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miR-145a-5p调控慢性间歇性低氧诱导脂肪细胞炎症和凋亡的机制
1
作者 徐漫欢 任锡凯 +3 位作者 周娈 赵伊敏 余珏珂 苏苗赏 《温州医科大学学报》 2025年第3期173-178,共6页
目的:探究miR-145a-5p基因表达对慢性间歇性低氧(CIH)诱导脂肪细胞炎症和凋亡的影响及分子调控机制,并探索其可能的靶向结合基因通路。方法:体外培养3T3-L1前脂肪细胞,经7 d诱导分化后分为对照组和CIH组,并予相应处理。油红O染色观察细... 目的:探究miR-145a-5p基因表达对慢性间歇性低氧(CIH)诱导脂肪细胞炎症和凋亡的影响及分子调控机制,并探索其可能的靶向结合基因通路。方法:体外培养3T3-L1前脂肪细胞,经7 d诱导分化后分为对照组和CIH组,并予相应处理。油红O染色观察细胞形态与脂滴情况;q-PCR法检测miR-145a-5p基因表达;构建miR-145a-5p-mimic转染细胞后,流式细胞仪检测细胞凋亡率;ELISA法检测细胞上清液中IL-1β和IL-10水平;Western blot法检测p-AMPK、成纤维细胞生长因子4(FGF4)及凋亡相关蛋白表达情况。双荧光素酶实验检测miR-145a-5p与FGF4的靶向关系。结果:与对照组相比,CIH组细胞的miR-145a-5p基因表达下降(P<0.05),IL-1β和IL-10水平上升(P<0.05),p-AMPK、FGF4、Bcl-2蛋白表达降低(P<0.05);转染后,转染组与CIH组相比,细胞凋亡率升高(P<0.01),Bcl-2蛋白表达、Bax/Bcl-2比值及FGF4蛋白表达升高(P<0.05),IL-1β水平降低(P<0.05)。双荧光素酶报告FGF4-WT+miR-145a-5p与FGF4-WT相比差异有统计学意义(P<0.01)。结论:miR-145a-5p在脂肪细胞的表达受CIH影响,且对脂肪细胞炎症及凋亡有调节作用,该作用可能通过与FGF4靶向结合而实现。 展开更多
关键词 慢性间歇性低氧 脂肪细胞 炎症反应 凋亡 miR-145a-5p
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铜绿假单胞菌感染支气管上皮细胞诱导铁死亡及丁酸钠的免疫调控作用
2
作者 周娈 何一帆 +4 位作者 赵伊敏 任锡凯 耿轩 黄楠 苏苗赏 《温州医科大学学报》 CAS 2024年第7期554-562,共9页
目的:探究铜绿假单胞菌(PA)感染对人支气管上皮细胞(BEAS-2B)铁死亡与炎症反应的诱导作用及丁酸钠(NaB)对炎症的调节作用。方法:体外培养BEAS-2B细胞,加入不同浓度NaB后通过CCK-8筛选其安全浓度和作用时间,Westernblot检测酰基辅酶A合... 目的:探究铜绿假单胞菌(PA)感染对人支气管上皮细胞(BEAS-2B)铁死亡与炎症反应的诱导作用及丁酸钠(NaB)对炎症的调节作用。方法:体外培养BEAS-2B细胞,加入不同浓度NaB后通过CCK-8筛选其安全浓度和作用时间,Westernblot检测酰基辅酶A合成酶长链家族成员4(ACSL4)、磷酸化蛋白激酶B(P-AKT)蛋白表达水平,确定NaB的用药条件。PA感染BEAS-2B细胞(MOI=1)不同时间后,CCK-8检测细胞存活率,倒置显微镜观察细胞形态变化,透射电镜观察细胞线粒体形态变化,二价铁离子探针检测细胞内Fe^(2+)水平;加入NaB预处理后,BODIPY581/591C11荧光探针检测细胞内脂质过氧化水平,Westernblot检测ACSL4、P-AKT、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)蛋白表达水平;加入ACSL4抑制剂吡格列酮(PIO)后,Westernblot验证其抑制效果,ELISA检测各组细胞上清液中炎症因子水平变化。结果:NaB对BEAS-2B细胞的安全浓度在2.5mmol/L以下,2.5mmol/LNaB处理细胞36h后,ACSL4和P-AKT蛋白表达水平显著下降(P<0.05)。PA感染BEAS-2B细胞后细胞存活率显著降低(P<0.05);细胞形态变为圆形;线粒体体积变小、膜密度增高,嵴减少甚至消失;胞内Fe^(2+)和脂质过氧化水平显著升高(P<0.05);细胞ACSL4和P-AKT蛋白表达水平上升(P<0.05),GPX4蛋白表达水平显著下降(P<0.05)。NaB预处理细胞后,与PA组相比ACSL4和P-AKT蛋白的表达水平下降(P<0.05),对GPX4蛋白的降低及胞内脂质过氧化水平为促进作用。ELISA检测结果显示,与对照组相比,PA感染后IL-6、IL-8、IL-1β和TNF-α水平显著上升(P<0.05),IL-10水平轻微下降(P<0.05);NaB或PIO预处理后,IL-6、IL-8、IL-1β和TNF-α水平均显著下降(P<0.05),IL-10水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论:PA感染导致支气管上皮细胞内Fe^(2+)及脂质过氧化物的积累从而发生铁死亡并引起炎症反应,NaB可能通过抑制ACSL4和AKT磷酸化途径起到免疫调节作用。 展开更多
关键词 铜绿假单胞菌 支气管上皮细胞 铁死亡 丁酸钠 炎症因子
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气候条件变化下环境中抗生素抗性基因研究
3
作者 赵伊敏 代朝猛 +4 位作者 游学极 赖小莹 童汪凯 张亚雷 刘曙光 《环境科学与技术》 CAS CSCD 北大核心 2023年第S02期177-183,共7页
抗生素滥用导致抗性基因(ARGs)的丰度不断上升,许多抗生素的治疗效果明显下降,给全球带来了日益严重的医疗危机。同时全球气候变化进程仍在持续,并且势必对ARGs的赋存和传播带来一定影响。然而,现有研究很少系统地总结气候变化对ARGs的... 抗生素滥用导致抗性基因(ARGs)的丰度不断上升,许多抗生素的治疗效果明显下降,给全球带来了日益严重的医疗危机。同时全球气候变化进程仍在持续,并且势必对ARGs的赋存和传播带来一定影响。然而,现有研究很少系统地总结气候变化对ARGs的影响。该文基于已有研究,着重对季节性、降雨、极端天气等气候因素进行分析,综述了这些因素对ARGs丰度的影响,并对这些影响背后的机理进行了探讨,发现季节主要通过影响处方率和温度来影响ARGs丰度,而降雨则会促进ARGs从空气到土壤和水体的传播,同样地,洪水等极端天气也有利于ARGs的传播,因此得出全球气候变化导致的气温升高、降雨和极端天气增多很可能会提高环境中ARGs的丰度并增加人体与其接触的概率的结论。最后提出了建立系统的ARGs监测网络和ARGs的风险评估机制,并将ARGs进行分类分析,着重关心那些会对人体造成较大影响的ARGs的展望。 展开更多
关键词 抗性基因 气候变化 降雨 温度 季节 极端天气
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