件下对Novikoff肝癌细胞的杀伤活性。TRAIL中和抗体能抑制NK细胞对Novikoff肝癌细胞的杀伤作用。IFN-γR-/-B6.129S7小鼠接受NDV注射后脾脏NK细胞的TRAIL表达无显著增加,NDV激活的NK细胞对Novikoff肝癌细胞的杀伤活性显著低于IFN-γ受体正常的BALB/c小鼠。结论腹腔注射NDV可增强脾脏NK细胞的体外抗肿瘤活性,其机制之一是通过IFN-γ受体途径上调NK细胞表面TRAIL蛋白表达来发挥作用。 展开更多

关键词 新城疫病毒 NK细胞 肿瘤坏死因子相关凋亡配体 肝癌细胞

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新城疫病毒7793株对人结肠癌细胞的杀伤作用 被引量：8

4

作者 宫金伶 黄川 +7 位作者 宋德志 姜艳华 赖振屏 高灵茜 王立芳 刘金颖 潘文宝胜 樊晓晖 《现代肿瘤医学》 CAS 2011年第3期414-417,共4页

目的:研究新城疫病毒NDV7793对人结肠癌细胞的体外杀伤作用,为结肠癌的生物疗法奠定基础。方法:通过蚀斑实验纯化病毒并测定纯化的NDV7793株的感染力;用乳酸脱氢酶微量释放法测定纯化病毒对人LoVo和Ls174t结肠癌细胞株的杀伤作用并且通... 目的:研究新城疫病毒NDV7793对人结肠癌细胞的体外杀伤作用,为结肠癌的生物疗法奠定基础。方法:通过蚀斑实验纯化病毒并测定纯化的NDV7793株的感染力;用乳酸脱氢酶微量释放法测定纯化病毒对人LoVo和Ls174t结肠癌细胞株的杀伤作用并且通过血凝实验测定病毒在不同细胞中的增殖力。结果:NDV7793在感染细胞96h后出现直径约为0.5mm左右的空斑,PFU为1.25×107个/ml,为弱毒株;NDV7793对LoVo和Ls174t人结肠癌细胞株有明显的杀伤作用,而且杀伤作用的强度与病毒作用的时间和病毒的浓度呈正相关的关系;NDV7793可以在肠癌细胞中生长复制,该病毒株在人结肠癌细胞株LoVo的复制能力强于Ls174t。结论:NDV7793具有较强的选择性杀伤人结肠癌细胞的作用,且为弱毒株,这株病毒具备肿瘤生物治疗的潜能。 展开更多

关键词 NDV7793株 人结肠癌细胞 抗肿瘤效应

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LDH法检测新城疫病毒野生株与疫苗株对大肠癌的体外杀伤作用 被引量：3

5

作者 黄川 姜艳华 +3 位作者 宋德志 高灵茜 杨哲 樊晓晖 《医学综述》 2008年第17期2696-2699,共4页

目的比较新分离的新城疫病毒野生株(NDV7793、NDVD817)与疫苗株Lasota对大肠癌的体外杀伤作用。方法3株病毒作用于大肠癌细胞株LS174T和LOVO,用乳酸脱氢酶微量释放法测定病毒的杀瘤活性并通过测定培养上清液的血凝效价来检测病毒的增殖... 目的比较新分离的新城疫病毒野生株(NDV7793、NDVD817)与疫苗株Lasota对大肠癌的体外杀伤作用。方法3株病毒作用于大肠癌细胞株LS174T和LOVO,用乳酸脱氢酶微量释放法测定病毒的杀瘤活性并通过测定培养上清液的血凝效价来检测病毒的增殖能力。结果3株新城疫病毒均可杀伤大肠癌细胞并可在其复制增殖,对正常大肠细胞无明显细胞毒性。而对正常大肠组织细胞未见明显影响(P<0.05);野生株对癌细胞的杀伤作用较强,72h后对LOVO细胞株的杀伤效应>90%;LOVO大肠癌细胞对NDV敏感性强于LS174T大肠癌细胞。结论3株NDV对大肠癌细胞均有选择性杀伤作用,野生株病毒的抑瘤效应强于疫苗株,对正常大肠组织无细胞毒性。 展开更多

关键词 新城疫病毒 大肠癌细胞 LDH微量释放法 杀瘤活性

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NDV7793促进人CD4^+T细胞表达TRAIL的实验研究 被引量：2

