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重组布氏杆菌BP26蛋白和OMP31蛋白作为间接ELISA诊断抗原的研究 被引量：13
1
作者 陈伟业 王淑杰 +6 位作者 王永 胡森 王清华 辛九庆 佟有恩 黄克和 步志高 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期518-521,582,共5页
目的传统布氏杆菌病血清学方法因其抗原构成复杂,存在较严重的交叉免疫反应性,导致结果判定困难。BP26及OMP31分别为布氏杆菌细胞周质蛋白及外膜蛋白,在感染牛、绵羊、山羊、犬和人类均为优势免疫原,且在抗原性上具有较好的布氏杆菌种... 目的传统布氏杆菌病血清学方法因其抗原构成复杂,存在较严重的交叉免疫反应性,导致结果判定困难。BP26及OMP31分别为布氏杆菌细胞周质蛋白及外膜蛋白,在感染牛、绵羊、山羊、犬和人类均为优势免疫原,且在抗原性上具有较好的布氏杆菌种属特异性。方法以大肠杆菌表达、纯化的BP26和OMP31重组蛋白为包被抗原,初步建立了检测血清特异抗体的间接ELISA方法,并以现地牛布氏杆菌普查检测血清100份为样本,与传统的试管凝集试验进行了比较研究。结果试管凝集试验血清样本阳性率为15%(15/100);BP26包被抗原ELISA检测判为阳性的12个样本中有11为试管凝集反应阳性,相对阳性率为73.3%,二者阳性符合率为92%(11/12);而采用OMP31为包被抗原,阳性检出率为0(图5)。结论被检测区域阳性牛主要感染布氏杆菌为牛种布氏杆菌(B.abortus天然缺失OMP31基因);BP26作为间接ELISA包被抗原用于牛布氏杆菌血清学检测具有良好的特异性及较好的敏感性。 展开更多
关键词 布氏杆菌BP26 OMP31 间接ELISA 试管凝集试验
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IS711和omp2作为布氏杆菌种属及种株间分子鉴别诊断标记的研究 被引量：16
2
作者 陈伟业 胡森 +1 位作者 黄克和 步志高 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期676-680,共5页
布氏杆菌为世界性具重要公共卫生意义的人兽共患疫病原,分6个种。建立种间及种株间安全敏感、经济有效的快速鉴别诊断方法对布病防制及分子流行病学研究具有重要意义。布氏杆菌IS711和omp2基因具有种属特异性,可用于布氏杆菌的PCR分子... 布氏杆菌为世界性具重要公共卫生意义的人兽共患疫病原,分6个种。建立种间及种株间安全敏感、经济有效的快速鉴别诊断方法对布病防制及分子流行病学研究具有重要意义。布氏杆菌IS711和omp2基因具有种属特异性,可用于布氏杆菌的PCR分子诊断。其中IS711为转座因子,在不同种布菌种存在插入位置的多态性,外膜蛋白OMP2编码基因则存在反向重复序列及种株间的多态性。为此,分别采用复式—PCR、PCR和限制性酶切片段长多态性(RFLP)分析,对分属于B．melitensis、B．suis和B．abortus的不同种布氏杆菌的不同种株,M5、M16、S2、S6和S19进行分子鉴别诊断。结果显示,根据IS711基因特定PCR扩增片段长多态性,可进行布氏杆菌种间的快速鉴别；而omp2编码基因PCR扩增片段PstⅠ、KpnⅠ、NcoⅠ和Eco47Ⅲ等4种限制酶片段长多态性,则可成为布氏杆菌菌株间特异的分子鉴别诊断标记,甚至疫苗株M5和野毒株M16之间的分子诊断标记。 展开更多
关键词 布氏杆菌 分子标记 IS711 omp2 限制性酶切片段长多态性(RFLP)
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重组杆状病毒表达牛β干扰素及其生物学活性研究 被引量：4
3
作者 陈伟业 肇慧君 +5 位作者 王喜军 黄克和 步志高 曹文雁 葛金英 温志远 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期992-996,共5页
