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NLRP3/Caspase-1/IL-1β轴在白藜芦醇抗骨关节炎中作用研究 被引量：1
1
作者 王睿淇 何健宜 +3 位作者 孙应许 杨迎春 顾海伦 刘莉 《中国新药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第17期1787-1795,共9页
目的:白藜芦醇被认为是治疗骨关节炎(osteoarthritis,OA)的潜在候选药物,但其保护机制仍有待阐明。本研究旨在研究白藜芦醇对高脂饮食(high-fat diet,HFD)诱导的肥胖相关OA中核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(nucleotide-binding olig... 目的:白藜芦醇被认为是治疗骨关节炎(osteoarthritis,OA)的潜在候选药物,但其保护机制仍有待阐明。本研究旨在研究白藜芦醇对高脂饮食(high-fat diet,HFD)诱导的肥胖相关OA中核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(nucleotide-binding oligomerization domain-like receptor protein 3,NLRP3)/胱天蛋白酶-1(Caspase-1)/白介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)轴的影响及磷脂酰肌醇3激酶(phosphoinositide 3-kinase,PI3K)/丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(serine/threonine-protein kinase,AKT)信号通路在其中的作用。方法:雄性C57BL/6小鼠用HFD或HFD+白藜芦醇喂养22周。收集膝关节,应用组织学、免疫组织化学和PCR检测软骨损伤程度和NLRP3,Caspase-1和IL-1β表达。在体外实验中,用IL-1β处理SW1353软骨肉瘤细胞以模拟OA状态,并使用PI3K抑制剂LY294002阻断PI3K/AKT信号通路,Western blot检测NLRP3,Caspase-1和IL-1β蛋白表达。结果:HFD喂养的小鼠软骨组织出现OA样损伤,而白藜芦醇处理能减轻这种损伤。HFD上调小鼠软骨组织NLRP3,Caspase-1和IL-1β的mRNA和蛋白表达,而白藜芦醇处理显著抑制这种上调作用。此外,LY294002能降低SW1353细胞受IL-1β刺激升高的NLRP3和Caspase-1的表达,白藜芦醇联合LY294002共同处理可进一步下调NLRP3和Caspase-1的表达。单独白藜芦醇处理或LY294002处理降低NLRP3和Caspase-1表达的作用没有差异。结论:肥胖相关OA小鼠关节软骨中NLRP3/Caspase-1/IL-1β轴被激活,白藜芦醇通过抑制其激活发挥保护作用,且其抑制机制与PI3K/AKT信号通路无关。 展开更多
关键词 骨关节炎 白藜芦醇 核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3炎性小体 PI3K/AKT信号通路 肥胖
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人工全髋关节置换术后下肢深静脉血栓形成的多因素分析 被引量：45
2
作者 顾海伦 王欢 段景柱 《中国骨伤》 CAS 2007年第9期611-613,共3页
目的:分析影响人工全髋关节置换术(THA)后下肢深静脉血栓形成(DVT)的危险因素。方法:对98例(112个关节)人工全髋置换术术后DVT发生情况进行分析。其中男55例,女43例;平均年龄59.12岁(41～81岁)。术前及术后7～10d均用彩色多普勒检查双... 目的:分析影响人工全髋关节置换术(THA)后下肢深静脉血栓形成(DVT)的危险因素。方法:对98例(112个关节)人工全髋置换术术后DVT发生情况进行分析。其中男55例,女43例;平均年龄59.12岁(41～81岁)。术前及术后7～10d均用彩色多普勒检查双下肢深静脉血流通畅情况及DVT的发生。对17项临床因素与人工关节置换术后DVT形成的相关性进行了分析。结果:术后发生DVT41例,DVT发生率为41.84%(41/98),其中无症状DVT患者占58.54%(24/41)。经Logistic多因素回归分析,与DVT相关的因素有5个,其中年龄、肥胖及肢体延长大于2cm使术后发生DVT的风险分别增加到1.952、3.349及7.376倍(P<0.05);硬膜外麻醉和踝泵练习使术后发生DVT的可能性减少到原来的0.132和0.265(P<0.01)。结论:年龄、肥胖及肢体延长大于2cm是人工关节置换术后发生DVT的危险因素,而硬膜外麻醉和踝泵练习是减少术后发生DVT的保护因素。关节置换术后无症状DVT的大量存在,提示术后最好常规行双下肢彩色多普勒检查,一旦有DVT发生,及时治疗,防止发生致命性肺栓塞。 展开更多