6

作者 周丹旎 殷君 +7 位作者 樊晓晖 梁莹 肖庆 宋德志 高灵茜 杨利 赖振屏 张增峰 《中国医学创新》 CAS 2014年第9期1-3,共3页

目的:研究新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)弱毒株NDV7793能否促进人CD4+T细胞表达肿瘤坏死因子相关凋亡因子诱导配体(TNF-related apoptosis-inducing ligand,TRAIL)。方法:首先用免疫磁珠分选法(magnetic activated cell sort... 目的:研究新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)弱毒株NDV7793能否促进人CD4+T细胞表达肿瘤坏死因子相关凋亡因子诱导配体(TNF-related apoptosis-inducing ligand,TRAIL)。方法:首先用免疫磁珠分选法(magnetic activated cell sorting,MACS)分选外周血静止CD4+T细胞,然后加抗CD3抗体、抗CD28抗体和白细胞介素-2(interleukin-2,IL-2)使之成为能被NDV激活的CD4+T细胞。用流式细胞技术(flow cytometry,FCM)检测NDV刺激的CD4+T细胞的TRAIL的表达水平。结果:MACS法分选外周血得到的CD4+T细胞纯度达到(97.38±0.28)%;能被NDV激活的CD4+T细胞表面分子CD25和CD69双阳性表达率可达(29.30±1.08)%,与PBS阴性对照组(2.40±1.30)%相比,差异有统计学意义(P<0.05);FCM检测结果显示,与对照组比较,NDV7793刺激的CD4+T细胞TRAIL表达水平均有显著升高,且在NDV7793效价为25 HU时达到最大值。结论:NDV7793可刺激CD3抗体、CD28抗体和IL-2预先活化的CD4+T细胞表达TRAIL。 展开更多

关键词 新城疫病毒 CD4+T细胞 TNF相关凋亡诱导配体 NDV7793

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H3N2亚型禽流感病毒及猪流感病毒感染人肺腺癌细胞后增殖的差异性变化 被引量：1

7

作者 崔梦一 梁佳 +5 位作者 黄晓量 劳婷婷 王伊玲 王晋 高灵茜 樊晓晖 《动物医学进展》 北大核心 2017年第4期35-40,共6页

人肺腺癌细胞A549被H3N2亚型禽流感病毒和猪流感病毒感染后,探讨不同毒株跨种属感染人呼吸道组织的可能性和趋势性。通过观察病毒感染A549细胞后的细胞病变(CPE)、血凝试验(HA)和50%组织细胞感染量(TCID50)来比较不同毒株感染细胞后的... 人肺腺癌细胞A549被H3N2亚型禽流感病毒和猪流感病毒感染后,探讨不同毒株跨种属感染人呼吸道组织的可能性和趋势性。通过观察病毒感染A549细胞后的细胞病变(CPE)、血凝试验(HA)和50%组织细胞感染量(TCID50)来比较不同毒株感染细胞后的复制差异和毒力改变,发现同一亚型不同来源的流感病毒对A549细胞感染和复制能力有较大差异,哺乳动物来源的病毒更有感染人呼吸道细胞的趋势,SW/GX/NS2783/2010有潜在的感染人细胞的能力。感染过程中的细胞因子变化和病毒基因组组成特点是进一步研究的方向,应重点关注具有跨种属感染趋势的流感病毒及其特殊分子决定簇的组成和特点。 展开更多

关键词 H3N2亚型流感病毒 猪流感病毒 禽流感病毒 人肺腺癌细胞

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Percoll及Ficoll分离纯化肝癌移植瘤肿瘤浸润淋巴细胞比较 被引量：1