本研究构建了表达牛β干扰素的重组杆状病毒,感染sf9细胞后,分别采用免疫荧光和免疫印迹证实了重组BoIFN-β的表达存在于细胞内和培养上清中。采用表达绿色荧光蛋白的水疱性口炎病毒(VSV*GFP)检测分泌到细胞上清中重组BoIFN-β的抗病毒... 本研究构建了表达牛β干扰素的重组杆状病毒,感染sf9细胞后,分别采用免疫荧光和免疫印迹证实了重组BoIFN-β的表达存在于细胞内和培养上清中。采用表达绿色荧光蛋白的水疱性口炎病毒(VSV*GFP)检测分泌到细胞上清中重组BoIFN-β的抗病毒活性,可达到106.0AU/mL。同时重组BoIFN-β还可以激活鸡Mx启动子控制的萤光素酶报告基因的转录表达。综上,本研究采用杆状病毒表达系统,重组牛β干扰素以分泌形式高水平表达,且具有天然Ⅰ型干扰素的生物学活性。 展开更多
关键词 牛β干扰素 抗病毒活性 Mx启动子 重组杆状病毒
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基于Mx启动子和荧光素酶报告基因定量检测鸡Ⅰ型干扰素生物学活性的研究 被引量：4
4
作者 陈伟业 葛金英 +6 位作者 肇慧君 胡森 温志远 曹文雁 王喜军 黄克和 步志高 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期123-128,共6页
为了探索并建立快速、敏感、准确的Ⅰ型干扰素生物学活性定量分析方法,本研究克隆了鸡Mx启动子(Mxp),并在其下游连接荧光素酶(Luciferase,luc)报告基因,构建鸡Ⅰ型干扰素活性检测质粒pMxp-luc。以pMxp-luc瞬时转染鸡胚成纤维细胞系DF-1,... 为了探索并建立快速、敏感、准确的Ⅰ型干扰素生物学活性定量分析方法,本研究克隆了鸡Mx启动子(Mxp),并在其下游连接荧光素酶(Luciferase,luc)报告基因,构建鸡Ⅰ型干扰素活性检测质粒pMxp-luc。以pMxp-luc瞬时转染鸡胚成纤维细胞系DF-1,24 h后用鸡IFN-α/β处理细胞,结果荧光素酶基因在Mx启动子的作用下获得转录表达;荧光素酶的表达量与干扰素的抗病毒活性有着良好的线性相关性,并在干扰素处理细胞6 h后就可以检测;对鸡IFN-α和IFN-β检测的敏感性分别约为抗病毒活性定量检测方法的10和100倍。该检测系统与传统抗病毒定量检测方法相比,具有快速简便、准确敏感、便于高通量检测等优势,在禽类乃至哺乳动物干扰素生物学基础和应用研究及产业化过程中具有重要应用价值。 展开更多
关键词 鸡Ⅰ型干扰素 生物活性检测 鸡Mx启动子 萤光素酶
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基于语音控制的声源定位演示实验仪 被引量：1
5
作者 陈伟业 杨烁星 许凌云 《大学物理实验》 2024年第4期69-72,共4页
基于TC264微处理器自主设计了一款语音控制的声源定位演示仪。采用3D建模软件creo3设计并打印了新型麦克风阵列拓扑结构,将麦克风阵列采集到的声源信息传输到TC264微处理器中,应用时延估计算法(TDOA)实现了声源准确定位,并采用LD3320芯... 基于TC264微处理器自主设计了一款语音控制的声源定位演示仪。采用3D建模软件creo3设计并打印了新型麦克风阵列拓扑结构,将麦克风阵列采集到的声源信息传输到TC264微处理器中,应用时延估计算法(TDOA)实现了声源准确定位,并采用LD3320芯片对声音进行识别,实现了对整个系统的辅助人声控制。同时在上位机中利用QT(应用程序开发框架)开发了一款windows系统下用于上位和底层平台进行交互的应用软件,实现了串口通信助手、多通道声音波形显示、定位结果显示等多种功能。 展开更多
关键词 TC264 TDOA算法 麦克风阵列 声源定位 语音控制