关键词 关节成形术 置换 髋 静脉血栓形成 下肢 危险因素
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Ad-BMP-2和Ad-TGF-β_1共转染人退变椎间盘髓核细胞对细胞外基质代谢的影响 被引量：10
3
作者 顾海伦 刘莉 +2 位作者 王欢 段景柱 李建军 《生物医学工程与临床》 CAS 2009年第1期58-61,共4页
目的探讨骨形态发生蛋白腺病毒表达载体(Ad-BMP-2)和转化生长因子-β1腺病毒表达载体(Ad-TGF-β1)共转染人退变椎间盘髓核细胞后对aggrecan和Ⅱ型胶原合成的影响。方法人退变椎间盘髓核细胞体外分离培养至第2代。为检测转入目的基因后... 目的探讨骨形态发生蛋白腺病毒表达载体(Ad-BMP-2)和转化生长因子-β1腺病毒表达载体(Ad-TGF-β1)共转染人退变椎间盘髓核细胞后对aggrecan和Ⅱ型胶原合成的影响。方法人退变椎间盘髓核细胞体外分离培养至第2代。为检测转入目的基因后蛋白表达情况,将其分为空白对照组、目的基因组和共转染组,细胞分别转染Ad-BMP-2(50MOI)、Ad-TGF-β1(50MOI)及共转染(各50MOI),再用Western blot方法检测转染后细胞目的蛋白的表达;为探讨目的基因对细胞外基质代谢的影响,将研究对象分为空白对照组(A组)、Ad-BMP-2100MOI(B组)、Ad-TGF-β1100MOI(C组)、Ad-BMP-2和Ad-TGF-β1各50MOI(D组),用ELISA法分别检测转染第3天和第6天细胞上清液中aggrecan和Ⅱ型胶原的蛋白表达量。RT-PCR检测第6天髓核细胞内Ⅱ型胶原和aggrecan的mRNA的表达水平。应用方差分析比较组间差异,以P<0.05表示差异有统计学意义。结果在转染目的基因载体后,目的蛋白表达增加。在转染后第3天和第6天各转染组细胞培养基中aggrecan和Ⅱ型胶原蛋白表达量高于对照组(P<0.01),与转染单个基因组相比,共转染组的aggrecan和Ⅱ型胶原蛋白表达量明显增加(P<0.01);并且在转染后第6天共转染组髓核细胞内aggrecan和Ⅱ型胶原mRNA表达也明显增加(P<0.01)。结论转染Ad-BMP-2、Ad-TGF-β1能促进aggrecan和Ⅱ型胶原合成,同时上调aggrecan和Ⅱ型胶原mRNA的表达;共转染Ad-BMP-2和Ad-TGF-β1对细胞外基质的mRNA和蛋白合成有协同作用。 展开更多
关键词 椎间盘 骨形态发生蛋白-2 转化生长因子-Β1 基因转染
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瘦素对IL-1β诱导大鼠骨性关节炎软骨细胞MMP-13 mRNA表达的影响 被引量：6
4
作者 顾海伦 刘亚莉 +2 位作者 王维 丁立峰 刘莉 《东南大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2015年第6期870-875,共6页
目的:探讨瘦素对IL-1β诱导大鼠骨性关节炎软骨细胞基质金属蛋白酶-13(MMP-13)mRNA表达的影响及其机制。方法:体外培养大鼠膝关节软骨细胞,取第3代细胞采用免疫细胞化学方法及甲苯胺蓝染色法鉴定Ⅱ型胶原及蛋白多糖表达;MTT法检测不同... 目的:探讨瘦素对IL-1β诱导大鼠骨性关节炎软骨细胞基质金属蛋白酶-13(MMP-13)mRNA表达的影响及其机制。方法:体外培养大鼠膝关节软骨细胞,取第3代细胞采用免疫细胞化学方法及甲苯胺蓝染色法鉴定Ⅱ型胶原及蛋白多糖表达;MTT法检测不同质量浓度瘦素环境下正常及IL-1β诱导软骨细胞的增殖活力;实时定量PCR法检测不同质量浓度瘦素处理后IL-1β诱导软骨细胞MMP-13 mRNA的表达,ELISA法检测培养基上清肿瘤坏死因子α(TNFα)的水平;通过小RNA干扰(siRNA)抑制瘦素长型受体(OB-Rb)表达,观察瘦素对MMP-13 mRNA表达的影响。结果:所有细胞均能分泌Ⅱ型胶原及蛋白多糖。MTT结果显示,低质量浓度瘦素对细胞增殖无明显影响,瘦素质量浓度大于等于10 ng·ml-1后可显著促进细胞增殖;而10 ng·ml-1的IL-1β可显著抑制细胞增殖,同时给予100 ng·ml-1及1μg·ml-1瘦素则可进一步抑制细胞增殖,差异均有统计学意义(P<0.05)。实时定量PCR结果显示,IL-1β可增加软骨细胞MMP-13 mRNA表达及TNFα分泌,而加入瘦素(100 ng·ml-1)后可进一步刺激MMP-13 mRNA的表达及TNFα的分泌,差异具有统计学意义(P<0.05)。转染OB-Rb siRNA的软骨细胞OB-Rb mRNA的表达显著下降(P<0.05),MMP-13 mRNA的表达则不受影响;IL-1β处理对转染组OB-Rb的mRNA表达无明显影响,但可显著诱导MMP-13 mRNA的表达增加(P<0.05),进一步加入瘦素后,OB-Rb mRNA的表达有所增加,但表达量远远低于siRNA未处理组,差异具有统计学意义(P<0.05),MMP-13 mRNA的表达则未见增加。结论:一定浓度的瘦素可通过与OB-Rb结合促进IL-1β诱导大鼠骨性关节炎软骨细胞MMP-13 mRNA表达,具有降解软骨作用。 展开更多