8

作者 孙盼 樊晓晖 +6 位作者 张彬 张磊 蔡双启 梁莹 赖振屏 高灵茜 宋德志 《中国社区医师》 2016年第13期7-8,10,共3页

目的:比较Percoll和Ficoll两种淋巴细胞分离液对肿瘤浸润淋巴细胞纯度及细胞增殖的影响。方法:用Percoll及Ficoll两种淋巴细胞分离液分离H22肝癌小鼠皮下移植瘤内淋巴细胞,对细胞首先行锥虫蓝染色后在显微镜下计算细胞总数和存活率,最... 目的:比较Percoll和Ficoll两种淋巴细胞分离液对肿瘤浸润淋巴细胞纯度及细胞增殖的影响。方法:用Percoll及Ficoll两种淋巴细胞分离液分离H22肝癌小鼠皮下移植瘤内淋巴细胞,对细胞首先行锥虫蓝染色后在显微镜下计算细胞总数和存活率,最后用流式细胞仪分析淋巴细胞纯度及分裂、增殖能力。结果:Percoll及Ficoll分离所得TIL总数分别为(3.28±0.78)×107和(2.02±0.76)×107;Percoll分离所得第3、5、7天的TIL增殖率分别为(22.8±2.31)%、(39.1±1.94)%、(69.85±1.68)%;Ficoll分离所得第3、5、7天的TIL增殖率分别为(13.25±1.68)%、(23.7±5.31)%、(41.5±1.56)%。Percoll分离所得TIL中CD3+T、CD4+T、CD8+T细胞分别为(73.2±6.8)%、(49.1±10.2)%、(22.0±1.4)%;Ficoll分离所得TIL中CD3+T、CD4+T、CD8+T淋巴细胞分别为(47.9±5.0)%、(29.1±8.4)%、(19.7±5.0)%。结论:与Ficoll相比,Percoll分离所得H22肝癌小鼠皮下移植瘤TIL的细胞得率和纯度更高、增殖力较强,将更有利于后续研究。 展开更多

关键词 肿瘤浸润淋巴细胞 淋巴细胞分离液 密度梯度分离 肝癌移植瘤

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NDV序贯5-FU方案治疗小鼠结肠癌肝转移的实验研究

9

作者 黄盼柳 周丹旎 +6 位作者 梁莹 樊晓晖 宋德志 高灵茜 孙盼 赖振屏 张彬 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2015年第19期3126-3129,共4页

目的:研究NDV7793序贯5-FU治疗方案对小鼠结肠癌肝转移的抑制效果,并初步探讨序贯联合用药对荷瘤小鼠免疫功能的影响。方法:采用脾内注射法建立小鼠结肠癌肝转移模型;将小鼠模型随机分为3组:PBS阴性对照组(0.1 m L/d,10 d)、NDV7793组[5... 目的:研究NDV7793序贯5-FU治疗方案对小鼠结肠癌肝转移的抑制效果,并初步探讨序贯联合用药对荷瘤小鼠免疫功能的影响。方法:采用脾内注射法建立小鼠结肠癌肝转移模型;将小鼠模型随机分为3组:PBS阴性对照组(0.1 m L/d,10 d)、NDV7793组[512 HU/(kg·d),5 d]和NDV7793序贯5-FU组[512 HU/(kg·d),5 d+10 mg/(kg·d),5 d]。根据受试小鼠生存时间、体重变化、肝脏转移癌灶数、肝重等指标评价序贯用药效果;根据受试小鼠胸腺指数及肝脏IFN-γ的量初步观察序贯用药对荷瘤小鼠免疫功能的影响。结果:小鼠生存时间序贯给药组(32 d)长于NDV7793单独给药组(30 d)及PBS阴性对照组(17d)(P<0.05);转移癌结节序贯给药组(30.60±9.32)少于PBS阴性对照组(273.30±30.73)(P<0.05),但与NDV7793组(24.83±6.90)相比,两者均无统计学差异(P>0.05),序贯给药组小鼠肝重轻于PBS阴性对照组(P<0.05);序贯给药组的胸腺指数低于NDV7793组(P<0.05),但其IFN-γ表达水平远高于NDV7793组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:NDV7793序贯5-FU对小鼠结肠癌肝转移具有抑制效果;与NDV7793单独用药相比,序贯联合用药对荷瘤小鼠生存期的延长及免疫功能的激活,均有一定的提高。 展开更多

关键词 新城疫病毒 免疫治疗 结肠癌肝转移 序贯给药

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鹅流感病毒唾液酸受体分布特点及病毒吸附模式

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作者 张彬 张增峰 +2 位作者 樊晓晖 孙增辉 高灵茜 《广西医科大学学报》 CAS 2016年第2期189-193,共5页