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等径PVC三通管局部水头损失系数试验研究 被引量：7
6
作者 陈伟业 吕宏兴 +1 位作者 石喜 周晋军 《灌溉排水学报》 CSCD 北大核心 2013年第1期128-130,共3页
基于水力学基本原理,对竖直管进水等径PVC三通管的局部损失进行了试验研究。分析了局部损失系数与入口雷诺数之间的相关关系。结果表明,随着雷诺数的增加,局部损失系数先减小再增大,呈良好的二次抛物线关系。
关键词 PVC三通管 局部阻力系数 水头损失 雷诺数 试验
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SiO_2对低温烧结压电陶瓷PMNNS的性能影响 被引量：3
7
作者 陈伟业 刘彭义 +1 位作者 林彩平 常鹏 《人工晶体学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2012年第1期141-145,共5页
在烧结温度为1020℃下,采用固相二步合成法制备了Pb(Ni1/3Nb2/3)0.05(Mn1/3Nb2/3)0.04(Mn1/3Sb2/3)0.01(Zr1/2Ti1/2)0.9O3(PMNNS)压电陶瓷,研究了加入不同掺杂量的SiO2对陶瓷的结构与机电性能的影响。结果表明:加入SiO2可以明显地降低... 在烧结温度为1020℃下,采用固相二步合成法制备了Pb(Ni1/3Nb2/3)0.05(Mn1/3Nb2/3)0.04(Mn1/3Sb2/3)0.01(Zr1/2Ti1/2)0.9O3(PMNNS)压电陶瓷,研究了加入不同掺杂量的SiO2对陶瓷的结构与机电性能的影响。结果表明:加入SiO2可以明显地降低烧结温度;而且当SiO2的掺杂量为0.1%时,陶瓷的性能最佳,其性能如下:d33=331 pC/N,tanδ=0.0041,kp=0.62,Qm=1326,εr=917。 展开更多
关键词 压电陶瓷 PMNNS 低温烧结 SIO2
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结合压缩感知与非局部信息的图像超分辨率重建 被引量：5
8
作者 陈伟业 孙权森 《计算机应用》 CSCD 北大核心 2016年第9期2570-2575,共6页
针对现有的超分辨率重建算法只考虑图像块的灰度信息,而忽略了纹理信息,并且大多数非局部方法在强调非局部信息的同时,没有考虑局部信息的问题,提出一种结合压缩感知与非局部信息的图像超分辨率重建算法。首先,根据图像块的结构特征计... 针对现有的超分辨率重建算法只考虑图像块的灰度信息,而忽略了纹理信息,并且大多数非局部方法在强调非局部信息的同时,没有考虑局部信息的问题,提出一种结合压缩感知与非局部信息的图像超分辨率重建算法。首先,根据图像块的结构特征计算像素之间的相似性,同时考虑了图像块的灰度信息和纹理信息;然后,合并图像的局部和非局部信息来估计相似像素的权重,构造结合局部和非局部信息的正则项;最后,将图像的非局部信息引入到压缩感知框架中,通过迭代收缩算法求解稀疏表示系数。实验结果表明,所提算法与现有的基于学习的超分辨率算法相比,重建图像的峰值信噪比和结构相似度取值更高,并且在恢复图像纹理细节的同时有效抑制了噪声。 展开更多
关键词 超分辨率重建 压缩感知 非局部信息 稀疏表示 结构特征
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猪γ-干扰素在重组杆状病毒中的表达及其抗病毒活性的测定 被引量：8
9
作者 秦立廷 王喜军 +5 位作者 胡森 李志中 陈伟业 葛金英 刘思当 步志高 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期386-391,共6页