关键词 瘦素 骨性关节炎 软骨细胞 基质金属蛋白酶-13 瘦素长型受体 大鼠
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人骨形态发生蛋白2促兔椎间盘细胞aggrecan和Ⅱ型胶原的合成作用 被引量：4
5
作者 顾海伦 吕刚 +2 位作者 王欢 段景柱 黄涛 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期551-553,共3页
目的:研究人骨形态发生蛋白2(BMP-2)对体外培养兔腰椎间盘髓核细胞Ⅱ型胶原和软骨聚集蛋白多糖(aggrecan)的影响。方法:兔髓核细胞体外分离培养,分别利用Antonopulos和Miamine法检测对照组和不同剂量hBMP-2(10,100和1000ng/ml)组胶原和... 目的:研究人骨形态发生蛋白2(BMP-2)对体外培养兔腰椎间盘髓核细胞Ⅱ型胶原和软骨聚集蛋白多糖(aggrecan)的影响。方法:兔髓核细胞体外分离培养,分别利用Antonopulos和Miamine法检测对照组和不同剂量hBMP-2(10,100和1000ng/ml)组胶原和蛋白多糖表达水平。RT-PCR检测细胞Ⅱ型胶原和aggrecan mRNA的表达水平。结果:加入BMP-2后可见随剂量增加胶原和蛋白多糖表达量逐渐增加,并存在剂量依赖关系(P<0.01)。在6dRT-PCR结果显示BMP-2组aggrecan和Ⅱ型胶原mRNA的表达高于对照组,并且随剂量增高aggrecan和Ⅱ型胶原mRNA的表达量逐渐增加。结论:BMP-2可促进体外培养兔腰椎间盘细胞合成代谢,随剂量增加胶原和蛋白多糖表达量逐渐增加,并存在剂量依赖关系,提示hBMP-2可能对退变椎间盘具有修复功能。 展开更多
关键词 骨形态发生蛋白2 椎间盘细胞 基因表达 胶原 蛋白多糖
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抑郁与腰椎间盘突出症患者术后疗效的关系 被引量：9
6
作者 顾海伦 段景柱 +2 位作者 王欢 周凤华 刘盈 《中国临床康复》 CSCD 北大核心 2005年第20期30-32,共3页
目的:探讨抑郁与腰椎间盘突出症手术预后是否相关。方法:选择2000-06/2003-12在中国医科大学附属第二医院住院行腰椎间盘突出症手术治疗的患者107例。①分别记录患者的病程、术前症状和体征总评分、术前疼痛程度评分根据视觉模拟评分记... 目的:探讨抑郁与腰椎间盘突出症手术预后是否相关。方法:选择2000-06/2003-12在中国医科大学附属第二医院住院行腰椎间盘突出症手术治疗的患者107例。①分别记录患者的病程、术前症状和体征总评分、术前疼痛程度评分根据视觉模拟评分记录。选用抑郁自评量表进行术前心理评估,53分为标准分。按抑郁自评量表评分将患者分为两组:<标准分为正常组,82例;≥标准分为抑郁组,25例。两组患者在性别、年龄、工作性质、文化程度及吸烟史方面无显著性差异(P>0.05)。②根据北美脊柱协会制定的60项指标结合临床实际制定出疗效评价量表共50分,内容包括4方面:症状(6分):腰或臀疼痛3分,腿痛或麻木3分;症状对功能的影响(19分):行走0～4分,站、坐、睡、抬物、剧烈活动、性生活各0～2分,排尿0～3分;体征(16分):腰部活动受限和畸形0～2分,腰部扣痛0～1分,健腿抬高试验0～2分,直腿抬高试验0～4分,肌力0～3分,感觉0～2分,反射0～2分;CT或MR同区域定位(9分):1～3区分别为3～9分。术后随访评分不包括CT或MR检查评分。③107例患者根据术后症状评分计算出症状改善率,即(术前症状评分-术后症状评分)/术前症状评分×100%。其中47例患者通过门诊复查得到术后体征评分,计算症状体症改善率,即犤(术前症状评分+术前体征评分)-(术后症状评分+术后体征评分)犦(术前症状评分+术前体征评分)×100%。同时还调查术后疼痛频率(从不痛到经常疼痛为0～2分)和术后工作能力(从恢复原来工作到未工作为0～4分)。④组间基线资料比较采用卡方检验,术前疼痛程度评分、症状改善率等行独立样本t检验。结果:按意向处理分析,107例患者均成功得到随访,随访时间2.08～3.46年,平均2.48年。①术前疼痛程度评分:抑郁组明显高于正常组犤(3.80±0.73),(3.28±0.94)分,P<0.05犦。②术后疼痛频率评分:抑郁组高于正常组犤(0.96±0.35),(0.45±0.57)分,P<0.01犦。③术后疼痛程度评分:抑郁组明显高于正常组犤(1.20±0.63),(0.58±0.65)分,P<0.01犦。④术后症状改善率:抑郁组低于正常组犤(67.87±17.86),(81.44±21.08)%,P<0.01犦。⑤术后工作能力评分:抑郁组术后工作能力较差,明显高于正常组犤(1.48±1.00),(0.78±1.04)分,P<0.01犦。⑥术后症状体征改善率:抑郁组明显低于正常组犤(69.27±16.51),(84.31±18.03)%,P<0.05犦。结论:抑郁患者术后症状改善率和症状体征改善率低,疼痛频率和疼痛程度高,术后工作能力较差。提示抑郁与腰椎间盘突出症手术的预后情况相关,是腰椎间盘突出症术后康复的不利因素,术前应对患者进行抑郁评定。 展开更多