目的:探讨鹅流感病毒唾液酸(SA)受体分布特点、病毒吸附模式及其作用。方法:凝集素组织化学法检测鹅呼吸道和消化道流感病毒SA受体的分布,荧光素Alexa488标记禽流感病毒H9N1和人流感病毒H1N1吸附鹅呼吸道和消化道组织。结果:鹅呼吸道和... 目的:探讨鹅流感病毒唾液酸(SA)受体分布特点、病毒吸附模式及其作用。方法:凝集素组织化学法检测鹅呼吸道和消化道流感病毒SA受体的分布,荧光素Alexa488标记禽流感病毒H9N1和人流感病毒H1N1吸附鹅呼吸道和消化道组织。结果:鹅呼吸道和消化道以表达SAα-2,3半乳糖(Gal)受体为主,SAα-2,3Gal受体在鹅呼吸道气管、支气管、次级支气管和副支气管、消化道结肠以及泄殖腔呈阳性表达,而SAα-2,6Gal受体缺乏或仅弱表达。禽流感病毒H9N1吸附鹅呼吸道气管、支气管、次级支气管和副支气管、消化道结肠以及泄殖腔,但人流感病毒H1N1仅少量病毒吸附副支气管、结肠以及泄殖腔。结论:鹅呼吸道和消化道同时表达SAα-2,3Gal受体,有助于禽流感病毒复制部位由消化道扩展到呼吸道以及各亚型禽流感病毒之间的基因重配,提示鹅在禽流感病毒的起源和进化中可能起重要作用。 展开更多

关键词 甲型流感病毒 唾液酸受体 病毒吸附 鹅

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人体多组织器官EV 71病毒受体SCARB 2和PSGL-1的分布特点

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作者 梁珍丽 王熹婧 +3 位作者 朱银川 高灵茜 宋德志 张增峰 《微创医学》 2017年第6期737-739,760,共4页

目的探讨人体多组织器官中EV71病毒受体SCARB2和PSGL-1的分布特点及其意义。方法应用免疫组织化学法检测中枢神经、呼吸道、肠道、肝脏、脾脏、心脏组织EV71病毒受体SCARB2和PSGL-1的表达。结果 SCARB2在中枢神经的大脑、小脑、脑干,呼... 目的探讨人体多组织器官中EV71病毒受体SCARB2和PSGL-1的分布特点及其意义。方法应用免疫组织化学法检测中枢神经、呼吸道、肠道、肝脏、脾脏、心脏组织EV71病毒受体SCARB2和PSGL-1的表达。结果 SCARB2在中枢神经的大脑、小脑、脑干,呼吸道的喉部、气管、支气管、细支气管、肺泡细胞、巨噬细胞以及肠道组织中呈阳性分布,肝脏呈弱阳性或阴性,脾脏、心脏则为阴性,SCARB2受体在中枢神经、呼吸道和肠道的分布明显高于肝脏、脾脏、心脏(P<0.05)。PSGL-1在中枢神经的大脑、小脑、脑干,呼吸道的喉部呈阳性分布,呼吸道的气管、支气管、肠道呈少量阳性分布,而肺泡细胞阴性,肝脏、脾脏、心脏为阴性或仅极少量表达阳性。PSGL-1受体在中枢神经系统的分布明显高于呼吸道、肠道、肝脏、脾脏、心脏(P<0.05),PSGL-1受体在呼吸道、肠道的分布明显高于肝脏、脾脏、心脏(P<0.05)。结论在中枢神经、呼吸道和肠道表达的EV71病毒受体SCARB2和/或PSGL-1,提示上述组织器官是EV71感染的主要部位。 展开更多

关键词 肠道病毒71型 受体 SCARB2 PSGL-1 人

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鸡源禽流感病毒H6N6亚型在猪呼吸道组织的复制及其基因特点 被引量：2

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作者 庞夏凤 王熹婧 +4 位作者 高灵茜 朱银川 林裕贵 李程颐 张增峰 《广西医科大学学报》 CAS 2020年第4期581-585,共5页

目的:探讨H6N6亚型禽流感病毒(AIV)是否跨种间屏障传播感染猪及其基因特点。方法:将3株鸡源性H6N6亚型AIV体外感染猪呼吸道组织,观察病毒在猪呼吸道组织复制及其病理变化,同时应用基因测序法,比较H6N6亚型AIV各基因片段的变化,筛选H6N6... 目的:探讨H6N6亚型禽流感病毒(AIV)是否跨种间屏障传播感染猪及其基因特点。方法:将3株鸡源性H6N6亚型AIV体外感染猪呼吸道组织,观察病毒在猪呼吸道组织复制及其病理变化,同时应用基因测序法,比较H6N6亚型AIV各基因片段的变化,筛选H6N6亚型AIV在猪复制的基因特点。结果:病毒体外接种猪呼吸道组织后病毒分离阳性,肺局部细胞出现坏死,肺泡细胞内病毒核蛋白(NP)抗原阳性,其中A/CK/ZZ/346/2014(ZZ346)病毒株复制能力较强。基因测序和分析显示,H6N6亚型AIV的血凝素(HA)裂解位点模式属低致病性病毒,ZZ346病毒株HA出现P186T突变、HA的158位点有氨基酸缺失以及神经氨酸酶(NA)颈区出现11个氨基酸(59~69)缺失。结论:鸡源性H6N6亚型AIV可感染猪;H6N6病毒HA出现P186T突变、HA158位点出现氨基酸缺失以及NA颈区出现11个氨基酸(59~69)缺失有助于病毒在猪体内有效复制。 展开更多