研究利用Bac-To-Bac杆状病毒表达系统构建含有猪γ-干扰素(porcine interferon-γ,PoIFN-γ)完整开放阅读框的供体质粒pFastBacTM1-PoIFN-γ,转化DH10Bac感受态细胞获得重组穿梭质粒rBacmid-PoIFN-γ,转染sf9昆虫细胞救获表达PoIFN-γ... 研究利用Bac-To-Bac杆状病毒表达系统构建含有猪γ-干扰素(porcine interferon-γ,PoIFN-γ)完整开放阅读框的供体质粒pFastBacTM1-PoIFN-γ,转化DH10Bac感受态细胞获得重组穿梭质粒rBacmid-PoIFN-γ,转染sf9昆虫细胞救获表达PoIFN-γ的重组杆状病毒rBac-PoIFN-γ。以抗PoIFN-γ单克隆抗体为一抗进行Western blot、间接免疫荧光(IFA)及间接ELISA检测,结果表明PoIFN-γ在重组杆状病毒rBac-PoIFN-γ感染的昆虫细胞中获得正确表达。抗病毒活性试验显示,重组杆状病毒表达rPoIFN-γ能有效抑制水疱性口炎病毒(VSV)在猪肾细胞系(PK-15)的复制,rBac-PoIFN-γ感染昆虫细胞培养上清抗病毒活性为2×104抑制单位(IU)/mL,其抗病毒活性可以被鼠抗原核表达重组PoIFN-γ免疫血清有效阻断。结果表明rPoIFN-γ在重组杆状病毒rBac-PoIFN-γ在感染昆虫细胞获得有效表达,并具有高效抗病毒活性。 展开更多
关键词 Γ-干扰素 猪 重组杆状病毒 抗病毒活性
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牛γ-干扰素在重组杆状病毒中的表达及其抗病毒活性的测定 被引量：8
10
作者 秦立廷 王喜军 +5 位作者 胡森 刘思当 步志高 李志中 陈伟业 葛金英 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期503-507,共5页
研究利用Bac-To-Bac杆状病毒表达系统构建含有牛γ-干扰素(Bovine interferon-γ,BoIFN-γ)完整开放阅读框的供体质粒pFastBacTM1-BoIFN-γ,转化DH10Bac感受态细胞获得重组穿梭质粒rBacmid-BoIFN-γ,转染sf9昆虫细胞救获表达BoIFN-γ的... 研究利用Bac-To-Bac杆状病毒表达系统构建含有牛γ-干扰素(Bovine interferon-γ,BoIFN-γ)完整开放阅读框的供体质粒pFastBacTM1-BoIFN-γ,转化DH10Bac感受态细胞获得重组穿梭质粒rBacmid-BoIFN-γ,转染sf9昆虫细胞救获表达BoIFN-γ的重组杆状病毒rBac-BoIFN-γ。采用抗BoIFN-γ单克隆抗体作为一抗进行间接免疫荧光(IFA)及间接ELISA检测,表明BoIFN-γ在重组杆状病毒rBac-BoIFN-γ感染的sf9昆虫细胞中获得正确表达。利用VSV*GFP-MDBK细胞系统测定rBoIFN-γ抗病毒活性,重组杆状病毒表达重组BoIFN-γ(rBoIFN-γ)能有效抑制水疱性口炎病毒(VSV)在牛肾细胞(MDBK)上的复制,rBac-BoIFN-γ感染sf9昆虫细胞上清抗病毒活性为2×105IU/mL,而且其抗病毒活性可以被鼠抗原核表达重组BoIFN-γ免疫血清阻断。结果表明:rBoIFN-γ在重组杆状病毒rBac-BoIFN-γ感染的sf9昆虫细胞中获得良好表达,并具有高效抗病毒活性。 展开更多
关键词 Γ-干扰素 牛 重组杆状病毒 抗病毒活性
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韩氏穴位神经刺激仪对异氟醚吸入麻醉术后躁动的影响 被引量：2
11
作者 陈伟业 张立贤 曹阳 《暨南大学学报（自然科学与医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期594-597,共4页