关键词 抑郁症 腰椎 椎间盘移位 治疗结果
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白藜芦醇通过失活FoxO1及激活Sirt1在IL-1β处理的SW1353细胞中发挥抗骨关节炎效应 被引量：7
7
作者 顾海伦 徐小磊 +1 位作者 刘旭丹 刘莉 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 2019年第4期311-317,共7页
目的探讨白藜芦醇(resveratrol,RES)抑制白介素1β(interleukin 1β,IL-1β)处理的SW1353细胞的炎症反应与叉头框转录因子O1(forkhead transcription factors O1,FoxO1)/细胞沉默信息调节子1(silent information regulator 1,Sirt1)信... 目的探讨白藜芦醇(resveratrol,RES)抑制白介素1β(interleukin 1β,IL-1β)处理的SW1353细胞的炎症反应与叉头框转录因子O1(forkhead transcription factors O1,FoxO1)/细胞沉默信息调节子1(silent information regulator 1,Sirt1)信号之间的关系。方法采用SW1353软骨肉瘤细胞系,进行如下4个方面的处理及检测:给予10ng/ml IL-1β的同时,加入RES(12.5、50μmol/L)处理24 h,Western blot法检测Sirt1蛋白的表达;给予10ng/mL IL-1β的同时,加入RES(50μmol/L)处理30 min,免疫细胞化学技术检测FoxO1的定位,Western blot法检测FoxO1及p-FoxO1水平;FoxO1 siRNA进行转染,荧光显微镜下观察转染效率,Western blot法检测FoxO1的抑制效果及对Sirt1的影响;FoxO1siRNA转染后,Western blot法检测RES处理对Sirt1蛋白表达的影响,ELISA法检测细胞培养基上清IL-6的水平。结果单纯IL-1β处理对Sirt1的蛋白表达无明显影响,而给予RES(12.5、50μmol/L)处理后显著增加Sirt1水平。加入IL-1β/RES后,FoxO1主要定位于细胞质中;IL-1β处理显著上调p-FoxO1水平,而加入RES则进一步增加p-FoxO1水平;FoxO1水平保持不变。FoxO1基因沉默可有效抑制细胞FoxO1水平,同时Sirt1水平也被显著抑制。FoxO1基因沉默后抑制RES诱导的Sirt1水平,抑制IL-1β增加的IL-6水平,而RES处理则引起IL-6水平的进一步降低。结论在IL-1β处理的SW1353细胞中,RES可以通过失活FoxO1,增加Sirt1的水平发挥抗炎效应。 展开更多
关键词 骨关节炎 白藜芦醇 叉头框转录因子1 细胞沉默信息调节子1 SW1353细胞
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髋臼骨折术后下肢深静脉血栓形成的多因素分析 被引量：32
8
作者 顾海伦 段景柱 王欢 《中国骨与关节损伤杂志》 2007年第6期462-464,共3页
目的分析影响髋臼骨折术后下肢深静脉血栓形成(DVT)的危险因素。方法对102例髋臼骨折术后DVT发生情况进行分析。术前及术后7～10d均用彩色多普勒检查双下肢深静脉血流通畅情况及DVT的发生,并对11项临床因素与人工关节置换术后DVT形成的... 目的分析影响髋臼骨折术后下肢深静脉血栓形成(DVT)的危险因素。方法对102例髋臼骨折术后DVT发生情况进行分析。术前及术后7～10d均用彩色多普勒检查双下肢深静脉血流通畅情况及DVT的发生,并对11项临床因素与人工关节置换术后DVT形成的相关性进行分析。结果髋臼骨折术后发生DVT有18例,DVT发生率为17.65%(18/102)。经Lo-gistic多因素回归分析,与DVT相关的因素有6个,其中年龄、肥胖、静脉曲张及手术方式使术后发生DVT的风险分别增加到4.075、7.803、46.176和4.251倍(P<0.05);硬膜外麻醉和踝泵练习使术后发生DVT的风险减少到0.121和0.114倍(P<0.01)。结论年龄和肥胖是人工关节术后发生DVT的危险因素,而硬膜外麻醉和踝泵练习则是术后发生DVT的保护因素。髋臼骨折术后无症状DVT的大量存在,提示术后最好常规行双下肢彩色多普勒检查,一旦有DVT发生,及时治疗,防止发生致命性肺栓塞。 展开更多
关键词 深静脉血栓形成 髋臼骨折 危险因素
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吸烟与腰椎间盘突出症预后关系的探讨 被引量：4
9
作者 顾海伦 王欢 +2 位作者 刘莉 周凤华 段景柱 《中国矫形外科杂志》 CAS CSCD 2003年第13期907-909,共3页