关键词 甲型流感病毒 H6N6亚型 复制 基因特点 猪

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鸭源性H6N6禽流感病毒对小鼠致病性研究

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作者 李程颐 林裕贵 +2 位作者 钟伟娟 高灵茜 张增峰 《广西医科大学学报》 CAS 2021年第4期650-654,共5页

目的:探讨鸭源H6N6亚型禽流感病毒(AIV)是否能跨种间屏障感染哺乳动物小鼠及其基因特点。方法:首先将前期分离的3株鸭源性AIVH6N6,应用基因测序和分析法,比较病毒各基因片段的变化,然后将病毒接种BALB/c小鼠,观察病毒在小鼠复制、感染... 目的:探讨鸭源H6N6亚型禽流感病毒(AIV)是否能跨种间屏障感染哺乳动物小鼠及其基因特点。方法:首先将前期分离的3株鸭源性AIVH6N6,应用基因测序和分析法,比较病毒各基因片段的变化,然后将病毒接种BALB/c小鼠,观察病毒在小鼠复制、感染、病理变化及其组织亲嗜性。结果:基因测序和分析显示,鸭源H6N6亚型AIV的血凝素(HA)裂解位点模式属低致病性病毒,其HA、神经氨酸酶(NA)、PB2等关键基因位点未出现突变,病毒与禽型受体SAα-2,3Gal特异性结合。病毒接种小鼠后,小鼠鼻甲、气管、肺组织出现炎症反应和病毒分离阳性。免疫组化检测病毒NP蛋白显示小鼠鼻甲、气管和支气管黏膜上皮细胞以及肺泡细胞阳性,其中A/DK/KM/1135/2019病毒株复制、感染能力较强。结论:鸭源性AIVH6N6可跨种间屏障传播给哺乳动物,提示有必要持续、密切监测水禽H6N6病毒的进化演变,以防其传播给人。 展开更多

关键词 甲型流感病毒 H6N6亚型 致病性 基因特点 小鼠

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小鼠腹腔注射流感病毒后外周血IFN-γTNF-α和IL-2的变化及意义

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作者 高灵茜 樊晓晖 +5 位作者 宋德志 肖庆 梁莹 宫金伶 王立芳 赖振屏 《国际生物制品学杂志》 CAS 2010年第3期124-127,共4页

目的 观察和比较小鼠腹腔注射人流感病毒H3N2和禽流感病毒H9N2后外周血干扰素γ（interferon-γ,IFN-γ）、肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）和白细胞介素2（interleukin-2,IL-2）质量浓度的变化,探讨其变化规律.方法... 目的 观察和比较小鼠腹腔注射人流感病毒H3N2和禽流感病毒H9N2后外周血干扰素γ（interferon-γ,IFN-γ）、肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）和白细胞介素2（interleukin-2,IL-2）质量浓度的变化,探讨其变化规律.方法 采用腹腔注射方式给小鼠注射人流感病毒H3N2、禽流感病毒H9N2或无病毒尿囊液,分离血清,用ELISA法检测注射后第1、2、3、4和5天外周血IFN-γ、TNF-α和IL-2质量浓度.分别比较人流感病毒H3N2和禽流感病毒H9N2注射组与阴性对照组在不同时间的IFN-γ、TNF-α和IL-2质量浓度.用方差分析和LSD-t检验进行统计学分析.结果 在某些时间段,病毒注射组外周血IFN-γ和IL-2质量浓度与阴性对照组问的差别有统计学意义,而病毒注射组TNF-α质量浓度与阴性对照组间的差别则无统计学意义.结论 小鼠腹腔注射人流感病毒H3N2和禽流感病毒H9N2可促进IFN-γ和IL-2产生,而对TNF-α产生则无显著影响. 展开更多