目的:评价韩氏穴位神经刺激仪经皮穴位电刺激对异氟醚吸入麻醉术后躁动的影响。方法:择期行功能性鼻内窥镜手术患者80例,随机分为对照组(C组,n=40)和电刺激组(H组,n=40),H组患者予持续经皮穴位电刺激,从术前30 min直至术毕30 min。两组... 目的:评价韩氏穴位神经刺激仪经皮穴位电刺激对异氟醚吸入麻醉术后躁动的影响。方法:择期行功能性鼻内窥镜手术患者80例,随机分为对照组(C组,n=40)和电刺激组(H组,n=40),H组患者予持续经皮穴位电刺激,从术前30 min直至术毕30 min。两组患者均予丙泊酚、芬太尼、维库溴铵静脉诱导后气管插管,术中吸入异氟醚、一氧化二氮维持麻醉。围术期监测患者平均动脉压(MAP)、心率(HR)、脉搏血氧饱和度(SpO2)等指标,观察患者术后躁动的发生率及躁动程度,并依次评估拔管即时、拔管后5、10、15、30 min各时点的Riker镇静-躁动评分(SAS)和视觉模拟评分(VAS)。结果:H组患者术后躁动的发生率低于C组(P<0.05);H组患者术后VAS评分和SAS评分均低于C组(P<0.01);与H组相比,C组患者拔管即时MAP、HR升高幅度更明显(P<0.05)。结论:韩氏穴位神经刺激仪经皮穴位电刺激可减轻异氟醚吸入麻醉的术后躁动。 展开更多
关键词 韩氏穴位神经刺激仪 异氟醚 吸入麻醉 术后躁动
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表达小反刍兽疫病毒F蛋白的重组山羊痘病毒疫苗的研究 被引量：6
12
作者 曲林茂 陈伟业 +5 位作者 胡倩倩 胡森 张倩 支海兵 黄克和 步志高 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期415-420,共6页
本研究利用gpt筛选基因和eGFP报告基因纯化筛选重组小反刍兽疫病毒(PPRV)F基因的重组山羊痘病毒(rGPV-PPRV-F),并经过PCR鉴定。免疫荧光和蛋白印迹试验都证实重组病毒能够感染绵羊羔羊睾丸细胞并表达PPRVF蛋白。以2×106PFU的rGPV-P... 本研究利用gpt筛选基因和eGFP报告基因纯化筛选重组小反刍兽疫病毒(PPRV)F基因的重组山羊痘病毒(rGPV-PPRV-F),并经过PCR鉴定。免疫荧光和蛋白印迹试验都证实重组病毒能够感染绵羊羔羊睾丸细胞并表达PPRVF蛋白。以2×106PFU的rGPV-PPRV-F皮内注射免疫山羊3只,并于首次免疫后第28d以相同剂量进行二次免疫。分别于一免后21d和二免后14d采血后分离血清进行病毒中和试验。结果表明,一免后21d山羊痘病毒(GPV)中和抗体效价依次为1∶40、≥1∶80、≥1∶80,PPRV中和抗体效价依次别为1∶20、1∶40、1∶20,全部阳转;二免后14d,GPV中和抗体效价≥1∶80,PPRV中和抗体效价依次为1∶20、1∶80、1∶40。本研究为小反刍兽疫重组山羊痘疫苗的产业化奠定了基础。 展开更多
关键词 小反刍兽疫 F蛋白 山羊痘病毒载体 重组疫苗 中和抗体
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稳定表达山羊SLAM受体的BHK-21细胞系的建立及应用 被引量：3
13
作者 张家林 李翠翠 +3 位作者 谢梅梅 王子龙 陈伟业 步志高 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期506-509,共4页
信号淋巴激活分子(SLAM)又称为CD150,是小反刍兽疫病毒(PPRV)和犬瘟热病毒(CDV)等麻疹病毒属病毒感染淋巴细胞的主要受体,在病毒侵入细胞中发挥重要作用。为建立稳定表达山羊SLAM(g SLAM)的真核细胞系,本研究将人工合成的g SLAM基因克... 信号淋巴激活分子(SLAM)又称为CD150,是小反刍兽疫病毒(PPRV)和犬瘟热病毒(CDV)等麻疹病毒属病毒感染淋巴细胞的主要受体,在病毒侵入细胞中发挥重要作用。为建立稳定表达山羊SLAM(g SLAM)的真核细胞系,本研究将人工合成的g SLAM基因克隆至真核表达质粒p IRESpuro3中,并在该基因的3'端引入Flag标签序列作为分子标记,构建了重组质粒p IRES3-g SLAM。将该重组质粒转染BHK-21细胞,经嘌呤霉素加压筛选及采用表达绿色荧光蛋白(GFP)的重组PPRV病毒(r PPRV/GFP)感染鉴定后,筛选到稳定表达g SLAM基因的细胞系。r PPRV/GFP感染和western blot鉴定表明,无论是否有嘌呤霉素压力的存在,该细胞系在传代至第20代,仍能稳定表达g SLAM蛋白。由于g SLAM氨基酸序列与犬的同源性较高,以表达GFP重组CDV强毒株(r CDV/GFP)感染该细胞系,病毒可以感染且能形成明显的细胞病变,表明该细胞系可用于CDV强毒分离和致弱机制等相关研究。 展开更多