目的 :探讨吸烟与腰椎间盘突出症手术预后关系。方法 :研究对象为住院行腰椎间盘突出症手术治疗患者共计 3 2 1名 ,患者术前记录吸烟量 ,按吸烟量分为 3组 :正常组、轻度吸烟组和重度吸烟组。同时记录自我评定抑郁量表(SDS)评分 ,术前... 目的 :探讨吸烟与腰椎间盘突出症手术预后关系。方法 :研究对象为住院行腰椎间盘突出症手术治疗患者共计 3 2 1名 ,患者术前记录吸烟量 ,按吸烟量分为 3组 :正常组、轻度吸烟组和重度吸烟组。同时记录自我评定抑郁量表(SDS)评分 ,术前腰腿痛程度 (VAS)。疗效评价标准根据北美脊柱协会制定的 60项指标结合临床实际制定出评价量表。结果 :术前疼痛评分 ,SDS评分 ,术后改善率重度吸烟组和轻度吸烟组明显高于不吸烟组 (P <0 .0 5或P <0 .0 1) ,说明吸烟者术前更加疼痛 ,抑郁发生率较高 ,术后改善率差。重度吸烟组和轻度吸烟组的SDS评分、术后改善率比较有统计学差异 (P <0 .0 5或P <0 .0 1) ,而术前疼痛评分无明显统计学差异。正常组与抑郁组之间术前疼痛和改善率有统计学差异 (P <0 .0 5或P <0 .0 1) ,说明抑郁患者术前有更明显的疼痛和较差术后改善率。吸烟者更易患抑郁症即吸烟是抑郁的危险因素 ,相对危险度OR =1.889( 95 %CI 1.165～ 3 .0 63 )。结论 :吸烟是腰椎间盘手术的不利因素 ,吸烟与抑郁之间有相关性。吸烟可以导致一个较差的手术效果 ,因此减少或停止吸烟可能增加手术的改善率。 展开更多
关键词 腰椎间盘突出症 吸烟 抑郁
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人骨形成蛋白2腺病毒表达载体转染体外培养兔腰椎间盘细胞的研究 被引量：2
10
作者 顾海伦 吕刚 +3 位作者 刘莉 李建军 黄涛 王佳 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第8期820-824,共5页
目的研究人骨形成蛋白2腺病毒表达载体(adenovirus-mediatedhumanbonemorphogeneticprotein2gene,Ad-hBMP-2)转染体外培养兔腰椎间盘细胞,分析其对腰椎间盘细胞的影响。方法成年健康新西兰大白兔4只,体重4～5kg,取L2、L3到L6、L7节段椎... 目的研究人骨形成蛋白2腺病毒表达载体(adenovirus-mediatedhumanbonemorphogeneticprotein2gene,Ad-hBMP-2)转染体外培养兔腰椎间盘细胞,分析其对腰椎间盘细胞的影响。方法成年健康新西兰大白兔4只,体重4～5kg,取L2、L3到L6、L7节段椎间盘细胞体外培养。利用免疫荧光和蛋白印迹法(Westernblot)检测空白对照组(未转染)、Ad-LacZ组[感染复数(multiplicityofinfection,MOI)150MOI]和不同剂量Ad-hBMP-2(50、100、150MOI)组转染后细胞hBMP-2的表达水平。采用RT-PCR检测转染后细胞型胶原和aggrecanmRNA表达水平。结果转染Ad-hBMP-2后通过免疫荧光和蛋白印迹法可见随转染剂量增加hBMP-2表达量逐渐增加,与50MOI组比较100MOI组升高102%,150MOI组升高183%。在转染后第6天RT-PCR结果显示转染组aggrecan和型胶原mRNA的表达高于对照组,并且随转染剂量增高mRNA的表达量均逐渐增加。aggrecanmRNA从50MOI组的61.7%增加到150MOI组的167.3%。型胶原mRNA从50MOI组的77.3%增加到150MOI组的169.0%。结论Ad-hBMP-2可高效转染体外培养兔腰椎间盘细胞,随转染剂量增加hBMP-2表达量逐渐增加,同时上调aggrecan和型胶原mRNA的表达,并存在剂量依赖关系。 展开更多
关键词 腺病毒 骨形成蛋白2 椎间盘细胞 基因转染
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人骨形态蛋白-2对椎间盘细胞蛋白多糖和Ⅱ型胶原的影响 被引量：4
11
作者 顾海伦 段景柱 王欢 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 2007年第3期283-287,共5页
目的研究人骨形态蛋白(human bone morphogenetic protein-2,hBMP-2)对体外培养人腰椎间盘髓核细胞Ⅱ型胶原和aggrecan的影响。方法人退变髓核细胞体外分离培养,通过免疫组织化学鉴定椎间盘细胞。利用ELISA法检测对照组和不同剂量hBMP-2... 目的研究人骨形态蛋白(human bone morphogenetic protein-2,hBMP-2)对体外培养人腰椎间盘髓核细胞Ⅱ型胶原和aggrecan的影响。方法人退变髓核细胞体外分离培养,通过免疫组织化学鉴定椎间盘细胞。利用ELISA法检测对照组和不同剂量hBMP-2(10ng/ml和100ng/ml)组Ⅱ型胶原和aggrecan的表达水平。用RT-PCR检测细胞Ⅱ型胶原和aggrecan的mRNA表达水平。结果加入hBMP-2后Ⅱ型胶原和aggrecan表达增加,并存在剂量依赖关系(P<0.01)。在第6天RT-PCR结果显示hBMP-2组aggrecan和Ⅱ型胶原mRNA的表达高于对照组,并且随剂量增高aggrecan和Ⅱ型胶原mRNA的表达量逐渐增加。结论hBMP-2可促进体外培养人腰椎间盘细胞合成代谢,Ⅱ型胶原和aggrecan表达量增加,并存在剂量依赖关系,提示hBMP-2可能对退变椎间盘具有修复功能。 展开更多