关键词 流感病毒A型 干扰素Ⅱ型 肿瘤坏死因子Α 白细胞介素2

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新城疫病毒对人NK细胞表达TRAIL的促进作用 被引量：6

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作者 殷君 王立芳 +5 位作者 樊晓晖 梁莹 肖庆 宋德志 高灵茜 赖振屏 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期974-981,共8页

目的:研究新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)刺激自然杀伤(natural killer,NK)细胞产生肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TNF-related apoptosis-inducing ligand,TRAIL)的作用机制。方法:采用免疫磁珠分选(magnetic activated cell... 目的:研究新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)刺激自然杀伤(natural killer,NK)细胞产生肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TNF-related apoptosis-inducing ligand,TRAIL)的作用机制。方法:采用免疫磁珠分选(magnetic activated cell sorting,MACS)法,分离得到高纯度的NK细胞;乳酸脱氢酶释放法检测NDV激活的NK细胞对人肝癌HepG2细胞的杀伤作用;实时荧光定量-PCR(real-time fluorogenic quantitative-PCR,RFQ-PCR)检测NDV刺激NK细胞4h后对TRAILmRNA表达水平的影响;FCM检测NDV刺激NK细胞16h时TRAIL蛋白的表达情况;ELISA法检测NDV刺激NK细胞后对其分泌干扰素γ(interferon-γ,IFN-γ)的影响;最后采用抗IFN-γ抗体中和IFN-γ后,再采用FCM检测NDV刺激的NK细胞中TRAIL蛋白的表达情况。结果:FCM检测结果显示,分离得到的NK细胞的纯度达(90.60±1.15)%;NDV刺激NK细胞16h后,明显增强NK细胞的杀伤肿瘤作用,NDV效价为204.8HU刺激组的杀伤率达到(22.28±0.84)%;RFQ-PCR及FCM检测结果显示,不同效价的NDV刺激NK细胞后,NK细胞中TRAILmRNA及蛋白表达水平均明显升高;ELISA检测结果显示,NDV刺激NK细胞后IFN-γ的分泌水平明显增加,在NDV效价为25.6HU刺激16h时达到峰值(796.47±37.87)pg/mL;采用抗IFN-γ抗体中和IFN-γ后,NK细胞中TRAIL蛋白表达水平明显下降。结论:NDV刺激NK细胞后可增强IFN-γ的分泌水平,进而通过IFN-γ上调TRAIL的表达,此途径为NDV刺激NK细胞表达TRAIL的机制之一。此外,NDV直接刺激NK细胞表达TRAIL是另一条重要的途径。 展开更多

关键词 肝肿瘤 实验性 新城疫病毒 免疫疗法 TNF相关凋亡诱导配体 自然杀伤细胞

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新城疫病毒D817对裸小鼠人结肠癌移植瘤的抑制作用 被引量：7

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作者 黄川 樊晓晖 +4 位作者 姜艳华 宋德志 高灵茜 黄企光 赖振屏 《中华肿瘤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期490-494,共5页

目的观察新城疫病毒DK／HK／817／1980（NDVD817）对裸小鼠人结肠癌移植瘤的抑制作用。方法采用LoVo细胞株建立裸小鼠人结肠癌移植瘤模型，分别给予裸小鼠尾静脉注射PBS、氟尿嘧啶（5-Fu）以及NDVD817高、中、低3个剂量，观察不同剂量ND... 目的观察新城疫病毒DK／HK／817／1980（NDVD817）对裸小鼠人结肠癌移植瘤的抑制作用。方法采用LoVo细胞株建立裸小鼠人结肠癌移植瘤模型，分别给予裸小鼠尾静脉注射PBS、氟尿嘧啶（5-Fu）以及NDVD817高、中、低3个剂量，观察不同剂量NDVD817对移植瘤的抑制作用，病理学观察NDVD817对移植瘤和肝细胞的损伤程度，流式细胞术检测肿瘤细胞的凋亡和坏死情况，酶联免疫吸附试验（ELISA）试剂盒检测荷瘤小鼠体内肿瘤坏死因子-Ⅱ（TNF—α）的含量，血凝实验检测荷瘤小鼠体内活病毒量。结果中剂量NDVD817可明显抑制移植瘤的生长，肿瘤抑制率达48．1％。NDVD817对荷瘤小鼠体重和肝脏的损伤较小，且具有诱导肿瘤细胞凋亡和诱导机体产生TNF—α的能力。荷瘤小鼠处死后只在瘤内检测到活病毒，而在血清和其他脏器中并没有检出活病毒。结论在对裸小鼠人结肠癌移植瘤的抑制过程中，NDVD817有明显的抑瘤效果，适当剂量的NDVD817更安全有效。 展开更多