关键词 信号淋巴细胞激活分子 BHK-21细胞 小反刍兽疫 犬瘟热 病毒分离
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重组马γ-干扰素抗病毒活性测定及单克隆抗体抑制活性鉴定 被引量：2
14
作者 白宇 陈伟业 +7 位作者 童铁钢 张维军 徐树兰 王群 孙庆歌 刘光亮 步志高 吴东来 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第7期1258-1262,共5页
为了测定大肠杆菌和杆状病毒表达的重组马γ-干扰素是否具有抗病毒活性,利用这两种干扰素处理马胎肾细胞(EFK-78),然后接种表达绿色荧光蛋白(GFP)的重组水泡性口炎病毒(VSV*GFP),观察干扰素对病毒表达GFP的抑制,测出其抗病毒活性单位分... 为了测定大肠杆菌和杆状病毒表达的重组马γ-干扰素是否具有抗病毒活性,利用这两种干扰素处理马胎肾细胞(EFK-78),然后接种表达绿色荧光蛋白(GFP)的重组水泡性口炎病毒(VSV*GFP),观察干扰素对病毒表达GFP的抑制,测出其抗病毒活性单位分别为1×103AU/mL、1×105AU/mL。评价了制备的九株抗重组马γ-干扰素单克隆抗体是否可抑制重组马γ-干扰素抗病毒活性,证实其中一株可中和重组马γ-干扰素的抗病毒活性。结果表明:杆状病毒表达的马γ-干扰素具有较高的抗病毒活性,其活性可被一株制备的抗重组马γ-干扰素单克隆抗体抑制;首次获得原核表达的具有抗病毒活性的马γ-干扰素。 展开更多
关键词 马γ-干扰素 抗病毒活性测定 单克隆抗体
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稳定表达小反刍兽疫病毒N蛋白的CHO细胞系的建立及表达产物的抗原性鉴定 被引量：2
15
作者 李翠翠 孙一瑞 +2 位作者 王子龙 陈伟业 步志高 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期262-265,共4页
为制备具有天然抗原活性的小反刍兽疫病毒(PPRV)核衣壳(N)蛋白,本研究建立了稳定表达PPRV N蛋白的真核细胞系。首先,将去除核定位信号(NLS)编码序列并且在其5'端引入组织纤维蛋白溶酶原抗原信号肽(tPA SP)编码序列的PPRV N基因克隆... 为制备具有天然抗原活性的小反刍兽疫病毒(PPRV)核衣壳(N)蛋白,本研究建立了稳定表达PPRV N蛋白的真核细胞系。首先,将去除核定位信号(NLS)编码序列并且在其5'端引入组织纤维蛋白溶酶原抗原信号肽(tPA SP)编码序列的PPRV N基因克隆至真核表达质粒pCAGG-neo中,构建了重组质粒pCAGG-N△NLS/his。并将其转染于CHO细胞中,经G418压力培养并采用间接免疫荧光试验(IFA)及western blot试验筛选鉴定,获得稳定表达PPRV N蛋白的细胞系。通过IFA及western blot试验鉴定His标签表明该细胞系传代至22代仍能够稳定表达PPRV N蛋白。最后通过western blot等试验表明该蛋白能够与绵羊抗PPRV多克隆抗体反应,进一步表明该细胞系表达的PPRV N蛋白具有天然的N蛋白抗原性,为PPRV病原学诊断等相关研究奠定了基础。 展开更多
关键词 小反刍兽疫 核衣壳蛋白 CHO细胞 细胞系