关键词 骨形态蛋白2 椎间盘细胞 基因表达 胶原 蛋白多糖
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Ad-hBMP-2转染体外培养人退变腰椎间盘细胞的研究 被引量：1
12
作者 顾海伦 吕刚 +3 位作者 李建军 刘莉 黄涛 原泉 《中国矫形外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第17期1331-1333,共3页
[目的]研究人骨形态发生蛋白-2腺病毒表达载体(Ad-hBMP-2)转染体外培养人退变腰椎间盘细胞,分析其对腰椎间盘细胞影响。[方法]成人退变腰椎间盘细胞体外培养,通过免疫组化和染色体分析鉴定椎间盘细胞。利用免疫荧光和蛋白印迹法检测不... [目的]研究人骨形态发生蛋白-2腺病毒表达载体(Ad-hBMP-2)转染体外培养人退变腰椎间盘细胞,分析其对腰椎间盘细胞影响。[方法]成人退变腰椎间盘细胞体外培养,通过免疫组化和染色体分析鉴定椎间盘细胞。利用免疫荧光和蛋白印迹法检测不同转染剂量对细胞BMP-2表达的影响。[结果]体外培养成人退变腰椎间盘细胞第2代鉴定具有其结构功能。转染后通过免疫荧光和蛋白印迹法可见随转染剂量增加BMP-2表达量逐渐增加。[结论]Ad-hBMP-2可高效转染体外培养人退变椎间盘细胞,同时随转染剂量增加BMP-2表达量逐渐增加。 展开更多
关键词 腺病毒 骨形态蛋白2 椎间盘细胞 基因转染 退变椎间盘细胞 退变腰椎间盘 细胞体外培养 转染 HBMP-2 蛋白印迹法
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人工桡骨小头置换治疗不稳定Mason Ⅲ型桡骨小头骨折 被引量：5
13
作者 顾海伦 杨军 +2 位作者 王维 任德新 李赫 《创伤外科杂志》 2017年第7期538-539,共2页
采用解剖桡骨小头假体对18例成人不稳定MasonⅢ型骨折患者进行手术治疗,并同期修复韧带。术后VAS评分1(0.5~2)分,按照Morrey肘部功能评分标准进行评定,优14例,良3例,可1例。1例术后出现异位骨化和假体松动。桡骨小头假体置换同期修复韧... 采用解剖桡骨小头假体对18例成人不稳定MasonⅢ型骨折患者进行手术治疗,并同期修复韧带。术后VAS评分1(0.5~2)分,按照Morrey肘部功能评分标准进行评定,优14例,良3例,可1例。1例术后出现异位骨化和假体松动。桡骨小头假体置换同期修复韧带可以提高肘关节的稳定性,对成人粉碎严重、不稳定MasonⅢ型骨折的治疗非常适合。 展开更多
关键词 桡骨小头骨折 人工桡骨 置换
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锁定解剖钢板治疗经鹰嘴肘关节骨折脱位效果观察 被引量：1
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作者 顾海伦 杨军 +2 位作者 薛峰 王唯 李怀明 《创伤与急危重病医学》 2014年第3期146-148,共3页
目的探讨手术治疗经鹰嘴肘关节骨折脱位的疗效。方法12例患者车祸伤10例，高处坠落伤2例。其中闭合性损伤11例，开放损伤1例，合并韧带损伤1例，无血管损伤。外伤后5～7d肿胀消退后行切开复位内固定。结果术后随访17．2～37．2个月（平... 目的探讨手术治疗经鹰嘴肘关节骨折脱位的疗效。方法12例患者车祸伤10例，高处坠落伤2例。其中闭合性损伤11例，开放损伤1例，合并韧带损伤1例，无血管损伤。外伤后5～7d肿胀消退后行切开复位内固定。结果术后随访17．2～37．2个月（平均27．4个月），骨折均一期愈合。术后经Broberg—Momey肘关节功能评分，平均评分为88分。本组优8例，良2例，可2例；优良率为83。3％。结论经鹰嘴肘关节骨折脱位比较少见，重建肘关节对合关系和恢复冠状突形态是手术关键，只有稳定肘关节和早期功能锻炼才会获得满意疗效。 展开更多
关键词 肘关节 骨折脱位 鹰嘴 锁定解剖钢板
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PTEN基因表达在IIB期骨肉瘤生存分析中的意义 被引量：3
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作者 顾海伦 段景柱 +1 位作者 王欢 黄涛 《中国骨肿瘤骨病》 2008年第1期29-32,共4页