关键词 新城疫病毒 溶瘤病毒 结肠忡瘤 小鼠 裸

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3株新城疫病毒体外对人喉癌Hep-2细胞杀伤效应的比较 被引量：2

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作者 姜艳华 樊晓晖 +6 位作者 黄川 宋德志 高灵茜 杨哲 黄企光 赖振屏 罗金莲 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2009年第1期10-13,共4页

目的比较新城疫病毒(NDV)强毒株D817、弱毒株7793和La Sota疫苗株对人喉癌Hep-2细胞的杀伤效应。方法3株病毒经扩增、噬斑纯化后,分别感染Hep-2细胞和喉正常组织细胞,一定时间后,显微镜下观察细胞形态变化,MTT比色法检测病毒对细胞的杀... 目的比较新城疫病毒(NDV)强毒株D817、弱毒株7793和La Sota疫苗株对人喉癌Hep-2细胞的杀伤效应。方法3株病毒经扩增、噬斑纯化后,分别感染Hep-2细胞和喉正常组织细胞,一定时间后,显微镜下观察细胞形态变化,MTT比色法检测病毒对细胞的杀伤效应。结果3株病毒均能在Hep-2细胞中增殖并杀伤细胞,杀伤效应以D817株最高,La Sota株其次,7793株最低,且差异均无统计学意义。杀伤效应与病毒剂量和作用时间呈正相关,显微镜下可见明显的细胞病变。而对喉正常组织细胞的杀伤效应不明显。结论NDV D817株和7793株对喉癌细胞的杀伤效应与La Sota疫苗株相似,而对喉正常组织细胞的杀伤效应不明显,有望成为喉癌生物学治疗新的候选病毒株。 展开更多

关键词 新城疫病毒 喉癌 杀伤效应

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新城疫病毒7793对结肠癌肝转移模型小鼠肝内Th1、Th2、Th17类细胞因子表达的影响 被引量：2

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作者 梁莹 黄盼柳 +4 位作者 樊晓晖 周丹旎 宋德志 高灵茜 赖振屏 《肿瘤学杂志》 CAS 2016年第5期355-359,共5页

[目的]探讨新城疫病毒(NDV)7793对结肠癌肝转移瘤小鼠肝组织Th1、Th2、Th17类细胞因子表达的影响,为NDV7793作用人结肠癌肝转移的免疫效果研究提供实验依据。[方法 ]取40只健康BALB/c小鼠,随机分为4组(每组10只):PBS组,5-Fu组,NDV7793组... [目的]探讨新城疫病毒(NDV)7793对结肠癌肝转移瘤小鼠肝组织Th1、Th2、Th17类细胞因子表达的影响,为NDV7793作用人结肠癌肝转移的免疫效果研究提供实验依据。[方法 ]取40只健康BALB/c小鼠,随机分为4组(每组10只):PBS组,5-Fu组,NDV7793组,正常对照组。建模及给药结束,采用ELISA法测定肝脏组织上清IL-2、TNF-α、IL-4、IL-10、IL-17的浓度,比较4组间各细胞因子表达差异,分析TNF-α与IL-17表达水平的相关性。[结果]经NDV7793治疗后,结肠癌肝转移瘤小鼠肝组织Th1、Th2、Th17表达均不同程度恢复到正常对照组水平,即Th1类细胞因子IL-2、TNF-α和Th17类细胞因子IL-17表达显著回升,Th2类细胞因子IL-4、IL-10表达显著下降;与5-Fu组相比,NDV7793组的小鼠肝脏各类细胞因子更趋近于正常对照组小鼠的水平;TNF-α表达水平与IL-17表达水平相关性检测,0.749≤r<1,P<0.01,有统计学意义。[结论 ]NDV7793能促进结肠癌肝转移小鼠的肝组织Th1类细胞因子分泌,抑制Th2类细胞因子分泌,使其趋近于正常水平,且小鼠TNF-α与IL-17表达呈正相关。 展开更多