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抗鸡γ-干扰素单克隆抗体的制备及定量ELISA方法的建立 被引量：3
16
作者 李志中 秦立廷 +4 位作者 王喜军 陈伟业 范蕾 李培锋 步志高 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第11期891-895,共5页
将原核表达重组鸡γ-干扰素（rChIFN-γ）以100μg/只剂量免疫8周龄BALB／c小鼠，4次免疫后进行细胞融合，以昆虫细胞表达重组鸡γ-干扰素为检测抗原，筛选出阳性克隆株，经有限稀释，获得1株稳定分泌抗鸡γ-干扰素单克隆抗体的杂交瘤... 将原核表达重组鸡γ-干扰素（rChIFN-γ）以100μg/只剂量免疫8周龄BALB／c小鼠，4次免疫后进行细胞融合，以昆虫细胞表达重组鸡γ-干扰素为检测抗原，筛选出阳性克隆株，经有限稀释，获得1株稳定分泌抗鸡γ-干扰素单克隆抗体的杂交瘤细胞株，分泌抗体亚型为IgG1型，轻链为K链，命名为G1株。Western blot检测显示，该单克隆抗体与原核表达和昆虫细胞表达的rCbIFN-γ均具有良好的免疫反应原性。昆虫细胞表达rChIFN-γ经该G1单克隆抗体作用后，失去抑制水疱性口炎病毒（VSV）在鸡胚成纤维细胞（CEF）复制的能力？利用纯化的单克隆抗体和昆虫细胞表达rChIFN-γ建立相对定量ELISA检测方法，取吸光度值（Y）对昆虫细胞表达rChIFN-γ的抗病毒活性单位对数（X）作回归曲线，回归方程为Y=0．1164^＊X-0．1281，回归系数R=0.9539，具有良好的线性关系. 展开更多
关键词 鸡γ-干扰素 单克隆抗体
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鸡SIgA重链单克隆抗体的制备及新城疫病毒和禽流感病毒特异黏膜SIgA检测方法的建立 被引量：1
17
作者 肇慧君 陈伟业 +2 位作者 葛金英 王喜军 步志高 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期138-142,共5页
为建立快速检测禽类黏膜组织中SIgA含量的方法,本研究原核重组表达鸡SIgA重链片段蛋白,纯化后免疫BALB/c鼠。以鸡胆汁中分离纯化的SIgA作为检测抗原,常规单克隆技术筛选出1株能够稳定分泌抗鸡SIgA单克隆抗体(MAb)的IgG2a、κ型MAb。经EL... 为建立快速检测禽类黏膜组织中SIgA含量的方法,本研究原核重组表达鸡SIgA重链片段蛋白,纯化后免疫BALB/c鼠。以鸡胆汁中分离纯化的SIgA作为检测抗原,常规单克隆技术筛选出1株能够稳定分泌抗鸡SIgA单克隆抗体(MAb)的IgG2a、κ型MAb。经ELISA和western blot分析,所获得的1株MAb亲和力高、特异性强;采用生物素标记纯化MAb腹水IgG为检测二抗,以禽流感-新城疫重组二联活载体疫苗免疫SPF鸡为模型,初步建立了新城疫病毒和H5亚型禽流感病毒特异的黏膜SIgA间接ELISA检测方法。本研究为开展特异性家禽黏膜免疫机制的研究提供了重要技术手段。 展开更多
关键词 SIGA 单克隆抗体 新城疫病毒 H5亚型禽流感病毒 ELISA
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生物电阻抗法测量18~42岁成人四肢骨骼肌质量的准确性评价 被引量：3
18
作者 郑伊迎 程红 +5 位作者 邝玉娴 马振新 陈伟业 卢可缘 米杰 刘丽 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2024年第4期549-553,共5页
