目的观察线粒体未折叠蛋白反应(mitochondrial unfolded protein response,mtUPR)在氯化锂-匹鲁卡品(pilocarpine,PILO)致痫大鼠海马神经中的变化及线粒体特异性抗氧化剂Mito-TEMPO对其影响。方法采用PILO诱导癫痫大鼠模型,并进一步采...目的观察线粒体未折叠蛋白反应(mitochondrial unfolded protein response,mtUPR)在氯化锂-匹鲁卡品(pilocarpine,PILO)致痫大鼠海马神经中的变化及线粒体特异性抗氧化剂Mito-TEMPO对其影响。方法采用PILO诱导癫痫大鼠模型,并进一步采用线粒体特异性抗氧化剂Mito-TEMPO进行干预;将成年雄性Wistar大鼠随机分为空白对照组(CON组)、致痫组(PILO组)、Mito-TEMPO组和PILO+Mito-TEMPO组;采用Nissl染色观察海马神经元损伤,电子透射显微镜观察线粒体超微结构,活性氧荧光探针(DCFDA)检测线粒体ROS生成,Rhodamine123染色法检测线粒体膜电位变化,Western blot法检测线粒体热休克蛋白HSP60、蛋白酶LONP1、线粒体蛋白酶CLpP的表达。结果(1)与CON组相比,PILO组海马神经线粒体超微结构破坏严重,线粒体ROS生成增多,线粒体膜电位降低;(2)与CON组相比,PILO组海马神经HSP60、LONP1和CLpP表达增加;(3)与PILO组相比,PILO+Mito-TEMPO组线粒体超微结构破坏减轻,线粒体ROS生成明显减少,线粒体膜电位增高;(4)与PILO组相比,PILO+Mito-TEMPO组海马神经HSP60、LONP1和CLpP表达降低。结论mtUPR在癫痫海马神经损伤中明显激活,Mito-TEMPO可能通过调控mtUPR对癫痫海马线粒体损伤发挥保护作用。展开更多
文摘目的观察线粒体未折叠蛋白反应(mitochondrial unfolded protein response,mtUPR)在氯化锂-匹鲁卡品(pilocarpine,PILO)致痫大鼠海马神经中的变化及线粒体特异性抗氧化剂Mito-TEMPO对其影响。方法采用PILO诱导癫痫大鼠模型,并进一步采用线粒体特异性抗氧化剂Mito-TEMPO进行干预;将成年雄性Wistar大鼠随机分为空白对照组(CON组)、致痫组(PILO组)、Mito-TEMPO组和PILO+Mito-TEMPO组;采用Nissl染色观察海马神经元损伤,电子透射显微镜观察线粒体超微结构,活性氧荧光探针(DCFDA)检测线粒体ROS生成,Rhodamine123染色法检测线粒体膜电位变化,Western blot法检测线粒体热休克蛋白HSP60、蛋白酶LONP1、线粒体蛋白酶CLpP的表达。结果(1)与CON组相比,PILO组海马神经线粒体超微结构破坏严重,线粒体ROS生成增多,线粒体膜电位降低;(2)与CON组相比,PILO组海马神经HSP60、LONP1和CLpP表达增加;(3)与PILO组相比,PILO+Mito-TEMPO组线粒体超微结构破坏减轻,线粒体ROS生成明显减少,线粒体膜电位增高;(4)与PILO组相比,PILO+Mito-TEMPO组海马神经HSP60、LONP1和CLpP表达降低。结论mtUPR在癫痫海马神经损伤中明显激活,Mito-TEMPO可能通过调控mtUPR对癫痫海马线粒体损伤发挥保护作用。