关键词 新城疫病毒 结肠肿瘤 肝肿瘤 肿瘤转移 白细胞介素-2 肿瘤坏死因子-α 小鼠

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NDV7793对肺腺癌皮下移植瘤小鼠肿瘤组织CEACAM1表达的影响 被引量：2

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作者 黄盼柳 梁莹 +7 位作者 樊晓晖 宋德志 高灵茜 梁爽 孙盼 张彬 张磊 崔梦一 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期2235-2240,共6页

为研究NDV7793对肺腺癌皮下移植瘤小鼠肿瘤组织CEACAM1蛋白表达的影响,我们取72只健康C57BL/6小鼠,建模后随机分为3组(每组24只):PBS阴性对照组、顺铂阳性对照组和NDV7793给药组。观察各组小鼠的生存期及肿瘤生长情况;通过流式及免疫组... 为研究NDV7793对肺腺癌皮下移植瘤小鼠肿瘤组织CEACAM1蛋白表达的影响,我们取72只健康C57BL/6小鼠,建模后随机分为3组(每组24只):PBS阴性对照组、顺铂阳性对照组和NDV7793给药组。观察各组小鼠的生存期及肿瘤生长情况;通过流式及免疫组化检测各组小鼠肿瘤组织CEACAM1表达水平。发现NDV7793给药组生存期显著长于PBS阴性对照组及顺铂阳性对照组,NDV7793给药组较顺铂阳性对照组抑瘤率更高,顺铂阳性对照组较PBS阴性对照组及NDV7793给药组小鼠肿瘤组织CEACAM1的表达水平更强,且NDV7793给药组较PBS阴性对照组小鼠肿瘤组织CEACAM1的表达水平更弱。提示NDV7793对肺腺癌皮下移植瘤小鼠的疗效比顺铂更佳,不仅延长小鼠生存期及抑制肿瘤生长,而且抑制肿瘤组织CEACAM1蛋白表达。 展开更多

关键词 NDV7793 CCR7 CEACAM1 CCL21

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miRNA93和miRNA192在H3N2亚型SIV病毒复制及宿主抗病毒免疫中的作用 被引量：2

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作者 李瑞 高灵茜 +5 位作者 崔梦一 高洁 田雯钰 赖振屏 张增锋 樊晓晖 《中国热带医学》 CAS 2020年第1期1-7,共7页

目的探讨分离于广西猪流感病毒SW/Guangxi/NS2783/2010和SW/Guangxi/NS650/2012跨种属感染人肺腺癌A549细胞的miRNA93和miRNA192对病毒复制及宿主抗病毒免疫的影响。方法通过测定不同稀释浓度的病毒感染细胞HA滴度值,确定病毒最佳稀释... 目的探讨分离于广西猪流感病毒SW/Guangxi/NS2783/2010和SW/Guangxi/NS650/2012跨种属感染人肺腺癌A549细胞的miRNA93和miRNA192对病毒复制及宿主抗病毒免疫的影响。方法通过测定不同稀释浓度的病毒感染细胞HA滴度值,确定病毒最佳稀释浓度。荧光定量PCR检测病毒感染细胞后miRNA93和miRNA192表达,Western blot检测病毒NP和HA蛋白表达水平;转染miRNA93和miRNA192抑制剂后,重新检测miRNA93、miRNA192、IFN-β及病毒NP、HA蛋白表达水平。结果不同稀释度病毒感染人A549细胞后HA滴度的结果显示病毒SW2783的最佳稀释度为10-3,而SW650的HA滴度无明显变化趋势,提示病毒SW2783对人A549细胞具有较好的适应性和感染能力。荧光定量PCR和Western blot结果提示两株病毒感染细胞后病毒NP和HA蛋白表达均先升高后降低,加入miRNA93抑制剂,两株病毒NP和HA蛋白的表达均上调;加入miRNA192抑制剂,病毒SW2783的HA蛋白表达下调(P=2.10×10-4),而SW650的HA蛋白表达上调(P=5.45×10-5),NP蛋白反而下调(P=0.034);ELISA结果提示病毒SW2783和SW650感染细胞后炎症因子IFN-β表达水平随感染时间延长而升高。结论研究表明miRNA93和miRNA192的表达与SIV病毒增殖及宿主抗病毒免疫有关,可作为干预猪流感病毒跨种属感染的新靶点。 展开更多

关键词 猪流感病毒 miRNA 病毒复制 抗病毒免疫 广西

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