目的评价生物电阻抗法(bioelectrical impedance analysis,BIA)测量成人四肢骨骼肌质量(appendicular skeletal muscle mass,ASM)的准确性。方法采用方便抽样法,于2021年4月至2022年9月在广州全市招募836名18~42岁成人,采用BIA与双能X... 目的评价生物电阻抗法(bioelectrical impedance analysis,BIA)测量成人四肢骨骼肌质量(appendicular skeletal muscle mass,ASM)的准确性。方法采用方便抽样法,于2021年4月至2022年9月在广州全市招募836名18~42岁成人,采用BIA与双能X线吸收法(dual-energy X-ray absorptiometry,DXA)同步检测ASM。以DXA为标准方法,通过组内相关系数以及在对数变换数据中进行Bland-Altman分析判断BIA与DXA所测值的一致性,以此评价BIA测量ASM的准确性。绘制受试者工作特征曲线,评价BIA识别低肌肉质量的诊断价值。结果最终纳入774名研究对象。男、女性中两法所测ASM组内相关系数分别为0.774和0.667。男、女性中BIA与DXA所测ASM比值均值(一致性限)分别为0.94(0.80~1.10)和0.91(0.78~1.05)。BIA识别男、女性低肌肉质量的曲线下面积分别0.91和0.94。BIA判断男、女性低肌肉质量的Z值最佳界值分别为-0.57和-0.66,男性中BIA识别低肌肉质量的灵敏度、特异度分别为82.5%、86.0%,女性中分别为86.8%、93.8%。结论BIA与DXA所测成人四肢骨骼肌质量的一致性尚可,且BIA识别18~42岁成人低肌肉质量的诊断价值较好。 展开更多
关键词 生物电阻抗法 双能X线吸收法 四肢骨骼肌质量 低肌肉质量
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客户经理营销管理对我国商业银行的影响 被引量：1
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作者 陈伟业 彭云 《华南金融研究》 2001年第2期14-16,共3页
面对加入ＷＴＯ所带来的严峻挑战，国有商业银行必须转变经营机制，进行制度创新。其中，建立以客户为中心的经营机制，并在此基础上全面推行客户经理制就是较好的一种制度选择。可以说，商业银行实施客户经理制是中国金融体系向国际化... 面对加入ＷＴＯ所带来的严峻挑战，国有商业银行必须转变经营机制，进行制度创新。其中，建立以客户为中心的经营机制，并在此基础上全面推行客户经理制就是较好的一种制度选择。可以说，商业银行实施客户经理制是中国金融体系向国际化发展的必然趋势。 展开更多
关键词 商业银行 客户经理制 中国 客户经理营销管理 客户金融风险 个人金融业务
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漫湾工程大坝接缝的全年冷却灌浆施工
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作者 陈伟业 李焰 《水利水电技术》 CSCD 北大核心 1995年第11期32-36,共5页
漫湾水电站工程大坝接缝灌浆工程量大，施工期短，按传统习惯只在冬春低温季节进行接缝灌浆施工难以完成，将影响第一台机组的蓄水发电．在考虑了坝体混凝土水化热逐渐消失后，影响和决定坝体温度的主要因素是气温和水温，以及坝体温度... 漫湾水电站工程大坝接缝灌浆工程量大，施工期短，按传统习惯只在冬春低温季节进行接缝灌浆施工难以完成，将影响第一台机组的蓄水发电．在考虑了坝体混凝土水化热逐渐消失后，影响和决定坝体温度的主要因素是气温和水温，以及坝体温度与气温滞后的变化规律，和漫湾地区全年气候温和，多年平均气温和水温不高的有利条件，确定对坝体接缝实施全年通水冷却灌浆施工．从通水冷却时间及坝体降温速度、接缝开合度的变化和灌区耗灰量大小的比较可知，夏秋高温季节与冬春低温季节之间无大差异．经测缝计监测、钻孔取芯压水试验和外观渗漏检查表明，全年通水冷却灌浆施工效果是好的，满足了设计要求． 展开更多
关键词 大坝 接缝 冷却灌浆 工程施工 水电站
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