目的分析IIB期肢体骨肉瘤预后的相关因素,评价PTEN在IIB期骨肉瘤生存分析中的意义。方法收集1996～2001年IIB期肢体骨肉瘤资料完整病例标本64例,男38例,女26例,平均年龄21.4(7～52)岁。发病部位:肱骨近端10例,股骨远端28例,股骨近端3例... 目的分析IIB期肢体骨肉瘤预后的相关因素,评价PTEN在IIB期骨肉瘤生存分析中的意义。方法收集1996～2001年IIB期肢体骨肉瘤资料完整病例标本64例,男38例,女26例,平均年龄21.4(7～52)岁。发病部位:肱骨近端10例,股骨远端28例,股骨近端3例,胫骨近端23例。收集患者年龄、性别、组织分型、是否保肢治疗、是否术前化疗、是否规律化疗、肿瘤大小等临床相关因素。所有患者标本进行PTEN免疫组织化学研究,多因素统计生存分析。结果64例骨肉瘤患者中复发11例,其中截肢患者中仅1例复发,占4.17%;保肢患者中10例复发,占25%,差异有统计学意义(P<0.05)。规律化疗组38例中3例复发,占7.89%;非规律化疗组26例中8例复发,占30.76%,差异有统计学意义(P<0.05)。64例骨肉瘤患者中肺转移29例,PTEN表达与肺转移相关(P=0.001)。规律化疗组38例中11例复发,占28.94%;非规律化疗组26例中18例复发,占69.23%,差异有统计学意义(P<0.01)。Cox模型分析肿瘤体积大是危险因素,而规律化疗和PTEN免疫染色阳性是保护因素。Keplan-Meier分析骨肉瘤患者PTEN阳性和规律化疗者生存期长。结论PTEN染色阳性是骨肉瘤患者预后的保护性因素,规律化疗是改善肢体骨肉瘤患者预后的关键。 展开更多
关键词 骨肉瘤 化学疗法 PTEN 生存分析
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基于案例研究的2014年电商跨界营销“三问”
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作者 顾海伦 《上海经济》 2015年第8期58-61,共4页
跨界,顾名思义,需要跨出自己的圈子,越过行业的界限,去到别人的领域里去。跨界可以有很多的作为,跨界可以玩营销,跨界可以做设计,跨界可以学管理。跨界的目的也可以很多元,高调地＂赚眼球＂,纯粹地＂省费用＂,或者,就是简单地想从别的... 跨界,顾名思义,需要跨出自己的圈子,越过行业的界限,去到别人的领域里去。跨界可以有很多的作为,跨界可以玩营销,跨界可以做设计,跨界可以学管理。跨界的目的也可以很多元,高调地＂赚眼球＂,纯粹地＂省费用＂,或者,就是简单地想从别的领域吸引消费者,然后,轻松愉快地继续挣钱。说＂跨界营销＂是2014年最火的词是肯定错不了的,各行各界各个品牌都在削尖了脑袋想做别人家那个＂门口的野蛮人＂,借点人气,学点经验,顺带,把钱挣足。 展开更多
关键词 跨界营销 门口的野蛮人 别人家 削尖 互联网经济 案例研究 品牌创造 手机壳 营销费用 品牌知名度
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瘦素抵抗肥胖大鼠脂肪组织SOCS-3、PPARγ及ACO mRNA水平的探讨 被引量：10
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作者 刘莉 顾海伦 +5 位作者 赵越 于飞 任亚浩 马爽 陈丽丽 杨军 《卫生研究》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期40-42,共3页
目的观察高脂饮食诱导的肥胖瘦素抵抗大鼠细胞因子信号转导抑制因子-3(SOCS-3)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)及乙酰辅酶A氧化酶(ACO)mRNA表达水平的变化。方法30只Wistar雄性大鼠,6只为对照组喂饲基础饲料,24只为高脂组喂饲... 目的观察高脂饮食诱导的肥胖瘦素抵抗大鼠细胞因子信号转导抑制因子-3(SOCS-3)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)及乙酰辅酶A氧化酶(ACO)mRNA表达水平的变化。方法30只Wistar雄性大鼠,6只为对照组喂饲基础饲料,24只为高脂组喂饲高脂饲料,第8周末按体重增量从高脂组中筛选出8只大鼠作为肥胖组,测定对照组和肥胖组大鼠血清瘦素,附睾脂肪组织中SOCS-3,PPARγ以及ACO mRNA表达。结果肥胖组大鼠体重以及血清瘦素水平均显著高于对照组(P<0.05);肥胖组脂肪组织SOCS-3、PPARγ mRNA水平显著高于对照组(P<0.05),而ACO mRNA则显著低于对照组(P<0.05)。结论高脂饮食诱导的肥胖大鼠存在瘦素信号转导通路的抑制,脂肪酸氧化能力降低,脂肪合成能力增强。 展开更多
关键词 肥胖 瘦素抵抗 信号转导抑制因子-3 过氧化物酶体增殖物激活受体Γ 乙酰辅酶A氧化酶
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焦虑与腰椎间盘突出症术后疗效的关系 被引量：18
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作者 王欢 顾海伦 +1 位作者 段景柱 周凤华 《中国矫形外科杂志》 CAS CSCD 2004年第15期1137-1139,共3页
目的 :探讨焦虑与腰椎间盘突出症手术疗效的关系。方法 :记录 2 14例行手术治疗的腰椎间盘突出症患者的术前疼痛时间、腰腿痛程度和术前症状、体征评分。术前完成焦虑自评量表 (SAS) ,并按SAS评分分为焦虑组和非焦虑组。术后随访患者症... 目的 :探讨焦虑与腰椎间盘突出症手术疗效的关系。方法 :记录 2 14例行手术治疗的腰椎间盘突出症患者的术前疼痛时间、腰腿痛程度和术前症状、体征评分。术前完成焦虑自评量表 (SAS) ,并按SAS评分分为焦虑组和非焦虑组。术后随访患者症状、体征、生活能力及恢复工作情况。结果 :焦虑组和非焦虑组之间术前病程、总评分无统计学差异。焦虑组比非焦虑组术后有更频更重的疼痛 ,术后症状改善率和症状体症改善率差 (P <0 0 1) ,术后恢复工作能力差 (P <0 0 5 )。结论 :术前焦虑影响术后改善率 。 展开更多
关键词 腰椎 间盘 突出 焦虑
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采用PFN/PFNA治疗股骨粗隆下骨折的回顾性研究 被引量：22
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作者 杨军 高杨杨 +1 位作者 顾海伦 李建军 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期469-471,474,共4页
目的探讨采用闭合复位股骨近端髓内钉/股骨近端髓内钉螺旋刀片（PFN/PFNA）内固定治疗股骨粗隆下骨折的临床效果。方法收集2005年1月以来我科收治的股骨粗隆下骨折病例36例,其中男22例,女14例,年龄16~86岁（平均45岁）,Seinsheiner分型... 目的探讨采用闭合复位股骨近端髓内钉/股骨近端髓内钉螺旋刀片（PFN/PFNA）内固定治疗股骨粗隆下骨折的临床效果。方法收集2005年1月以来我科收治的股骨粗隆下骨折病例36例,其中男22例,女14例,年龄16~86岁（平均45岁）,Seinsheiner分型Ⅱ型4例（Ⅱ型A 1例,Ⅱ型B 2例,Ⅱ型C 1例）,Ⅲ型16例（Ⅲ型A 10例,Ⅲ型B 6例）,Ⅳ型10例,Ⅴ型6例。采用麻醉及C臂的帮助下牵引床闭合复位满意后,行PFN/PFNA内固定治疗。其中闭合复位32例,4例行有限切开复位。结果 34例患者获得随访,平均随访时间为18个月（3~36个月）,所有患者切口Ⅰ期愈合,均获得骨性愈合,平均愈合时间为4.5个月（3.5~7.5个月）。根据改良Harris髋关节评分标准进行功能评价：优25例,良5例,可4例,优良率88.2%。结论 PFN/PFNA治疗股骨粗隆下骨折,闭合复位,切开损伤小,术中出血少,有利于骨折的愈合,术后能辅以髋膝关节的早期功能锻炼减少骨折的并发症,同时又较易掌握,是治疗股骨粗隆下骨折较好的内固定选择。 展开更多
关键词 股骨粗隆下骨折 闭合复位 PFN/PFNA
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白藜芦醇对肥胖者骨性关节炎软骨细胞的作用及对TLR4、NF-κBmRNA表达的影响 被引量：15
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作者 焦永亮 刘慧敏 +4 位作者 顾海伦 李克雨 李星瑶 于晓璐 刘莉 《东南大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2015年第3期342-346,共5页
目的：探讨白藜芦醇是否可通过抑制TLR4/NF-κB信号通路发挥抗骨性关节炎的作用。方法：采用两步酶消化法分离培养肥胖者骨性关节炎软骨细胞。免疫细胞化学染色及甲苯胺蓝染色对细胞进行表型鉴定。应用MTT法测定白藜芦醇对软骨细胞增殖... 目的：探讨白藜芦醇是否可通过抑制TLR4/NF-κB信号通路发挥抗骨性关节炎的作用。方法：采用两步酶消化法分离培养肥胖者骨性关节炎软骨细胞。免疫细胞化学染色及甲苯胺蓝染色对细胞进行表型鉴定。应用MTT法测定白藜芦醇对软骨细胞增殖活力的影响。ELISA法检测细胞培养基上清TNF-α的水平。RT-PCR法检测TLR4、NF-κBm RNA表达水平。结果：软骨细胞Ⅱ型胶原免疫细胞化学染色及蛋白多糖甲苯胺蓝染色呈阳性。白藜芦醇浓度在6.25~100μmol·L-1时对细胞增殖均无抑制作用,其中低浓度的白藜芦醇（6.25~12.5μmol·L-1）能促进细胞增殖（P〈0.05）。IL-1β（10 ng·ml-1）能抑制细胞增殖（P〈0.05）。白藜芦醇浓度在6.25~12.5μmol·L-1时,对IL-1β诱导的细胞活力降低有显著抑制作用。相比对照组,IL-1β诱导组的培养基上清中TNF-α水平及软骨细胞TLR4、NF-κBm RNA表达均明显增加（P〈0.01）,而加入白藜芦醇（6.25~12.5μmol·L-1）处理后,TNF-α水平及TLR4、NF-κBm RNA表达均显著降低（P〈0.01）。结论：白藜芦醇可能通过抑制TLR4/NF-κB信号通路发挥抗骨性关节炎效应。 展开更多
关键词 软骨细胞 白藜芦醇 TOLL样受体4 骨性关节炎 肥胖
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